溶组织内阿米巴的致病株与非致病株对中性粒细胞的粘附作用

溶组织内阿米巴与宿主细胞的粘附是其致病的关键。作者对溶组织内阿米巴8个致病株和9个非致病株虫体与人的多形核粒细胞(PMNs)的粘附活性进行测定,并研究碳水化合物、细胞骨架和血清因子对其粘附的影响。用阿米巴滋养体与PMNs粘附形成玫瑰花结试验检测,表明致病株和非致病株     

克隆化的致病性溶组织内阿米巴诱导的抗补体作用

新近从感染者粪便中分离的溶组织内阿米巴,培养在Robinson氏培养基、TYSGM-9或TYI-S-33培养基中,并根据感染者病史、同工酶分析、基因DNA分析鉴定出4株为非致病性虫株,7株为致病性虫株。另取在TYI-S-33培养基长期培养的致病株HM-1:IMSS通过仓鼠肝脏,称为HM-1-H株,或培养在无免疫性的人血清(NHS)替代灭活牛血清的改良TYI-S-33培养基中,称为     

用半乳糖特异粘附植物血凝素的单克隆抗体鉴别溶组织内阿米巴致病和非致病株

据报道,通过薄层淀粉凝胶电泳及已糖激酶和磷酸葡萄糖变位酶的同工酶,可区分溶组织内阿米巴的致病和非致病的阿米巴酶株群。本实验共用18个致病株和30多个非致病株。进行植物血凝素的纯化,抗植物血凝素单克隆抗体的制备、纯化及用~(125)I标记,用放射免疫测定(RIA)法、Western blot技术以及阿米巴滋养体粘附红细胞试验等,进一步研究鉴定溶组织内阿米巴的致病与非致病株。     

多聚酶链反应在鉴别溶组织内阿米巴致病与非致病株及阿米 …

用福尔马要固定粪便标本，从中抽提ＤＮＡ。采用两对可区别溶组织内阿米巴致病与非致病的引物进行了ＰＣＲ扩增。３２例经镜检证实的溶组纳内阿米巴带囊者均呈ＰＣＲ阳性反应，其中６例（１８．８％）仅对致病性引物、２５例（７８．１％）仅对非致病引物显示阳性反应，１例（３．１％）则对致病及非致病引物均呈阳性反应。致病性ＰＣＲ阳性者与受试者的临床表现（腹泻或痢疾粪便）密切相关（ＯＲ＝３１．５）。所有对照者（粪便中无     

溶组织内阿米巴DNA介导的基因转移新进展

近几年,DNA介导的基因转移,已被广泛用作细胞或生物体基因控制和功能分析的强有力工具。有关溶组织内阿米巴的基因结构和转录模式的报道对构建合适的转染载体是重要的。 溶组织内阿米巴的基因结构并不复杂,迄今所报道的仅2个基因有内含子,编码区在基因组内无定向地紧密相连。体外分析表明,其转录为单顺反子方式。基因间相对短的     

溶组织内阿米巴和多种非致病性阿米巴的补体敏感性

虽然一些学者对溶组织内阿米巴侵袭组织的功能做了细致的研究,但是其特性很难区别于非致病性的内阿米巴Entamoeba dis-par(E.d.)。近来发现,这两个虫种的补体敏感性有显著不同,为了研究补体敏感性是否     

溶组织内阿米巴经仓鼠肝脏传代后对其毒力的影响

用不同来源的两株溶组织内阿米巴(E.h)研究经金黄仓鼠肝脏传代对阿米巴毒力的影响。同时用仓鼠肝脏和豚鼠盲肠内接种以及白细胞毒性试验测定虫株的毒力,并比较这三种方法的实用意义。 材料与方法 一、虫株与实验动物 B株是在1980年从急性阿米巴痢疾患者粪便中分离而得,系北京热带医学研究所提供。B_0株系指未经肝脏传代者。B_1株系指将B_0株经仓鼠肝脏传代一次者,B_2株系传代二次者。C株是在1984年从带包囊者粪便分离而得,北京     

组织中溶组织内阿米巴的间接免疫萤光染色法

将组织按常规用10%甲醛盐水固定,作成石腊切片,在室温内置于pH7.1的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中,每分钟更换PBS一次,更换3次后,将切片放在盛有PBS的染色盘内10分钟,时加摇动,而后倾去PBS,吸去切片周围的水份。在切片上滴加稀释的特异免疫血清,置室温内30分钟,用PBS洗涤2次(15分钟)。再在切片上滴加未稀释的与     

FTA-巢式PCR方法鉴定溶组织内阿米巴原虫的初步研究

目的建立一种简便,快速的FTA-巢式PCR方法用于鉴定粪便中溶组织内阿米巴原虫(Entamoeba histolytica, E.h).方法 收集门诊腹泻病人新鲜粪便,用光学显微镜进行初步检查.用FTA卡抽提镜检结果为阳性的粪便DNA,根据溶组织内阿米巴原虫的SSU -rRNA序列设计引物,进行巢式PCR扩增,对PCR产物进行琼脂糖凝胶分析,并对阳性产物进行测序和序列比对分析.结果 根据光学显微镜检测结果,挑选了44例镜检结果为阿米巴原虫阳性的腹泻病人粪便.经FTA-巢式PCR扩增,其中20例样本可扩增出427 bp左右的目的条带,目的条带的测序和序列分析结果表明为溶组织内阿米巴原虫.镜检方法与巢式PCR方法的阳性符合率为45.45%(20/44),将E.h与形态学相似的其他内阿米巴原虫进行了鉴定和区分.结论 本研究建立的FTA-巢式PCR方法具有简单,快速,准确等优点,为临床检验和流行病学调查中E.h的鉴别诊断提供了新的技术方法.     

泰国溶组织内阿米巴在体外对杀阿米巴药物的敏感性

本试验用的泰国溶组织内阿米巴当地分离株取自30名宿主。23份是从阿米巴痢疾患者血粘液大便中获得的滋养体,2份是从住院病人的乙状结肠镜检和直肠拭子中分离而得,另5份是从无任何症状的排包囊者分离获得。阿米巴最初培养在改良的Boeck和Drbohlav's以及正常植物群和产气荚膜梭状     

溶组织内阿米巴原虫分离株的随机扩增多态性DNA分析

作者采用随机扩增多态性DNA(RPAD)技术,试图发现不同阿米巴原虫分离株毒力的差异与种内和种间遗传变异性之间的相关性。从分离的11份溶组织内阿米巴、1份侵袭性阿米巴和2份莫斯可夫斯基内阿米巴(E.moshikovskii)无菌标本中,提取总DNA     

溶组织内阿米巴在一家庭范围内的传播

作者报道了一起发生在一意大利家庭中由溶组织内阿米巴带虫者引起的阿米巴病暴发的情况。 这是一普通意大利家庭,有4名成员:父亲(No.1),母亲(No.2),两个孩子(Nos.3,4)及其两名朋友(Nos.5,6),他们均无去热带旅行史。3名成人(Nos.1,2,6)和一名儿童(No.3)首先发病,表现为低热性小肠结肠炎,腹部不适,但无脓血便。两周后另两人也出现类似症状。用抗腹泻药物治疗无效,且患     

用PCR进行致病性与非致病性溶组织内阿米巴的流行病学调查

用多聚酶链反应(PCR)扩增致病性与非致病性的溶组织内阿米巴的DNA序列,在墨西哥农村进行流行病学调查。以受检者粪便用福马林-醋酸乙酯沉淀法取得包囊,供镜检和抽提DNA。同时询问病史。取其DNA抽提液0.5～1μI,加入含Tris,MgCl_2,硫酸铵、二硫赤藓糖醇、Triton X-100,牛血清白蛋白配成的反应液于2对引物和2.5～5U的聚合酶的混合液中,最后加入100μl石蜡油,     

溶组织内阿米巴:对非致病性阿米巴转变为致病性的一种解释

对溶组织内阿米巴非致病性虫株经过无菌培养可转变为致病性虫株这一现象的解释具有高度争议。实验选用NIH收集的溶组织内阿米巴分离株,无菌培养在含10％或15％牛血清的TYI-S-33培养基上的200:NIH株克隆2,其酶株群属于酶株群Ⅱ,而迪斯帕内阿米巴为NIH:0692:2株则属于酶株群Ⅰ,在含10％牛血清的IYI-S-33培养基上培养,     

非致病性阿米巴含有但不分泌如溶组织内阿米巴分泌的酸性磷酸酶

酸性磷酸酶(AP)可能作为一种毒力因子参与阿米巴原虫的致病过程。它至少有两个同型:膜相关性酸性磷酸酶(MAP)和分泌性酸性磷酸酶(SAP)。作者对多种不同阿米巴种株之间SAP和MAP的水平差异,以及AP活性与是否产生阿米巴肝脓肿的相关性进行了研究。     

直接扩增和鉴别粪标本中致病性与非致病性溶组织内阿米巴的DNA

取定量的HK-9株溶组织内阿米巴滋养体放入受检者的0.1g粪便中,再加DTT、KOH等在65℃孵育15min,后用HCl中和,并以酶/氯仿/异戊醇振荡抽提DNA。同时再取受检者粪便0.1g以NaCl洗涤,离心,蛋白酶K消化,抽提其DNA。用以rRNA为模板设计的致病性与非致病性引物进行双向PCR,PCR产物以含0.2μg/ml溴乙锭的1.3％的琼脂糖凝胶电泳显示,并用限制性内切酶DraⅠ和Sau 96Ⅰ进行消化。     

高氧环境中溶组织内阿米巴基因的调控

溶组织内阿米巴主要生产在厌氧环境中 ,在侵入组织过程中必须遭遇到有氧环境 ,故虫体有特殊的调节系统来维持高氧环境中的正常生理功能以及生存能力。Akbar等应用半定量RT PCR技术比较高氧环境中滋养体RNA表达 ,以期获得虫体在侵入组织时高氧环境中基因的调控情况。从HM 1∶IMSS虫株分离滋养体 ,培养于TYI S 33培养基中。取 2 0ml(含 2× 10 6 滋养体 )培养基移至 9cm含组织培养基的平皿中 ,35℃分别培养 1～ 8h ;在暴露的条件下倾倒培养基 ,收集滋养体 ,台盼蓝染色检测虫体的存活力。TRIZOL试剂分离滋养体总RNA ,Northern印迹…     

γ-干扰素对溶组织内阿米巴蛋白质及DNA合成的影响

本文通过测定可溶性介质和γ-干扰素(γ-IFN)的作用,确定细胞免疫对阿米巴感染的防御作用。鼠脾细胞上清液(LRSN)获自6～8周龄的雄性BALB/c小鼠。溶组织阿米巴HMI:IMSS株经72小时纯培养,加ConA刺激的富含淋巴因子的LRSN,或力加重组γ-IFN共同培养,用~3H掺入试验,特     

3种方法检测粪便中溶组织内阿米巴的结果比较

目的比较生理盐水直接涂片法、醛醚沉淀法及ELISA 3种方法检测粪便中溶组织内阿米巴的优缺点。方法采集受检者粪便标本278份.分别采用3种方法进行阿米巴原虫感染检测,检测结果进行统计学处理,分析3种方法的阳性检出率、准确率、敏感性、特异性及费用。结果生理盐水直接涂片法、醛醚沉淀法和ELISA法的阳性率分别为9.71%、10.79%和12.23%,差异无统计学意义(P>0.05);阳性标本经PCR确证,3种方法的阳性符合率分别为48.71%、51.11%和77.36%,差异有统计学意义(P<0.05)。生理盐水直接涂片法费用低(1元/份),耗时少(0.1 h～0.2 h)。结论粪便溶组织内阿米巴检测推荐使用ELISA法,其次是醛醚沉淀法,如果用生理盐水涂片法,至少要重复检测3次。     

阿米巴病人血清中IgG和IgM抗体所识别的溶组织内阿米巴抗原的分子量

作者采用蛋自质印渍技术对3株溶组织内阿米巴进行了抗原分析。先分别收集A_3、HK-9、SFL-3等3株溶组织内阿米巴培养物,3次冻融并经超声处理后1000g离心15分钟获超声上清抗原,用于ELISA或蛋白