结核分枝杆菌毒力基因研究进展

结核病是目前全球重点控制的传染病之一,结核分枝杆菌(简称结核杆菌)具有强大的致病性和传染力,而要彻底了解和控制结核杆菌,对其毒力基因的认识就显得非常重要。近年来世界各国投入了很大的人力物力研究结核杆菌的毒力基因。对毒力基因的认识将促进结核的疫苗研制、临床诊断与控制,具有十分重要的抗结核战略意义。     

青海省北京家族结核分枝杆菌的磷脂酶C基因多态性研究

目的 研究青海高原地区结核分枝杆菌的磷脂酶C基因的多态性并探讨其与北京家族结核菌株的关系。方法 收集2012-2016年青海地区结核分枝杆菌临床分离株共250株，采用多位点数目可变串联重复序列（multiple-locus variable-number tandem repeat analysis，MLVA）分型技术进行基因分型，通过聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）分析结核分枝杆菌磷脂酶C基因（phospholipase C，plc）的多态性。结果 250株临床分离结核杆菌中，北京家族菌株184株占73.60%，非北京家族菌株66株占26.40%。该地区结核杆菌的plc基因呈多态性，250株结核杆菌中分别有13.20%，15.20%和16.40%的菌株含突变的plcA，plcB和plcC基因，突变率较低，而plcD基因突变率高达97.20%。北京株与非北京株的plcA，plcB和plcC基因突变率差异均有统计学意义（均有P<0.05），而plcD基因突变率未发现差异（χ2=0.322，P=0.571）。结论 结核分枝杆菌plc基因突变可能会减弱菌株毒力，而北京株中该基因突变较少，可能因此导致该家族菌株在本地区的广泛流行。     

鄞州区50株结核杆菌6种耐药基因检测分析

目的：分析鄞州区结核杆菌耐药相关基因的突变特点,评价DNA测序分析在结核分枝杆菌耐药性检测中的价值。方法：利用DNA测序分析方法检测50株结核分枝杆菌的KatG、inhA、rpoB、embB、rpsL及rrs基因片段。结果;50株结核杆菌中,对INH、RFP、EMB、SM耐药的基因突变率分别为88％（包括KatG、inhA基因）、70％（rpoB基因）、100％（embB基因）、55％（包括rpsL、rrs基因）。其中INH耐药以KatG基因突变为主,SM耐药以rpsL基因突变为主,KatG基因突变多见于315位点,rpoB基因突变多见于531位点,embB基因突变多见于306位点,rpsL基因突变多见于43位点。结论：通过对结核杆菌常见耐药基因检测,将在短时间内区分敏感株及耐药株,有效指导临床用药,具有重要的意义。     

37株矽肺结核病人分离的结核杆菌耐药试验

３７株矽肺结核病人分离的结核杆菌耐药试验水利电力部新安江疗养院（浙江省建德市康乐路，３１１６００）章式梦结核杆菌依靠它的生物适应机制，对现有常用抗结棱药物易产生耐药性，临床上为了控制和延缓其耐药性的产生，多采用抗结核药物的联合应用。有关结核杆菌耐药性...     

霍乱弧菌毒力相关基因检测分析

目的:对霍乱弧菌临床及外环境分离株进行毒力相关基因检测,以了解其毒力相关基因的携带情况.方法:采用PCR方法对霍乱弧菌进行6种毒力相关基因的检测.结果:所有检测的霍乱弧菌rtxA均为阳性,具有3种毒力基因型.结论:毒力相关基因检测能反映不同类型菌株间的分子特征,对于霍乱的分子流行病学研究及预防控制具有重要意义.     

免疫色谱检测法在结核分枝杆菌检测和鉴定的评价

结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染性疾病。近年来，在世界范围内有复活、增加的趋势。如何快速进行检测分枝杆菌，鉴别结核分枝杆菌与其他分枝杆菌，对于结核病的预防和控制上非常重要。我们利用结核杆菌分泌到菌体外的特异性蛋白质MPB64，采用免疫色谱法对9株标准菌株、参考菌株和20株临床标本分离菌株进行鉴定，并将其结果与其他鉴定方法做了研究比较。     

人类结核菌疫苗研究进展

结核病是当今严重威胁人类健康的公共卫生问题，全球现有20亿人感染，每年200万人死于结核病。人口的流动、HIV与结核的双重感染和结核杆菌高耐药性的产生，给结核的治疗控制雪上加霜。因此，大多数专家认为：结核的控制必须靠有效的疫苗。但是，目前唯一批准使用卡介苗(BCG)尚不能有效预防感染和发病。     

PCR法制备地高辛标记探针原位杂交在人结核杆菌Edman株基因检测中的应用

目的 建立一种用于临床上检测人感染结核杆菌Edman株的快速敏感的PCR探针原位杂交方法.方法 根据NCBI报道的人结核杆菌编码序列,以结核杆菌Edman株Ag85A基因150~841 bp之间的基因序列为靶序列,采用PCR法制备对人结核杆菌特异性高的地高辛标记DNA探针(690 bp),并对探针进行电泳和测序鉴定.分离培养结核杆菌,通过原位杂交检测所制备探针的特异性;对结核杆菌做10倍比稀释,运用探针对其进行敏感性检测.结果 所制备的探针对结核杆菌的杂交反应呈阳性,以dNTP代替地高辛标记探针作为对照组的杂交反应为阴性;通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;PCR法制备地高辛标记探针原位杂交法检测结核杆菌A_g85A基因下限为1.0 x 10.c妯ml. 结论 本研究建立的地高辛标记探针原位杂交法对结核杆菌Edman株Ag85A基因的检测具有快速、特异、敏感白勺特点,适合结核分枝杆菌的临床检测.     

卡介苗生产用菌株全基因组测序

【目的】对我国生产用卡介苗上海D2PB302菌株(简称“卡介苗上海D₂株”)全基因组进行测序及部分基因功能预测。【方法】取卡介苗上海D2株(编号D2-JIA12-1)样品DNA，采用第三代测序平台PacBio RSⅡ进行全基因组测序，并结合二代测序数据得到最终的基因组序列。对基因序列分别进行rRNA预测和tRNA预测，对预测的基因进行基本的功能注释，并选取其中肺内表达结核分枝杆菌(MTB)在小鼠体内感染过程中高表达编码(IVE-TB)抗原基因序列、减毒结核分枝杆菌疫苗(MTBVAC)作为目的序列与结核分枝杆菌H37Rv序列(NC＿000962.3)比对。【结果】卡介苗上海D2株基因组序列长度为4 045 232 bp,GC含量为65.66%。Glimmer3.02软件共预测出4 259个基因，基因的平均长度为933 bp，其中1 783个基因是假定蛋白，其余2 476个基因具有明确的生物学功能，与毒力基因库比对后得到144个毒力基因，包含29个Ⅶ型分泌系统基因，10个N端具有保守的脯氨酸-谷氨酸(PE)和脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸(PPE)序列的蛋白质家族基因。【结论...     

乌鲁木齐市耐多药结核分枝杆菌基因突变特征分析

目的 了解耐四种一线抗结核药物结核分枝杆菌的有关基因突变特征。方法 对19例耐多药结核病患者和254例全敏结核病患者痰液标本中分离的结核分枝杆菌进行药物敏感性试验,提取其DNA进行PCR扩增,对扩增产物测序并与标准株H37Rv进行比对。结果 19株耐多药结核杆菌和254株全敏结核杆菌均未检测到耐异烟肼基因inhA突变;耐多药组突变率最高的为耐异烟肼katG基因,突变位点为315;耐利福平的突变基因是rpoB,耐药位点为526和531,531位点突变率高于526位点;耐乙胺丁醇的突变基因是embB,耐药位点为206;耐链霉素的突变基因是rpsL和rrs,耐药位点分别为43和1401,rpsL基因的突变率高于rrs基因。结论 耐多药结核分枝杆菌耐异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素的突变基因分别为katG、rpoB、embB、rpsL和rrs,这对今后乌鲁木齐市耐多药结核病的快速诊断和控制提供了理论依据。     

表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌的免疫功能研究

目的研究表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌在动物体内的免疫功能。方法用表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞增殖实验检测重组耻垢分枝杆菌的免疫原性,利用流式细胞术分析小鼠T淋巴细胞亚群比例的变化,通过病理学切片观察重组耻垢分枝杆菌在动物体内的毒力。结果重组耻垢分枝杆菌诱导的脾淋巴细胞增殖反应、CD4＋T细胞比例均明显高于对照组;重组耻垢分枝杆菌不会导致脏器的器质性病变。结论表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫原性显著增强,且毒力无明显改变,有望成为一种新型的结核病疫苗。     

表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌的免疫功能研究

目的研究表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌在动物体内的免疫功能。方法用表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞增殖实验检测重组耻垢分枝杆菌的免疫原性,利用流式细胞术分析小鼠T淋巴细胞亚群比例的变化,通过病理学切片观察重组耻垢分枝杆菌在动物体内的毒力。结果重组耻垢分枝杆菌诱导的脾淋巴细胞增殖反应、CD4+T细胞比例均明显高于对照组;重组耻垢分枝杆菌不会导致脏器的器质性病变。结论表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫原性显著增强,且毒力无明显改变,有望成为一种新型的结核病疫苗。     

难辨梭状芽胞杆菌的分子生物学研究及其临床应用

难辨梭状芽胞杆菌（Ｃｄ）是抗生系相关性腹泻的主要病原菌，目前已从基因水平不同程度地认识了该菌主要的致病物质－－Ａ毒和Ｂ毒素的结构、毒力表达的调控、毒素作用的受体和受体后作用的机制等。虽然分离培养技术是检测该菌及其毒素不可替代的重要方法，使用简便敏感的分子探针技术将是一大趋势。通过基因工程改造毒素基因，控制有毒菌株的繁殖或者生产疫苗，可从根本上对Ｃｄ相关性腹泻进行有效控制。     

某医院178株结核杆菌耐药情况分析

<正>结核分枝杆菌,俗称结核杆菌,是引起结核病的病原菌。近年来,全球结核病的发病率呈上升趋势,已成为人们关注的问题。结核病发病率上升的主要原因是大量的结核耐药菌株的出现。对结核病患者结核杆菌耐药情况的分析可以为结核病的预防和控制提供重要的科学依据。为此我们对2012年1月-2013年12月在某医院住院治疗的178例肺结核患者的耐药情况进行了分析。1对象与方法 (1)对象:收集2012年1月-2013     

肺结核病人的护理措施

结核俗称“痨病”，是结核杆菌侵入体内引起的感染，是青年人容易发生的一种慢性和缓发的传染病。肺结核是由结核杆菌引起一种慢性传染性肺部疾病。为了有效提高患者的治愈率，降低感染率、发病率，让患者早日康复，护理和治疗同等重要。     

大肠埃希菌O157：H7特异基因检测与毒力基因分析

目的：对江苏省2000和2001年分离的经血清玻片凝集试验初筛为大肠埃希菌O157：H7（E.coliO157:H7)的菌株进行O157O抗原及H7抗原特异性基因检测，了解2000年监测点宿主动物分离O157菌株毒力基因携带率及毒力基因图谱。方法：用聚合酶链反应法检测O157特异基因，H7特异基因，多重引物聚合酶链反应法检测VT1，VT2，eaeA,hly等毒力基因并进行分析。结果：134株血清玻片凝集试验初筛为E.coliO157:H7的菌株经特异基因检测确定为E.coliO157的占72.4%(97/134),E.coliO157:H7的仅为29.1%(39/134)；非O157菌株占26.9%(36/134)，有44.3%(58/134)的O157菌株鞭毛抗原不是H7。2000年宿主动物分离菌株，经特异基因检测为非O157的不携带毒力基因（0/18）；为E.coliO157:H?的菌株，毒力基因携带率为10.7%(3/28)；确定为E.coliO157:H7的菌株，毒力基因携带率高达93.1%(27/29)。且毒力基因型以VT2 eaeA hly为主。结论：特异性基因检测鉴定E.coliO157:H7，可大大减少血清玻片凝集试验的误判，结合毒力基因检测，可分析E.coliO157:H7菌株毒力基因型的变化，对制定切实有效的防制对策控制E.coliO157:H7流行具有重要意义。     

结核分枝杆菌异烟肼耐药与KatG基因相关性

目的探讨新疆地区结核分支杆菌异烟肼(INH)耐药与结核杆菌KatG基因突变和缺失的关系。方法收集结核病患者的痰标本238份,分离培养结核杆菌分离株60株,其中异烟肼敏感株28株,耐药株32株,抽提临床菌株DNA和H37RV标准株DNA,应用聚合酶链反应-单链多态构象分析(PCR-SSCP)和测序方法对结核分支杆菌KatG基因突变进行检测。结果 238份肺结核病人痰标本,涂片抗酸杆菌阳性60例,阳性率25.2%;以结核分支杆菌H37RV为对照,28株药物敏感株的KatG,基因扩增产物273片段单链多态构象分析(SPSS)图谱均正常,32例耐INH分离株中32株KatG基因扩增阳性,其中11株SSCP图谱与H37RV株有差异,KatG突变率为34.37%。结论新疆地区结核杆菌INH耐药率仍属于高耐药区域,新疆地区结核分支杆菌INH耐药的产生可能是其KatG基因突变所致。     

结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药与embB基因突变的相关性研究

目的分析西安地区耐乙胺丁醇(EMB)结核杆菌临床分离株embB基因突变的特点,建立快速检测结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性的方法。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测104株结核分枝杆菌临床分离株的embB基因。结果以H37Rv标准株为对照,35株药物敏感株的SSCP和RFLP分析结果均与标准株一致,不存在突变;69株耐乙胺丁醇分离株中,39株(56.52%)SSCP泳动与标准株不一致,存在基因异常;19株(27.54%)RFLP分析存在基因异常。结论西安地区结核杆菌临床分离株对乙胺丁醇耐药与embB基因(尤其是306位密码子)突变有关,PCR-SSCP和PCR-RFLP技术可快速、准确地检测结核分枝杆菌对EMB的耐药性。     

警惕小儿肺结核

小儿结核病大多为首次感染结核杆菌而致的原发性结核,由于小儿对结核杆菌具有高度敏感性,因此一旦染病,结核病灶周围常有广泛的炎性反应,结核菌素试验呈强阳性反应,并会反变出现疱疹性结膜炎,而且可引起全     

痰标本质量对结核杆菌镜检阳性率的影响

<正>结核病是一种慢性呼吸道传染病,是我国重大的公共卫生问题。结核病早期诊断和治疗是现阶段控制结核病疫情的有效方法。结核杆菌是引起结核病的病原菌,至今,痰涂片镜检仍是结核的诊断、化疗方案的确定与预后评价的重要手段之一。但不同的痰标本质量对结核杆菌镜检阳性率有着重要的临床意义,为此对1355份痰标本进行了分析,现将结果报道如下。