人垂体促卵泡生成激素免疫测定用标准品研制

随着人垂体促卵泡生成激素（FSH）放射免疫分析及酶联免疫分析技术在临床病理诊断中广泛应用,对其使用的各种测定试剂盒的标准化要求不断提高,必须提供一种准确可靠的标准物质供试剂盒生产者和科研工作使用,为此世界卫生组织（WHO）以高纯的人垂体FSH做原料制备了批号为83/575的标准品,以人垂体FSH、LH第二次国际参考品（批号78/549）为对照品,组织国际协作标定,1986年正式作为国际标准品发放使用,但因此次国际协作标定结果免疫活性结果不均一,所以根据其生物活性标定结果将本标准品定为80IU/支,而83/575的免疫活性标定结果仅为16IU/支,二者相差5倍,造成免疫活性不连续,在国际免疫分析界未得到广泛应用,因而WHO决定FSH IS（83/575）作为生物标准品,78/549仍被用作免疫分析技术标准化工作的参考物质,必须尽快提供一种与IRP（78/549）免疫活性相符的参考物质供试剂盒标准化使用,因而开展了本工作。     

癌胚抗原工作标准品的制备

制备供免疫分析用的癌胚抗原工作标准品并标定其免疫效价,用4．6mg/LCEA纯品溶液和PH7．4的1％人白蛋白－50mmol Na2HPO4-NaH2PO4溶液配制浓度为320μg/L的工作标准品溶液。将该溶液按每安瓿（amp.)0.5mL(160ng/amp.)分装、冻干。以国产CEA RIA和CEA IRMA药盒现行标准品为对照品,标定工作标准品效价,并与国际参考制剂1stIRP CEA HUMAN73／601进行对照实验。以药盒标准品为对照品,工作标准品平均免疫效价为163ng/amo.,95%可信为159－168ng/amp.,工作标准品与国际参考剂的剂量－反应曲线不显著偏离平行。CEA工作标准品与国际参考制剂1stIRP CEA73/60在免疫学反应中是同质的,可以作为实验室间对照品使用。     

甲状腺素（T4）第三次免疫测定用国家标准品的建立

目的：建立甲状腺素（T4）第三次免疫测定用国家标准品。方法和结果：精确称取高纯T4原料,用含1．0％BSA的0．02MPBS缓冲液配制成2000ng／ml溶液,经无菌过滤处理后,分装、冻干制成候选品。以T4第二次国家标准品（150551-0004）为对照品,经协作标定,候选品中T4免疫活性为940ng／支。结论：候选品各项指标均符合要求,可作为T4第三次免疫测定用国家标准品使用。本标准品的建立,为T4免疫测定用试剂盒的标准化提供定量基础。     

三碘甲腺原氨酸免疫分析工作标准品的研制

制备供免疫分析用的3,5,3-三碘甲腺原氨酸(T3)工作标准品并标定其免疫效价.用每升含193.27mg T3的40mol/L NaOH溶液和去激素血清,配制浓度为100μg/L的T3溶液.将该溶液按每1mL分装,冻干.以国产现行标准品为对照品,标定配制的T3工作标准品免疫效价为91.4ng/安瓿,95%的可信限为88-95ng/安瓿.并从T3药盒工作标准曲线上,读出本所1601-9703批低、中、高质控血清的T3值.在以相应的参考值为参照时,测定值的偏倚均小于10%.总之,配制的T3工作标准品适用于国产T3RIA药盒标准品的核对及其质控血清的标定.     

麻风患者血清游离甲状腺素的放射免疫分析

麻风患者血清游离甲状腺素的放射免疫分析何浩明，孙习俊，苏彩女，兰义和，田小平，金同敬我们测定过麻风患者血清ＴＴ３和ＴＴ４含量的改变，而患者血清ＦＴ３、ＦＴ４含量变化的报告少见，为此，我们应用ＲＩＡ测定了３８例麻风患者血清游离甲状腺素的含量，并对其临床...     

rhTSH第一次生物测定用国际标准品国际合作研究

在回顾了促甲状腺素(TSH)国际标准品建立和发展历史的基础上,报告了重组人促甲状腺素(rhTSH)第一次生物测定用国际标准品(03/192)国际协作研究的情况.基于在本次协作研究中03/192在不同的分析系统中表现的适当的一致性和其热加速降解品表现的稳定性,世界卫生组织(WHO)已推荐重组制剂03/192作为rhTSH第一次生物测定用国际标准品使用,并定义为9.5 IU/安瓿.本实验室用5种不同的标记免疫分析方法参加协作研究,并对TSH免疫测定用国家标准品(150530-0312)进行了评估,以WHO提供的几支TSH国际标准物质为对照品综合评价TSH免疫测定用国家标准品,其标定结果是0.557 mIU/安瓿,相当于现标示值(0.600 mIU/安瓿)的92.8%,说明TSH国家标准品与国际标准品相符.     

乙型肝炎病毒表面抗原国家定量标准品的研制

目的 研制乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)国家定量标准品及定量线性参考品.方法 收集各地乙型肝炎患者和健康献血员血样,用不同厂家乙型肝炎、丙型肝炎病毒血清学试剂盒筛选.6个协作单位用7种试剂以世界卫生组织(WHO)HBsAg定量标准品标定1份HBsAg国家定量标准品,稀释后得到HBsAg国家定量线性参考品.结果经7种试剂共21次协作标定,得到HBsAg国家定量标准品的浓度为1226 IU/ml,各次检测结果的变异系数均小于15%.将国家定量标准品系列稀释后得到由8个不同浓度血清组成的HBsAg国家线性参考品,经检测后表明其浓度与理论浓度的差值均<15%,通过加速试验检测该参考品的稳定性效期暂定为5年.将其作为HBsAg国家线性参考品并初步限定检测结果的允许值范围.结论 标定1份HBsAg国家定量标准品并建立了由8份血清组成的HBsAg国家定量线性参考品.     

游离甲状腺素（FT4）放射免疫分析的临床应用

甲状腺素进入血液循环后未与血浆中甲状腺素结合球蛋白(Thyroxin Binding Globulin，简称TBG)相结台者为游离甲状腺素(Free Thyroxine，简称FT4)。FT4为甲状腺激素对于机体组织而主要发挥其活性作用，如果直接检测FT4浓度，且可真正反映甲状腺的功能状态，     

人血清载脂蛋白H放射免疫分析试剂盒的研制

目的 :从人血浆中分离纯化载脂蛋白H(apolipoproteinH ,apoH) ,经免疫家兔 ,获得特异性抗血清 ,采用Iodogen法进行12 5I标记apoH ,建立了人血清apoH放射免疫分析 (RIA)方法。结果 :方法灵敏度为2 33mg/L ,工作范围 5～ 32 0mg/L ,批内和批间CV分别为 4 93和 4 0 1% ,回收率为 95 7% ,与apo -AI、apo-B未见交叉反应。测定了 91例正常人血清apoH含量 ,正常值 :男性为 2 30 17± 5 6 4mg/L ,女性为 2 0 0 2 7± 4 2 5mg/L ,男女两组之间血清apoH水平差异无显著性。     

游离甲状腺素化学发光免疫分析方法的建立

目的 采用二抗-甲状腺素抗体固相两步包被法,使用鲁米诺-双氧水-辣根过氧化物酶化学发光体系作为检测体系,建立测定血清中游离甲状腺素的化学发光免疫分析方法.方法 利用竞争法建立游离甲状腺素的检测体系,分别对该体系进行分析性能评估、2016年度内分泌室间质评,并与进口全自动发光试剂盒检测结果进行一致性检验.结果在4~64pmol/L的校准曲线范围内相关系数0.9995,最低检出限为0.54pmol/L,批内和批间精密度均小于7.0%,稳定性结果良好,不影响检测结果.2016年全国室间质评测定结果均在允许范围内,与进口西门子发光试剂盒有很好的临床符合性,两种试剂盒的样本测值差异不具有统计学意义.结论 本方法利用二抗-甲状腺素抗体固相两步包被法,在节约包被原料的同时改善了精密度且提高了灵敏度,最后通过临床血样的一致性评价,与参比试剂盒具有同等的临床使用价值.     

电化学发光免疫分析法在AFP定量检测中的应用

为了解电化学发光免疫分析 (ECLIA)双抗体夹心法定量检测血清甲胎蛋白 (AFP)的临床应用及其优越性 ,参照NCCLS的评价方案对定量检测AFP含量的ECLIA法和放射免疫分析 (RIA)法进行精密度评价、线性评价和回收试验的比较 ,并采用两种方法平行检测 6 5例病人血清标本的AFP含量 ,对其进行相关性分析。结果表明 :两种方法都有较好的重复性 ,但ECLIA法明显优于RIA法 ;ECLIA法和RIA法具有良好的相关性 (r=0 .981 ,P <0 .0 5 ) ;回收率均在 95 %以上 ,ECLIA法明显高于RIA法 (t=4 .6 9,P <0 .0 5 ) ;ECLIA法的线性范围 (>5 0 0 μg/L)较RIA法 (<5 0 0 μg/L)要宽。ECLIA法定量检测AFP的准确性和精确度都明显优于RIA法 ,较RIA法更能满足临床需要     

国产肿瘤标志物免疫分析药盒质量考察

用美国Ｂｉｏ－ｒａｄ公司、瑞典ＣＡＮＡＧ公司出品的质控样品和国家质量控制血清作为标准物质对１３个国产肿瘤标志物ＩＲＭＡ与ＲＩＡ药盒进行了质量检验。９个ＩＲＭＡ药盒的Ｂｍａｘ／Ｂｍｉｎ比值均大于２０，平均批变异系数（ＡＢＣＶ）小于４％，ｒ〉０．９９００；４个ＲＩＡ药盒的ＮＳＢ／Ｔ％〈５，Ｂ０／Ｔ〉３０，│ｒ│〉０．９９００，ＥＤ（有效剂量值）２５、ＥＤ和ＥＤ７５均在剂量－反应曲线范围内。每种药盒的质     

国产癌胚抗原放射免疫分析药盒质量考察

用癌胚抗原国家质量控制血清作为标准物对１２个国产ＣＥＡ ＲＩＡ（癌胚抗的放射免疫分析）与ＩＲＭＡ（免疫放射分析）药盒进行了质量检验和分析。其中，８个ＣＥＡ ＲＩＡ药盒的ＮＳＢ／Ｔ％（非特异性结合百分率）〈％５，Ｂ０／Ｔ〉２５，│ｒ│〉０．９９００，有效剂量值ＥＤ２５、ＥＤ５０和ＥＤ７５均在剂量－反应曲线范围内，低、中、高质控血清测定均值都在各自的参考范围内，且偏倚均不超过±１０％；４个ＣＥＡ ＩＲ     

孕酮质控血清研制

为制备供免疫分析用的孕酮质控血清并确定其参考值与参考范围，用０．４Ｌ混合正常人血清和０．６Ｌ去甾体激素血清，配制低值质控血清；１Ｌ混合正常人血清，作为中值质控血清；在１Ｌ混合正常人血清中加１５００ｕＬ孕酮乙醇溶液（浓度为１０ｕｇ／ｍＬ），配制高值质控血清。三种孕酮质控血清充分搅拌混匀后，按每瓶０５．ｍＬ分装、冻干。用天津德普公司和法国ＣＩＳ公司孕酮ＲＩＡ药盒测定本批和９３０６０１批号甾体激素质控血清孕酮含量。结果表明：采用德普公司药盒数据定值，低、中高值三种质控血清孕酮参考值各为１．２３、２．９５和１５．９ｕｇ／Ｌ，相应的参考范围分别是０．９８－１．４８、２．３６－３．５４和１２．７－１９．１ｕｇ／Ｌ。本批质控血清可以作为实验室用ＲＩＡ药盒检验孕酮时使用。     

神经肽Y放免分析法的建立

本文在自制了特异性神经肽Y(NPY)抗血清基础上,建立了血浆、脑组织NPY放免分析法。竞争抑制分析证明,与相关神经肽无交叉反应,最小检测范围为150～200 pg/ml,血浆和组织平均回收率为85～90%,说明该法特异性、灵敏性良好。反相高压液相层析表明所测血浆和脑组织NPY—Li的层析特性与标准NPY基本一致。     

IMMULITE Ⅰ型全自动分析系统使用初评

本文通过测定血清中T3,T4含量为例,介绍IMMULITE Ⅰ型酶放大化学发光免疫分析仪及化学发光法与放射免疫分析法(RIA)的比较.IMMULITE Ⅰ型分析仪测得血清中T3,T4重复性良好,批内变异和批间变异均小于5%.在对T3值是432ng/dL和377ng/dL的血清样品作回收实验,回收率为103.2%-116.9%.两种方法测得T3结果呈相关,相关系数 0.91,回归方程为Y=1.06X+0.159.IMMULITE Ⅰ型分析仪测量,在25min后出第一个样品结果,以后每35sec出另一个结果,而RIA通常需要几小时或更长时间,才能出结果.因此IMMULITE Ⅰ型分析仪操作简便,其采用的化学发光法可与RIA媲美,是一种功能全,运行平稳的化学发光分析仪,值得进一步推广使用.     

CEA电化学发光免疫分析法的建立

目的建立人癌胚抗原（CEA）的电化学发光免疫分析法（ECLIA）。方法生物素标记的CEA McAb、钌复合物标记配对的CEA McAb、链霉亲和素包被的磁性微粒组成CEA ECLIA试剂,用ECLIA仪检测CEA并做方法学评价。用本法与进口的同类ECLIA试剂对119例结直肠癌、150例肺癌、45例胃癌、32例胰腺癌和34例肝细胞癌患者的血清CEA检测结果进行分析。调查218名志愿者血清CEA正常参考值。结果本法检测CEA的批内CV为1.6%～7.1%,批间CV为2.3%～11.7%,灵敏度为0.2 ng/mL。与CA19-9和AFP无交叉反应。自建ECLIA检测CEA浓度范围为0.2～1000.0ng/mL,正常参考值低于5.6ng/mL。结论自建CEA ECLIA与进口试剂比较（r=0.9641,P〈0.05）,正常参考范围接近进口同类方法。具备产业化的潜能。