TRPV1受体在针刺镇痛中的调节作用及机制研究

TRPV1作为一种新型离子通道,在疼痛调节方面具有重要作用。新型靶向镇痛药物开发遇到挑战,非药物疗法受到越来越多关注。近年来,研究表明TRPV1受体与针刺镇痛疗效高度相关,TRPV1通过上调启动兴奋性p NR1-p Ca MKII通路介导针刺信号向中枢神经系统传导而发挥针刺效应。对于各类疼痛,针刺的缓解机制主要以抑制外周、脊髓、中枢及内脏的TRPV1信号表达为主,类似于TRPV1拮抗剂作用。但对于炎性疼痛,针刺对不同脑区TRPV1的调节同时有拮抗和激动,而对于精神性疼痛,则以上调TRPV1信号为主。     

温和灸对慢性内脏痛敏模型大鼠结肠CRFR2表达的影响

目的:观察温和灸对慢性内脏痛敏(Chronic Visceral Hyperalgesia,CVH)模型大鼠行为学及结肠组织促肾上腺皮质激素释放因子2型受体(Corticotrophin Releasing Factor Receptor 2,CRFR2)蛋白及其mRNA表达的影响。方法:采用乳鼠结直肠扩张(Colorectal Distention,CRD)刺激建立CVH大鼠模型,模型制备成功后选取双侧天枢、上巨虚穴分别进行温和灸及假灸干预,1次/d,连续7 d。全部干预结束后,以腹部撤回反射(Abdominal Withdrawl Reflex,AWR)评分作为检测大鼠内脏痛敏的行为学指标;采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法观察结肠组织CRFR2蛋白及其mRNA的表达。结果:在不同强度的CRD刺激下,与正常组相比,模型大鼠AWR评分升高(P0.01)。温和灸组干预后,大鼠AWR评分下降(P0.01)。模型组大鼠CRFR2蛋白及其mRNA表达均高于正常组(P0.01),温和灸干预后,CRFR2蛋白及其mRNA表达进一步升高(P0.01)。假灸组与模型组比较,差异无统计学意义。结论:温和灸有效缓解CVH模型大鼠内脏痛敏状态,与其升高结肠组织CRFR2蛋白及其mRNA的表达有关。     

PAR4、TRPV1在电针缓解肠易激综合征大鼠内脏痛敏中的作用研究

目的:观察PAR4、TRPV1在电针缓解肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛敏中的作用,探讨针刺缓解大鼠内脏痛敏的可能机制。方法:将SPF级成年雄性Wistar大鼠32只随机分为正常对照组、模型组、电针大肠俞组、电针上巨虚组,每组8只,采用乙酸灌肠法复制IBS内脏痛敏模型。造模成功后电针治疗,每天1次,连续7 d。在电针结束后,观察各组大鼠粪便性状并根据粪便性状分级进行粪便性状的评分,检测粪便含水量和引起腹部回缩反射的最小容量阈值,采用western-blotting检测大鼠结肠组织中PAR4、TRPV1蛋白的含量。结果:模型组大鼠粪便性状评分和粪便含水量与正常对照组相比明显增加(P<0.01,P<0.01),电针大肠俞组、电针上巨虚组大鼠粪便性状评分(P<0.01,P<0.01)和粪便含水量降低(P<0.05,P<0.05)。模型组与正常对照组相比引起大鼠腹部回缩反射的容量阈值明显降低(P<0.01),电针大肠俞和电针上巨虚后引起大鼠腹部回缩反射的容量阈值显著增加(P<0.01,P<0.01);模型组结肠组织PAR4蛋白的表达水平与正常对照组相比有升高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比电针上巨虚组结肠组织PAR4蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组结肠组织TRPV1蛋白的表达水平与正常对照组相比升高(P<0.05)。与模型组相比电针大肠俞组、电针上巨虚组结肠组织TRPV1蛋白表达水平有下降的趋势。结论:电针可以有效缓解IBS内脏痛敏,其机制可能和调控IBS内脏痛敏大鼠结肠PAR4、TRPV1蛋白的表达有关。     

艾灸“大肠俞”对大鼠内脏痛敏及骨髓细胞瞬时感受器电位香草酸受体亚型1表达的影响

目的:运用大鼠新生期结直肠扩张(CRD)形成成年内脏痛敏模型,探讨内脏痛敏及艾灸疗效与骨髓细胞瞬时感受器电位香草酸受体亚型(TRPV)1表达之间的关系。方法:新生SD雄性大鼠自出生8d后进行CRD刺激建立内脏痛敏模型。8周后对模型组和对照组进行"大肠俞"模拟热敏灸,灸前后CRD刺激,记录腹部撤回反射(AWR)评分及测定痛阈值,结束后90min内取各组大鼠骨髓细胞运用RT-PCR测TRPV 1mRNA表达。结果:①模型组AWR评分明显高于对照组(P<0.01),痛阈明显低于对照组(P<0.01)。②模型组艾灸后的AWR评分明显低于艾灸前(P<0.05,P<0.01),痛阈明显高于艾灸前(P<0.01)。对照组艾灸后40、60、80mmHg的AWR评分明显低于艾灸前(P<0.01),痛阈明显高于艾灸前(P<0.05)。③对照组TRPV 1mRNA相对表达量较低(0.655±0.400),艾灸对照组TRPV 1mRNA相对表达量降低(0.551±0.257,P>0.05),艾灸模型组TRPV 1mRNA相对表达量(2.423±2.730)较对照组、艾灸对照组略高(P>0.05),模型组TRPV 1mRNA相对表达量(6.550±2.308)明显高于对照组、艾灸对照组、艾灸模型组(P<0.01)。结论:新生期CRD可形成内脏痛敏,骨髓细胞TRPV 1mRNA表达明显增加。艾灸"大肠俞"明显减轻内脏痛敏,可减少骨髓细胞TRPV 1mRNA表达。     

隔药灸对慢性炎性内脏痛大鼠mTOR-4E-BP1/S6RP信号通路的调控作用

目的：从mTOR-4E-BP1/S6RP信号通路角度,探讨隔药灸治疗慢性炎性内脏痛的中枢机制。方法：将雄性SD (Sprague Dawley)大鼠随机分为正常组、模型组、隔药灸组、mTOR抑制剂组。采用TNBS合50%乙醇灌肠的方法制备CIVP大鼠模型。隔药灸组采用隔附子饼灸“天枢”（双侧）“气海”;mTOR抑制剂组在L5～L6间鞘内注射雷帕霉素。采用腹壁撤回反射评分（Abdominal Withdrawal Reflex, AWR评分）观察各组大鼠痛行为变化;采用Western Blotting及RT-q PCR技术检测各组大鼠脊髓mTOR、4E-BP1、S6RP磷酸化蛋白及m RNA表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠AWR评分在各个压力梯度下均明显升高（均P<0.01）;脊髓mTOR、4EBP1、S6RP磷酸化蛋白及m RNA表达均明显增高（P<0.01或P<0.05）。与模型组比较,隔药灸组及mTOR抑制剂组大鼠经干预治疗后,AWR评分均显著下降（P<0.01,P<0.05）;脊髓mTOR、4EBP1、S6RP磷酸化蛋白及m RNA表达均明显降低...     

不同频次温和灸对动脉粥样硬化兔血脂及TNF-α、MCP-1、ICAM-1含量的影响

目的 观察不同频次温和灸对动脉粥样硬化(AS)家兔血脂及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量的影响,探讨不同频次温和灸治疗AS的可能机制。方法 将50只家兔适应性喂养1周后,随机分为空白组13只和造模组37只。空白组给予标准饲料饲养,造模组给予高脂饲料饲养8周并结合免疫损伤的方法制备AS模型。造模结束后每组随机选取1只家兔进行血脂检测和主动脉弓部组织病理形态结构观察,检验造模是否成功。将造模成功后的家兔随机分为模型组、低频次艾灸组、高频次艾灸组,每组12只。从第9周开始,低频次艾灸组和高频次艾灸组选取“膻中”“神阙”“内关(双)”“血海(双)”穴位进行艾灸干预,低频次艾灸组治疗隔日1次,高频次艾灸组治疗每日1次,每次治疗30 min,共干预4周。空白组、模型组仅进行抓取、固定,不予干预。干预结束后,观察家兔一般情况;酶法测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量;比色法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;苏丹Ⅳ染色观察各组家兔主动脉弓部组织病理形态结构,电镜观察主动脉超微结构;酶联免疫法检测血清TNF-α、...     

温和灸对高脂血症大鼠脂蛋白代谢酶的影响

目的:观察温和灸对慢性高脂血症大鼠血脂及脂蛋白代谢酶的影响,探讨艾灸可能的调脂机制。方法:采用高脂饲料喂养造模方法制备慢性高脂血症模型。将48只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组、药物组,药物组以洛伐他汀混悬液灌胃,治疗结束后取大鼠血清,测定胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-c)、高密度脂蛋白(HDL-c)含量及脂蛋白酯酶(LPL)、肝酯酶(HL)活性。结果:①与正常组相比,模型组TC、TG、LDL-c明显升高,HDL-c显著降低,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,艾灸组、药物组均具有降低TC、TG、LDL-c,升高HDL-c的效应(P<0.01);②与正常组比较,模型组LPL活性显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),HL活性有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05);与模型组相比,艾灸组LPL、HL活性明显高于模型组(P<0.05),药物组无统计学意义(P>0.05)。结论:艾灸发挥调节血脂组分代谢的作用,可能与调控LPL和HL的活性有关。     

慢性炎性痛电针镇痛频率优选及其DRG TRPV1活化机制研究

目的:筛选电针干预慢性炎性痛的优势频率,观察不同频率电针对慢性炎性痛大鼠DRG p-TRPV1的干预情况,探讨优势频率电针的DRG p-TRPV1活化干预机制。方法:所有实验大鼠完全随机分为空白组、模型组、2 Hz电针组、100 Hz电针组和2/100 Hz电针组。除空白组外,其余各组均进行CFA造模。电针组选用双侧"足三里"和"昆仑"穴,0. 5 m A～1. 5 m A,30 min/次。采用Von Frey Hair检测各组大鼠不同时间点患侧PWT和PWL;采用免疫印迹法检测大鼠DRG pTRPV1的表达。结果:100 Hz电针对CFA大鼠的PWT提升最为显著(P 0. 05),100 Hz、2/100 Hz电针均能有效提高CFA大鼠的PWL(P 0. 05,P 0. 05); CFA模型大鼠L4-6 DRG p-TRPV1蛋白表达均有上调,其中L4水平上调差异无统计学意义(P 0. 05),L5、L6水平上升较为显著(P 0. 05),100 Hz电针能有效抑制CFA大鼠L5 DRG p-TRPV1蛋白的过表达(P 0. 05),对L4、L6 DRG p-TRPV1蛋白的过表达虽有下调趋势,但差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:100 Hz电针对慢性炎性痛的镇痛效应最佳,这可能与其能有效下调CFA大鼠L5 DRG p-TRPV1蛋白的过表达有关。     

温和灸不同时间因素对寒湿凝滞型原发性痛经止痛效应的临床研究

目的探讨温和灸不同时间因素(持续时间、间隔时间和介入时间)的量效关系和对寒湿凝滞型原发性痛经止痛效应的最佳治疗方案。方法以58例寒湿凝滞型原发性患者为观察对象,应用正交试验设计法进行3因素2水平搭配组合随机分为4组分别进行温和灸关元、三阴交治疗,以VAS-P量表、RSS量表评分为指标评定其止痛效应。结果温和灸治疗寒湿凝滞型原发性痛经的时间因素中的重要因素是持续时间和间隔时间,每穴灸治10 min优于每穴灸治5 min、2 d 1次优于1 d 1次、经前5天开始治疗优于经前7天开始治疗。结论持续时间和间隔时间是影响温和灸对寒湿凝滞型原发性痛经止痛效应的重要因素,温和灸灸治10 min/穴,2 d 1次,经前5天开始治疗为最佳治疗方案。     

电针“足三里”穴对内脏痛大鼠延髓内脏带内c-fos和GFAP表达的影响

目的:探讨电针对内脏痛大鼠模型疼痛行为学方面的影响以及延髓内脏带中即刻早期基因c-fos和胶质原纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP)在针刺镇痛中的表达及其意义。方法:雄性SD大鼠32只,随机分为空白对照组、内脏痛组、电针组和电针后内脏痛组,每组8只。将0·6%乙酸(V/V,10mL/kg)注射入大鼠腹腔内造成内脏痛模型。电针取双侧“足三里”穴,断续波,频率50Hz,强度2~5V,持续30min。观察并计算各组动物的疼痛指数(visceral painindex,VPI)后处死动物,延髓切片进行抗Fos蛋白或抗GFAP单一或双重标记的免疫组织化学染色,观察并记数c-fos和GFAP在中枢延髓内脏带内的表达。结果:内脏痛组和电针后内脏痛组出现典型的扭体反应,其中内脏痛组更明显,而空白对照组和电针组大鼠行为学无变化。各组c-fos阳性神经元、GFAP阳性星形胶质细胞表达主要位于延髓内脏带内孤束核、迷走神经背侧运动核。除了空白对照组,内脏痛组、电针组和电针后内脏痛组中c-fos和GFAP表达明显增高;3组之间比较,c-fos和GFAP表达内脏痛组最高,电针后内脏痛组其次,电针组最低(P<0·01)。结论:电针“足三里”穴对内脏痛模型大鼠的疼痛具有良性调节作用,其机制可能与其调节延髓内脏带内免疫阳性神经元和星形胶质细胞的功能活动有关。     

温灸刮痧疗法治疗颈型颈椎病临床研究

目的:观察温灸刮痧疗法治疗颈型颈椎病的临床疗效。方法:将90例颈型颈椎病患者按随机数字表法分成观察组、对照1组和对照2组,每组30例。观察组给予温灸刮痧疗法治疗,对照1组采用艾灸疗法治疗,对照2组采用刮痧疗法治疗。3组治疗前后均采用Northwick Park颈痛量表(NPQ)和McGill疼痛问卷(MPQ)评价颈痛程度,比较3组疗效,记录不良反应发生情况。结果:治疗1个疗程、2个疗程后,观察组NPQ评分均低于对照1组和对照2组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前及治疗1个疗程后,观察组与对照1组、对照2组MPQ评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗2个疗程后MPQ评分低于对照1组、对照2组,差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗后,观察组总有效率优于对照1组和对照2组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组均未出现明显不良反应。结论:温灸刮痧疗法可以减轻颈型颈椎病患者的颈部疼痛,治疗效果优于艾灸疗法和刮痧疗法。     

艾灸及其生成物对腹泻型肠易激综合症模型大鼠内脏痛和结肠水液代谢的影响

目的：探讨艾灸治疗腹泻型肠易激综合征（IBS-D）的作用机制及起效因素。方法：40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、温和灸组、无烟温和灸组、艾烟组,直结肠球囊刺激制备IBS-D模型,观察大鼠一般状况,腹部撤回反射（AWR）评分评估内脏痛,免疫组化检测结肠Claudin-1、AQP3、AQP8、Na+/K+-ATPase蛋白表达。结果：与正常组比较,IBS-D模型大鼠AWR 评分和结肠Claudin-1、AQP3、AQP8、Na+/K+-ATPase蛋白表达显著降低（P＜0.01）,粪便稀软,部分肛门周围鼠毛沾染稀便。综合疗效：温和灸、无烟温和灸、艾烟干预后,IBS-D模型大鼠粪便性状等大体情况改善,AWR 评分不同程度降低（P＜0.05或P＜0.01）,除Na+/K+-ATPase外,结肠Claudin-1、AQP3、AQP8表达不同程度升高（P＜0.05或P＜0.01）,综合疗效：温和灸>无烟温和灸>艾烟。结论：温热刺激、光辐射、艾烟3 者相结合对IBS-D 模型大鼠内脏痛和结肠水液代谢的改善效应最好,其中温热刺激、光辐射可能发挥了更为主要的作用。     

温针灸治疗寒湿凝滞型原发性痛经疗效观察

目的观察温针灸对寒湿凝滞型原发性痛经患者的疼痛积分的影响及临床疗效。方法温针灸气海、关元穴治疗寒湿凝滞型原发性痛经患者作为治疗组,以口服月月舒冲剂为对照组,采用疼痛评分及临床疗效来评定。结果两组临床疗效差异有统计学意义(P<0.05),两组治疗前后积分比较差异均有统计学意义(P<0.01),治疗后治疗组积分与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论温针灸能有效治疗寒湿凝滞型原发性痛经。     

温针配合隔附子饼灸对糖尿病胃轻瘫血浆胃肠激素的影响

目的观察温针配合隔附子饼灸治疗糖尿病胃轻瘫的疗效及对血清胃动素的影响。方法将50例糖尿病胃轻瘫患者随机分为治疗组和对照组,每组25例。治疗组采用背俞穴温针配合神阙隔附子饼灸治疗,对照组采用药物治疗。观察两组临床疗效,并检测治疗前后两组胃动素的变化。结果两组治疗后总体症状积分及血清胃动素水平与同组治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后总体症状积分及血清胃动素水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率为92.0%,对照组为72.0%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论温针配合隔附子饼灸是一种治疗糖尿病胃轻瘫的有效方法,能改善血清胃动素水平。     

督灸对哮喘小鼠效应及TRPV1相关神经-免疫炎症的影响

目的:观察督灸对哮喘小鼠效应及TRPV1相关神经-免疫炎症的影响。方法:将80只雌性Balb/c小鼠随机分为4组,分别为空白组、模型组、地塞米松组、督灸治疗组,每组20只。复制卵蛋白(OVA)致敏及激发小鼠哮喘模型。检测各组小鼠气道反应性,观察各组小鼠肺组织病理学改变,外周血嗜酸性粒细胞数(EOS),支气管肺泡灌洗液(BALF)中各类炎症细胞百分比的水平。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测BALF中白细胞介素(IL)-4,IL-13,P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织TRPV1蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠肺组织病理显示支气管及支气管管壁周围有大量炎症细胞浸润,支气管上皮细胞变性坏死,支气管黏膜水肿、增厚;给予浓度为12.5、25、50 mg/mL乙酰甲胆碱吸入后RI值明显上升(P<0.01);外周血EOS计数及BALF中EOS、淋巴细胞百分比明显升高(P<0.05);BALF中IL-4、IL-13、SP和CGRP表达水平明显升高(P<0.01);肺组织中TRPV1的表达增加。与模型组比较,...     

温针灸辅助治疗对膝关节炎患者的预后影响研究

目的:探讨温针灸辅助抗炎止痛药、软骨保护剂治疗膝关节炎的作用机制及其对患者预后的影响。方法:选取2015年10月至2017年5月广州中医药大学针灸康复临床医学院收治的膝骨关节炎患者126例,按随机数字表法分为观察组和对照组,每组63例。观察组采用"扶他林+维固力"药物联合温针灸治疗;对照组采用"扶他林+维固力"药物治疗。比较2组的疗效、关节滑液炎性反应因子水平、关节积液深度及滑膜厚度、WOMAC评分变化情况。结果:观察组的总有效率93.65%明显高于对照组的80.95%,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后的关节液中IL-1、TNF-α、MMP-3水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后的关节积液明显少于对照组、且滑膜厚度明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组治疗后的WOMAC总积分及各单项评分均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:温针灸能温通经络、行气活血、祛瘀止痛,临床辅助药物治疗膝关节炎可以减轻炎性反应,促进关节积液吸收,有助于改善膝关节功能。     

电温针治疗急性脑梗死患者运动功能障碍疗效观察

目的观察电温针治疗急性脑梗死(ACI)患者偏瘫下肢运动功能障碍的临床疗效。方法将90例急性脑梗死患者随机分为治疗组和对照组,每组45例。治疗组采用电温针治疗,对照组采用单纯温针治疗,分别观察两组治疗前后Barthel指数(MBI)、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、简化Fugl-Meyer评分(FMA)变化及临床疗效。结果两组治疗后MBI、NIHSS、FMA评分与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后MBI、NIHSS、FMA评分与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组临床疗效优于对照组(P<0.05)。结论电温针能够改善急性脑梗死患者运动功能。     

温针灸治疗风寒型急性期周围性面神经麻痹的临床疗效

〔摘 要〕 目的：观察温针灸治疗风寒型急性期周围性面神经麻痹的临床疗效。 方法：选取河源市中医院 2018 年 6 月至 2020 年 6 月期间收治的 120 例风寒型急性期周围性面神经麻痹患者,随机分为常规针刺组与温针灸组,各 60 例。常规针刺 组取患侧阳白、风池、下关、颧髎、地仓、迎香、太阳,双侧外关、翳风、合谷,予以常规针刺治疗;温针灸组取穴同常 规针刺组,在常规针刺治疗的基础上,予以外关、翳风、合谷温针灸治疗,两组治疗频次与周期相同。记录治疗前后两组 患者的面部残疾指数（FDI）评分,比较两组患者的临床疗效。 结果：治疗前两组患者的 FDI 评分比较,差异无统计学意义 （P ＞ 0.05）;治疗后温针灸组患者的 FDI 评分低于常规针刺组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。温针灸组患者治疗 总有效率为 98.31 %,高于常规针刺组的 93.22 %,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 结论：温针灸治疗风寒型急性期周 围性面神经麻痹疗效优于常规针刺。     

寒热体质大鼠TRPV1通道表达的研究

目的:研究寒、热体质大鼠大脑皮质辣椒素受体(TRPV1)通道表达及热痛阈的差异。方法:以两后掌表面皮肤温度为主要指标,结合自主活动及一般情况,从自然群体大鼠中筛选出常体、寒体及热体大鼠,通过光照热痛照射仪测定各组大鼠热痛甩尾潜伏期,比较不同体质大鼠的热痛阈差异。取大鼠大脑皮质,用实时荧光RT-PCR(SYBR GreenⅠ)检测TRPV1通道mRNA表达;蛋白质印迹法(Western Blot)检测TRPV1通道蛋白表达。结果:热体组大鼠热痛甩尾潜伏期时间显著低于常体组和寒体组(P0.01);热体组大鼠大脑皮质TRPV1通道mRNA相对表达量显著高于常体和寒体组(P0.01);热体组大鼠大脑皮质TRPV1通道蛋白相对表达量高于寒体组(P0.05)。结论:寒、热体质大鼠大脑皮质中TRPV1通道mRNA、蛋白表达及热痛阈均存在差异。