组合靶基因自动检测仪应用软件的设计

目的：研制与开发组合靶基因自动检测仪应用软件。方法：应用VB6．0编程语言及Access 97数据库实现压电石英谐振频率的实时检测与分析。结果：实现了组合靶基因自动检测仪压电石英谐振频率的实时检测。数据分析，结果保存与数据转换等。结论：组合靶基因自动检测仪应用软件是一类可实时检测与分析压电石英谐振频率的新型实用性软件，可广泛应用于压电石英谐振频率的检测。     

石英谐振传感器液相稳定平台构建及检测HCMV的实验研究

目的 建立石英谐振压电基因传感器检测系统液相稳定平台并应用该检测系统实时检测链置换扩增(Strand displacement amplification,SDA)反应。方法 ①观察以金属夹具式和粘胶式两种检测池连接方式构成的传感器在液相中的频率稳定性;②以巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)为检测对象,建立SDA反应系统;③传感器检测系统对HCMVSDA反应进行实时检测。结果 ①新型金属夹具式可调节及可换式传感器检测池可实现传感器在液相中的频率稳定性;②SDA反应可引起压电基因传感器的频率持续下降;③在一定范围内核酸杂交所引起的频率下降幅度随加入的靶序列浓度提高而增大。结论 成功构建压电基因传感器液相检测稳定平台并实现对SDA反应的实时检测;该系统可直接检测基因组DNA并可广泛应用于病原微生物的临床检测。     

压电石英晶体传感器检测血浆凝血酶原时间及其初步应用

目的：建立一种压电石英晶体传感器检测血浆凝血酶原时间（PT）的方法。方法：采用AT切向，基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件；观察血浆凝集过程中晶体振荡频率的变化，确定血浆凝集反应的起点和终点。结果：（1）血浆标本加入反应体系后, 晶体振荡频率呈阶梯状快速下降，接着频率瞬时上升，然后再缓慢降低达到平稳，频率阶梯下降的起点为血浆凝集反应的起点，频率从快速上升变为下降的转折点为血浆凝集的终点，计算两点之间的时间即为血浆凝血酶原时间。（2）该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好（γ＝0．97），批内CV＝0．78％，批间CV＝2．38％。结论：压电石英晶体传感器检测血浆凝血酶原时间，血浆凝集反应起点和终点确定方便，可靠，且操作简单，快速，成本低廉，检测结果准确，是一种敏感性高，重复性好的血浆凝血酶原时间检测新方法，可用于常规检测。     

压电石英晶体甲胎蛋白免疫传感器的实验研究

目的　构建一种新型压电甲胎蛋白 (AFP)免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定组成检测池 ,抗人AFP单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电AFP免疫传感器。结果　构建的压电AFP免疫传感器对AFP的响应特性良好 ,其线性检测范围为 2 0～ 10 0 0ng ml ,癌胚抗原(CEA)、前列腺特异抗原 (PSA)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对AFP的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次 ;68例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 ,两种方法的相关系数为 0 92 ,P <0 0 1。结论　研制的压电AFP免疫传感器是一种灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能重复使用和实时在线检测AFP的新方法 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。     

压电石英晶体传感器液相检测的影响因素

目的　探讨压电石英晶体传感器液相检测的影响因素。方法　采用AT切向镀金膜的石英晶体制成 2× 5型石英晶体微阵列 ,观察晶体振荡频率在不同粘度和密度的甘油PBS( 0 .15mol LpH 7.0 )溶液、不同浓度的NaCl溶液、不同pH的PB溶液( 0 .0 6 7mol L)及不同体积的PBS溶液 ( 0 .15mol LpH 7.0 )中的变化规律以及机械冲击和重新加样对晶体振荡频率的影响。结果　石英晶体振荡频率随溶液粘度和密度、离子浓度、pH的增大而降低。溶液体积、机械冲击和重新加样对晶体频率基本无影响。结论　石英晶体传感器所处溶液体系的性状如粘度、密度、离子浓度、pH等因素对其振荡频率有较大的影响 ,石英晶体传感器用于生物反应检测时应减少和避免上述因素的干扰     

压电石英晶体振荡频率检测平台的建立及应用

目的　构建一种 2× 5型压电石英微阵列振荡频率检测平台。方法　利用基频 1 0MHz的 2× 5型石英晶体微阵列作为传感换能器件 ,自行设计自激式振荡频率检测仪、频率分析软件PESA2 .0 ,与计算机连接组成压电石英晶体传感器检测平台 ,并应用于气、液相检测。结果　石英晶体微阵列在气、液相起振能力强 ,并获得稳定振荡 ,气相稳定度可达± 1Hz ,液相≤ 2Hz。消除了温度、电离辐射、机械震动等因素的干扰 ;实现了频率信号检测的自动化、微机化和自能化。结论　该检测平台具有检测频率稳定、自动化和智能化程度较高、能实时检测等优点 ,是一种新型压电晶体振荡频率检测共用平台 ,可广泛用于压电传感器振荡频率的检测     

适配子型压电石英晶体传感器探针固定方法的研究

目的 比较金膜表面两种探针固定法的优劣,选择适配子型压电传感器探针固定的最佳方法.方法 用巯基固定法及生物素-亲和素固定法将针对人IgE的适配子探针固定在压电传感器的金膜表面,对不同浓度IgE引起的频率变化进行检测.结果 与巯基法相比,生物素-亲和素法固定探针压电传感器频率下降更为明显,检出限低,线性范围宽,0.1～2.5 mg/L浓度范围内IgE浓度与频率变化呈明显的线性相关,相关系数0.994 5.结论 在压电基因传感器探针固定中效果良好的巯基法在适配子探针固定中并不适用,生物素-亲和素法在适配子压电传感器探针固定中有明显优势.     

压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原方法的研究及应用

目的建立一种压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原(Fib)的方法.方法采用AT切向、基频10MHz的银膜石英晶体作为压电元件;观察血浆凝集过程中晶体振荡频率的变化,确定血浆凝集反应的起点和终点.结果 (1)检测池加入凝血酶原待频率稳定后,血浆标本加入反应体系后,晶体振荡快速下降,由于反应中形成的纤维蛋白原凝块的质量、体积与晶体接触的面积以及血清产生的量不同,造成频率瞬时的上升、下降,或频率稳定,直至反应结束频率平稳,加样后频率下降的起点为血浆凝集反应的起点,频率上升、下降,稳定的起始点为反应的终点,计算两点的时间即为反应时间,查标准曲线得纤维蛋白原的含量.(2)该方法的检测结果与STAGO磁珠检测法的相关性好(r＝0.957).结论压电石英晶体传感器检测血浆纤维蛋白原是一种实时在线检测的方法,在线观测凝集反应的终点,反应的起点和终点的判别方便、可靠、准确.且操作简单,快速,成本低廉,是一种敏感性高、重复性好的方法,并可用于临床检测.     

变滞量二阶中立型差分方程的振动生

研究了一类具变滞量的变系数二阶中立型差分方程的振动性,给出了该类方程振动及差分算子 Δ振动的充分条件。     

呼吸机管道更换时间与呼吸机相关性肺炎发生相关性的Meta分析

目的系统评价呼吸机管道更换时间与呼吸机相关性肺炎(VAP)发生的相关性。方法应用计算机检索近10年的Pubmed电子数据库、中国生物医学文献数据库和中国期刊全文数据库,对符合标准的文献按Cochrane协作网推荐的方法进行Meta分析。结果共纳入10项研究,17419例病例。按呼吸机管道更换时间分为1 d组191例、2 d组9448例、3 d组174例和7 d组7606例。Meta分析结果显示,7 d组的VAP发生率与1 d组、2 d组和3 d组比较,差异均无统计学意义(RR分别为2.40、1.40和0.81;95%CI分别为0.61～9.47、0.97～2.03和0.51～1.30;P值分别为0.21、0.07和0.39)。结论呼吸机管道每7 d更换一次较为合理,有利于节省人力、物力,而并不增加VAP的发生率。     

三叉神经节细胞电压门控通道研究中的钙电流振荡活动

目的 :探讨三叉神经节细胞电压门控性钙通道电流特性。方法 :在急性分离的三叉神经节细胞膜上 ,阻断电压门控性延迟整流钾通道和电压门控性钠通道 ,在 - 70mV的钳制电位下 ,给予 1 0mV步幅递增、80ms步宽的去极化脉冲刺激 ,进行全细胞膜片钳记录。结果 :在仅阻断电压门控性延迟整流钾通道时 ,- 1 0mV的去极化脉冲刺激激活了三叉神经节细胞膜上继快钠电流之后的慢内向电流 ,呈重复开闭的振荡特性 ;同时阻断电压门控性延迟整流钾通道和电压门控性钠通道 ,在 - 2 0mV的去极化脉冲刺下 ,也可记录到呈振荡特性的慢内向电流。振荡电流可被细胞外喷射的 1mmol·L-1 尼福地平所阻断。结论 :三叉神经节细胞膜上高电压激活的重复开闭慢内向电流可能为电压门控性钙电流 ,其振荡特性可能与感觉信息中枢传入的初级加工有关。     

核酸外切酶-压电石英DNA传感器检测金黄色葡萄球菌的实验研究

目的 构建一种用于检测金黄色葡萄球菌的核酸外切酶-压电石英DNA传感器新方法,同时对其重要影响因素进行探讨.方法 采用λ核酸外切酶处理金黄色葡萄球菌PCR产物,EB染色、电泳后于紫外灯下进行观察,对杂交温度、杂交时间和杂交响应性能等因素进行实验研究,进一步将构建的核酸外切酶-压电石英DNA传感器法用于金黄色葡萄球菌检测,并对其灵敏度和特异性进行研究.结果 λ核酸外切酶-压电石英DNA传感器法最适杂交温度为35℃,最适杂交时间为60 min,响应性能显著大于普通压电DNA传感器(P＜0.01),可以检测到1.0×104CFU/ml的金黄色葡萄球菌,特异性好.结论 利用核酸外切酶-压电石英DNA传感器检测金黄色葡萄球菌,具有杂交效率高、技术难度低、频率响应性能高等优点,有较好的应用前景.