改良彗星试验检测紫外线照射致淋巴细胞DNA损伤

目的 用不同方法提取外周血淋巴细胞进行彗星实验,以确认最佳实验条件。通过紫外线照射全血比较不同铺胶层数对淋巴细胞DNA损伤的影响。方法 将铺有细胞、凝胶混合物的玻片在pH10的碱性裂解液中作用1h,碱性电泳液中预电泳20min,25V300mA电泳20min,15min中和2次,5μg/mlPI染色15min,计算彗星细胞率。并用本实验室方法观察紫外线照射对全血淋巴细胞的DNA损伤。结果 用生理盐水、PBS作为缓冲液在冰浴下提取淋巴细胞的慧星细胞率与全血结果相近。但室温下提取淋巴细胞DNA损伤明显增加。30W紫外灯照射30min,45min与未照射组相比彗星细胞率明显增加,差异有显性意义（P＜0．05）,一层胶与二层胶结果相比差异无显性意义（P＞0．05）。结论 全血用于检测淋巴细胞DNA损伤操作简便,结果可靠,无人为操作引起的DNA损伤,紫外线可诱导全血淋巴细胞DNA链断裂,有明显的剂量－效应趋势,减少铺胶层数,节省时间,结果与二层胶彗星细胞率无差异。     

抗氧化剂拮抗紫外线致DNA损伤作用的研究

目的 探讨抗氧化剂-过氧化氢酶、还原型谷胱甘肽和β-胡萝卜素是否对紫外线照射诱发的DNA损伤具有拮抗作用.方法 提取人外周血中的淋巴细胞,用单细胞凝胶电泳法检测经不同浓度过氧化氢酶、还原型谷胱甘肽或β-胡萝卜素处理及应用不同计量紫外线照射后淋巴细胞的DNA损伤状况.结果 随着紫外线照射剂量的增加,淋巴细胞的DNA损伤程度逐渐加重;外源性过氧化氢酶、还原型谷胱甘肽和β-胡萝卜素的加入可明显减轻DNA损伤程度,但均未能完全阻断DNA的损伤;在一定范围内,这些抗氧化剂的剂量与拮抗功效呈量效关系.结论 过氧化氢酶、还原型谷胱甘肽和β胡萝卜素对紫外线照射诱发的DNA损伤均有拮抗作用,是拮抗紫外线照射诱发DNA损伤较为理想的拮抗剂;单细胞凝胶电泳法适用于研究紫外线照射引起的DNA损伤.     

益母草对小鼠精子程序外DNA合成的抑制作用

研究证明 ,铅能通过睾丸屏障 ,造成小鼠雄性生殖细胞遗传损伤〔1,2〕;同时铅具有重要应用价值 ,职业接触在所难免。因此 ,应用一些常用中草药对职业化学毒物损伤雄性生殖细胞防护作用的探讨 ,是一项有实际应用价值的研究。本文采用小鼠精子程序外DNA合成 (UDS)试验 ,研究了益母草(Herbaleonuri)对醋酸铅 [Pb(CH3COO) 2 ]引起的小鼠雄性生殖细胞遗传损伤的影响。1　材料与方法1 1　实验动物　 11～ 12周龄C5 7BL/ 6J雄性小鼠 ,由吉林大学实验动物部提供。1 2　实验药品　益母草水提取物 :称取益母草 16g(吉林大药房提供并鉴定 ) ,双蒸…     

苯酚致V79细胞毒性及DNA损伤效应的研究

目的 了解苯酚(PH)对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79细胞)的细胞毒性以及DNA损伤.方法 采用甲基四唑蓝(MTT)法检测不同浓度(25、50、100、200、400 mg/L)苯酚在不同时间染毒(12、24、48h)后对V79细胞的毒性;采用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测不同浓度(5、10、20、40、80 mg/...     

甲基叔丁基醚致DNA损伤的体内和体外研究

目的 探讨甲基叔丁基醚（MTBE）对动物致癌的机制.方法 小鼠经呼吸道染毒MTBE 20 d后,取肝、肾、肺细胞进行单细胞凝胶电泳（SCGE）、DNA交联试验及肺和肾组织中丙二醛（MDA）含量测定.对体外培养的大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞进行SCGE、DNA交联试验和程序外DNA合成试验（LDS）.结果 MTBE 1 440、4 968 mg/m^3组染毒小鼠肝细胞、各剂量组肾细胞、4 968 mg/m^3组肺细胞DNA迁移距离均大于阴性对照组;肝细胞DNA迁移距离与MTBE浓度有剂量-反应关系（r=0.997,P=0.003）.MTBE1 440、4 968 mg/m^3组雌性小鼠及4 968 mg/m3组雄性小鼠肾MDA含量高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.MTBE浓度＞0.050mmol/L时,大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞DNA迁移距离较阴性对照组增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,且DNA迁移距离与MTBE浓度有剂量-反应关系（r肺=0.967,T肝=0.963,均P＜0.05）;5.0、10.0 mmol/L MTBE组大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞的3H-TrR掺入量每分钟脉冲数（CPM）均高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;各剂量组小鼠肝细胞、大鼠肺Ⅱ型细胞和肝细胞的DNA交联率与阴性对照组的差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 MTBE对DNA有损伤作用,细胞DNA断裂和脂质过氧化是其引起动物肝、肾肿瘤的可能机制之一.     

氟对小鼠睾丸细胞DNA损伤与修复的研究

目的 :探讨氟的生殖遗传毒性。方法 :应用单细胞凝胶电泳试验 (SCGE)研究了氟化钠对离体小鼠睾丸细胞的DNA损伤与修复效应。结果 :氟化钠在 (0 .6 2～ 5 ) mm ol/ L 之间可引起小鼠睾丸细胞 DNA单链断裂 ,出现拖尾的彗星细胞。无论是拖尾细胞百分率 ,还是 DNA迁移长度都随氟化钠浓度的增加而增加 ,表现出明显的计量反应关系。此外 ,氟化钠所致的睾丸细胞 DNA损伤基本在 2 h内完全修复。结论 :在一定浓度下 ,氟化钠可引起离体小鼠睾丸细胞的 DNA损伤 ,可能是一种潜在的雄性生殖毒物。     

二氯乙酸对小鼠肝细胞DNA损伤效应研究

目的：研究二氯乙酸的DNA损伤作用。方法：小鼠肝细胞的体外、体内试验。体外试验，取小鼠肝细胞染毒，染毒’1h后彗星试验；体内试验，小鼠连续灌胃6d，每天一次，在第1、3、6d时各染毒3h后取其肝细胞进行彗星试验。荧光显微镜下观察、计数拖尾细胞的尾长。结果：无论是体外试验，还是体内试验，二氯乙酸均可导致肝细胞DNA损伤；体内试验结果显示．随染毒次数的增加，DNA损伤加重。结论：二氯乙酸是肝细胞的DNA损伤剂，致癌作用可能与其DNA损伤作用有关，属于遗传致癌物。     

环境雌激素致乳腺癌细胞DNA损伤作用

目的观察环境雌激素辛基酚（0P）和三羟异黄酮（GEN）对乳腺癌细胞株（MDA-MB-231）增殖和DNA损伤的影响。方法以2，8和32μmol／LOP或GEN与乳腺癌细胞共培养24，48或72h，用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）试验和单细胞凝胶电泳观察环境雌激素影响细胞增殖和DNA损伤程度。结果OP能明显抑制细胞增殖，DNA损伤明显增加，并呈剂量-效应和时间-效应关系。2，8μmol／LGEN促进细胞的增殖，DNA损伤无明显改变，32μmol／L却明显抑制细胞的增殖，彗星拖尾长度明显增长，但增长效应不及OP。结论OP和高浓度GEN通过损伤MDA-MB-231细胞DNA导致细胞增殖受到抑制，但GEN损伤效应不及OP。     

光气致小鼠肺脏细胞DNA损伤和凋亡

目的研究光气致BALB/c小鼠肺水肿模型的肺脏的DNA损伤和凋亡。方法26只二级BALB/C小鼠,雄性,随机分为正常对照组和染毒组,各13只。正常对照组小鼠给予空气,染毒组小鼠给予11·9mg/L剂量的光气,时间均为5min,染毒后4h,比较2组小鼠肺脏的湿干比、病理学变化,单细胞凝胶电泳测定2组肺Ⅱ型细胞DNA损伤情况及对小鼠肺脏进行DNA琼脂糖凝胶电泳。结果11·9mg/L的光气染毒5min,小鼠肺脏湿干比(6·42±1·00)比正常对照组(4·25±0·47)显著增加(P<0·05);光镜下观察肺组织可见肺水肿发生;单细胞凝胶电泳法测定染毒组肺Ⅱ型细胞的尾长、尾部DNA、尾距均显著高于正常对照组(P<0·001);DNA琼脂糖凝胶电泳出现DNA梯状样改变。结论光气染毒可造成小鼠肺水肿,引起肺Ⅱ型细胞发生DNA损伤和肺脏细胞凋亡。     

紫外辐射致皮肤郎格罕氏细胞损伤的量效关系的实验研究

用郎格罕氏细胞（ＬＣ）、迟发型变态反应（ＤＴＨ）为指标，以太阳荧光灯为光源，进行亚慢性动物实验。结果表明，１／８红斑剂量（ＭＥＤ）为较安全剂量，持续照射不能引起ＬＣ数目及形态变化，仍能诱导正常的ＤＴＨ反应；而１ＭＥＤ持续照射则能引起免疫抑制，表现为ＬＣ数目减少．形态异常，不能诱导正常的ＤＴＨ反应。提示我们在医疗卫生及实际生活中，应避免此剂量的持续照射，以免发生免疫抑制。     

几种化合物对石棉诱发人胚肺细胞非程序DNA合成的影响

目的探讨几种化合物对温石棉诱发人胚肺（ＨＥＬ）细胞非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）的影响。方法用不同浓度的柠檬酸铝、混合稀土或亚硒酸钠溶液浸泡温石棉１小时后，再将其与ＨＥＬ细胞共同孵育，通过３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，测定了ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ。结果温石棉可使ＨＥＬ细胞的ＵＤＳ显著增高，并呈明显的剂量－反应关系。与未处理温石棉组相比，经三种化合物处理的温石棉所致ＵＤＳ量均明显下降。结论采用适当化合物溶液浸泡温石棉，有可能减轻温石棉对人类的致癌危害性。     

紫外辐射致免疫抑制的剂量—效应关系的实验研究

我们以太阳荧光灯为光源，以郎格罕氏细胞及Ｔ细胞亚群为指标进行了亚慢性动物实验，旨在探讨长期低剂量紫外辐射对免疫系统的影响及其剂量－效应关系。结果表明，１／８ＭＥＤ在免疫耐受上是安全的，不能引起免疫抑制；而１ＭＥＤ对机体有明显的免疫抑制作用，表面在Ｔｓ增加和ＬＣ减少上。提示我们在日常生活及卫生保健中应避免此剂量的持续暴露。本研究为紫外辐射长期暴露限值提供了免疫学依据。     

黄浦江上游水源水致突变性研究

运用Ａｍｅｓ试验、非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验研究了黄浦江上游水源水的致突变性。结果发现淀峰采样点水样致突变性为阴性，大桥采样点水样致突变性为弱阳性，临江采样点水样致突变性为阳性。提示黄浦江自来水取水口上移至大桥是必需的。     

单细胞凝胶电泳检测人血淋巴细胞DNA辐射损伤的剂量效应关系

目的 采用单细胞凝胶电泳观察和分析不同剂量辐射照射后1d和22d血淋巴细胞DNA损伤的特征性变化。方法 C57BL/6j小鼠分为假照射组和辐射损伤模型组。采用⁶⁰COγ射线照射诱导辐射损伤模型。吸收剂量分别为1.0、2.0、4.0、和8.0Gy。应用单细胞凝胶电泳检测和分析照射损伤后1d和22d淋巴细胞DNA损伤变化。结果 ①通过单细胞凝胶电泳可观察辐到射损伤后1d和22d淋巴细胞DNA损伤的特征性改变。其中彗星头DNA,尾DNA,彗星长度,头长度,尾长度,尾/头长比值,彗星尾距,Oliv尾距等指标具有显著性统计学差异。在照射后22d所检测的上述特征性改变较照射后1d更为显著。结论 上述结果提示SCGE将有可能作为辐射损伤后DNA损伤的一种新的辐射生物剂量量计。     

A comparison of DNA repair and survival of Escherichia coli O157:H7 following exposure to both low- and medium-pressure UV irradiation

DNA repair and survival of pathogenic E. coli O157:H7 was investigated following exposure to ultraviolet (UV) radiation from both low-pressure (LP) and medium-pressure (MP) lamps. This study included irradiation at UV doses used in drinking water treatment and lower doses indicative of potential treatment problems. Immediately following UV exposure, an average log inactivation of 4.5 or greater was observed following all tested doses of LP (5, 8, 20 and 40 mJ/cm²) or MP UV (5 and 8 mJ/cm²) indicating the sensitivity of E. coli O157:H7 to UV irradiation. Following conditions conducive to repair, maximum photo repair occurred rapidly within 30 minutes after low doses (5 and 8 mJ/cm²) of LP UV. The rate of repair was much higher than reported previously in non-pathogenic E. coli (which occurred within 2 hours). In contrast to LP UV, limited photo repair of E. coli O157:H7 was observed following MP UV exposure at reduced doses (5 and 8 mJ/cm²). At these lower doses, low levels of light independant repair were observed following LP UV, but not following exposure of MP UV irradiation. This study indicates that MP UV may enhance UV disinfection of E. coli O157:H7 by reducing the ability to repair following non-ideal treatment conditions. Following doses used in drinking water treatment (20 and 40 mJ/cm²), low levels of photo repair following LP UV were evident.     

紫外辐射致T细胞亚群改变的剂量效应关系的实验研究

为探讨紫外线低剂量长期作用对免疫功能的影响和紫外辐射致T细胞亚群改变的剂易效应关系,我们以T细胞亚群为指标,以太阳荧光灯为光源,进行了亚慢性动物实验。结果表阴、1/8MED为安全剂量,持续照射不能引起T细胞亚群变化。而1MED持续照射则能引起免疫抑制,表现在Ts增高和T_H/T_S比例下降上。提示我们在医疗卫生工作及实际生活中,应避免此剂量的持续暴露,以免发生免疫抑制。本实验为制订紫外线接触限值提供了免疫学依据。     

Attenuation Effect of UV on Haemonchus contortus Larvae in Experimentally Infected Goats

Background

Haemonchus contortus causes severe economic losses in small ruminants, so this study was conducted to study the UV effect on H. contortus larvae and its protective effect.

Methods

Sixteen male goats were divided into 5 groups, control infected, control uninfected and UV 30 minutes exposure; UV 60 minutes exposure and UV booster 60 minutes exposure. The UV groups were exposed to UV irradiation at wave length 254 nm for 30 and 60 minutes. The UV booster 60 min was administrated 2 doses of exposed larvae with an interval of one month. All groups except the control negative one were challenged for 42 days from the beginning.

Results

In UV booster 60 min had reduction in egg count per gram feces and worm burden (93% & 34 % respectively). The establishment rate and relative fertility declined in comparison with other groups. These parameters were similar in control infected, UV 30 min and UV 60 min groups. PCV value of UV booster 60 min group was similar to uninfected group. After two weeks from the booster dose of irradiated larvae, increased levels of antibody were found in goats of UV booster 60 min group.

Conclusion

Two doses of UV 60 min exposure, with an interval of one month, gave reduction not only in egg per gram feces but in worm burden as well.     

东北地区冬季阳光抗佝偻病作用的实验研究

我们于1987.12.10～1988.1.9在沈阳进行了阳光紫外线抗佝偻病作用的实验研究。所用大白鼠分成室内阳光照射1、2、3、4小时组,另外设立了不照射的对照组和每日进行3小时阳光照射的室外组。在实验期间,动物共接受21天的阳光照射。在实验终了对动物进行生物化学、病理解剖学和X光学的检测。结果表明:在所有实验组、户外组、对照组的动物身上都出现了佝偻病所见;在所有动物的骨化过程上未见到本质上的差异。     

氯化汞诱发人离体血细胞hprt基因位点突 变频率的研究

为了解化学诱变物对血细胞hprt基因位点的影响。采用多核细胞法（CB法）研究了不同浓度氯化汞对人血淋巴细胞hprt基因位点的影响及突变频率。结果表明：50μg/ml以下的氯化汞可诱发人淋巴细胞hprt基因位点突变,且突变频率随着体外染毒浓度的增加而升高,突变频率Y(10∧－3）与氯化汞的浓度C之间可以拟合成Y＝0．9948＋0．0106C的直线回归议程。hprt基因突变频率可作为检测生产性毒物或环境毒物接触人群的敏感指标。