天麻HPLC指纹图谱建立及判别分析

天麻为常用名贵中药,使用量大、价格高,常有性状相似的伪品出现;并且冬天麻(栽培天麻)与春天麻(多为野生天麻)的价格差异较大,真伪优劣难以鉴别。为此,广泛收集了48份冬天麻、春天麻、天麻饮片、天麻粉等不同性状的天麻样品和9种10份天麻伪品,应用HPLC-DAD-MS技术,通过优化供试液的制备方法、色谱条件和质谱条件,测定、比较这些样品的HPLC图,并进行相似度及Fisher判别分析。结果表明,这48份天麻样品的HPLC图相似,其相似度大于0.848(n=48);以其平均图谱作为指纹图谱。有11个分离良好的共有峰,选择6个主要色谱峰作为特征峰,经与对照品比较,UV和MS数据分析,分别鉴定为天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E,均为天麻的药效成分。10份天麻伪品与天麻HPLC指纹图谱明显不同,相似度低于0.042,并且未发现天麻HPLC指纹图谱的特征峰。说明根据指纹图谱的相似度或者特征峰均可鉴别天麻的真伪。对15份冬天麻和11份春天麻的HPLC图分析结果表明,两者的HPLC图相似(平均相似度为0.908);但特征峰的强度不同,冬天麻中天麻素、巴利森苷A和C的强度低于春天麻;以天麻HPLC图中11个共有峰的面积为变量建立的Fisher非标准化判别函数和线性判别函数均能100%判别冬天麻和春天麻,予以准确鉴别。     

天麻商品等级与天麻素和天麻多糖的相关性研究

目的研究天麻中天麻素和天麻多糖的量与天麻商品规格、等级和产地之间的相关性,评价天麻的质量。方法分别采用HPLC法和苯酚-硫酸法测定了35份冬天麻、春天麻及其不同等级天麻样品中天麻素和天麻多糖量;结合性状鉴别特征,分析这2种活性成分与天麻商品规格、等级、产地等因素之间的关系。结果冬天麻中天麻多糖的量(26.05%)高于春天麻(20.21%),而天麻素的量则是冬天麻(0.49%)低于春天麻(0.68%)。在不同等级的天麻中,天麻多糖的量与等级有关,一等(32.65%)、二等天麻(32.89%)高于三等(21.71%)、四等天麻(14.57%);而天麻素的量相近,一、二、三、四等天麻中天麻素的量分别为0.46%、0.65%、0.43%和0.44%。四川、陕西、云南等天麻道地产地的样品中天麻素和天麻多糖量均较高。结论建立的HPLC法和苯酚-硫酸法可准确测定天麻中天麻素和天麻多糖的量。天麻多糖的量与天麻商品规格、等级和经验鉴别优劣的结果相符合,可作为天麻质量评价的指标。     

RP-HPLC同时测定天麻中4种成分的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量.方法:采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长270 nm,柱温35℃.结果:天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛分别在19.1～383(r=0.999 9),0.620～12.4(r=0.999 9),2.45～49.0(r=0.999 9),0.280～5.63 mg·L~(-1)(r=0.999 6)与峰面积线性关系良好;平均加样回收率(n=9)均在96.7%～97.7%,RSD均小于1.6%.结论:本法准确可靠,分离度好,适用于天麻药材中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量测定.     

不同产地及变型天麻有效成分差异性分析

目的分析不同产地及变型天麻有效成分差异性。方法利用HPLC法测定不同产区天麻中8种天麻素类成分,比较其含有量差异,并进行差异性、相关性、主成分、因子载荷分析。结果天麻有效成分含有量之间存在一定的相关性,可能有相互转化或累积代谢途径的相互影响。不同产区样品之间有效成分及总天麻素含有量具有一定差异,对羟基苯甲醇、腺苷对绿天麻分类分别具有较大正、负贡献,提取的特征成分可在主成分空间内有效识别不同产区样品。结论天麻有效成分及总天麻素可用于不同品种的差异性识别,尤其是巴利森苷E、巴利森苷A,可作为乌天麻与其他天麻品种差异性分析的标志物。另外,对羟基苯甲醇、腺苷可作为绿天麻识别的模式物质。     

云南昭通天麻三种变型中四个成分的含量比较研究

目的比较云南昭通乌、绿、黄天麻中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量。方法采用AgilentTCC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）,以甲醇-0.1%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长270nm,柱温35℃。结果四个成分的含量比较,天麻素：黄〉乌〉绿;腺苷：绿〉乌〉黄;对羟基苯甲醇：绿〉黄〉乌;对羟基苯甲醛：黄〉乌〉绿。结论乌、绿、黄天麻中四个成分的含量有明显差异,天麻素和对羟基苯甲醛的含量以黄天麻最高,腺苷和对羟基苯甲醇的含量以绿天麻最高。     

不同泡制时间天麻酒药效成分动态溶出规律研究

目的建立一种超高效液相色谱法(UPLC)同时检测天麻酒中天麻素、对羟基苯甲醇两种药效成分的方法。通过将天麻粉和天麻片置于53%的乙醇中模拟天麻酒的酒浸过程,研究指标性药效成分的动态溶出规律。方法运用超高效液相色谱仪-二极管阵列检测器(UPLC-DAD)进行天麻素和对羟基苯甲醇的定性与定量测定。色谱条件:乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长220 nm,柱温25℃,进样量10.0μl,流速1.0 ml/min。结果天麻素的线性方程为Y=21.341X+43.525(r=0.9997),线性范围3.2～32.0μg/mL;对羟基苯甲醇的线性方程为Y=33.673X+21.806(r=0.9995),线性范围11.68～116.8μg/mL;天麻粉组中天麻素,对羟基苯甲醇的平均回收率分别为91.09%、98.09%。天麻片组中天麻素,对羟基苯甲醇的平均回收率分别为90.52%、96.90%。结论该方法能够对天麻酒中的药用有效成分进行定性与定量测定,可以用于天麻酒的质量控制。通过研究不同泡制时间天麻酒的动态溶出规律,能够指导天麻酒的制备。     

蒸制对乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的含量的影响

目的:通过HPLC法测定蒸制前后乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的含量,通过对比探索出物理方法蒸制对乌天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的含量的影响。方法:色谱柱Agilent XDB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-0.05%磷酸溶液(3∶97),流速1.0m L/min,检测波长220nm,柱温35℃。结果:乌天麻蒸制后天麻素和对羟基苯甲醇含量有明显的变化,为新鲜乌天麻1.28~1.51倍;对羟基苯甲醇转化为天麻素转化率为0.63~0.86。结论:蒸制后天麻素和对羟基苯甲醇总含量为新鲜乌天麻的1.28~1.51倍,对羟基苯甲醇转化为天麻素的转化率为0.63~0.86。     

不同产地天麻标准汤剂的制备与质量评价研究

目的:制备天麻标准汤剂,并建立其质量评价方法。方法:收集有代表性的15批天麻药材,以水为溶媒,采用标准化制备工艺制备标准汤剂,计算出膏率。采用HPLC法建立天麻标准汤剂的指纹图谱,并测定其中天麻素和对羟基苯甲醇的含量,计算转移率。结果:15批天麻标准汤剂的出膏率范围为10.50%～21.15%,平均值为16.47%,标准偏差为3.62%。天麻素含量范围为4.85～20.12 mg·g~(-1),均值为13.56 mg·g~(-1),标准偏差为4.667 mg·g~(-1),其转移率范围为22.67%～69.25%,均值为50.66%,标准偏差为12.31%。对羟基苯甲醇含量范围为4.28 mg·g~(-1)～14.38 mg·g~(-1),均值为7.91 mg·g~(-1),标准偏差为3.22 mg·g~(-1),转移率范围为40.90%～89.48%,均值为60.62%,标准偏差为15.21%。标准汤剂指纹图谱共得到7个峰,其中天麻素与对羟基苯甲醇含量较高,与药材保持一致。结论:15批不同产地天麻药材与其对应的标准汤剂基本属性保持一致,但不同产地之间存在一定差异,以云南产地较佳。该实验制备了天麻的标准汤剂并建立了其质量评价方法,为后续天麻配方颗粒及其标准汤剂的质量控制提供了参考。     

UPLC指纹图谱结合多成分含量测定的天麻饮片质量研究

目的建立天麻饮片UPLC指纹图谱和同时测定天麻饮片中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A的超高效液相色谱分析方法。方法采用Waters Acquity超高效液相系统,Waters ACQUITY UPLC BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,检测波长270 nm(指纹图谱)、220 nm(含量测定),体积流量为0.3 mL/min,柱温35℃。通过相似度评价、主成分分析、偏最小二乘判别分析对28批天麻饮片指纹图谱进行分析,通过对照品比对对主要共有峰进行指认和含量测定。结果建立了不同产地天麻的指纹图谱,标定了20个共有峰,并指认了其中6个共有峰:天麻素(1号峰)、对羟基苯甲醇(3号峰)、对羟基苯甲醛(7号峰)、巴利森苷B(14号峰)、巴利森苷C(15号峰)、巴利森苷A(18号峰)。28批样品相似度均在0.90以上,主成分分析将不同产地天麻分为5组,并发现对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、巴利森苷A等6个差异成分。同一成分在各产地天麻饮片中的含量差异明显,不同成分的波动范围不同,各产地5种成分总量贵州(2.52%)云南(2.49%)陕西(2.33%)湖北(2.10%)浙江(1.90%)安徽(1.65%)。结论建立不同产地天麻UPLC指纹图谱结合多成分含量测定方法为完善天麻饮片的质量控制提供了参考。     

彝良乌天麻最佳采收期初步研究

目的:明确彝良乌天麻的最佳采收期。方法:当年3月采用"三下窝"的方式栽培乌天麻,分别于当年10月、11月和翌年3月采收,测定产量,采用UPLC测定天麻素和对羟基苯甲醇的含量,苯酚-浓硫酸法测定天麻多糖的含量。结果:11月采收的乌天麻天麻素、天麻素和对羟基苯甲醇总含量最高,分别达到了5.813 mg/g和5.951 mg/g,与10月和翌年3月采收的乌天麻存在极显著差异(P0.01);11月采收的乌天麻多糖含量为21.321 mg/g,显著高于10月和翌年3月(P0.05)。结论:以乌天麻产量、天麻素、天麻素和对羟基苯甲醇的总含量及天麻多糖作为评价指标,彝良乌天麻的最佳采收期应为11月。研究结果为彝良乌天麻合理采收提供了理论依据。     

天麻饮治疗眩晕800例

目的 :观察经方半夏白术天麻汤、泽泻汤化裁治疗眩晕的临床疗效。方法 :采用随机法分为两组 ,治疗组用天麻饮 (天麻、茯苓、半夏、当归、白术、泽泻、川芎、菊花等 )治疗 ,对照组用氟桂嗪治疗。结果 :治疗组治愈率、总有效率分别为 81 %、95 .6% ,对照组治愈率、总有效率分别为 1 9.8%、67.9%。两组有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 :天麻饮治疗眩晕有平肝潜阳 ,化痰燥湿 ,活血通络的疗效     

天麻素注射液的临床应用

目的：探讨天麻素注射液在临床的应用疗效。方法：查阅和归纳总结近几年相关文献。结果：天麻素注射液可用于治疗神经衰弱,癫痫,各种原因引起的眩晕头痛以及缺血性心脑血管等疾病。结论：天麻素注射液疗效肯定,安全、方便,值得在临床上大力推广使用。     

天麻灵芝颗粒药效学实验研究

目的对天麻灵芝颗粒进行药效学研究。方法通过小鼠断头张口喘气实验、耐常压缺氧实验、豚鼠氯仿所致眩晕实验、旋转刺激缺血性眩晕模型大鼠水迷宫实验,考察天麻灵芝颗粒抗眩晕作用;通过小鼠自主活动实验、小鼠协同戊巴比妥钠催眠实验,考察天麻灵芝颗粒的镇静催眠作用;通过小鼠扭体法实验、小鼠热板法实验,考察天麻灵芝颗粒镇痛作用;通过游泳和调节免疫实验,考察天麻灵芝颗粒抗疲劳及调节免疫的作用。结果天麻灵芝颗粒能促进大脑供血供氧;能明显减少小鼠的自主活动次数,增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠只数,缩短阈剂量戊巴比妥钠小鼠入睡潜伏期并延长睡眠时间;能显著地增加醋酸致小鼠扭体反应潜伏期并减少扭体反应次数,增加热板法小鼠痛阈值;能明显延长小鼠游泳时间,增加幼龄小鼠脾脏、胸腺指数,增加小鼠的碳粒廓清指数和吞噬指数。结论天麻灵芝颗粒具有抗眩晕、镇静催眠、镇痛、抗疲劳及提高免疫功能的作用。     

加味天麻胶囊主要药效学试验研究

目的:探讨加味天麻胶囊对关节炎的作用、抗炎作用及对免疫作用的影响。方法:对关节炎的作用选用大鼠佐剂型关节炎试验法。结果:加味天麻胶囊大剂量、中剂量、小剂量对佐剂性关节炎动物足肿胀度明显减轻(P<0.05 P<0.05);致炎后26天原发侧和继发侧加味天麻胶囊1.80g/kg、0.90g/kg、0.45g/kg剂量动物足肿胀度仍有明显减轻(P<0.05 P<0.05)。提示:加味天麻胶囊具有抗炎作用,对佐剂性关节炎具有对抗作用。     

天麻钩藤饮新用

天麻钩藤饮出自近代胡光慈所著《杂病证治新义》,由天麻、钩藤、生决明、山栀、黄芩、川牛膝、杜仲、益母草、桑寄生、夜交藤、茯神组成.具有平肝熄风、清热安神、补益肝肾之功效.主治肝阳上亢,肝风内动.笔者用该方异病同治,治疗高血脂、血管性头痛、失眠等病证,均获得满意效果,现报道如下:     

高效液相色谱法测定天麻胶囊中天麻素的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定天麻胶囊中天麻素的含量。方法采用色谱柱为NUCLEOSIL C18(10μm,4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈-水(3∶97);流速为1.0 ml.min-1;柱温为25℃;检测波长:220 nm。结果天麻素在10.83~64.98μg.ml-1范围内线性关系良好(r=0.9999),回归方程为:A=99.1571C-21.2667,天麻素平均回收率为99.2%,RSD为0.6%,n=5。结论该法操作简便,结果可靠,重现性好,可用于控制天麻胶囊的质量。     

半夏白术天麻汤新用

半夏白术天麻汤出自《医学心悟》,由半夏、白术、天麻、橘红、云苓、甘草、生姜、大枣组成 ,具有化痰熄风、健脾祛湿的作用 ,主治风痰上扰所致眩晕头痛 ,胸闷呕恶等症。笔者采用本方加减治疗内科杂症 ,亦获得满意疗效。现举验案数例介绍如下。脑梗塞并发膈肌痉挛张某 ,男性 ,52     

HPLC测定天麻胶囊中天麻素含量

目的应用HPLC测定天麻胶囊中天麻素的含量。方法采用DiamonsilC18柱色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相0.1%磷酸溶液-80%乙腈(97.2∶2.8);流速0.8mL.min-1;检测波长220nm,柱温40℃。结果天麻素线性范围为0.0392~0.3528μg(r=0.9998),平均加样回收率为95.69%,RSD=1.20%(n=5)。结论本方法稳定、可靠、灵敏度高、重现性好、杂质干扰小,方法操作简便、准确,可作为该制剂的质量控制标准,用于对天麻胶囊中主要成分天麻素的含量控制。     

天马颗粒的质量标准研究

目的:建立天马颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法对天马颗粒的主要成份马钱子、延胡索、黄芪进行定性鉴别;用高效液相色谱法测定士的宁的含量。结果:薄层色谱中均能明显鉴别出马钱子、延胡索、黄芪成份;士的宁进样量在0.1286μg~0.6340μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为96.25%,RSD=0.56(n=5)。结论:本方法可快速、准确、简便地对天马颗粒进行定性、定量检测,可用于该制剂的质量控制。