中心体异常与肿瘤发生的相关性

中心体这一微小的细胞器已越来越受到人们的重视。本文综述了中心体的结构、功能、复制过程及中心体蛋白 ,论述了中心体的异常与肿瘤发生的关系及与二者相关的基因 ,对研究中心体在肿瘤的发生机制、诊断和治疗中的应用前景作一展望 ,并提出了一些尚需探讨的问题     

喉癌 STK15基因异常与中心体扩增的研究

目的　研究喉癌中 STK15基因的异常及中心体扩增情况。方法　应用逆转录 -聚合酶链反应方法 ,检测 6 2例喉鳞状细胞癌和人喉鳞状细胞癌细胞系 Hep- 2中 STK15基因 m RNA表达水平 ;应用聚合酶链反应 -单链构象多态性检测上述组织及细胞中 STK15基因第 6、7外显子突变 ;以 Hep- 2细胞系为代表应用免疫荧光方法检测中心体扩增情况。结果　在 39例 ( 6 3% )喉癌及 Hep- 2细胞系中检测到了STK15基因的高表达 ;在上述组织和细胞中均未检测到 STK15基因第 6、7外显子的突变 ;Hep- 2细胞系有明显的中心体扩增 :单个细胞中心体数目变化范围为 1～ 7,有中心体扩增的细胞数为 11%～ 2 3%。结论　在 Hep- 2细胞系中发现了 STK15基因高表达与中心体扩增 ,提示 STK15基因高表达引起中心体扩增 ,可能是导致该细胞系染色体不稳定的重要因素 ;在喉癌组织中观察到了STK15基因高表达 ,提示它可能是导致喉癌发生的多因素之一     

狗心中心纤维体的组织学结构及其与心脏传导系统的关系

利用光镜观察了１２只杂种成年狗心中心纤维体的组织学结构及其与房室结、房室束的关系。狗中心纤维体软骨组织。房室结位于中心纤维体的右侧，二者紧密相贴。房室束恒定地穿中心纤锥体。结合狗心电图的观察结果证明，中心纤维体的较骨是一种正常组织，并不影响房室传导。     

p53突变和STKl5过表达与肿瘤中心体不稳定的相关性

中心体异常与肿瘤发生的相关性已越来越受到人们的重视。本文综述了中心体异常与肿瘤发生的关系，论述了与中心体异常和肿瘤发生相关的基因p53和STKl5以及二者相关性，对研究中心体在肿瘤的发生机制、诊断、治疗中的应用前景作以展望，并提出了一些尚需探讨的问题。     

赖型钩端螺旋体及澳洲型钩端螺旋体的ompL1和flaB2抗原基因序列分析

目的：构建棘型钩端螺旋体017及澳洲型钩端螺旋体607株外膜蛋白抗原基因ompL1和内鞭毛抗原基因flaB2的重组质粒，并分别对ompL1及flaB2基因进行序列分析。方法：通过聚合酶链反应扩增ompL1及flaB2，并将其分别克隆到pcDNA3.1/Myc-His(＋）载体T7启动子下游，构建抗原基因表达质粒，进行序列测定分析。结果：序列分析显示赖型钩体017株与澳洲型钩体607株的ompL1相同碱基949个（98．85％），碱基变异11个（1．15％）；flaB2的相同碱基823个（96．94％），碱基变异26个（3．06％），呈很高的保守性。结论：赖型钩体017株与澳洲型钩体607株的ompL1及flaB2分别具有高度同源性。     

健康成人身高相关基因研究进展

身高是一由多基因控制的数量遗传性状，并受环境因素的影响。通过候选基因法已发现一些与其相关的基因多态性位点，如维生素D受体基因、多巴胺D2受体基因等。另外，利用全基因组扫描技术结合连锁分析法也发现人类染色体上的一些区域与身高发育有关。     

问号钩端螺旋体rLTB/rCTB-LipL32/1免疫保护作用及野生株LipL32基因表达和患者抗体检测

目的构建LTB—LipL32／1和CTB—LipL32／1融合基因原核表达系统并鉴定其表达产物的免疫和佐剂活性及保护作用，了解问号钩端螺旋体(简称钩体)野生株LipL32基因携带、表达及钩体病人血清LipL32基因产物抗体产生频率。方法采用常规分子生物学技术构建LTB—LipL32／1和CTB—LipL32／1融合基因及其原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rLTB-LipL32／1及rCTB-LipL32／1表达情况。分别采用Western blot和GM1-ELISA检测rLTB-LipL32／1及rCTB—LipL32／1的免疫反应性和佐剂活性。采用PCR和MAT分别检测97株问号钩体野生株LipL32基因及其表达情况。采用ELISA检测228例钩体病人血清LipL32基因产物的抗体。采用豚鼠保护试验检测重组蛋白的免疫保护作用。结果与报道的相关序列比较，LTB—LipL32／1和CTB-LipL32／1融合基因核苷酸序列相似性分别为99．12％～99．71％和98．54％～99．42％，氨基酸序列相似性分别为97．58％-99．63％和96．77％～99．63％。rLTB-LipL32／1和rCTB—LipL32／1表达产量均约为细菌总蛋白的10％，并主要以包涵体形式存在。rLTB—LipL32／1和rCTB-LipL32／1均分别能与LipL32／1兔抗血清和牛GMI结合。97．9％(95／97)问号钩体野生株含有LipL32基因，95．9％(93／97)问号钩体野生株与rLipL32／1和rLipL32／2兔抗血清的MAT结果阳性。97．4％(222／228)和94．7％(216／228)的病人血清rLipL32／1和rLipL32／2抗体阳性。rLTB-LipL32／1、rCTB-LipL32／1和rLipL32／1豚鼠保护率分别为75．0％、75．0％～87．5％、50．O％～62．5％。结论成功构建了LTB—LipL32／1和CTB—LipL32／1融合基因及其原核表达系统。rLTB-LipL32／1和rCTB-LipL32／1融合蛋白有良好的抗原性和佐剂活性及一定的免疫保护作用，具有成为问号钩体属特异性疫苗的良好前景。LipL32／1是不同问号钩体血清群中广泛存在、序列保守、高频率表达的基因。     

TACC蛋白与肿瘤

 TACC蛋白家族的成员是中心体主轴的组成蛋白,被认为与多种肿瘤的形成相关。TACC蛋白可能通过调节染色体的稳定性,以及细胞内相关基因的转录,从而影响了肿瘤的形成。但是现有的研究尚不能阐明TACC蛋白在肿瘤中的确切作用。本文综述了近年来关于TACC蛋白与肿瘤关系的研究,并且着重介绍了TACC蛋白调控肿瘤形成的分子机制。     

家兔下橄榄背侧副核的超微结构特点——电镜研究

本实验对7只家兔的下橄揽背侧副核进行了电镜观察。除发现已报道过的轴树突触、轴体突触及以树突为中心的突触球外,还见此核内有轴轴突触、轴突与胞体棘形成的突触,以轴突为中心的突触球及核内微纤维束。轴树突触最常见,突触后成分为树突或棘。轴体突触较少见。有一轴突终末与一胞体棘形成突触,同时还与一树突形成突触。轴轴突触前、后成分中均含圆形囊泡,有时形成轴-轴-树突触串。家兔下橄榄背侧副核内见有两种突触球,一种以树突为中心,另一种以轴突为中心。还发现两个轴突终末同时与另一轴突终末形成轴→轴→轴突触。下橄榄背侧副核内的复杂突触形式,说明传入冲动在其中可能经过扩散、会聚、突触前抑制及整合等复杂的过程。     

双微体的研究进展

双微体(double minute chromosomes,DMs)是基因扩增的主要细胞遗传学标志,是染色体外遗传单位的一种主要存在形式.大量研究表明,双微体与基因组不稳定、恶性肿瘤、细胞耐药及衰老密切相关.针对双微体的深入研究对于肿瘤遗传学的发展及其临床应用有着重要的意义.人类基因组计划的完成与功能基因组计划的深入,大大地加快了在序列水平对双微体的了解.对双微体的全面认识,将有助于理解基因扩增机制及基因组可塑性,并为后两者的研究提供全新的切入点.     

喉癌中STK15基因扩增及表达的研究

目的研究喉癌中5TK15基因扩增、mRNA和蛋白表达增高在喉癌发生、发展中的作用。方法应用差异PCR方法检测40例喉鳞状细胞癌及癌旁正常对照组织5TK15基因扩增的情况；应用逆转录-PCR方法检测同批标本STK15mRNA表达情况；用免疫组织化学方法分析STK15蛋白表达。结果肿瘤组织中5TK15基因扩增率为35％（14／40）；STK15 mRNA表达增高占67．5％（27／40）；STK15蛋白表达的阳性率为72．5％（29／40）；将扩增与表达的结果与喉癌患者的临床各项指标进行统计学分析，5TK15基因扩增、STK15mRNA表达增高与肿瘤的分化程度显著相关（P〈0．05）；STK15蛋白表达与肿瘤的分化程度和病理分级显著相关（P〈0．05）。结论喉癌中5TK15基因扩增、mRNA和蛋白表达水平增高，导致中心体复制异常、染色体不稳定。可能在喉癌的发生及恶性进展中起一定作用。     

p53突变和STK15过表达与肿瘤中心体不稳定的相关性

中心体异常与肿瘤发生的相关性已越来越受到人们的重视。本文综述了中心体异常与肿瘤发生的关系 ,论述了与中心体异常和肿瘤发生相关的基因 p5 3和 STK1 5以及二者相关性 ,对研究中心体在肿瘤的发生机制、诊断、治疗中的应用前景作以展望 ,并提出了一些尚需探讨的问题     

PYK2靶向短发夹RNA干扰重组体的构建及鉴定

目的:本研究利用RNA干扰技术，以PYK2为靶基因，设计构建重组体，并对重组体进行鉴定，为下一步探索心肌纤维化机制的新途径奠定基础。方法:设计有小发夹结构的8条DNA序列，经退火成互补4对双链，再克隆到载体PAVU6＋27中构建重组体，转化入JM109菌株，提取质粒进行酶切鉴定、测序分析。结果:酶切鉴定和测序分析均提示PYK2靶向RNA干扰重组体的构建成功。结论:PYK2靶向RNA干扰重组体的成功构建，为下一步利用该重组体沉默心脏成纤维细胞中PYK2基因的表达，探索心肌纤维化机制打下基础。     

解偶联蛋白3基因启动子区-55（C〉T）多态与中国人静息能量消耗及体脂含量与分布的关系

目的 研究解偶联蛋白3基因（UCP3）启动子区-55（C〉T）多态与中国人静息能量消耗、体脂参数的关系。方法 在300名中国人（正常体重91人，超重／月巴胖209人）中，用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（polymemse chain reaction-restriction fragment length polymorphisms，PCR—RFLP）检测伙巧基因启动子区-55（C〉T）变异，并测定其静息能量消耗、体脂含量及分布。结果 UCP3基因启动子区-55（C〉T）多态基因型频率与肥胖及肥胖类型均无相关。正常体重组1T基因型者静息能量消耗水平显著高于CT及CC基因型者（P〈0．05）；超重／肥胖组各基因型者间比较亦有同样趋势。在超重／肥胖组，TT基因型者FM／FFM值与CT及CC基因型者差异有显著意义（P〈0．01）。结论 UCP3基因启动子区-55（C〉T）多态与中国人静息能量消耗相关，该变异可能通过对静息能量消耗的影响调节机体的能量代谢。     

降钙素基因相关肽拮抗内皮素生物效应的研究

本实验在大鼠及小鼠的整体、离体器官及细胞水平上系统观察了降钙素基因相关肽对内皮素的拮抗作用。结果表明，ＣＧＲＰ显著地拮抗ＥＴ的升压、增加血管张力、促进血管平滑肌细胞增殖、损伤心肌以及致小鼠猝死等作用，并明显降低大鼠血浆ＥＴ含量。结果提示ＣＧＲＰ可能是机体内源性ＥＴ拮抗剂，给予外源ＣＧＲＰ可能对与ＥＴ有关的心脑血管疾病有防治意义。     

解偶联蛋白3基因 -55 C→T变异与中国人体脂代谢、含量、分布及2型糖尿病的关系

目的 研究解偶联蛋白3（uncoupling protein 3,UCP3）基因－55C→T变异与中国人体脂含量、体脂代谢、体脂分布及2型糖尿病的关系。方法 用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性检测了165名糖耐量正常者（男／女为69／96）及151例2型糖尿病患者（男／女为62／89）UCP3基因－55C→T变异的基因型，核磁共振8检测局部体脂含量，酶法及硫酸葡聚糖－锰沉淀法测血总胆固醇及血高密度脂蛋白胆固醇，并用公工密度脂蛋白胆固醇。结果 （1）非糖尿病中国人与白种人比较等位基因频率及基因型频率差异均无显著性（P分别为0.1120和0.0646），与Pima印地安人比较差异均有显著性（P分别为0.0105及0.0314）。（2）逐步回归分析发现，UCP3基因－55C→T变异的独立相关变量：糖耐量正常男性组为血高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇，糖耐量正常女性组为股部脂肪面积，2型糖尿病男性组为血甘油三酯，2型糖尿病妇性组为腰臀比。（3）2型糖尿病组与糖耐量正常组相比，等位基因频率的差异有显著性（P为0.0358）。携带T等位基因发生2型糖尿病的相对风险的比数比为1.434（95％可信区间为1.031-1.995）。结论 UCP3基因－55C→T变异与中国人局部体脂含量、体脂代谢及分布相关，但存在性别及疾病状态的差异。该变异与中国人2型糖尿病的发生相关。     

A20基因在血管内皮细胞的表达研究

目的：探讨外源性A20基因在内皮细胞获得稳定表达的可行性。方法：将N－末端标记E－tag的HA20 cDNA重组于pCAGGS真核表达载体，构建了pCAGGSEHA20真核表达重组体，构建了pCAGGSEHA20真核表达重组体。DOTAP脂质体介导的pCAGGSEHA20和pMAMneo基因转染，经G418筛选阳性克隆，再用免疫荧光及分子原位杂交检测A20基因的表达。结果：成功构建了pCAGGSEHA20真核表达重组体，A20基因在经G418筛选后的内皮细胞中得到有效表达。结论：在DOTAP脂质体介导下，A20基因能够导入内皮细胞并在其内获得表达。     

神经细胞粘附分子样蛋白及过氧化物酶体激活物受体δ样蛋白基因的发现

目的 钓取人血管抑制素的cDNA。方法 以RT-PCR的方法从人胎肝中钓取cDNA片段，克隆并部分测序，测得的序列在GenBank及Swissprot中进行分析。结果 发现2个完整的开放阅读框架，其编码的多肽一个与人神经细胞粘附分子高度同源。另一个与大鼠过氧化物酶体激活物受体δ同源，已在GenBank登录，登录号分别为BankIt323569AF241539，B巨响324273AF242527。结论 发现了分别编码神经细胞粘附分子样蛋白及过氧化物酶体激活物受体δ样蛋白的基因。     

节律基因CLOCK单核苷酸多态性与生活方式在学龄前儿童肥胖中的交互作用

目的 探讨节律基因昼夜节律运动输出周期故障（CLOCK）单核苷酸多态性与生活方式对学龄前儿童肥胖的作用。方法 选择2021年6月至2022年6月在佛山复星禅诚医院儿童保健门诊查体的肥胖儿童60例（肥胖组），其中男性34例，女性26例；年龄3～6岁，平均年龄5.24岁；体质量16.54～18.73 kg，平均体质量17.08 kg。另选择100例体质量正常的健康儿童作为对照组，其中男性57例，女性43例；年龄3～6岁，平均年龄5.39岁；体质量13.75～15.21 kg，平均体质量14.96 kg。检测两组儿童节律基因CLOCK单核苷酸T3111C位点多态性基因型及等位基因频率分布，通过调查问卷统计两组儿童的临床资料和生活方式。采用多因素Logistic回归模型分析肥胖的危险因素，估算CLOCK单核苷酸T3111C位点多态性基因型和生活方式与肥胖风险的调整比值比（OR）及95%可信区间（CI），分析节律基因CLOCK单核苷酸T3111C位点多态性与生活方式因素对学龄前儿童肥胖的交互作用。结果 两组儿童TT基因型频率、TC基因型频率、CC基因型频率差异均有统计学意义（肥胖组与对照组比，8...     

Aurora-A在细胞中的功能以及与肿瘤的关系

Aurora蛋白激酶家族，在细胞的有丝分裂期发挥着重要作用。目前分为3种即Aurora-A、Aurom-B、Aurora-C。其中Aurora-A定位于中心体和纺锤体，主要参与中心体的成熟、分离和纺锤体形成。此外Aurora-A可以参与p53通路的调节，细胞凋亡和分裂之间平衡的调节等。Aurom-A高表达可引起中心体异常扩增，异倍体产生。在肿瘤组织中的研究显示它在多种肿瘤乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、胃癌等组织中存在着高表达，并且与某些肿瘤的预后相关。Aurom-A可能通过多种机制参与了肿瘤的发生和发展。