补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织RANKL/OPG基因表达的影响

目的:研究补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)基因表达的影响,探讨补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的分子机制.方法:通过卵巢去势的方法造成大鼠骨质疏松模型,造模后随机分为6组:假手术组、模型组、仙灵骨葆组(5.0 g·kg-1)、补肾基础组(5.4 g·kg-1)、通络组(0.9 g·kg-1)、补肾通络组(6.3 g·kg-1).ig给药,1次/d,共10周.治疗10周后,在无菌条件下取出大鼠L3椎体,剔除软组织及骨膜,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测骨组织RANKL/OPG基因mRNA的表达.结果:与模型组相比,补肾通络组、补肾基础组、通络组RANKL mRNA表达明显下降,RANKL/OPG明显下降(P＜0.01),3组间比较,补肾通络组的干预作用明显优于补肾基础组与通络组(P＜0.05).结论:补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的作用机制可能与调控RANKL mRNA表达,改善RANKL/OPG,从而抑制破骨细胞活性,降低骨吸收有关.     

金刚健骨片对骨质疏松症模型大鼠骨组织OPG/RANKL/RANK系统影响的实验研究

目的:观察金刚健骨片对骨质疏松症模型大鼠体内OPG/RANKL/RANK系统表达的影响。方法:采用卵巢摘除法建立SD大鼠骨质疏松模型,设立假手术组、模型组(单纯去卵巢组)、雌激素组(尼尔雌醇组)和金刚健骨片组。造模成功后4周开始给药,给药12周后RT-PCR检测各组大鼠骨组织中OPG/RANKL/RANK mRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组的OPG表达降低、RANKL表达增加,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,金刚健骨片组和雌激素组的OPG表达增高,RANKL表达降低,差异均有统计学意义(P0.05);金刚健骨片组与雌激素组之间比较,差异无统计学意义(P0.05);RANK的mRNA表达在各组之间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:采用卵巢摘除法成功建立大鼠骨质疏松模型;金刚健骨片可促进OPG在骨质疏松大鼠中的表达,抑制其RANKL的表达,这可能是金刚健骨片治疗骨质疏松症的作用机制之一。     

脉冲电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松的影响

目的:探讨脉冲电磁场(PEMFs)对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法:将30只SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、PEMFs组,去卵巢组和PEMFs组大鼠行双侧卵巢切除术,术后PEMFs组给予脉冲电磁场治疗,干预12周后进行大鼠外周血液样本生化指标、骨密度及PCR分析。结果:干预12周后,PEMFs组大鼠血清TRACP 5b水平较去卵巢组显著降低(P0.01);PEMFs组骨密度相比去卵巢组显著增高(P0.05);OPG mRNA表达显著增加(P0.01),RANKL mRNA表达显著降低(P0.05)。结论:脉冲电磁场可能通过对RANKL/RANK/OPG信号系统的调节,抑制骨吸收,对治疗去卵巢大鼠骨质疏松有良好疗效。     

更年春方对骨代谢相关基因表达的影响

目的:观察更年春方对去卵巢(OVX)大鼠骨髓微环境中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)mRNA表达的影响,探讨更年春抗绝经后骨质疏松骨丢失的可能分子机制。方法:取健康10月龄雌性SD大鼠42只,随机平均分为假手术组(S),生理盐水组(N)、尼尔雌醇组(E)、更年春高剂量组(H)、更年春中剂量组(M)和更年春低剂量组(L)。假手术组仅切除卵巢周围少许脂肪,其余5组均切除卵巢。灌药3d后取腰椎冲洗骨髓提取总RNA,实时定量PCR法检测上述因子mRNA的表达情况。结果:更年春高剂量组可上调OVX大鼠骨组织中OPG的mRNA的表达,下调M-CSF的mRNA的表达,使RANKL/OPG值下降。结论:更年春方抗绝经后骨质疏松骨丢失的分子机制可能与其调控OPG和M-CSF的表达,影响RANKL/OPG值有关。     

大豆苷元-壳聚糖微球对去卵巢小鼠骨质疏松的药效研究

目的 评价大豆苷元-壳聚糖长效微球对小鼠去卵巢骨质疏松的作用.方法 建立小鼠去卵巢骨质疏松模型,测定给药后小鼠体质量和子宫重量系数,并取股骨进行石蜡切片HE染色观测.结果 小鼠去卵巢后3周出现骨质疏松症状,所有实验组小鼠体质量无明显增重.与假手术组相比,去卵巢后子宫重量系数明显减小(P＜0.01)；肌肉注射高剂量大豆苷元-壳聚糖微球1次后,第3周和第5周子宫重量系数有较大幅度的增加(分别为P＜0.05,P＜0.01),明显高于每日灌胃大豆苷元混悬液组.与模型组相比,微球给药组可见骨小梁分布较密,骨皮质呈不明显蚕食样改变,骨髓腔较密实；而大豆苷元混悬液灌胃给药组无明显差别.结论 与大豆苷元混悬液灌胃给药相比,大豆苷元-壳聚糖微球经肌肉注射有明显的改善骨质疏松症状作用,提示其在体内生物利用度得到提高.     

基于OPG/RANKL及Notch1信号通路探讨温针灸对膝骨性关节炎兔软骨下骨损伤的影响

目的：观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔软骨下骨的骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化子配体(RANKL)及Notch1信号通路的影响，探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法：选取新西兰雌雄兔共50只(6个月),随机分为空白组、模型组、药物组和温针灸组。采用管型石膏伸直位固定法建立兔KOA模型。经6周实验干预后采用HE染色观察各组软骨下骨形态结构，蛋白质印迹法检测OPG、RANKL及Notch1蛋白表达，实时荧光定量PCR检测各组软骨下骨中OPG、RANKL及Notch1 mRNA含量。结果：与模型组比较，药物组和温针灸组软骨表面相对光滑完整，结构较为清晰，软骨下骨处细胞分布较为整齐均匀。与空白组比较，模型组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较，药物组和温针灸组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显降低，差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG mRNA、OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1比值均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。温针灸组Lequesne MG评分及Mankin评分均明显低于药物组，差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1水平均高于药物组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：温针灸可促进OPG表达，抑制RANKL及Notch1表达，通过调控OPG/RANKL及Notch1信号通路，减轻KOA兔软骨下骨的损伤，从而起到治疗KOA的作用。     

温肾通络止痛汤对去卵巢模型大鼠骨密度与血清生化指标的影响

目的:通过观察温肾通络止痛汤对去卵巢模型大鼠骨代谢的影响,探究其治疗绝经后骨质疏松症的机制。方法:选用3个月龄SD雌性大鼠72只,60只行双侧卵巢切除(OVX)后,随机分为模型组(OVX组),戊酸雌二醇组,温肾通络止痛汤高剂量组、中剂量组、低剂量组,其余12只为假手术组。通过骨密度和骨代谢生化指标测定,评价温肾通络止痛汤治疗绝经后骨质疏松症的效果。结果:温肾通络止痛汤可以防止去卵巢SD雌性大鼠胫骨骨密度降低,减少血清白细胞介素-6(IL-6)、核因子κB受体活化因子配基(RANKL)表达,提高血清骨保护素(OPG)水平,从而降低血清RANKL/OPG比值,达到抗骨质疏松的作用。结论:温肾通络止痛汤治疗绝经后骨质疏松症的作用机制主要为下调血清IL-6、降低RANKL/OPG比值,从而抑制破骨细胞活性,提高骨密度。     

补肾活血颗粒对去势骨质疏松大鼠OPG/RANK/RANKL系统的影响

目的:观察补肾活血颗粒对去势骨质疏松大鼠骨组织骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)mRNA表达及其骨密度的影响,探讨补肾活血颗粒治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症(OP)提供实验依据。方法:将雌性SD大鼠80只随机分为模型组、补肾活血颗粒治疗组、倍美力阳性对照组、正常对照组4组;除正常组外,其余各组大鼠行双侧卵巢去除术,正常组大鼠行假手术处理;各组大鼠给予相应处理12 W。采用双能X线骨密度仪测定大鼠右股骨上干骺端骨密度、HE染色观察骨组织形态改变、免疫组织化学染色方法及荧光定量PCR检测骨组织OPG、RANK、RANKL相关蛋白和基因的表达。结果:补肾活血颗粒能够显著增加去势骨质疏松大鼠的骨密度;提高其骨组织OPG、RANK mRNA及蛋白的表达水平,降低RANKL mRNA及蛋白的表达水平;作用与阳性对照组相当。结论:补肾活血颗粒可显著增强去势骨质疏松大鼠的骨密度,促进OPG、RANK mRNA和蛋白的表达及抑制RANKL mRNA和蛋白表达是其部分作用机制。     

大豆异黄酮抗绝经后骨质疏松骨丢失分子机制的初步研究

目的:观察大豆异黄酮(Soybean Isoflavaones)对去卵巢大鼠骨组织中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(ODF)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)mRNA表达的影响,探讨大豆异黄酮抗绝经后骨质疏松(PMO)骨丢失的可能分子机制.方法:健康3月龄雌性SD大鼠30只,随机平均分为假手术组,去卵巢组和大豆异黄酮组(大豆异黄酮,50mg/kg·d,灌胃).假手术组仅牵动卵巢,其余两组均行卵巢切除术.12周后取第3～6腰椎做骨密度检查;取股骨提总RNA,实时定量PCR(Real-time quantitative PCR)法检测上述因子mRNA的表达情况.结果:大豆异黄酮能够增加去卵巢大鼠腰椎骨密度,并可上调去卵巢大鼠骨组织OPG的mRNA表达,下调M-CSF的mRNA表达,使ODF/OPG值下降.结论:大豆异黄酮抗绝经后骨质疏松骨丢失的分子机制可能与其调控OPG和M-CSF的表达和ODF/OPG值有关.     

补肾壮骨液对骨质疏松模型大鼠血清OPG、RANKL蛋白表达的影响

目的：观察补肾壮骨液（BGY）对骨质疏松（POP）模型大鼠骨形态计量学变化及血清OPG、RANKL表达的影响。方法：采用去势法建立大鼠POP动物模型,BGY三个剂量组和阳性对照组分别给予BGY和rhIGF-1。3个月后,采用图象分析系统进行骨形态计量学分析,ELISA法分别测定大鼠血清OPG、RANKL。结果：BGY高、中剂量组骨形态计量值与模型组比较有显著性差异（P〈0.05）;BGY三个剂量组、阳性对照组及模型组的血清OPG和RANKL均较正常组升高,而BGY三个剂量组、阳性对照组测得较高的OPG和RANKL值,较之模型组有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）。结论：BGY可通过上调OPG,下调RANKL的表达,影响OPG/RANKL/RANK系统,使其骨量增加,骨结构改善,从而起到防治POP的作用。     

去卵巢骨质疏松大鼠骨组织OPG/RANKLmRNA动态表达研究

目的:建立去卵巢大鼠骨质疏松症动物模型,检测造模成功后不同时期大鼠胫骨OPG/RANKLmRNA表达量及血清雌二醇水平,分析OPG/RANKLmRNA表达变化规律。方法:选取3月龄雌性SD大鼠60只随机分为2组即去卵巢组与对照组,每组30只。去卵巢组去除双侧卵巢,对照组仅去除腹腔少许脂肪。分别在造模12周后0个月、6个月、12个月每组随机处死10只,检测不同时期大鼠胫骨OPG/RANKLmRNA表达量及血清雌二醇水平。采用SPSS 17.0软件进行统计,分析数据,得出结论。结果:与对照组相比,去卵巢组胫骨OPGmRNA表达量、血清雌二醇浓度在各时间点上均显著降低(P<0.05),RANKLmRNA表达量则显著增高(P<0.05);去卵巢组0个月与6个月、6个月与12个月比较,胫骨OPGmRNA表达量及血清雌二醇浓度下降,差异具有统计学意义(P<0.05),RANKLmRNA表达量增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:造模成功后12个月内,去卵巢大鼠胫骨骨组织OPGmRNA表达量持续减少,血清雌二醇浓度均持续降低,RANKLmRNA持续高表达,OPG/RANKL比值缩小。     

强骨胶囊对去卵巢大鼠血清OPG、RANKL表达影响的研究

目的：建立去卵巢大鼠骨质疏松症的动物模型,观察强骨胶囊对其血清中骨保护素（OPG）、核因子-Кβ受体活化因子配基（receptor activator of nuclear factr-kappaβ1igand,RANKL）、雌激素水平、胫骨干骨密度及胫骨生物力学的影响。方法：将3月龄48只SD雌性大鼠按照1：3的比例随机分为空白组、手术模型组。手术模型组制备成为去势大鼠模型,3个月后再将手术模型组大鼠进一步随机分为3组：强骨胶囊组、尼尔雌醇组、模型对照组,分别予以强骨胶囊、尼尔雌醇、蒸馏水（每组12只）进行灌胃3个月,3个月后处死空白组和手术模型组大鼠,取大鼠双侧胫骨及血液标本,检测治疗前后大鼠的胫骨骨密度、血清OPG、RANKL值,雌激素水平、胫骨生物力的变化。结果：追模后3个月手术模型组与空白组相比较骨密度显著下降（P〈0．05）;经过3个月的治疗后,其中强骨胶囊组、尼尔雌醇组与模型对照组大鼠血清OPG、RANKL含量及大鼠各部位骨密度相比有统计学意义（P〈0．05）。结论：强骨胶囊对细胞因子轴OPG／RANKL／RANK系统有调节作用,能提高去卵巢大鼠胫骨骨密度及血清OPG含量,降低去卵巢大鼠血清RANKL浓度,同时改善胫骨生物力学性能。     

中西医结合疗法治疗老年骨质疏松症的临床应用效果

目的：分析补肾中药与西药联合疗法对老年骨质疏松症患者临床疗效和外周血骨代谢指标表达的影响,为其临床应用提供数据支撑。方法：采用前瞻性研究,选取老年骨质疏松患者80例,以随机数字表分为观察组和对照组各40例;对照组采用阿仑磷酸钠与碳酸钙D3进行治疗,观察组在此基础上加用补肾汤剂。用药6个月后对比临床疗效和骨密度（BMD）,并采取患者空腹外周静脉血,分别采用RT-PCR和Westernblot检测外周血OPG/RANKL的mRNA及蛋白表达。结果观察组患者的临床总有效率和显效率均高于对照组,且显效率有统计学差异（χ2=5.208,P=0.022）。治疗前两组患者的骨密度无明显统计学差异;治疗后观察组股骨颈、腰椎L2-4和大转子骨密度均显著高于对照组（t=2.847、2.461、3.052;P=0.031、0.043、0.022）。治疗前,两组患者的OPG/RANKL表达水平无显著差异;治疗后,观察组OPG/RANKL mRNA及蛋白表达均显著高于对照组（t=8.524、6.872;P=0.000）。此外,OPG/RANKL mRNA及蛋白表达均与患者平均BMD呈直线正相关（R2（mRNA）=0.6503,R2（蛋白）=0.6563）。结论：补肾中药可调节骨质疏松患者OPG/RANKL/RANK轴,对促进骨生成、抑制骨吸收、增加骨密度有正向作用,与西药联合应用时能够增强临床疗效。     

温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死血清OPG、RANK、RANKL的影响

目的：探讨温阳补肾方对兔激素性股骨头坏死血清OPG、RANK、RANKL表达的影响,进一步揭示温阳补肾方对激素性股骨头坏死的作用机制。方法：136只新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、中药低、中、高剂量组。造模成功后,分别于给药后第4、8、12周取血清,用酶联免疫法检测OPG／RANK／RANKL含量。结果：第4周时,正常组、中药中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。第8周时,正常组、中药低、中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。第12周时正常组、中药低、中、高剂量组RANK、RANKL明显低于模型组（P〈0．01）,而OPG明显高于模型组（P〈0．01）。结论：大剂量激素使用可上调RANK、RANKL的表达,下调OPG的表达,使骨过度吸收从而破坏骨质导致股骨头坏死。温阳补肾方可以提高OPG表达,降低RANK、RANKL的表达,抑制破骨细胞的活化,促进新骨的形成,是治疗激素性股骨头坏死的作用机制之一。     

壮骨冲剂对去卵巢大鼠骨密度、骨钙素的影响

目的：探讨壮骨冲剂对去卵巢大鼠骨密度、骨代谢指标的影响,为预防、治疗绝经后骨质疏松症提供实验依据。方法：将40只6月龄SD雌性大鼠采用假手术和摘除卵巢手术建立骨质疏松模型,按一定剂量给用药组灌服壮骨冲剂,西药组灌服尼尔雌醇,假手术组、模型组灌服等量生理盐水。3个月后处死大鼠,眼球取血,测定血清骨钙素水平。同时取大鼠双侧股骨用于测定BMD。结果：壮骨冲剂可减缓大鼠摘除卵巢后骨量的丢失,使去卵巢大鼠血清骨钙素（BGP）水平升高（P〈0．05）。结论：壮骨冲剂通过对钙调激素分泌释放的调节,使骨量的丢失减少,对绝经后的骨质疏松起到防治的作用。     

补肾宁心方对小鼠绝经后骨质疏松的影响

目的 探讨补肾宁心方防治绝经后骨质疏松的作用.方法 建立BALB/c小鼠绝经后骨质疏松模型,灌服补肾宁心方浓缩液（简称补肾方组）,并以17 β-雌二醇为阳性对照（简称E2组）,以生理盐水为阴性对照（简称模型组）.12周后处死,取血测Th1/Th2型细胞因子;取椎骨（L3-4）和左股骨测骨密度（BMD）;取右股骨行骨组织形态计量分析;胫骨提取总RNA,半定量RT-PCR分析护骨素（OPG）的mRNA表达.计算子宫对体重的比值,并行子宫组织切片观察.结果 补肾方组的IFN-γ水平较模型组明显升高（P＜0.01）,而IL-4水平低于模型组（P＜0.05）.补肾方组与E2组小鼠的BMD均改善,骨小梁面积增加,OPG mRNA表达增加;但补肾方组小鼠的子宫明显小于E2组（P＜0.05）,与模型组比较差异无显著性.结论 补肾方能够选择性地防治绝经后骨质疏松,对子宫无或仅有轻微的刺激作用.其机制可能与调节Th1/Th2的偏移及提高OPG的表达,抑制破骨细胞的活性有关.     

仙灵骨葆胶囊对去卵巢骨折大鼠骨折端骨微结构的影响及OPG/RANKL信号调控机制

目的 研究仙灵骨葆胶囊对去卵巢大鼠骨折端骨微结构的影响及骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配基(RANKL)信号调控机制.方法 从48只Sprague-Dawley雌鼠中随机挑出40只切除双侧卵巢,恢复性饲养6周后建立股骨骨折内固定模型,建模大鼠随机分为模型组,阳性对照组及仙灵骨葆胶囊高、中、低剂量组,余下8只...     

补肾壮骨胶囊对去卵巢大鼠骨质疏松症骨密度和相关细胞因子的影响

目的：研究补肾壮骨胶囊对去卵巢大鼠骨质疏松症的骨密度和细胞因子等的影响,探索该药对绝经后骨质疏松症的防治功效及作用机理。方法：将大鼠随机分为6组：假手术组、卵巢切除组、切除卵巢＋牡蛎碳酸钙组、切除卵巢＋补肾壮骨胶囊低剂量组、切除卵巢＋补肾壮骨胶囊中剂量组、切除卵巢＋补肾壮骨胶囊高剂量组,观察骨密度、血清E2和IL-6、子宫指数和股骨指数等指标,了解其对去卵巢大鼠骨骼的影响。结果：1）骨密度的变化：去卵巢16周后,卵巢切除组大鼠右股骨骨密度和骨矿含量均明显低于假手术对照组,差异有显著性（P〈0.01）,表明造模成功。与卵巢切除组比较,补肾壮骨胶囊中剂量组和高剂量组可明显提高模型大鼠股骨BMC含量（P〈0.05）,高剂量组可明显提高模型大鼠股骨BMD的含量（P〈0.05）。2）血清E2和IL-6的变化：去卵巢16周后,卵巢切除组大鼠血清E2含量显著低于假手术对照组,差异有显著性（P〈0.05）。中药中剂量组及高剂量组E2含量明显高于模型组,差异有显著性（P〈0.05）。3）子宫指数和股骨指数：与假手术组比较,卵巢切除组子宫指数和股骨指数明显降低,具有统计学意义（P〈0.05）,提示造模成功。与卵巢切除组比较,高剂量组子宫指数明显增加（P〈0.05）;高、中、低三个剂量组股骨指数均明显增加（P〈0.05）。结论：补肾壮骨胶囊能增加去卵巢大鼠子宫湿重,但对干重无明显影响,可以显著提高去卵巢大鼠离体骨骨密度及改善其生物力学性能,提高去卵巢大鼠血清E2和IL-6含量,具有类性激素样作用。     

淫羊藿总黄酮对去势大鼠股骨骨组织形态学及生物力学的影响

目的：探讨淫羊藿总黄酮（TFE）对去势大鼠股骨骨组织形态及生物力学的影响及其机制。方法：采用卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松模型,将60只大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,TFE低、中、高剂量组,β-雌二醇组6组,每组10只,分别予相应药物灌胃90天。脱钙完成后将股骨近端沿矢状面切开,制成常规石蜡,切片,光镜下观察骨小梁结构;采用三点弯曲实验机,支点跨距18 mm,加载速度2 mm/min,分别从载荷-变形曲线和应力-变形曲线上获得结构力学参数和材料力学参数。结果：与正常对照组相比,模型对照组大鼠骨小梁出现断裂、间隙增宽、数量减少;与模型对照组相比,各给药组骨组织形态明显改善,以TFE高剂量组最为明显;与正常对照组相比,模型对照组股骨结构力学和材料力学均显著下降,其差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型对照组相比,TFE低、中、高剂量组及β-雌二醇组生物力学各项指标均上升或显著上升,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：TFE可改善去势大鼠股骨骨组织结构,从而改善其生物力学性能。