香烟烟雾提取物对CD4^＋T细胞向Th17细胞和调节性T细胞分化的影响

目的观察香烟烟雾提取物（CSE）对CD4^＋T细胞向Th17细胞和调节性T细胞分化的影响,为探索香烟烟雾暴露导致气道慢性炎症的机制提供实验依据。方法采用免疫磁珠法分离纯化健康志愿者外周血CD4^＋T细胞,以1×10^6／ml细胞密度接种于96孔培养板,分为以下8个组①空白对照组;②T细胞刺激剂组：加入T细胞刺激剂抗人CD3／28抗体微磁珠;③T细胞刺激剂CSE干预组：CD3／28＋2%CSE;④细胞因子组：CD3／28＋细胞因子;⑤细胞因子CSE干预组：CD3／28＋细胞因子＋2％CSE;⑥芳香烃受体（AHR）激动剂6-甲酰基吲哚[3,2-b]咔唑（FICZ）组CD3／28＋细胞因子＋FICZ;⑦AHR拮抗剂白藜芦醇组：CD3／28＋细胞因子＋2％CSE＋白藜芦醇;⑧溶剂对照组：CD3／28＋细胞因子＋DMSO。细胞因子为含TGF-β/IL-1β／IL-6／IL～23的混合细胞因子,以诱导Th17细胞和调节性T细胞分化。培养5d后,收集细胞,采用流式细胞术检测细胞表面分子CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋细胞（Treg细胞）,以及胞内细胞因子IL-17＋的CD4^＋T细胞（Th17细胞）,计算各种刺激培养条件下,诱导生成的Th17及Treg细胞占CD4^＋T细胞的百分比。结果①CSE对Th17细胞分化的影响：空白对照组Th17细胞比例为（0．69±0．12）％,加入T细胞刺激剂后为（1．32±0．12）％,在此基础上加入CSE的干预组IL-17＋细胞比例升高为（2．17±0．24）％,（t=3．21,P〈0．01）;细胞因子组IL-17＋细胞比例为（1．35±0．08）％,而在此基础上加入CSE的干预组Th17细胞升高为（2．58±0．39）%（t=3．13,P〈0．01）。②CSE对Treg细胞分化的影响：在空白对照组中,Treg细胞占CD4^＋T细胞中的比例为（0．21±0．19）％,在加入T细胞刺激剂后,Treg细胞比例升高（3．59±0．37）％,加入细胞因子后,Treg细胞比例明显增加（5．85±0．76）％;在继续加入CSE干预后,Treg细胞比例明显减少（3．07±0．33）％（t=3．74,P〈0．01）;同样,T细胞刺激剂CSE干预组也出现Treg细胞比例减少（2．19±0．19）％,（t=2．71,P〈0．05）。③AHR活化对Treg细胞和Th17细胞分化的影响：AHR激动剂FICZ组的Treg细胞比例明显低于细胞因子组[（2．60±0．40）％,（5．85±0．76）％]（t=4．18,P〈0．01）,但Th17细胞比例升高[（2．86±0．43）％,（1．35±0．08）％]（t=3．65,P〈0．01）。AHR阻断剂白藜芦醇组中的Treg细胞比例和Th17细胞比例均低于细胞因子组,分别为[（0．33±0．14）％,（5．85±0．76）％],（t=7．71,P〈0．01）和[（0．42±0．07）％,（1．35±0．08）％],（t=8．87,P〈0．001）,并且和空白对照组接近,在细胞培养第5天通过7-AAD-AnnexinV对该组细胞检测并未发现细胞异常凋亡或死亡情况,结合该组细胞培养过程中的镜下形态推测该实验组CD4^＋T细胞的分化增殖受到白藜芦醇抑制。结论CSE可促进CD4^＋T细胞向Th17细胞分化,并抑制Treg细胞分化,这一过程可能通过AHR诱导。     

抗病毒治疗对慢性丙型肝炎CD4^＋CD25^＋调节性T细胞频率和功能的影响

目的研究抗病毒治疗前后慢性丙型肝炎患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）频率和功能的变化。方法筛选HLA—A2阳性慢性丙型肝炎患者31例，给予聚乙二醇化干扰素α-2a（相对分子质量为40000）180μg每周1次皮下注射，联合口服利巴韦林。分别在治疗前和治疗结束随访24周时应用流式细胞仪检测患者CD4^＋CD25^＋ Treg细胞占外周血CD4^＋T细胞的频率，应用液闪计数仪检测其对HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的抑制作用，ELISA法检测细胞培养上清γ干扰素（IFN-γ）水平的变化情况。结果治疗结束随访24周，患者外周血CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（9．6±3．0）％，明显低于治疗前的（11．0±2．3）％（t=2．028，P〈0．05）；持续病毒学应答（SVR）组CD4^＋CD25^＋ Treg细胞频率为（8．9±2．7）％，明显低于未获得SVR患者组的（10．4±2．3）％（t=3．324，P〈0．01）。抗病毒治疗后CD4^＋CD25^＋ Treg细胞抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。治疗后患者IFN-γ水平为（3959±577）pg／ml，明显高于治疗前的（1965±326）pg／ml（t=16．1，P〈0．01）；获得SVR患者组IFN-γ（6824±568）pg／ml，明显高于未获得SVR患者组的（2219±286）pg／ml（t=29．853，P〈0．001）。结论慢性丙型肝炎患者随着HCV RNA水平的下降，CD4^＋CD25^＋Treg细胞频率降低，抑制HCV特异性CD8^＋T细胞增殖的作用减弱。     

HIV／AIDS病人CD4^＋T淋巴细胞计数与HDL—C水平的相关性

目的探讨未经高效抗反转录病毒治疗（HAART）的艾滋病病毒（HIV）感染者／艾滋病（AIDS）病人（HIV／AIDS病人）,不同CD4^＋T淋巴细胞（CD4细胞）水平的高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）的水平。方法选择未进行HAART的HIV／AIDS病人,同时检测CD4细胞计数和空腹血脂水平,比较不同CD4细胞水平的HIV／AIDS病人的血脂水平,重点观察HDL—C的变化。结果CD4细胞计数与HDL—C水平呈正相关（P〈0．01）,CD4细胞计数〉200／μL组的107例病人的HDL—C为（1．02±0．29）mmol／L,≤200／μL组的139例病人的HDL～C为（0．84±0．35）mmol／L,≤200／μL病人的HDL-C较〉200／μL病人明显降低（P〈0．01）。而CD4细胞计数在200～51／μL的病人HDL-C为（0．96±0．30）mmol／L,≤50／μL的病人HDL-C为（0．72±0．36）mmol／L,≤50／μL的HDL-C降低更明显（P〈0．01）。结论HIV感染可导致血脂异常,HAART之前的HIV／AIDS病人中,主要是HDL—C及载脂蛋白A1的降低,随着CD4细胞计数减少,HDL-C水平随之降低,心血管疾病（CVD）的危险随之升高。     

支气管哮喘大鼠CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及地塞米松干预作用的研究

目的研究支气管哮喘（简称哮喘）大鼠模型支气管肺泡灌洗液（BALF）、血液、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化,及地塞米松对CD4^＋CD25^＋T细胞的影响。方法50只SD大鼠随机分为5组,空白对照（A）组,哮喘（B）组,地塞米松1（C）组、地塞米松2（D）组,地塞米松3（E）组。A组第1天给予腹腔注射生理盐水1ml,第15～21天每天给予生理盐水雾化。B、C、D、E组用卵蛋白建立哮喘大鼠模型,第1天,每只大鼠腹腔注射抗原1ml（卵蛋白1mg＋灭活百日咳杆菌9×10。个＋氢氧化铝干粉100mg）混悬液,第15～21天给予1％的卵蛋白雾化30min,C、D、E组于雾化后分别给予腹腔注射地塞米松0．2mg／kg、1mg／kg、2mg／kg。采用流式细胞仪检测的方法,观察大鼠体内BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞的变化及使用不同剂量地塞米松后对其的影响。结果B组BALF、外周血、脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞表达占CD4^＋T细胞的百分比分别是（42．21±5．62）％、（12．69±2．70）％、（11．15±1．05）％,A组结果分别是（18．76±5．85）％、（6．21±1．73）％、（7．85±2．13）％。B组与A组比较,差异均具有统计学意义（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．05）;C组、D组、E组BALF中CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的百分比表达分别是（10．49±4．03）oA、（13．28±5．12）％、（7．51±5．39）％,显著低于A组和B组,（P〈0．05,P〈0．01）;外周血中,C组（6．03±1．43）％、D组（4．88±0．95）％与A组（6．21±1．73）％比较,差异无统计学意义,E组（3．49士0．62）％与C组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。脾脏中,c组（7．25±1．82）%、D组（8．63±3．18）％与A组（7．85±2．13）％比较,差异无统计学意义,E组（3．38±1．37）％与C组、D组、A组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在哮喘大鼠体内有明显的优势表达,可能是哮喘发病的机制之一。地塞米松可以抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的表达。BALF内CD4^＋CD25^＋T细胞的变化与外周血和脾脏的变化具有一致性,监测外周血或脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞变化可了解肺部情况。     

支气管哮喘儿童急性发作期诱导痰液T细胞亚群及自然杀伤T细胞的变化

目的分析支气管哮喘（简称哮喘）儿童急性发作期及缓解期诱导痰液T细胞亚群及自然杀伤T细胞（NKT细胞）的变化，探讨T细胞及NKT细胞在儿童哮喘气道炎症中的作用。方法选取18例哮喘急性发作、21例哮喘缓解期及12名正常儿童的痰液，采用流式细胞术比较各组儿童诱导痰液CD3、CD4、CD8、NKT（CD3-CD56^＋）百分比及CD4／CD8比值。结果哮喘急性发作组CD4细胞百分比[（43．75±13．5）%]明显高于缓解期组[（37．04±7．1]）％]和正常对照组[（33．57±7．54）％]（P〈0．05），CD8细胞百分比[（21．10±6．10）%]明显低于缓解期组[（28．67±5．32）%]和正常对照组[（28．31±9．46）％]（P〈0．05），CD4／CD8比值（2．14±0．94）高于缓解期组（1．33±0．35）和正常对照组（1．31±0．42）（P〈0．05），CD4、CD8细胞百分比及CD4／CD8缓解期组和正常对照组差异无统计学意义（P〉0．05），急性发作组CD4／CD8比值与嗜酸粒细胞百分比呈正相关（r＝0．559．P〈0．05）。缓解期组CD4／CD8比值与嗜酸粒细胞无相关性（r＝0．898，P〉0．05）。急性发作组CD3 CD56。细胞百分比[（3．33±1．69）％]略高于缓解组[（3．09±1．23）％]及对照组[（2．94±0．87）％]．但差异无统计学意义（P〉0．05）。CD3^-CD56^＋细胞百分比在三组之间无统计学差异（P〉0．05）。结论儿童哮喘急性发作期，气道内CD4细胞占优势，CD4／CD8细胞比例失衡，CD4细胞可能介导儿童哮喘气道炎症过程。     

鸦胆子油乳剂联合经导管肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌28例临床观察

目的：观察经导管肝动脉化疗栓塞术（TACE）联合鸦胆子油乳剂对原发性肝癌（HCC）的疗效及安全性。方法：将2009年7月-2010年7月在丽水市中心医院确诊的56例患者随机分为TACE联合鸦胆子油乳剂组（联合组）和单纯TACE组（TACE组）,每组各28例。两组患者均治疗至少3个周期,并随访6-37个月,采用Kaplan-Meier方法进行生存期分析,比较两种治疗方法对HCC的疗效及其对患者体力状态评分、免疫功能影响的差异,并评价两种疗法的安全性。结果：按mRECIST标准,联合组有效率为71．4％,TACE组治疗有效率57．1％,两组比较差异有显著性意义（P〈0．05）。联合组及TACE组中位TTP（至疾病进展时间）分别10个月和8个月,差异有统计学意义（P〈0．05）。联合组及TACE组1、2、3年总生存率分别为96．3％、62．4％、23．7％和92．2％、70．3％、21．3％,差异无统计学意义（P=0．67）。治疗后联合组患者外周血CD4＋阳性T细胞绝对值、CD4＋／CD8＋比值分别为（652．68±167．01）个／μl和2．16±0．78,显著高于TACE组的（416．71±170．57）个／μl和1．48±0．77（P〈0．05）;治疗后联合组和TACE组患者卡氏生存质量评分（KPS评分）分别为95．36±6．37和88．57±9．71,差异有统计学意义（P〈0．05）;两组患者均出现1-2度恶心、呕吐、低热及肝功能损害,两组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：鸦胆子油乳剂联合TACE治疗HCC可以提高近期疗效和患者生活质量,改善免疫状态,并能延缓TTP时间,是治疗HCC的一种安全、有效的方法。     

冠心病心力衰竭患者血尿酸、血浆脑利钠肽与左室射血分数的相关性分析

目的探讨冠心病心力衰竭患者血尿酸水平与血浆脑钠肽水平的相关性及与左室射血分数的关系。方法随机选取我院心血管内科住院的80例冠心病心力衰竭患者作为观察组,对照组为非心血管疾病患者30例。两组患者均行血尿酸、血浆脑利钠肽及左室射血分数检测并进行比较,分析尿酸、脑利钠肽与左室射血分数的关系及血尿酸与脑利钠肽的相关性。结果观察组血尿酸、脑利钠肽明显高于对照组[（486．56±78．4）μg／ml比（320．12±82．24）μg／ml,（984．2±482．6）μg／nd比（26．1±5．2）μg／ml]（P〈0．05,P〈0．01）,左室射血分数观察组低于对照组[（38±3．6）％比（55±4．5）％,P〈0．01）]。血尿酸及脑钠肽与左室射血分数呈负相关（r=-0．701,P〈0．01;r=-0．695,P〈0．01）,尿酸与脑钠肽呈正相关（r=0．807,P〈0．01）。结论高血尿酸是冠心病心力衰竭的又一个独立的危险因素,它和血浆脑钠肽一样,可以反映心功能恶化程度。血尿酸及脑钠肽与左室射血分数呈负相关。     

天津市高效抗逆转录病毒治疗艾滋病临床观察

目的评价天津市艾滋病（AIDS）初治患者,应用高效抗逆转录病毒治疗（HAART）的疗效、安全性和预后。方法将在天津市传染病医院就诊的62例AIDS患者,随机分成治疗组（45例）及对照组（17例）;治疗组应用一线HAART方案：AZT／D4T＋3TC＋NVP／EFV。观察两组患者的临床表现、免疫功能变化及预后。结果（1）HAART治疗组与对照组患者基线CD4 T细胞计数差异无统计学意义（P〉0．5）;治疗组的45例患者,HAART前CD4 T细胞计数均值为73／μl;HAART后3、6、12个月时分别为120／μl（39例）、139．5／μl（30例）和200／μl（22例）。（2）治疗组患者应用HAART后,机会性感染、肿瘤的发生率和病死率分别为40％和4．44％,均显著低于对照组的88．24％和47．06％（P〈0．01）。（3）初治患者一线HAART治疗的有效率为95．55%（43／45）,有17．78％（8／45）的患者因药物不良反应而调整HAART方案。结论天津市AIDS患者对一线HAART有较好的疗效,随着HAART疗程的延长,免疫功能得到恢复并改善了预后,存在药物不良反应和资源有限等问题。     

艾滋病免疫重建炎性综合征与基线CD4^＋T淋巴细胞计数的相关性及治疗分析

目的探讨艾滋病（AIDS）免疫重建炎性综合征（IRIS）与基线CD4^＋T淋巴细胞（简称CD4细胞）计数的相关性及治疗方法。方法将选取的艾滋病病毒（HIV）感染者／艾滋病（AIDS）病人（HIV／AIDS病人）,根据不同基线CD4细胞水平分为两组,观察这两组在高效抗反转录病毒治疗（HAART）后,发生IRIS的情况,以及糖皮质激素在治疗IRIS中的作用。结果共选取HIV／AIDS病人312例,A组157例,CD4细胞计数≤100个／μL：B组155例,CD4淋巴细胞计数〉100个／μL。A组IRIS发生率为40．1％（63／157）,死亡率为6．3％（4／63）;B组IRIS发生率为3．9％（6／155）,无死亡病例;两组IRIS发生率差异有统计学意义（P〈0．01）,死亡率虽有差异,但无统计学意义（P〉0．05）。两组IRIS最常见并发结核病,分别为71．4％（45／63）和33．3％（2／6）。糖皮质激素治疗重症病人症状的有效率为90．2％。结论基线CD4细胞低下是IRIS发生的重要因素,CD4细胞计数≤100个／μL的病人发生IRIS合并结核的较多见,糖皮质激素治疗有效。     

姜黄素抑制棕榈酸诱导的巨噬细胞炎症反应的机制研究

目的探讨姜黄素抑制棕榈酸诱导的巨噬细胞炎症反应的作用机制。方法以0、250、500μmol／L棕榈酸干预小鼠巨噬细胞RAW264．724h,观察细胞形态,逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞中受体相互作用蛋白140（RIPl40）、肿瘤坏死因子a（TNF-a）、白细胞介素-6（IL-6）mRNA水平,酶联免疫吸附实验（ELISA）检测上清中TNF-a、IL-6水平;噻唑蓝法（MTr）确定姜黄素作用RAW264．7细胞的最佳时间和浓度;细胞分为姜黄素组和对照组,分别给予20μmol／L姜黄素和二甲基亚砜（DMSO）预处理1h后,均给予500μmol／L棕榈酸作用24h,观察细胞形态并检测细胞中RIPl40、TNF-a、IL-6mRNA水平和上清中TNF-a、IL-6浓度。采用单因素方差分析和t检验对研究数据进行统计检验。结果500μmol／L棕榈酸组RIPl40mRNA表达较0μmol／L组显著升高（3．40±0．51比1．01±0．21,t=7．436,P〈0．01）;0、250、500μmol／L棕榈酸组TNF-amRNA（1．00±0．03、1．79±0．12、2．16±0．13）和蛋白[（197±25）、（371±10）、（485±17）ng／L]、IL-6mRNA（1．00±0．51、2．55±0．15、2．59±0．17）和蛋白[（953±66）、（1081±36）、（1182±18）ng／L]与棕榈酸剂量明显相关（F=99．308、187．049、152．958、26．594,均P〈0．01）;棕榈酸处理后,细胞变圆、皱缩甚至崩解;姜黄素作用RAW264．7细胞的最佳时间为1h,最佳浓度为20ixmol／L;姜黄素组与对照组相比,RIPl40mRNA（1．00±0．05比0．63±0．01,t=一13．79,P〈0．01）、TNF-amRNA（0．64±0．11比1．00±0．07,t=一4．532,P〈0．05）和蛋白[（322±12）比（485±17）ng／L,t=一13．577,P〈0．01]、IL-6mRNA（0．57±0．05比1．00±0．02,t=一14．167,P〈0．01）和蛋白[（241±47）比（1182±18）ng／L,t=一44．810,P〈0．01]均显著降低,而细胞形态正常,细胞问仍有连接融合。结论RIPl40可能参与姜黄素抑制棕榈酸诱导的炎症反应过程。     

急性ITP患儿外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞、IL-7水平变化及意义

目的探讨急性特发性血小板减少性紫癜（AITP）的发病机制。方法选择35例AITP患儿（AITP组）和30例健康查体者（对照组）,用流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T（Tr）细胞数量及占CD4^＋细胞比例,ELISA法检测血浆中IL-7水平。结果AITP组和对照组外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞／CD;细胞分别为0．11±0．04、0．15±0．02,IL-7分别为（2．32±0．53）、（0．44±0．80）pg／ml,P均〈0．05;AITP组外周血IL-7水平与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞／CD;细胞呈负相关（r=0．71,P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Tr细胞数量减少、IL-7水平升高可能在AITP发病中具有重要作用,机制为降低有效免疫抑制作用,导致自身反应性T细胞激活增多、凋亡减少,促进血小板破坏。     

单核样髓源性抑制细胞在炎症性肠病中的表达及其临床意义

背景：近年来炎症性肠病（IBD）发病率呈上升趋势,其病理生理学机制复杂且仍未明确。目的：研究单核样髓源性抑制细胞（MDSCs）在IBD患者外周血单核细胞中的比例,分析单核样MDSCs与IBD活动性的关系,从而初步探讨单核样MDSCs在IBD中的作用机制。方法：纳入IBD患者60例,分为克罗恩病（CD）组（n=33）和溃疡性结肠炎（UC）组（n=27）,选取30名同期健康体检者作为正常对照组,采用流式细胞仪检测CD组、UC组、正常对照组患者外周血单核样MDSCs／单核细胞比例,分析单核样MDSCs与IBD患者WBC、PLT、ESR、CRP的相关性。结果：CD组和UC组外周血单核样MDSCs／单核细胞比例较正常对照组相比显著升高[（43．7±23．0）％、（49．1±27．2）％对（10．7±7．4）％]（P〈0．01）,CD组与UC组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。活动期CD和UC组外周血单核样MDSCs／单核细胞比例均较缓解期组显著升高[（60．3±16．8）％、（66．3±17．6）％对（28．1±16．2）％、（19．9±9．0）％]（P〈0．01）。IBD患者外周血单核样MDSCs／单核细胞比例与WBC计数、PLT计数呈正相关（r=0．44,P=0．02;r=0．43,P=0．02）,与ESR、CRP不相关（r=0．33,P=0．08;r=0．30,P=0．12）。结论：IBD患者外周血单核样MDSCs比例明显升高,与IBD活动性密切相关。单核样MDSCs在IBD发病中具有重要作用。     

冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子和血管内皮生长因子表达的影响

目的观察冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨其肾脏保护的作用机制。方法35只8周龄清洁级雄性sD大鼠,体重260～280g,根据体重按随机数字表法分为正常血清组（n=18）、低剂量虫草提取液喂养组（5g·kg^-1·d^-1,n=8）和高剂量虫草提取液喂养组（10g·kg^-1·d^-1,n=9）,采用生理盐水及不同剂量虫草提取液灌胃8d后,分离静脉血提取对照血清及不同浓度的冬虫夏草含中药血清。体外培养HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,之后分别加入正常血糖正常血清[正常血糖组（NC组）：5．6mmol／L葡萄糖＋10％胎牛血清（FBS）＋1％正常大鼠血清]、高血糖正常血清[高血糖组（HG组）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％正常大鼠血清]、低剂量虫草含药血清[低药组（LD）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％低剂量虫草含药血清]和高剂量虫草含药血清[高药组（HD）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％高剂量虫草含药血清]进行培养,采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）测定各组细胞PEDF及VEGFmRNA的表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组细胞上清液中PEDF及VEGF的水平。组间资料比较采用单因素方差分析,样本间资料比较采用t检验。结果与NC组相比,HG组PEDFmRNA表达明显下降（24h：0．375±0．011比0．507±0．008,t=16．828,P〈0．0l;72h：0．376±0．014比0．515±0．010,t=14．034,P〈0．01）,VEGFmRNA表达明显上升（24h：1．005±0．011比0．864±0．012,t=14．963,P〈0．01;72h：1．168±0．012比0．873±0．011,t=31．417,P〈0．01）;LD组和HD组PEDFmRNA表达较HG组显著上调（24h：0．505±0．018、0．639±0．012比0．375±0．011,F=354．719,P〈0．01;72h：0．612±0．023、0．700±0．019比0．376±0．014,F=97．82,P〈0．01）,VEGFmRNA表达明显下降（24h：0．838±0．014、0．767±0．017比1．005±0．011．F=79．55,P〈0．01：72h：0．923±0．016、0．784±0．012比1．168±0．012,F=244．28,P〈0．01）,且HD组疗效更明显。经对照血清及CS血清培养24、72h后,与NC组相比,HG组PDEF水平明显降低[24h：（267±8）比（303±10）ng／L,t=6．493,P〈0．01;72h：（265±27）比（338±42）ng／L,t=3．259,P〈0．01],VEGF明显升高[24h：（128±3）比（113±8）ng／L,t=3．737,P〈0．01;72h：（144±7）比（125±7）ng／L,t=4．215,P〈0．01;与HG组相比,LD组和HD组PEDF明显升高[24h：（297±12）、（296±26）比（267±8）ng／E,F=5．427,P〈0．01;72h：（323±20）、（332±33）比（265±27）ng／L,F=5．690,P〈0．01],VEGF明显降低[24h：（106±6）、（109±11）比（128±3）ng／L,F=5．738,P〈0．01;72h：（124±9）、（125±7）比（144±7）ng／L,F=7．878,P〈0．01]。结论冬虫夏草可能通过降低肾小球系膜细胞VEGF的表达,升高PEDF的表达,对肾脏起到保护作用。     

云南省HIV／AIDS病人早期抗病毒治疗的有效性和安全性分析

目的评价云南省艾滋病病毒（HIV）感染者／艾滋病（AIDS）病人（HIV／AIDs病人）早期抗反转录病毒治疗（ART）的有效性和安全性。方法对云南省2011年8月至2012年8月期间开始ART的病人,按照基线CD4淋巴细胞（CD4细胞）计数水平分A、B两组,A组为基线CD4细胞计数〉350／±的病人（早期治疗组）,B组为基线CD4细胞计数≤350／μL．的病人（延迟治疗组）。比较两组病人治疗满1年后的队列保持情况、治疗效果、治疗期间病人的不良反应和机会性感染发生等情况。结果两组9810例病人治疗满1年后,在队列保持方面,A组病人坚持治疗的比例（在治率）为88．0％（1712／1946）,高于B组的84．9％（6674／7864）;死亡率A组（1．2％）低于B组（5．7％）;在治疗效果方面,两组的HIV病毒载量抑制比例差异无统计学意义（P〉0．05）,两组病人中．HIV病毒载量〈C400拷贝／mL病人所占比例,分别为90．4％和91．2％;治疗6个月和12个月时,与基线CD4细胞计数相比,A组的增幅（4．32％）（治疗前后CD4细胞差值的比较）低于B组（10．27％）,P〈0．01,但A组病人仍然获得比B组较高的CD4细胞平均值;在机会性感染和不良反应方面,A组的发生比例（4．3％和20．9％）均低于B组（10．3％和24．3％）,P〈0．01。结论云南省HIV／AIDS病人早期治疗12个月能够获得良好的有效性和安全性,初步实现了减少HIV相关的发病率和死亡率、非艾滋病相关疾病的发病率和死亡率和改善生活质量的抗病毒治疗总体目标。     

3TC＋TDF＋LPV／r方案治疗免疫重建不良AIDS病人的临床观察

目的观察核苷类反转录酶抑制剂（NRTI）＋蛋白酶抑制剂（PI）方案,对免疫重建不良的艾滋病（AIDs）病人免疫功能的影响。方法接受一线抗病毒治疗1年以上、病毒载量低于检测下限（〈50拷贝／mL）且免疫学失败的病人,改用NRTI＋PI方案,即用拉米夫定（3TC）、替诺福韦酯（TDF）＋洛匹那韦／利托那韦（LPV／r）治疗12个月,检测治疗期间病人CD＋T淋巴细胞（CD4细胞）数的变化。结果收集的16例病毒载量〈50拷贝／mL且免疫学失败的病人,在接受治疗3、6和12个月后,病人CD。细胞数分别上升至（195±5．63）个／μL（213±4．68）个／μL和（270±4．36）个／μL,显著高于基线（换药时）CD4细胞水平（131±3．65个／μL）（P〈0．01）。结论3TC＋TDF＋LPV／r方案可以促进病毒载量低而免疫功能低下的病人的免疫重建。     

小鼠外吐小体免疫原性与1型糖尿病的相关性

目的研究外吐小体免疫原性及其与1型糖尿病病程的相关性。方法采用超滤、高速离心法分离6～15周龄NOD小鼠MIN6β细胞系以及原代胰岛胶质细胞来源的外吐小体,分为对照组、外吐小体组,以Westernblotting分析蛋白表达,以流式细胞术检测外吐小体刺激抗原递呈细胞后表型变化和细胞因子释放水平,掺入。３[H]以检测T淋巴细胞增殖水平,酶联免疫斑点法检测脾细胞受外吐小体刺激干扰素（IFN）－γ阳性T细胞克隆数和NOD小鼠病程的相关性。组间比较采用t检验。结果（1）外吐小体具有典型球状囊泡结构并携带1型糖尿病自身抗原谷氨酸脱羧酶65（GAD65）蛋白;（2）外吐小体组（11．5％）较对照组（2．6％）组织相容性抗原Ⅱ和CD。分子双阳性抗原递呈细胞增加;（3）外吐小体组CD11b＋、CD11c＋和B220＋亚群细胞的白细胞介素6（IL-6）均高于对照组,分别为：（115．0±2．4）比（25．3±2．9）pg／ml,（64．7±3．0）比（22．9±1．4）pg／ml,（10．7±1．2）比（6．3±O．6）pg／ml（均P〈0．05）;（4）外吐小体组CD11b＋、CD11c＋和B220＋亚群细胞的肿瘤坏死因子α（TNF—α）均高于对照组,分别为：（125．0±8．6）比（29．7±1．6）pg／ml,（108．0±6．7）比（16．7±2．1）pg／ml,（24．2±1．4）比（13．5±1．7）pg／ml（均P〈0．01）;（5）外吐小体组CD4阳性T细胞亚群高于阴性对照组[外吐小体10μg/ml组：（21510±1704）cpm,1μg／ml组：（4450±304）cpm,阴性对照组：（575±64）cpm,均P〈0．01],且IFN－γ阳性T细胞克隆数在雌性NOD小鼠随鼠龄呈递增趋势。结论外吐小体具有活化自身反应性T细胞功能并与1型糖尿病病程密切相关。     

160例成人HIV感染者/AIDS患者机会性感染与CD4+之间关系分析

目的：分析中国成人艾滋病病毒（HIV）感染者／艾滋病（AIDS）患者机会性感染发生的频率与CD4^ 细胞数之间的关系。方法：对1990－2001年在北京佑安医院就诊的160例成人HIV感染者／AIDS患者CD4^ 、CD8^ 进行跟踪分析。结果：（1）CD4^ ＞500个／μl66人次（12．7％），CD4^ 为200个／μl-500个／μl212人次（41．1％），CD4^ ＜200个／μl234人次（45．3％）。在CD4^ ＜个200／μl中，CD4^ ＜100个／μl128人次（24．8％），CD4^ ＜50个／μl89人次（17．2％）。（2）CD4^ ＞200个／μl时，共发生机会性感染33人次（15．6％）。CD4^ ＜200个／μl时，共发生机会性感染170人次（72．6％），CD4^ 为100个／μl0－200个／μl之间发生机会性感染42人次（39．6％），CD4^ ＜100个／μl发生机会性感染128人次（98．4％），其中CD4^ ＜50个／μl发生机会性感染87人次（97．8％）。结论：中国成人HIV感染者／AIDS患者在CD4^ ＞200个/μl时机会性感染出现频率较少，CD4^ ＜200个／μl时机会性感染的频率明显增加，CD4^ ＜100个／μl和＜50个／μl时，感染率约为100％。     

高效抗逆转录病毒治疗12个月后艾滋病患者的免疫重建观察

目的探讨高效抗逆转录病毒治疗（HAART）对AIDS患者的疗效及毒副作用。方法45例未经治疗的AIDS病人按基线CD4^＋T细胞计数分为两组,予12个月HAART,分别在基线及治疗1、3、6、9、12个月末随访血浆病毒载量（VL）、T细胞亚群和临床症状。结果抗病毒治疗12个月后45例病人血浆VL平均下降2．8lg拷贝／ml;CD4^＋细胞平均增长187个／μl,其中记忆表型增长119个／μl,纯真表型增长68个／μl,CD4^＋CD28^＋细胞比例显著升高;CD8^＋T激活亚群比例显著降低。基线CD4^＋T细胞计数〉100个／μl的14例病人治疗12个月后有10例血浆VL〈50拷贝／ml,而〈100个／μl的31例病人治疗后仅有11例血浆VL〈50拷贝／ml（P〈0．05）。出现血浆波动的病例数在两组也有统计学差异（分别为2例和14例,P〈0．05）。CD4^＋T细胞计数呈双相增长过程,其增量与血浆VL减少量呈显著正相关。常见的药物副作用有消化道反应、外周神经炎、肝功能损害等。结论HAART方案对AIDS病人有较好的疗效,能够实现免疫重建,但也存在较多毒副作用。     

Sorcin表达受抑乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7／A02对化疗药物敏感性的观察

目的观察可溶性耐药相关钙结合蛋白基因（Sorcin）表达受抑乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7／A02对化疗药物敏感性的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7／A02细胞分为两组,观察组转染针对Sorcin基因的siRNA,对照组不转染。MTT法检测细胞对阿霉素（ADR）、依托泊苷（VP-16）、高三尖杉酯碱（HHT）、长春新碱（VCR）的敏感性,用流式细胞仪检测细胞对碱性蕊香红-123（Rho-123）的外排功能及VP16处理后的细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中的Bcl-2、Bax蛋白。结果观察组ADR、VP-16、HHT、VCR的IC50分别为（19．92±1．29）、（31．47±2．36）、（4．19±0．27）、（2．96±0．23）μg／ml,对照组分别为（111．57±5．60）、（144．77±20．43）、（24．30±0．43）、（5．89±0．28）μg／ml,两组比较,P均〈0．01。观察组细胞凋亡率为9．15％±0．25％,对照组为4．10％±0．12％,两组比较,P〈0．01。观察组细胞内Rho-123的荧光强度为6．34±0．86,对照组为5．42±0．73,两组比较,P〉0．05。观察组细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达量为0．59±0．032、1．80±0．03,对照组分别为0．69±0．025、1．94±0．04,两组比较,P均〈0．05。结论抑制Sorcin表达可显著增强MCF-7／A02细胞对化疗药物的敏感性;这种作用可能与其调节Bcl-2／Bax通路促进MCF-7／A02细朐凋亡有关。     

50岁及以上HIV／AIDS病人的抗病毒治疗效果

目的了解≥50岁艾滋病病毒（HIV）感染者／艾滋病（AIDS）病人（HIV／AIDS病人）的抗病毒治疗反应。方法2008年1月至2010年10月,在北京地坛医院艾滋病门诊开始抗病毒治疗时年龄≥50岁的HIV／AIDs病人作为观察组（老年组）;采用简单随机抽样法在同一时期内开始抗病毒治疗的805例年龄为18～40岁HIV／AIDS病人中,抽取168例作为对照组（青年组）。对两组病人的疾病状况、抗病毒治疗效果及不良反应进行回顾性比较分析。结果83例老年组和168例青年组的CD4＋淋巴细胞（CD4细胞）基线水平差异无统计学意义;老年组的肌酐清除率低于青年组（P〈0．01）,高甘油三酯血症、高胆固醇血症、高血糖发生率老年组高于青年组（P=0．044,P=0．004,P〈0．01）。抗病毒治疗6个月后：与基线CD4细胞水平相比,两组CDt细胞均明显增加（P〈0．01,P〈0．01）,增幅老年组为（112．65±107．04）个／μL,青年组为（128．39±113．85）个／μL（P〉0．05）;病毒完全抑制率老年组为82．92％,青年组为83．55％（P〉0．05）。无论是否接受基于D4T的初始治疗方案,老年组发生高血脂和高血糖的风险均高于青年组;两组接受基于AZT的初始治疗方案的病人的白细胞计数与血红蛋白变化幅度,以及两组接受基于NVP的初始治疗方案的病人的天冬氨酸转氨酶（AST）与丙氨酸转氨酶（ALT）变化状况,均无统计学意义。结论老年组与青年组相比,在接受抗病毒治疗后6个月免疫学反应和病毒学应答相同,但老年组病人易出现如高血脂和高血糖以及肌酐清除率下降等情况,因此,在≥50岁的HIV／AIDs病人的抗病毒治疗过程中应加以重视。