12-脂氧合酶抑制剂黄芩素对2型糖尿病大鼠肾脏细胞外基质的影响及机制

目的：探讨12-脂氧合酶（12-lipoxygenase,12-LO）特异性抑制剂黄芩素（baicalein,BAI）对2型糖尿病大鼠肾脏细胞外基质（ECM）的影响及机制。方法：将链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导的2型糖尿病大鼠随机分为：对照组、模型组、黄芩素低剂量治疗组（80mg·kg^-1·d^-1）和高剂量治疗组（160mg·kg^-1·d^-1）。治疗12周后检测各组大鼠尿白蛋白排泄率（UAER）、血糖（BG）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、内生肌酐清除率（Ccr）等变化;应用免疫组化技术检测各组肾组织中胶原Ⅳ（ColⅣ）、纤维连接蛋白（FN）、层黏连蛋白（LN）的表达;应用RT—PCR方法检测12-LOmRNA的表达。结果：治疗组较模型组明显改善尿白蛋白、BUN水平和肾脏肥大指数等。与对照组比较,模型组大鼠肾脏ColⅣ、FN、LN的表达明显增加;治疗组可明显降低糖尿病大鼠肾脏ColⅣ、FN、LN的表达。12-LOmRNA的相对含量模型组明显高于对照组（P＜0．01）;低、高剂量治疗组较模型组显著降低（P＜0．01）。两治疗组之间各指标无统计学差异。结论：BAI对2型糖尿病大鼠肾脏具有明显的保护作用,其机制可能是通过抑制12-LOmRNA的表达,从而下调肾脏ColⅣ、FN、LN的表迭,减少ECM沉积,延缓糖尿病肾病的发生、发展。     

肾康灵对肾大部切除大鼠肾脏的保护作用

目的：观察肾康灵在5／6肾大部切除大鼠模型中对残肾的保护作用并探讨其可能的机制。方法：将50只大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、苯那普利治疗组（10nag·kg^-1·d^-1）、肾康灵高剂量组（15g·kg^-1·d^-1）和肾康灵低剂量组（5g·kg^-1·d^-1）。8周后观察大鼠24h尿蛋白、BUN、Scr、Alb及肾脏病理改变，并用免疫组化法观察转化生长因子pI（TGF—β1）、Col—Ⅳ、纤连蛋白（FN）、层黏连蛋白（LN）的表达。结果：肾康灵高低剂量治疗组和苯那普利治疗组尿蛋白排出量、肌酐、尿素氮水平明显低于模型组，血浆白蛋白水平高于模型组（P〈0．05）。病理上，接受肾大部切除术的大鼠均可见基质增生、肾小球硬化，但与模型组相比，用药组肾小球硬化程度明显减轻，其中肾康灵高剂量组肾小球硬化程度最轻；免疫组化结果显示用药组TGF-β1均明显低于模型组（P〈0．01），且肾康灵高、低刺量组与苯那普利组之间比较无统计学意义（P〉0．05）。结论：肾康灵对5／6肾大部切除大鼠肾脏有明显保护作用，其机制可能与其能减少肾组织中TGF-β1的表达、减少细胞外基质、降低蛋白尿等有关。     

肾疏宁对MsPGN大鼠肾小球系膜基质的影响

目的 :观察肾疏宁对MsPGN大鼠肾小球系膜基质中ColⅣ、FN的影响。方法 :综合运用口服牛血清白蛋白 ,尾静脉注射葡萄球菌肠毒素 ,定期注射弗氏佐剂 ,复制了大鼠MsPGN模型 ,利用免疫组化观察肾疏宁对MsPGN大鼠肾小球系膜基质中ColⅣ、FN的影响。结果 :模型组系膜基质中ColⅣ、FN表达明显增多 ,肾疏宁组和肾炎康复片组的表达则明显减少 ,其中肾疏宁组尤为显著。结论 :肾疏宁可能通过减少肾小球系膜区的FN及ColⅣ的表达而达到治疗MsPGN的目的     

氟伐他汀对5/6肾切除大鼠肾脏皮质细胞外基质积聚的影响

目的观察降脂药氟伐他汀对5/6肾切除大鼠肾皮质细胞外基质(ECM)积聚的影响和探讨其降脂作用外的肾脏保护机制。方法将5/6肾切除大鼠随机分为模型组和氟伐他汀治疗组(治疗组),另设假手术组作为对照。实验期间测定尿蛋白排泄率;氟伐他汀处理(7mg·kg-1·d-1)13周后免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原(ColⅣ)及纤连蛋白(FN)蛋白表达;酶谱法检测肾皮质基质金属蛋白酶(MMP)-2活性;免疫印迹检测金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-2蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠尿蛋白排泄、肾小球Ⅳ型胶原和FN表达均明显增加(均为P<0.01)。模型组大鼠肾皮质MMP-2活性较假手术组明显降低(P<0.01),而TIMP-2蛋白表达明显上调(P<0.01)。氟伐他汀治疗后这些改变均明显好转。结论氟伐他汀可能通过增加5/6肾切除大鼠肾脏MMP-2活性和降低TIMP-2表达,从而能增加细胞外基质降解和减轻肾小球细胞外基质积聚。     

大豆黄素对5／6肾切除大鼠肾脏保护作用的研究

目的 探讨大豆黄素对5／6肾切除大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法将26只雌性SD大鼠分为3组：假手术组（S组）8只,5／6肾切除模型组（M组）8只,大豆黄素治疗组（D组）10只。对M组和D组大鼠建立5／6肾切除模型,D组给予大豆黄素15mg·kg^-1·d^-1灌胃,M组给予等量生理盐水灌胃,共8周。检测各组大鼠治疗前、后24h尿蛋白定量、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、血清总蛋白（TP）和清蛋白（Alb）,观察肾组织病理学表现,检测肾组织纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原和转化生长因子β1（TGFβ1）表达。结果与M组相比,D组24h尿蛋白量、SCr、BUN降低（P〈0．05）;肾小球硬化指数降低（P〈0．05）;肾组织FN和Ⅳ型胶原蛋白表达降低（P〈0．01）;TGF-β1mRNA及其蛋白表达降低（P〈0．05）。结论大豆黄素对5／6肾切除大鼠肾脏有保护作用,可能与其抑制肾组织TGF-β1的表达有关。     

罗格列酮对肾大部切除大鼠残肾细胞外基质的影响及其机制

目的：观察罗格列酮对肾大部切除大鼠残肾的细胞外基质（ECM）的影响并探讨其可能的机制。方法：将大鼠随机分为4组，每组8只：假手术组（SHAM组）、肾大部切除组（NX组）、肾大部切除加小剂量罗格列酮治疗组（XL组，罗格列酮5mg.kg^-1·d^-1）和肾大部切除加大剂量罗格列酮治疗组（DL组，罗格列酮15mg·kg^-1·d^-1）。8周后观察大鼠尿蛋白、血BUN、Scr和肾脏病理改变，用免疫组化检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在肾组织中的表达。用天狼星红染色半定量法检测肾脏胶原纤维含量。用RT～PCR的方法测定肾组织中纤连蛋白（FN）的表达。结果：（1）罗格列酮能降低大鼠24h尿蛋白定量、血BUN、Scr，与NX组比较有统计学差异（P〈0.01，P〈0．05）。（2）NX组可见肾小球硬化，ECM增生，肾组织大量胶原纤维沉积。用药后病变减轻，其中大剂量罗格列酮组肾小球MMP-2明显增多；肾小管、间质MMP-9明显减少；肾小球囊壁、肾小球基底膜及肾小管基底膜、血管周围胶原纤维沉积减少。（3）与SHAM组相比，NX组残肾组织FN mRNA的表达均明显升高（P〈0.05），XL组FN mRNA的表达较NX组有所降低，以大剂量XL组为明显（P〈0．01）。结论：罗格列酮可剂量依赖性地降低尿蛋白，改善肾功能肾脏病理损害；减少肾脏胶原纤维沉积和FN的表达；这可能与罗格列酮能抑制肾组织MMP-9表达和上调MMP-2表达有关。     

温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾损害的干预作用

目的：观察温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病肾损害的干预作用。方法：将48只雄性SD大鼠随机分为5组：（1）正常对照组（n=8）：予生理盐水灌胃;（2）模型组（n=10）：按关木通水煎液10ml·kg^-1·d^-1（相当于关木通40g·kg^-1·d^-1,马兜铃酸A2．6mg·kg^-1·d^-1）给大鼠灌胃;（3）中药组（n=10）：在模型组基础上,再予温阳活血方30g·kg^-1·d^-1灌胃;（4）西药组（n=10）：在模型组基础上,再予科素亚33．3mg·kg^-1·d^-1灌胃;（5）中西药结合组（n=10）：在模型组基础上,再予温阳活血方＋科素亚灌胃。20周末,收集大鼠尿液测定24h尿蛋白、NAG、β2-MG,腹主动脉取血用于测定Scr、BUN、RBC、Hb。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠24h尿蛋白、NAG、β2-MG、Scr、BUN均明显升高（P〈0．01,P〈0．05）,而血Hb、RBC均明显下降（P〈0．01）;与模型组比较,治疗组大鼠24h尿蛋白、NAG、β2-MG、Scr、BUN均明显下降（P〈0．01,P〈0．05）,而血RBC、Hb均明显升高（P〈0．01,P〈0．05）。结论：温阳活血方对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾损害有一定的保护作用,能降低尿蛋白和尿NAG、β2-MG的排泄,改善肾功能和贫血。     

正清风痛宁对乙肝肾疗效的观察

目的探讨正清风痛宁对乙型肝炎病毒相关肾炎（HBV-GN，简称乙肝肾）蛋白尿的疗效。方法将20例乙肝肾患者分为治疗组10例、对照组10例，对照组口服阿德福韦酯片10mg／d、prednison 0．5mg·kg^-1·d；治疗组在对照组基础上加服sinomenine240mg／d，两组均观察3个月。比较治疗前后24h尿蛋白定量和血白蛋白水平。结果治疗后两组尿蛋白都有下降，但治疗组尿蛋白下降更加显著（P〈0．01）；血清白蛋白显著上升（P〈0．05）。结论正清风痛宁可有效地降低HBV-GN尿蛋白和升高血白蛋白。     

肾疏宁对肾小管间质损害大鼠FN、ColⅢ、PAl-1mRNA的作用

目的：观察肾疏宁对肾小管间质损害大鼠FN、colm、PAl—lmRNA表达的影响。方法：在系膜增生性肾炎（MsPGN）模型基础上。延长造模时间至12～16周，使其自然发展成肾小管间质损害模型，观察肾疏宁对肾小管间质FN、colm、PAl—lmRNA表达的影响，并设苯那普利为阳性对照组。结果：第12～16周末，造模各组肾小管间质FN、ColⅢ、PAI-1mRNA表达量均明显升高（P〈0．05或P〈0．01），肾疏宁组、苯那普利组均显著低于模型组（P〈0．05或P〈0．01），第12周末，肾疏宁组与苯那普利组比较无统计学差异（P〉0．05），而第16周末，肾疏宁组明显低于苯那普利组（P〈0．01）。结论：肾疏宁能抑制细胞外基质的合成，促进其降解，从而保护肾小管间质损害。     

氟伐他汀对糖尿病大鼠肾组织核因子-κB活性的影响

目的：观察氟伐他汀对实验性2型糖尿病大鼠肾组织中核因子-κB（NF-κB）活化的影响。方法：应用单侧肾切除后饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ）方法,制备2型糖尿病肾病（DN）大鼠模型。将实验动物随机分为假手术组、2型糖尿病组及氟伐他汀治疗组（2mg·kg^-1·d^-1）。给药治疗6周后,检测各组动物血糖、血脂、血肌酐（Scr）、24h尿蛋白定量（TP／24h）等指标。采用电泳迁移率变动分析（EMSA）方法检测NF-κB活性变化,采用RT—PCR方法检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）mRNAg达水平。结果：小剂量氟伐他汀未影响血糖、血脂。治疗6周后,可明显降低2型DN大鼠肾组织中NF-κB活性,减少MCP-1 mRNA表达,并降低蛋白尿。结论：氟伐他汀对实验性2型糖尿病大鼠具有非依赖降脂的肾脏保护作用,其机制至少部分与降低肾组织中NF-κB活性,下调MCP-1基因表达有关。     

苦参碱对大鼠慢性环孢素肾毒性模型TGF-β1和BMP-7表达的影响

目的：探讨苦参碱对大鼠慢性CsA肾毒性是否具有保护作用及其可能机制.方法：SD大鼠56只,随机分为对照组（橄榄油0.2 ml/d）,CsA模型组（CsA 20 mg·kg^-1·d^-1）,安博维组（CsA 20 mg·kg^-1·d^-1＋安博维10 mg·kg^-1·d^-1）和苦参碱组（CsA 20 mg·kg^-1·d^-1＋苦参碱10 mg·kg^-1·d^-1）,实验共4周,于第2周和第4周末2次采集肾脏标本,行常规病理检查,免疫组化检测TGF-β1和BMP-7表达.结果：与对照组比较,CsA组小管间质损伤评分,TGF-β1表达明显增加,而BMP-7明显下降,P＜0.05.苦参碱能下调TGF-β1表达,促进BMP-7表达,减轻肾脏小管间质损伤,P＜0.05.结论：苦参碱对实验性大鼠慢性CsA肾毒性具有一定的保护作用.     

温阳活血方对5/6肾切除大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的:探讨温阳活血方对慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)大鼠肾脏中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法:选用120只SD雄性大鼠,通过5/6肾切除建立慢性肾衰竭大鼠模型。随机分为5组:(1)假手术组:予生理盐水10ml·kg-1·d-1灌胃;(2)模型组:予生理盐水10ml·kg-1·d-1灌胃;(3)中药组:予温阳活血方30g·kg-1·d-1灌胃;(4)西药组:科素亚33.3ml·kg-1·d-1灌胃;(5)中西药联合组:予温阳活血方+科素亚灌胃。分别在给药后4、8、12周,每组随机选取8只大鼠处死,检测肾功能指标和24h尿蛋白,用免疫组化法检测肾脏TGF-β1表达水平。Western印迹检测给药12周后TGF-β1蛋白在肾组织中的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血BUN、Scr、24h尿蛋白定量明显均明显升高(P<0.01,P<0.05);三个治疗组血BUN、Scr、24h尿蛋白定量明显低于模型组(P<0.01)。免疫组化显示,治疗组均能显著减少TGF-β1在肾脏中的表达(P<0.01)。结论:温阳活血方可能是通过降低慢性肾衰竭大鼠的Scr、BUN和尿蛋白水平,抑制肾脏TGF-β1表达,从而延缓肾衰竭进展。     

阿魏酸哌嗪对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的：观察阿魏酸哌嗪对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法：将雄性SD大鼠32只随机分为4组：正常组、模型组、阿魏酸哌嗪治疗组、厄贝沙坦治疗组,采用STZ诱导的糖尿病大鼠模型,阿魏酸哌嗪组予阿魏酸哌嗪溶液50mg·kg-1·d^-1灌胃,厄贝沙坦组予厄贝沙坦溶液50mg·kg^-1·d^-1灌胃,正常组与模型组予以同等体积蒸馏水灌胃,连续8周。监测血糖,8周后处死各组大鼠,行24h尿蛋白定量和肾功能检查,称左肾重,行HE、PAS染色观察肾组织的病理变化,行免疫组化、实时荧光定量PCR观察转化生长因子-β（TGF-β）和纤连蛋白（FN）的表达情况。结果：阿魏酸哌嗪能显著减少糖尿病大鼠肾脏TGF-β和FN的表达,改善肾脏病理变化。结论：阿魏酸哌嗪对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其作用机制可能与其降低TGF-β和FN的表达有关。     

黄芪对人肾小管上皮细胞细胞外基质分泌的影响及其机制探讨

目的：探讨黄芪对人肾小管上皮细胞细胞外基质分泌的影响及甚可能机制。方法：将体外培养的人肾小管上皮（HK-2）细胞株转板至细胞融合并同步后,分为空白对照组、转化生长因子-β（TGF-β1）刺激组（5ng／ml）、TGF-β1加黄芪100μg／ml组、TGF-β1加黄芪1mg／ml组。作用24h后半定量逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）检测纤维连接蛋白（FN）及纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）mRNA;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测上清液中FN的含量;westernblot检测PAI-1的表达。结果：（1）HK-2细胞表达少量FN和PAI-1;（2）HK-2细胞在5ng／ml TGF-β1．刺激下分泌FN、PAI—1mRNA及FN、PAI-1蛋白表达明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;（3）HK-2细胞在TGF-β1和不同浓度的黄芪作用后,可使FN、PAI-1mRNA及蛋白表达减少,与TGF-β1组比较差异有统计学意义（P〈0．01）,尤以黄芪1mg／mi组为甚。结论：TGF—β1可促进HK-2细胞分泌FN和PAI—1,黄芪可部分拮抗TGF-β1的上述效应。这可能是黄芪预防或改善肾小管间质病变的作用机制之一。     

芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织Urotensin Ⅱ及胶原表达的影响

目的：观察芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织中UrotensinⅡ及胶原表达的影响。方法：雄性SD大鼠60只,随机选取10只大鼠为正常对照组（N组）,其余50只采用一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ,45mg／kg）诱导DN模型,造模成功后随机分为糖尿病肾病组（DN）、芡实小剂量组（EL,1.5g·kg^-1·d^-1）、中剂量组（EM,3.0g·kg^-1·d^-1）、大剂量组（EH,6.0g·kg^-1·d^-1）及氯沙坦钾组（LP,30nag·kg^-1·d^-1）,每组10只,均采用灌胃给药,N组和DN组给予等量蒸馏水。各组大鼠连续给药12周后,检测大鼠生化指标;HE、Masson染色观察肾脏病理变化;采用免疫组化、western—blot法测定Uro-tensinⅡ及胶原Ⅰ、Ⅲ在肾组织中表达的变化。结果：（1）与N组相比,12周末DN组大鼠肾小球肥大,系膜基质增生,间质胶原沉积．血清BUN、Scr、24h尿蛋白定量明显增高（P＜0.05）,肾组织UrotensinⅡ及胶原Ⅰ、Ⅲ表达增加（P＜0.05）。（2）与DN组相比,EM、EH组大鼠病理改变减轻,BUN、Scr、24h尿蛋白定量显著下降（P＜0.05）,肾组织UrotensinⅡ及胶原Ⅰ、Ⅲ表达明显降低（P＜0.05）。结论：芡实可通过抑制UrotensinⅡ及胶原Ⅰ、Ⅲ在肾闻质的过度表达,进而改善肾功能,延缓糖尿病肾病大鼠肾间质纤维化的进程,从而发挥肾脏保护作用。