AmpC酶的检测技术研究进展

在细菌耐药酶研究机制中，革兰阴性杆菌中的AmpC酶备受临床床关注，使人类对抗AmpC酶的斗争更加艰难。AmpC酶属BushI型酶或AmberC类酶，是不被克拉维酸抑制的“丝氨酸”头孢菌素酶，主要存在于肠杆菌，枸橼酸杆菌，粘质沙雷菌，摩根摩根菌，铜绿假单胞菌等菌属中。AmpC酶可分为诱导型、结构型、质粒型。本文将三型AmpC酶的检测技术综述如下。     

酶电极法与酶比色法测定血糖和尿素的比较

目的 评价酶电极法和酶比色测定血糖、尿素的可靠性和临床应用价值。方法 在CX3分析仪上用酶电极法测定血糖和尿素，在HITACHI 7060分析仪上用氧化酶法和已糖激酶法测定血糖及酶偶联法测定尿素。进行方法学比较。结果 酶电极法测定血糖、尿素的线性、重复性、准确度均优于酶比色法；酶电极法测定血糖、尿素的线性范围大于酶比色法；酶电极法、酶比色法的抗干扰能力差异不大；几种方法测定血糖、尿素的结果相关性好。结论 酶电极法是一种准确、快速的检测方法，适合临床快速检验；酶比色法稳定，干扰因素少，适合常规批量检测。     

酶循环法检测及其进展

1961年Lowry OH等应用两种工具酶建立循环酶测定方法。即6-磷酸葡萄糖脱氢酶、谷氨酸脱氢酶的催化特性及酶偶联反应的原理，使反应体系中NADP^ ←→NADPH循环变化，对循环中生成大量的6-磷酸葡萄糖酸，用指示酶6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶催化，检测终产物NADPH，从而提高检出能力。ChiMMY等改进Lowry OH酶循环法，即酶双循环法。其操作方法包括待测样品酶循环、工具酶灭活、加入指示酶双循环及对终产物检测。本文对酶循环动力学研究、临床生化检验及环境监测中的应用作一介绍。     

细菌β内酰胺酶的命名

细菌日益增多的β内酰胺酶的名称常使人困惑，因其命名无规律可循。酶的氨基酸组成并非命名的完全依据。如截至2006年底的现有152个TEM酶和88个SHV酶，同类酶间的氨基酸只有1—7个差异；而现有的53个CTX—M酶和22个IMP酶，同类酶间的氨基酸有20％的不同；甚至OXA酶间可有80％的不同。β内酰胺酶的命名基本是英文字头或字的一部分，依据酶所作用的底物、生化特征、来源的菌株、特有的序列、在染色体上的位点、发现地或医院名或首例发现患者名或发现者名等。有些酶的名称并不恰当，如PSE酶的名称为假单胞菌特异性酶，但其后不久就在大肠埃希菌和其他肠杆菌中发现，但仍在沿用。     

环氧酶-2抑制药的药理研究及临床应用

1引言 环氧酶（cycloxygenase,，COX）于1976年被发现，是前列腺素（prostaglandins，PGs）生物合成的必需酶之一。其主要作用机制为催化花生四烯酸产生前列腺素和白三烯，引起炎症和启动凝血系统。环氧酶分为2种——环氧酶-1和环氧酶-2。环氧酶-1属结构性酶，在生理状态下，在全身大多数组织和细胞中均可测到，且含量稳定，主要和胃肠道反应有关：环氧酶-2是可诱导酶，属炎性介质，生理状态下仅存住于脑、肾皮质等个别器官。     

临床酶学标准化的新途径

在临床上，测定血清或其他组织中一些酶的水平对很多疾病的诊断、预防及判定病情进展具有重要意义。酶的测定可利用生化学的方法测定酶的催化活性和将酶作为蛋白用免疫方法测定酶的质量。测定酶的催化活性是最为常用方法，它具有迅速、灵敏、成本低等特点，是目前临床上测...     

临床酶测定标准化的几个问题

临床酶测定标准化的几个问题文庆成迄今，血清（血浆）中酶测定是通过它们催化的反应速度测量的，以酶催化（活性）浓度表示。这与以免疫实验将酶作为蛋白质测定比较，其优点是快速、敏感、特异和低消耗。但是，酶催化浓度测定结果是相对的，它依从于测定原理、单位定义和...     

肝脏酶谱检测的临床应用

酶是一种高效、专一，具有生物催化活性的特殊蛋白质。它是活细胞的成份，由活细胞产生，能在细胞内或细胞外起同样的催化作用。酶是机体物质代谢、生命活动的必要条件。机体内各种物质代谢、能量传递、信息转录、神经传导、免疫调节、细胞衰老以及生长发育等都有酶的参与。肝脏是机体内含酶最丰富的器官，肝脏受损时，可因细胞通透性增加、细胞坏死等，使血清酶量发生变化。酶学检测已作为肝病诊断、鉴别诊断、预后判断及疗效评价的重要依据。     

幼龄成骨细胞移植促进骨质疏松性骨折愈合中不同类型一氧化氮合酶的动态表达

目的：追踪观察移植细胞在骨折愈合不同时间点的神经型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶与内皮型一氧化氮合酶动态表达的生物学意义。方法：实验于1999-01／2004-02在中山大学动物试验中心、中山大学病理教研室完成、中山大学肿瘤防治中心完成。选择SD清洁级大鼠96只，按配对原则分为实验组48只，对照组48只；SD清洁级乳鼠20只进行成骨细胞原代培养。建立SD大鼠老龄骨质疏松骨折的动物模型，实验组将SD乳鼠颅骨体外培养的成骨细胞移植到SD雌性大鼠骨质疏松性骨折部位，对照组注入等量无血清培养液。手术后3，7，10，14，21，28，56，84d处死，每组每个时间点6只。用免疫组化检测骨折愈合不同时相的标本诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶和神经元型一氧化氮合酶的动态表达情况。结果：96只大鼠均进入结果分析。实验组：诱导型一氧化氮合酶在3d左右可见较多阳性表达的细胞，7d有表达高峰。内皮型一氧化氮合酶在3d左右可见少量阳性细胞，14d有表达高峰：神经元型一氧化氮合酶在10d左右可见少量阳性细胞，14-21d表达稍有增高，整个实验过程中神经元型一氧化氮合酶表达较弱，表达高峰不明显。而对照组诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶均有较弱表达，表达峰低平，而神经元型一氧化氮合酶表达很弱，未见明显表达高峰。结论：诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶在成骨细胞移植促进老年骨质疏松性骨折愈合的表达具有时效性，且表达的定位细胞不同，表达的量有差别，提示骨折部位一氧化氮合酶的释放可能对促进骨质疏松性骨折愈合有意义。神经元型一氧化氮合酶在成骨细胞移植促进老年骨质疏松性骨折愈合过程中的作用不明显。     

小儿骨源性碱磷酶测定的探讨

目的 测定新生儿血中的骨源性碱磷酶（BAP），对结果阳性的患儿同时测定血钙（Ca）、血磷（P）、碱磷酶总活性（ALP），用以鉴别佝偻病。方法 骨源性碱磷酶（BAP）：斑点酶免疫实验，血钙（Ca）、血磷（P）、碱磷酶总活性（ALP）：全自动生化仪测定。结果 （1）144例新生儿中71例骨源性碱磷酶活性增高，异常率为49．3％；（2）血钙、血磷、碱磷酶总活性：骨源性碱磷酶增高患儿中，17例血钙降低，异常率为23．9％，25例碱磷酶总活性增高，异常率为35．8％，12例血磷降低，异常率为16．9％，与骨源性碱磷酶异常率相比，后者显著高于前三项（P〈0．01）。结论 骨源性碱磷酶可敏感反映出新生儿钙营养状况，对鉴别佝偻病有很大帮助。且方法简便、实用，可列为常规检查项目。     

不同种属来源明胶及其他因素对明胶酶谱法检测金属蛋白酶的影响

金属蛋白酶12（MMP-2，明胶酶A）与金属蛋白酶-9（MMP-9，明胶酶B）在多种生理过程中起作用，病理状态下如肿瘤、心血管疾病和呼吸系统疾病，则这些酶的表达和活性增加。明胶酶谱法多用于检测血浆、细胞培养上清及组织中的金属蛋白酶-2和9的活性，我们先前的实验发现不同来源的明胶直接影响明胶酶谱法结果，不同方式处理样本对酶的活性检测有影响，本研究就明胶的来源（自猪、牛皮肤提取）是否影响金属蛋白酶活性的检测，以及不同样本量、样本储存温度、反复冻融等因素对明胶酶谱法检测金属蛋白酶活性的影响进行探讨。     

革兰阴性杆菌中AmpC酶的检测

AmpC酶是由革兰阴性杆菌产生的不被克拉维酸抑制，属β-内酰胺酶BushI型酶或Amblerc类酶，能水解青霉素类，1、2、3代头孢菌素类和单环类的β-内酰胺酶。AmpC不但由染色体编码，而且也可由质粒介导，质粒介导的AmpC酶的出现增强了耐药菌株的横向传播。高产AmpC酶菌株引起的感染使抗感染治疗面临严峻挑战。AmpC酶检测有头孢西汀三维试验、等电聚焦电泳和PCR等方法，但难以在临床细菌室开展，近年报道的几种AmpC酶表型筛选法是一种简便、有效的方法，可供各级临床实验室选用。     

脂酶的医学研究进展

脂酶是由449个氨基酸残基组成的单链糖蛋白，分子量为46000－56000D。脂酶存在于胰、小肠和多种其它组织中。胰腺中组织中的脂酶浓度是血清中的500－800倍。脂酶的最适合pH在7．4－10．0之间，等电点pI由于酶的形式不同有5．80，5．85几种。电泳分析证实正常血清中脂酶分为两个同工酶带，胰腺炎时则可分为四个同工酶带。脂酶的测定可采用光电比色、比浊、免疫和荧光测定等多种测定方法，目前各种测定方法的灵敏度都较高，而特异性的变化则较大。目前脂酶已广泛应用于急性胰腺炎的诊断，而脂酶的升高亦根据报道与癌症，非胰岛素依赖性糖尿病和肥胖等疾病相关。     

蕲蛇酶注射液治疗高龄急性脑梗死患者114例临床分析

蕲蛇酶是从尖吻蛇酶毒中分离纯化的凝血酶样酶，属于丝氨酸型蛋白酶，是由17种氨基酸263个亚基所组成的糖蛋白，具有降低血浆纤维蛋白原含量、抗血小板聚结的作用。蕲蛇酶对急性脑梗死的治疗是有效的，作者运用蕲蛇酶治疗高龄梗死患者114例，现报告如下。     

蝮蛇抗栓酶的不良反应

蝮蛇抗栓酶的不良反应刘春起，张洪树蝮蛇抗栓酶（Ｓｖａｔａ）是从蝮蛇毒中提取配制的一种酶制剂。自１９６３年Ｋｅｉｄ将蝮蛇毒用于临床以来，目前已有３种蝮蛇毒制剂（去纤酶、抗栓酶、清栓酶）。蝮蛇抗栓酶对脑血栓形成各期、冠心病、血栓闭塞性脉管炎、高粘血症等２...     

乙酰肝素酶在脂肪肝中的表达

目的观察乙酰肝素酶在脂肪肝中的表达，以探讨其在脂肪肝中的作用。方法采用酒精灌胃造脂肪肝的模型，运用免疫组化的方法检测乙酰肝素酶。结果在脂肪肝中，乙酰肝素酶的表达明显增强，且与甘油三酯的水平高低有关。结论氧化应激、缺氧诱导乙酰肝素酶的表达，且乙酰肝素酶参与脂肪肝的形成。     

诱导型AmpC酶和结构型AmpC酶的检测与产酶菌株感染的治疗进展

在细菌耐药机制中，耐药酶扮演着极其重要的角色，其中AmpC酶在革兰阴性杆菌耐药机制中的地位日渐突出，特别是质粒型AmpC酶的出现，使AmpC酶获得了与ESBLs相同的进化背景，使其可以在相同菌种间甚至不同菌种间将耐药质粒相互传播，从而使人类对抗AmpC酶的斗争更加艰难。AmpC酶属Bush1型酶或AmblerC类酶，是不被克拉维酸抑制的“丝氨酸”头孢菌素酶，主要存在于肠杆菌，     

“HOOK”效应与酶联免疫测定

1971年Engvall和Perlmanm开创了液体标本中微量物质的测定方法：固相酶联免疫吸附测定法ELISA，之后，酶联免疫测定日新月异，相继又出现了固相免疫酶度量分析法IEMA及液相酶放大免疫测定技术EMIT等新方法，新技术。由于酶免疫测定具有高度特异性和敏感性，又具有无放射性危害，其广泛应用于临床微生物及其抗体、蛋白质、非肽类激素、药物的检测。 酶联免疫测定中，ELISA应用最广。虽然ELISA测定具有高度的特异性、敏感性，但在实际工作中，影响ELISA测定的干扰因素众多，其中因“HD－HOOK”效应而导致的假低值…     

牛磺酸对运动大鼠心肌线粒体ATP酶及钙、镁离子的影响

目的：探讨牛磺酸对运动大鼠心肌线粒体ATP酶及钙、镁离子的影响。方法：以力竭运动大鼠为模型，测定了心肌线粒体Ca^2 -ATP酶、Mg^2 -ATP酶的活性以及Ca^2 、Mg^2 含量。结果：大鼠力竭运动后，心肌线粒体Ca^2 -ATP酶和Mg^2 -ATP酶的活性显著下降，Ca^2 -含量显著增加，Mg^2 含量显著降低；而补充牛磺酸组大鼠力竭运动后未见心肌线粒体Ca^2 -ATP酶和Mg^2 -ATP酶的活性以及Ca^2 -、Mg^2 含量的显著变化。结论：牛磺酸能有效地拮抗力竭运动后大鼠心肌线粒体Ca^2 -ATP酶、Mg^2 -ATP酶活性的降低以及Ca^2 -、Mg^2 含量的显著变化，具有保护心肌线粒体的作用。     

抗氧化酶对离子辐射抗性的影响

离子辐射可致细胞内活性氧离子（ROS）的增多，从而介导细胞损伤。锰过氧化物酶（MnSOD）、铜锌过氧化物酶（Cu－ZnSOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）是3种主要的抗氧化酶，本文为比较上述3种酶的抗氧化作用，取中国仓鼠卵巢细胞（CHO）为母细胞，分别将3种酶的基因转染入CHO细胞中，检测转染后的细胞3种酶的活性表达情况。选酶活性增高4倍左右的3组细胞克隆。MnSOD－cl、cCu－ZnSOD－c4和cGPx－cl为实验对象，用10居里X线照射72h后观察，从形态学上看，未行基因转染的CHO细胞在照射后出现肿胀、裂解等典型的坏死，而转染Mn…