HSP70与肿瘤

1974年，Tissieres等证实高温引起的果蝇染色体蓬松是由于热休克激发染色体内基因转录合成特异性的蛋白，即热应激蛋白（又称热休克蛋白）引起的。热休克蛋白（Heat Shock Protein，HSP）按分子量大小分为以下几个家族：小分子HSP（相对分子质量为22～32ku）、HSP60、HSP70、HSP90、HSP100和泛素（相对分子质量为7～8ku），其中最重要、诱导后表达量最大的是HSP70家族。HSP70是热休克蛋白家族中最重要的成员之一，它具有“分子伴侣”功能，参与蛋白质合成、加工、折叠、转运等过程。它在肿瘤细胞特别是在恶性肿瘤细胞中常有高水平表达，可以通过基因调解以及免疫应答来发挥抗肿瘤细胞凋亡作用。而热化疗是治疗肿瘤的一种重要方法，其优点明显，     

大肠癌中HSP70和HSP90α表达与其生物学行为的关系

目的探讨热休克蛋白(HSP)70和HSP90α的表达与大肠癌生物学行为及预后的关系。方法应用免疫组织化学(SP法)检测HSP 70和HSP 90α在58例大肠癌和24例大肠腺瘤及20例正常大肠黏膜组织中的表达。结果大肠癌组织中HSP 70和HSP 90α阳性表达率分别为81.0%和77.6%,均明显高于大肠腺瘤及正常大肠黏膜组织(P<0.05)。两种蛋白表达与大肠癌的分化程度,淋巴结转移,Dukes分期,浸润肌层的深度有关;该4因素的分组间均有统计学差异(均P<0.05),且两者表达呈正相关(r=0.331,P<0.05)。HSP 70和HSP 90α表达阳性者术后3年生存率明显低于阴性者(P<0.05)。结论 HSP 70和HSP 90α的异常表达参与了大肠癌的发生、发展;对两者的检测可作为临床判断大肠癌的恶性程度、转移及预后的参考指标。     

原发性肝癌中HSP90α的表达及意义

目的　研究热休克蛋白 90α(HSP90α)在人原发性肝细胞癌 (HCC)组织中的表达并探讨其与肿瘤生物学行为、预后的关系。方法　采用免疫组织化学方法检测了 10例正常肝组织、40例HCC肿瘤组织及癌旁组织中HSP90α的表达。结果　HSP90α在正常肝脏、癌旁组织、原发性肝癌中的阳性表达率分别为 10 %、5 2 5 %、72 5 %。原发性肝癌中的阳性表达率明显高于正常肝脏和癌旁组织 (P <0 0 5 )。HCC的HSP90α与肿瘤分化程度、肿瘤大小显著相关 (P <0 0 5 ) ;与病灶数目无关(P >0 .0 5 ) ;与预后亦有关 ,HSP90α阴性病人预后显著优于HSP90α阳性病人 ,术后平均无瘤生存期前者 38 6个月、后者 2 5 5个月 (P <0 0 5 )。结论　HSP90α在原发性肝癌中表达增高 ,HSP90α可作为判断HCC分化程度和预后的指标。     

HSP表达在炎症反应综合征中的作用与意义

热休克蛋白(HSPs)是生物体面临不利生存环境中快速表达的一类保护性蛋白家族，具有修复和维护细胞功能的作用。在炎症反应综合征(SIRs)病理过程中，机体细胞均有HSP表达，并通过分子伴侣、抗凋亡及抗炎机制发挥保护作用。本文对不同组织细胞HSP表达对SIRS发展及转归的意义作一综述。     

参附注射液预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后HSP70和HSP90表达的影响

目的探讨参附注射液(SF)单次预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法30只雄性SD大鼠随机均分为单纯缺血-再灌注组(MCAO组)、SF预处理组(SF组,缺血前30 min经腹腔注射SF 10 ml/kg)和假手术组(Sham组)。MCAO组和SF组采用颈内动脉尼龙线线栓法致右侧大脑中动脉栓塞120 min。观察再灌注后24 h时脑组织病理学改变,检测热休克蛋白(HSP)70和HSP90表达。结果再灌注24 h后,SF组脑组织病理学损害轻于MCAO组。Sham组未见HSP70及HSP90表达。MCAO组可见到较多的HSP70免疫阳性细胞,明显高于Sham组(P<0.01);SF组HSP70免疫阳性细胞分布较MCAO组广泛,数量明显增多,胞浆及胞核都可见HSP70免疫阳性细胞[(1.341±0.464)vs.(0.856±0.574)](P<0.05),而SF组HSP90的表达与MCAO组相仿[(0.006±0.013)vs.(0.005±0.007)]。结论SF预处理可通过增加HSP70表达而对大鼠脑缺血-再灌注损伤起保护作用。     

热休克蛋白70对肝缺血再灌注损伤的作用及机制探讨

目的 探索热休克蛋白70（Heat shock protein 70,HSP700）对大鼠肝缺血再灌注损伤的作用及机制。方法 实验大鼠分为持续阻断组，间断阻断组和假处理组。用免疫金银法观察再灌注1h后肝组织HSP70蛋白的表达，并检测其肝细胞及线粒体功能，肝组织内钙和脂质过氧化物（Lipid peroxide,LPO)含量，以及超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD)活性。结果 HSP70蛋白在持续性缺血再灌注后无表达，肝细胞功能，线粒体功能和SOD活性均显下降，而肝组织内钙和LPO值均显升高。间断性血流阻断组则有HSP70蛋白的合成表达，该组与假处理组的上述各项指标的差异均无显意义。结论 HSP70蛋白在肝缺血再灌注后的诱导产生有利于保护肝细胞有线粒体的功能，该效应与细胞内钙稳定和SOD活性增高有关。     

热休克蛋白70在大鼠急性打击损伤脊髓中的表达

目的观察急性打击损伤大鼠脊髓组织中热休克蛋白70（heat shock protein70，HSP 70）的表达。方法65只大鼠随机分为3组：正常对照组5只、手术对照组和脊髓损伤组各30只，采用改良Allen法建立脊髓损伤动物模型。手术对照组和脊髓损伤组分别于处置后的2h、6h、12h、24h、48h、72h这6个时间点各采集5只大鼠的脊髓。应用免疫组织化学染色方法观察不同时点各组脊髓中热休克蛋白的表达变化。结果在大鼠正常胸段脊髓中没有基础性HSP70的表达。打击造成急性脊髓损伤后2h，脊髓组织内出现HSP70的表达，损伤后24～48h脊髓组织中HSP70染色达到高峰，并维持至损伤后72h。结论在遭遇损伤性刺激后，脊髓组织在随后的2～72h内HSP70的表达明显增加；HSP70可能在阻止脊髓的继发性损伤方面发挥一定的作用。     

热休克蛋白90在门静脉高压大鼠肠系膜血管中的表达

目的研究门静脉高压症时肠系膜血管热休克蛋白90(HSP90)的表达。并对其表达定位。方法SD大鼠分为实验组和假手术组，用门静脉部分结扎法制作门静脉高压模型。4周后取肠系膜血管组织，采用免疫组织化学技术、免疫印迹(Westernblot)、逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法在蛋白及mRNA水平测定门静脉高压大鼠肠系膜血管HsPg0的表达。结果门静脉高压大鼠肠系膜血管HSP90的表达增强，且保持在蛋白及mRNA水平上的一致。HSP90不仅在血管内膜而且还在血管平滑肌层有明显的表达。结论HSP90可能参与了门静脉高压内脏血管病变的形成，从而为进一步揭示门静脉高压内脏血管病变的发病机制提供了新的思路。     

肝细胞肝癌中HSP90α的表达及意义

目的 研究热休克蛋白90α(HSP90α)在人肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达，并探讨其与肿瘤生物学行为及预后的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测l0例正常肝组织、40例HCC组织及其癌旁组织中HSP90α的表达。结果 HSP90α在正常肝脏、癌旁组织及肝细胞性肝癌中的表达阳性率分别为l0．0％、52．5％及72．5％．在肝细胞性肝癌中的表达阳性率明显高于正常肝组织和癌旁组织(P＜0．05)。HCC的HSP90α阳性表达与肿瘤的临床分期、分化程度、累及浆膜状况及淋巴结转移状况显著相关(P＜0．05)；而与肿瘤数目无关(P＞0．05)。HSP90α阴性表达者的预后显著优于HSP90α阳性表达者，术后平均无瘤生存期前者为38．6个月，后者为25．5个月(P＜0．05)。结论 HSP90α在肝细胞性肝癌中的表达明显增强，HSP90α表达与HCC的临床分期、肿瘤分化程度、累及浆膜状况及淋巴结转移状况有关．可作为判断颈后的指标之一。     

O-ClcNAc修饰在谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌组织HSP70表达中的作用

目的 探讨O位-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)修饰在谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌组织热休克蛋白70(HSP70)表达中的作用.方法 健康雄性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8),正常对照组(C组)仅静脉输注乳酸钠林格氏液;LPS组、G+LPS组和A+G+LPS组均静脉注射LPS10 mg/kg,G+LPS组给予LPS前1 h静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg,A+G+LPS组给予LPS前1h依次静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg和O-位-N-乙酰葡萄糖胺糖基转移酶抑制剂四氧嘧啶50 mg/kg.注射LPS后6 h处死大鼠,取心肌组织,测定O-GlcNAc和HSP70的表达水平.结果 与C比较,其他各组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平均上调(P＜0.05);与LPS组比较,G+LPS组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平上调(P＜0.05);与G+LPS组比较,A+G+LPS组心肌O-GlcNAc和HSP70的表达水平下调(P＜0.05).结论 O-GlcNAc修饰参与了谷氨酰胺诱导内毒素休克大鼠心肌HSP70表达上调.     

烫伤大鼠肠粘膜下调蛋白质组的分离及鉴定

目的 对烫伤后大鼠肠粘膜下调蛋白质组进行分离鉴定，探讨其在严重烫伤后肠粘膜损害发生中的作用。方法 采用大鼠Ⅲ度烫伤模型，利用高分辨双向电泳(2-DE)对肠粘膜组织进行蛋白质分离，用Image Master 2D Elite图像分析软件对差异蛋白质中的下调蛋白质组进行鉴定。结果 烧伤后6、12h两组明确下凋的蛋白质点数为34，进行鉴定及分析的蛋白质22个；与线粒体有关的下调蛋白质有线粒体乌头酸酶、丙酰辅酶A羧化酶、肝脏F-ATP酶重链A、肌钙蛋白-l、短链羟酰基辅酶A脱氢酶、P-电子转移[传递]黄素蛋白α亚基等6种；参与代谢的下调蛋白质有磷酸丙糖异构酶l和细胞溶质环氧化物水解酶；与细胞骨架蛋白及基质蛋白有关的下调蛋白质有纤维单元素、类动力蛋白-5、肌钙蛋白-2和碱性肌浆球蛋白轻链3共4种；参与调控的下调蛋白质有糖皮质激素诱导蛋白、核因子l-B2、BRCAl、雌二醇安息香酸盐转录因子、G-蛋白β-2亚基、N-甲基-D-天门冬氨酸受体l等6种；与免疫调控有关的下调蛋白质有T细胞受体-V-δ6和Ig重链V区蛋白l。结论 在大鼠烫伤后肠粘膜表达下调蛋白质中，以与线粒体有关及参与激素和细胞因子调控的蛋白质数量居多，说明大鼠烫伤后早期损伤发生机制与线粒体功能改变以及激素、细胞因子表达调控紊乱关系密切。     

烫伤大鼠肠粘膜前列腺素水平与前列腺素转移因子mRNA表达的变化

目的　探讨烫伤大鼠肠粘膜前列腺素E2 (PGE2 )、前列腺素I2 (PGI2 )、血栓素A2 (TXA2 )水平和前列腺素转移因子 (PGT)mRNA表达变化及其意义。　方法　以 30 %TBSAⅢ度烫伤大鼠为模型 ,以放射免疫法测定肠粘膜中PGE2 、PGI2 、TXA2 的含量 ,用原位杂交检测PGTmRNA表达。　结果　大鼠肠粘膜PGE2 、PGI2 水平在伤后 12h升高 ,随后明显降低 (P <0.0 5～ 0.0 1);TXA2 水平在伤后 2 4、4 8h明显高于正常水平 (P <0.0 5 );PGTmRNA表达在伤后有增加的趋势。　 结论　烫伤后肠粘膜PGE2 水平降低及TXA2 水平升高 ,可能是肠粘膜损伤的机制之一 ;PGT对伤后PGs水平具有调节作用     

热休克预处理对严重烧伤大鼠胃黏膜的保护作用及机制

目的观察热休克预处理（HS）对严重烧伤大鼠胃黏膜热休克蛋白（HSP）60、HSP70表达及线粒体超氧化物歧化酶（SOD）、细胞色素氧化酶（CCO）活性的影响，探讨HS对严重烧伤大鼠胃黏膜的保护作用及机制。方法将Wistar大鼠随机分为烧伤组（40只）：烧伤后即制作急性胃黏膜损伤模型；另取8只大鼠不致伤作为空白对照。HS组（40只）：于烧伤前20h行HS，另取8只大鼠仅行HS不烧伤，作为实验对照。放线菌素D组（40只）：在HS前30min静脉注射放线菌素D0．1mg／kg，随后的处理同HS组；另取8只大鼠只注射放线菌素D不烧伤，作为实验对照。于伤后3、6、12、24、48h处死各组大鼠（每组每时相点8只）。取胃黏膜组织检测胃黏膜损伤指数（UI）、HSP70 mRNA、HSP60、HSP70的表达及SOD、CCO的活性。结果大鼠烧伤后uI呈时间依赖性增加，烧伤组伤后24h胃黏膜损伤程度最严重，UI为12．8±1．9。除伤后3h外，HS组大鼠各时相点uI均低于烧伤组（P＜0．05或0．01）。放线菌素D组大鼠胃黏膜损伤程度明显重于烧伤组及HS组（P＜0．05）。烧伤组、HS组除伤后24、48h外其余各时相点HSP70 mRNA均增加，而放线菌素D组伤后24、48h有所增加。与烧伤组比较，HS组大鼠胃黏膜HSP60及HSP70表达显著增加，除伤后48h外其余各时相点比较，差异均有统计学意义（P＜0．05或0．01）。放线菌素D组大鼠HSP60和HSP70表达明显受抑（P＜0．05）。大鼠烧伤后胃黏膜CCO、SOD活性不断降低，经HS后CCO及SOD下降不明显，在伤后6、12、24h均高于同时相点烧伤组（P＜0．05或0．01）。结论HS对大鼠严重烫伤后急性胃黏膜损害具有保护作用，其机制可能与HSP60、HSPT0诱导表达增强，线粒体SOD及CCO活性增加等有关。     

重组人生长激素对烧伤大鼠肠粘膜结构及细胞凋亡的影响

目的　探讨重组人生长激素 (rhGH)的早期应用对严重烧伤大鼠小肠粘膜的保护作用。　方法　 30只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、烧伤组和rhGH组 ,每组 10只。后两组造成2 5 %TBSAⅢ度烧伤创面 ,立即腹腔注射地塞米松 80mg/kg ,从伤后 2h开始分别给予等渗盐水和rhGH(1.33U·kg-1·d-1)。于伤后 30、96h ,观察回肠末端粘膜组织形态、肠上皮细胞超微结构和肠粘膜细胞增殖活性与凋亡率变化。　结果　烧伤组肠粘膜形态结构及上皮细胞损伤严重 ,rhGH组明显减轻 ,基本接近对照组 ;伤后 30h烧伤组和rhGH组肠粘膜细胞增殖指数 (proliferativeindex ,PI)均明显高于对照组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,但两组之间差异无显著性意义 ;伤后 96h ,rhGH组PI较烧伤组和对照组均明显升高 (P <0 .0 1)。烧伤组肠粘膜细胞凋亡率较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,rhGH组凋亡率较烧伤组 (P <0 .0 1)和对照组 (P <0 .0 5 )明显下降。　结论　rhGH能促进严重烧伤后肠粘膜细胞增殖 ,但作用缓慢 ;能抑制肠粘膜细胞凋亡 ,而且作用迅速、效果明显 ,并可能通过抑制作用减轻肠粘膜损伤 ,维护形态结构的基本正常。     

四君子汤加味防治烫伤后大鼠肠道损伤和细菌移位实验研究

目的　研究中药四君子汤加味对减轻烫伤后肠道损伤的影响。　方法　Wistar大鼠随机分为 3组 :烫伤治疗组 (简称治疗组 )管饲党参、茯苓、白术、甘草、大黄中药煎剂 2ml,2次 d ,烫伤对照组 (简称对照组 )和正常组管饲同量蒸馏水。根据指标设定于伤后不同时相点 ,分别处死大鼠检测肠粘膜和血浆中肿瘤坏死因子 (TNF)、一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)、ATP酶活性及肠粘液中S IgA含量 ,观察肠粘膜病理变化 ,行脏器组织细菌培养、血培养。　结果　中药四君子汤加味可明显降低烫伤大鼠血浆和肠粘膜TNF、NO和MDA含量 ,维持肠粘膜细胞分泌S IgA的功能 ,恢复T细胞数量 ,减轻肠粘膜屏障损害 ,减少脏器细菌检出率。　结论　中药四君子汤加味能够减轻肠粘膜损伤 ,防止肠道细菌移位     

小剂量多巴胺对烫伤大鼠休克期肠粘膜的保护作用

目的　观察小剂量多巴胺对严重烫伤大鼠休克期肠粘膜机械屏障的保护作用。方法　大鼠预置心导管 ,30 %Ⅲ度烫伤后静脉复苏。观察大鼠常规治疗 (对照组 )和小剂量多巴胺 (3μg·kg-1·min-1)持续给药后 ,血清中二胺氧化酶 (DAO)、丙二醛 (MDA)及乳酸水平的变化 ,对肠道的病理学改变进行评分。　结果　多巴胺治疗组大鼠休克期一般情况明显好于对照组 ,小剂量多巴胺能显著降低严重烫伤大鼠血清中的乳酸、MDA、DAO水平 ,以伤后 3～ 12h明显 ;多巴胺治疗组大鼠回肠病理学评分明显优于对照组。　结论　小剂量多巴胺对严重烫伤大鼠休克期肠粘膜机械屏障有明显的保护作用。     

高氧液对大鼠烫伤后肠黏膜下调蛋白质的影响

目的观察高氧液对烫伤大鼠肠黏膜下调蛋白质的影响,为伤后早期应用高氧液治疗提供理论依据。方法制作大鼠35%TBSAⅢ度烫伤模型,设烫伤后普通补液组(烫伤组)、伤后输入高氧液为干扰因素组(高氧液组)和正常对照组,每组6只。利用高分辨双向电泳(2DE)对肠黏膜组织进行蛋白质分离,采用Imagemaster2DElite图像分析软件进行分析,应用生物质谱、蛋白质库及文献分析等方法研究高氧液对大鼠烫伤后肠黏膜下调蛋白质的影响。结果烫伤组大鼠明确下调的34个蛋白质点中,高氧液组出现明确上调的蛋白质点数为9。它们是线粒体乌头酸酶、丙酰辅酶A羧化酶、短链羟酰基辅酶A脱氢酶、雌二醇安息香酸盐转录因子、磷酸丙糖异构酶1、T淋巴细胞受体Vδ6和类动力蛋白5。结论高氧液可以上调大鼠严重烧伤后早期肠黏膜中的下调蛋白质,进而部分恢复肠黏膜的屏障功能。     

大鼠重度烫伤后早期心肌组织内缺氧诱导因子-1α表达的变化

目的　观察烫伤大鼠伤后早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA和蛋白的表达变化 ,探讨其意义。　方法　制作 4 0 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,设正常对照组及伤后不同时相组。取心脏解剖左、右心室 ,采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法检测HIF 1αmRNA的表达 ,采用蛋白免疫印迹法测定其蛋白水平的变化。　结果　正常大鼠左、右心室肌HIF 1αmRNA、蛋白表达结果有所不同。大鼠烫伤后 ,心肌组织内HIF 1αmRNA水平、蛋白表达量明显升高 (P <0.0 1)。结论　正常状态下 ,大鼠左心室肌对缺血缺氧耐受能力较右心室肌强。严重烫伤可以诱导大鼠心肌细胞HIF 1α表达增加 ,介导心肌保护效应     

HSP 70表达与雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌的关系

目的 探讨热休克蛋白70（HSP 70）与雄激素非依赖性前列腺癌（PC a)发生的关系。方法 采用免疫组化方法测定2例正常前列腺组织、20例雄激素依赖性PCa和14例雄激素非依赖性PCa石蜡包埋标本HSP 70的表达。结果 HSP 70在正常前列腺基底细胞中呈阳性表达，分泌细胞中为阴性表达。20例雄激素依赖性PCa中16例（80．0％）无HSP 70表达，3例有微弱表达，1例为异质性表达。14例雄激素非依赖性PCa中13例（92．8％）呈弥漫、高水平的HSP 70表达，1例为阴性，与雄激素依赖PCa HSP70表达率的比较，差别有极显著性意义（P＜0．01）。结论 HSP 70过表达与雄激素依赖性PCa向雄激素非依赖性PCa的进展有关。