云树果实醋酸乙酯提取物对H22荷瘤小鼠抑瘤作用及机制研究

目的 研究云树果实醋酸乙酯提取物（EGCF）对H22实体移植瘤的抑制活性及作用机制。方法 皮下接种H22瘤株建立小鼠H22实体移植瘤模型,随机分为模型组、环磷酰胺（20 mg/kg,阳性对照,ip给药）组和EGCF高、中、低剂量（400、200、100 mg/kg,ig给药）组,连续给药10 d,另设一对照组。检测小鼠体质量变化、抑瘤率及脾脏指数,ELISA法测定血清中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF-β1）的含量,HE染色法观察肿瘤组织病理学改变,免疫组化法检测肿瘤组织p-STAT3及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果 与模型组比较,EGCF高、中、低剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低（P<0.01、0.001）,脾脏指数均无显著性差异;高、低剂量组小鼠血清中IL-6水平显著降低（P<0.05）,各剂量组TNF-α含量显著增加（P<0.05、0.01）;各剂量组瘤组织均出现较多红染、碎片状的干酪样坏死区域,且伴有大量空泡形成;各剂量组均显著减少肿瘤组织VEGF表达,高剂量组显著抑制STAT3磷酸化（P<0.05、0.01）。结论 EGCF能够抑制H22实体移植瘤生长,其机制可能与阻断STAT3相关信号通路有关。     

蓝萼乙素通过Akt/BAD通路对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探究蓝萼乙素通过蛋白激酶B（Akt）/B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关死亡启动因子（BAD）通路对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的影响和机制。方法 将48只SPF级雌性Balb/c-nu裸鼠随机分为模型、蓝萼乙素（56、112 mg/kg）和蓝萼乙素＋SC79（112 mg/kg＋10 mg/kg）组,每组12只。将HeLa细胞种植在裸鼠右大腿根部背侧皮下,建立皮下移植瘤模型,观察肿瘤体积、质量和一般情况的变化。苏木精–伊红（HE）染色观察肿瘤组织的组织学变化。TUNEL实验检测肿瘤组织细胞凋亡情况。Western blotting法检测移植瘤组织中p-Akt、Akt、p-BAD、BAD、磷酸酯酶与张力蛋白同源物（PTEN）蛋白表达水平。结果 与模型组相比,蓝萼乙素组第22、25、28天裸鼠肿瘤体积、肿瘤质量、肿瘤组织Akt、BAD磷酸化水平显著降低（P＜0.05）,肿瘤细胞凋亡率、肿瘤组织PTEN蛋白水平显著升高（P＜0.05）;SC79可减弱蓝萼乙素对宫颈癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。结论 蓝萼乙素对宫颈癌裸鼠移植瘤生长起到抑制作用,其作用机制与抑制Akt/BAD信号通路有关。     

去甲斑蝥素通过下调c-met基因逆转肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药的研究

目的 本研究通过去甲斑蝥素（NCTD）作用于肺癌顺铂（DDP）耐药细胞A549/DDP,探讨其对DDP耐药的逆转作用及其相关机制。方法 应用CCK-8法检测NCTD对A549和A549/DDP细胞活力的影响、DDP对A549细胞和A549/DDP的半数抑制浓度（IC₅₀）、NCTD联合不同浓度DDP对A549/DDP细胞DDP耐药性的影响;细胞克隆形成实验检测NCTD、DDP单给药及NCTD与DDP联合用药对A549/DDP细胞克隆形成率的影响;Western blotting法检测A549/DDP和A549细胞中c-met表达,以及NCTD、DDP单给药及NCTD与DDP联合用药对A549/DDP细胞内c-met蛋白表达的影响。结果 NCTD剂量相关性地抑制A549和A549/DDP细胞的活力,选择抑制率小于10%的最大NCTD浓度即10 μmol/L作为逆转浓度;DDP作用于A549/DDP和A549细胞的IC₅₀分别为15.11和5.04 μmol/L,差异有统计学意义（P<0.01）;A549/DDP细胞中c-met表达明显高于A549细胞;用NCTD（10 μmol/L）处理后,DDP对A549/DDP细胞的IC₅₀从15.11 μmol/L减少到8.06 μmol/L,差异显著（P<0.01）;与DDP单给药组比较,NCTD联合DDP作用明显降低A549/DDP细胞克隆形成率（P<0.01）;Westernblotting结果显示,NCTD联合DDP作用明显抑制顺铂耐药细胞A549/DDP细胞中c-met蛋白的表达,单用DDP或NCTD与对照组比较差异不明显。结论 NCTD与DDP联用可逆转A549/DDP细胞对DDP耐药,其机制可能与抑制c-met蛋白表达有关。     

β-榄香烯对人肺腺癌A549细胞株裸鼠移植瘤放疗增敏作用的研究★

目的 建立人肺腺癌A549细胞株裸鼠移植瘤模型，用增敏剂量的β-榄香烯联合放疗对移植瘤进行干预，探讨放疗增敏机制是否与抑制葡萄糖转运蛋白1（GLUT-1）表达有关。方法 采用细胞悬液接种法建立裸鼠移植瘤模型，将肿瘤体积达到75 mm³左右的20只裸鼠随机分为空白对照组（NS组）、β-榄香烯单药组（ELE组）、β-榄香烯联合放疗组（ELE+RAD组）和单纯放疗组（RAD组）。监测干预后各组裸鼠肿瘤体积的变化，获得各组裸鼠的肿瘤生长曲线。通过计算增敏系数，检测45 mg·kg^-1 β-榄香烯是否发挥增敏作用，采用Real-Time PCR、Western blotting及免疫组化染色检测各组移植瘤中GLUT-1的表达水平。结果 成功建立A549细胞株裸鼠移植瘤模型，依据各组移植瘤体积变化绘制生长曲线。测得增敏系数（EF）为2.44，提示β-榄香烯的剂量已达到增敏效果。与NS组相比，实验组移植瘤GLUT-1 mRNA及蛋白表达水平均显著降低（P<0.01）；ELE组与RAD组GLUT-1 mRNA及蛋白表达水平无显著差异（P>0.05）；与ELE组、RAD组相比，ELE+RAD组GLUT-1 mRNA及蛋白表达水平均显著降低（P<0.01）。免疫组化结果显示，与NS组比较，实验组GLUT-1的表达均被显著抑制（P<0.05）；其中ELE组和RAD组GLUT-1的表达抑制作用相对较弱，RAD组的抑制作用略强于ELE组，但两组差异无统计学意义（P>0.05）；而ELE+RAD组GLUT-1的表达抑制作用较强（P<0.05）。结论 增敏剂量的β-榄香烯与放疗联合应用可显著抑制裸鼠移植瘤中GLUT-1 mRNA及蛋白表达，明显增强放疗对肺癌裸鼠移植瘤的生长抑制效果，提示β-榄香烯可能通过抑制GLUT-1表达发挥放疗增敏作用。     

丹参酮ⅡA通过抑制PI3K/Akt通路逆转人喉癌细胞顺铂耐药的机制研究

目的 研究丹参酮Ⅱ_A对人喉癌细胞顺铂耐药的影响作用及机制。方法 以不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期人喉癌Hep-2细胞和人喉癌顺铂耐药细胞（Hep-2/DDP）48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算半数抑制浓度（IC₅₀）和耐药指数（RI）。以不同质量浓度（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L）丹参酮Ⅱ_A干预对数生长期Hep-2细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算IC₅₀;采用丹参酮Ⅱ_A（IC₅₀5.32 mg/L）＋不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期Hep-2/DDP细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,计算2种药物联用的IC₅₀和逆转倍数（RF）。取对数生长期Hep-2/DDP细胞,设置对照组、顺铂组、丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组、丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组。各组分别给药干预48 h后,采用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞增殖抑制率和凋亡率,Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）、激活型半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）、cleaved Caspase-9、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、p-PI3K、蛋白激酶B（Akt）蛋白表达情况。结果 顺铂对Hep-2细胞的IC₅₀为4.58 mg/L,对Hep-2/DDP细胞的IC₅₀为14.09 mg/L,RI为3.08;丹参酮Ⅱ_A对Hep-2细胞的IC₅₀为5.32 mg/L;丹参酮Ⅱ_A联合顺铂对Hep-2/DDP细胞的IC₅₀为3.34 mg/L,RF为4.22。与对照组比较,顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P<0.01）;与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P<0.05）;与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低（P<0.05）。与对照组相比,顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.05）。与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P<0.05）。与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著升高,Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著降低（P<0.05）。与对照组相比,顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化（p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt）水平显著降低（P<0.05）。与顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著降低（P<0.05）。与丹参酮Ⅱ_A＋顺铂组比较,丹参酮Ⅱ_A＋顺铂＋IGF-1组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著升高（P<0.05）。结论 丹参酮Ⅱ_A可逆转人喉癌细胞顺铂耐药,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路活化而促进喉癌细胞凋亡有关。     

樟芝多糖通过调节肠黏膜浸润的Th9及IL-9的表达调控小鼠慢性结肠炎的机制研究

目的 研究樟芝多糖调节结肠黏膜浸润的Th9及其细胞因子IL-9的表达,从而减轻小鼠慢性结肠炎的机制。方法 利用葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）构建小鼠慢性结肠炎模型,设置正常组、模型组、阳性对照组（抗IL-9抗体注射组）以及樟芝多糖组（20 mg·kg^-1）。DAI评分综合评价小鼠1个月内活动能力,测定小鼠1个月内的体质量变化,流式细胞术检测外周血、结肠黏膜固有层中单个核细胞中CD4+IL-9+T细胞的比例,ELISA法检测外周血及结肠黏膜中IL-9、TGF-β以及IL-4的表达,实时荧光定量PCR检测小鼠结肠黏膜中IL-9、TGF-β、smad3及IL-4的表达,HE染色观察小鼠结肠组织病理。结果 DSS可以引起小鼠慢性结肠炎性病变,DAI评分结果显示模型组小鼠活动能力明显下降,而樟芝多糖干预后DAI评分显著降低（P<0.05）,模型组小鼠外周血及结肠黏膜固有层中Th9比例相比正常组显著增高（P<0.05）,外周血及结肠黏膜中IL-9、TGF-β及IL-4的蛋白及mRNA表达也显著增高（P<0.05）。阳性对照组及樟芝多糖组小鼠外周血及结肠黏膜固有层中Th9比例相比模型组显著下调（P<0.05）,且外周血及结肠黏膜中IL-9,TGF-β以及IL-4的蛋白及mRNA表达也显著下调（P<0.05）,HE染色结肠病理情况明显好转。结论 樟芝多糖可以通过调节Th9比例和IL-9表达改善小鼠慢性结肠炎,其作用与免疫调节及抗炎作用有关。     

Mn3[Co (CN)6]2@SiO2对鼠C6脑胶质瘤模型3T MR成像及生长规律的研究

目的 利用Mn₃[Co（CN）₆]₂@SiO₂对大鼠C6脑胶质瘤模型进行3T MR成像,研究肿瘤的生长规律。方法 收集对数生长期鼠C6胶质瘤细胞,建立鼠C6脑胶质瘤模型,于细胞接种后第7 d行MR扫描,然后鼠尾静脉注射0.5 mL Mn₃[Co（CN）₆]₂@SiO₂,于注射后5 min、24 h再行MR扫描,扫描结束后取出肿瘤组织行HE染色。随机抽取脑内成功接种C6胶质瘤细胞的荷瘤鼠10只,接种后第 7、9、11、13、15、17、19天行MR扫描,测量肿瘤体积,绘制出肿瘤生长曲线。结果 成功建立了鼠C6脑胶质瘤模型,并且鼠尾静脉注射Mn₃[Co（CN）₆]₂@SiO₂后5 min、24 h肿瘤均强化,24 h肿瘤强化较前明显;MRI检测出胶质瘤大小与时间呈正相关关系（r_s=0.9944,P=0.000）。结论 应用Mn₃[Co（CN）₆]₂@SiO₂对鼠C6脑胶质瘤活体示踪MR成像,可以反映肿瘤的生物学特性,适用于肿瘤生长规律的观测。     

人参皂苷Rb1调控MAPK通路改善小鼠脑缺血再灌注诱导血脑屏障损伤的作用研究

目的 探讨人参皂苷Rb₁对小鼠脑缺血再灌注诱导的血脑屏障（BBB）损伤的作用及机制。方法 将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组和人参皂苷Rb₁低、中、高剂量（5、10、20 mg·kg^-1）组,采用线栓法栓塞颈内动脉1 h后复灌建立脑缺血再灌注损伤模型,假手术组不栓塞,其余操作同模型小鼠。缺血1 h后ip相应药物,于再灌注24 h后处死取材。采用伊文思蓝染色法检测各组小鼠BBB损伤程度;采用实时荧光定量PCR （qRT-PCR）法检测各组小鼠脑组织中炎症因子白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及紧密连接蛋白1（ZO-1）、闭合蛋白（Occludin）的mRNA表达水平;同时采用Western blotting检测各组小鼠脑组织中ZO-1、Occludin蛋白,金属基质蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）以及MAPK通路相关蛋白磷酸化的表达水平。结果 与模型组相比,人参皂苷Rb₁可显著减少脑缺血再灌注小鼠脑组织中伊文思蓝的渗漏量（P<0.05）,显著降低脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA转录水平（P<0.05、0.01）;显著上调ZO-1和Occludin的mRNA转录和蛋白表达水平（P<0.05、0.01）;显著降低MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平（P<0.05、0.01）;显著抑制MAPK通路p38、JNK及ERK磷酸化蛋白的表达（P<0.05、0.01）。结论 人参皂苷Rb₁对小鼠脑缺血再灌注诱导的BBB损伤具有一定的改善作用,其作用机制可能与抑制MAPK信号通路激活,减少MMP-2、MMP-9蛋白的表达,进而减轻对ZO-1、Occludin等紧密连接蛋白的降解有关。     

人参皂苷Rg1对移植性白血病模型小鼠的作用

目的 研究人参皂苷Rg₁对移植性白血病模型小鼠的作用。方法 采用免疫磁性分选法（MACS）从K562细胞中分离、纯化CD34⁺CD38^-人白血病干细胞（CD34⁺CD38^- LSCs）,流式细胞术检测分选细胞纯度,台盼蓝染色测定分选细胞活性。将6～8周雌性NOD/SCID小鼠27只随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg₁（200 mg/kg）组,每组9只,模型组和人参皂苷Rg₁组通过尾iv移植CD34⁺CD38^- LSCs构建白血病小鼠模型,ip给药30 d。观察各组小鼠一般情况及腹部包块变化;全自动血常规检测仪检测外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板水平;免疫组化法检测肝、脾脏病理学变化;流式细胞仪分析骨髓细胞周期;CCK-8法检测各组骨髓细胞的增殖能力;细胞免疫荧光染色鉴定骨髓细胞CD34阳性表达情况。结果 分选前K562细胞中CD34⁺CD38^- LSCs细胞群百分比为（9.64±1.14）%,分选后CD34⁺CD38^- LSCs纯度可达（96.45±1.63）%;台盼蓝染色显示分选后细胞活性为（95.26±2.16）%。与对照组比较,模型组小鼠腹部包块明显,生存情况较差,体质量显著下降（P<0.05）;白细胞数显著增高,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著下降（P<0.05）;肝、脾脏结构被破坏,有大量白细胞浸润;骨髓细胞周期检测显示G₀/G₁期比例显著下降（P<0.05）,S期比例显著升高（P<0.05）;骨髓细胞增殖活力显著升高（P<0.05）。与模型组比较,人参皂苷Rg₁组小鼠腹部包块明显减小,生存情况好转,体质量显著增加（P<0.05）;白细胞总数显著下降（P<0.05）,红细胞数、血红蛋白水平、血小板数均显著升高（P<0.05）;肝、脾脏结构明显恢复;骨髓细胞G₀/G₁期比例显著升高（P<0.05）,G₂/M期和S期比例显著下降（P<0.05）。细胞免疫荧光检测显示,模型组和人参皂苷Rg₁组中小鼠的骨髓细胞中存在大量的人源白血病细胞。结论 NOD/SCID小鼠尾iv移植CD34⁺CD38^- LSCs可成功构建急性髓系白血病小鼠模型,人参皂苷Rg₁能有效缓解NOD/SCID小鼠的白血病症状。     

臭牡丹提取物对H22荷瘤小鼠体内抑瘤作用及对相关蛋白表达的影响

目的 研究臭牡丹提取物对H22实体移植瘤的抑制作用及与B淋巴细胞瘤/白血病-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达的相关性。方法 皮下接种H22瘤株建立小鼠H22实体移植瘤模型。60只荷瘤鼠随机分为模型组、5-氟尿嘧啶（5-Fu）组和臭牡丹高、中、低剂量（2.18、1.09、0.55 g/kg）组,每组12只,各组分别给予生理盐水、5-Fu（25 mg/kg,1次/d）及不同浓度的臭牡丹提取物干预。连续给药14 d后处死,检测小鼠体质量变化、抑瘤率及脾脏和胸腺指数;Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,臭牡丹高、中剂量组小鼠的肿瘤质量均显著降低（P<0.01）,胸腺和脾脏指数显著增加（P<0.05）;同时Bax蛋白的表达水平显著上调,Bcl-2蛋白的表达显著降低（P<0.01）。结论 臭牡丹提取物能够抑制H22实体移植瘤生长,其机制可能与上调Bax/Bcl-2比值和免疫调节有关。     

芦荟多糖增强顺铂对肺腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 观察芦荟多糖（Aloe polysaccharide,AP）和顺铂（DDP）合用对人肺腺癌A549细胞裸小鼠移植瘤生长的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法 采用A549细胞株建立人肺腺癌裸鼠模型,将35只,♀,成瘤裸小鼠随机分为7组：对照组（生理盐水0.2 mL）;DDP低剂量组（1.0 mg·kg^-1）;DDP高剂量组（5 mg·kg^-1）;AP低剂量组（10 mg·kg^-1）;AP高剂量组（30 mg·kg^-1）;DDP低剂量组＋AP低剂量组;DDP低剂量组＋AP高剂量组,隔天腹腔注射给药,共8次。于最后1次给药后48 h处死各组小鼠,收集瘤标本行光镜观察,免疫组化检测p53和bcl-2蛋白表达情况。结果 各实验组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤质量明显低于对照组（P〈0.01）。低、高剂量AP联合用药组较低剂量DDP组抑瘤作用明显增强（P〈0.05）,其瘤重抑制率分别为49.34%和82.61%。高剂量AP组与对照组比较,p53和bcl-2的表达均下调,差异具有统计学意义（P〈0.05）,联合用药组该调节作用进一步增强。高剂量DDP组出现不良反应,其余各组无明显不良反应。结论 AP能够增强DDP对人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用,其作用机制可能与AP抑制p53和bcl-2的表达有关。     

黄芪扶正汤联合顺铂对LewiS肺癌荷瘤小鼠的治疗作用

目的观察黄芪扶正汤与顺铂联合使用后对Lewis肺癌小鼠的治疗作用。为其在临床上的进一步应用提供实验依据。方法将实验小鼠随机分为下列五组:空白组、模型组、黄芪扶正汤组、顺铂组、化疗+中药组。观察小鼠生活状态,体质量变化等,做详细记录。取血后处死小鼠,取实体瘤称重并计算抑瘤率、肺转移抑制率,评价黄芪扶正汤的抗肿瘤的作用。结果中药组处理后的Lewis肺癌小鼠肿瘤明显减轻,肿瘤肺转移数目明显减少,并且对小鼠的白细胞和骨髓有核细胞几乎没有影响。结论黄芪扶正汤可通过减低化疗药物的毒性和提高化疗药物的疗效来抑制肿瘤的生长和转移。     

顺铂联合8-硝基白杨素对人卵巢癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的 研究顺铂联合8-硝基白杨素对人卵巢癌COC1细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法 建立人卵巢癌COC1细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组,每组5只：生理盐水组、8-硝基白杨素组、顺铂组、8-硝基白杨素+顺铂组。观察各组裸鼠移植瘤体积、重量及裸鼠体质量的变化;裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数的变化;FCM测定瘤组织细胞凋亡率;Western blot分析瘤组织细胞凋亡的可能分子生物学机制。结果 与顺铂组和8-硝基白杨素组相比,顺铂联合8-硝基白杨素联合作用COC1细胞裸鼠移植瘤后,移植瘤的体积、移植瘤的重量均明显降低(P<0.05);与顺铂组相比,顺铂联合8-硝基白杨素联合组裸鼠体质量无明显差异(P>0.05),裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数无明显差异(P>0.05);顺铂和8-硝基白杨素联合作用COC1细胞16 d后,COC1细胞发生凋亡,同时bcl-2蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达增高。结论 顺铂联合8-硝基白杨素通过降低bcl-2蛋白表达,活化caspase-3蛋白表达来抑制人卵巢癌COC1细胞裸鼠移植瘤生长。     

对乙酰氨基酚对Lewis肺癌荷瘤模型小鼠上皮屏障功能的影响

目的考察对乙酰氨基酚对Lewis肺癌荷瘤小鼠上皮屏障功能的影响,为临床合理用药提供参考。方法 C57BL/6小鼠的右腋处皮下接种2×10~6个Lewis肺癌细胞,通过小鼠一般状态和肺组织表面转移灶考察对乙酰氨基酚对肿瘤肺转移的影响。利用病理组织形态、HE染色、免疫组化等方法检测肿瘤转移情况,同时采用qRT-PCR法检测屏障相关蛋白Claudin5、Occludin、ZO-1、DSG2 mRNA表达水平,探讨对乙酰氨基酚影响上皮屏障的潜在机制。结果与对照组和模型组比较,大体形态观察对乙酰氨基酚组小鼠肺组织出现了明显的肿瘤转移灶,病理及免疫组织化学染色结果进一步显示对乙酰氨基酚组肺组织转移灶明显增加,qRT-PCR结果显示对乙酰氨基酚组小鼠肺组织Claudin5、Occludin、ZO-1、以及DSG2等屏障相关蛋白m RNA表达均显著降低。结论对乙酰氨基酚可以影响上皮屏障相关蛋白表达诱导上皮屏障功能障碍,并可能继而有利于肿瘤转移。     

消岩汤对环磷酰胺诱导Lewis肺癌小鼠骨髓抑制的造血微环境的改善研究

目的观察消岩汤对环磷酰胺诱导Lewis肺癌小鼠造血微环境的影响,探究消岩汤对Lewis肺癌小鼠骨髓抑制的造血微环境的改善作用及其作用机制。方法 SPF级Lewis肺癌小鼠随机分为对照组、模型组、重组人粒细胞刺激因子组和消岩汤组,每组各10只。对照组和模型组ig 0.02 mL/g生理盐水。人粒细胞刺激因子组在造模后sc重组人粒细胞刺激因子注射液15 ng/g,1次/d,连续给药7 d。消岩汤组在造模后ig 2.9 g/mL消岩汤,2次/d,0.2 mL/次,连续给药7 d。采用流式细胞仪分析细胞周期,通过细胞培养技术检测基质细胞分化能力,采用QRT-PCR法检测骨髓细胞Bcl-2和Bax mRNA的基因表达。结果与模型组比较,消岩汤能促进骨髓细胞从G_0/G_1期向S、G2/M期转化(P0.05);能一定程度上缓解化疗导致的成纤维细胞集落生成单位(CFU-F)形成减少(P0.05);能上调抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达((P0.05)。结论消岩汤能够促进骨髓细胞向增殖周期转化,上调Bcl-2 mRNA表达,改善造血微环境,从而缓解Lewis肺癌骨髓抑制对小鼠造血功能的影响。     

黄芪扶正汤抗小鼠Lewis肺癌机制的实验研究

目的探讨黄芪扶正汤在提高Lewis肺癌小鼠免疫力的最佳剂量时是否具有抑制HIF-la、VEGF表达的作用,为黄芪扶正汤在临床上的进一步应用提供实验依据。方法建立肺癌小鼠动物模型,随机分为4组：模型组、中药组、顺铂组、联合治疗组,每组7只。皮下接种后第7天,同时开始给药,顺铂组2mg．Kg-1,腹腔注射,每2日一次,共给药8次;中药组每日灌服黄芪扶正汤溶液10mL．Kg-1．d-1,共15天;联合治疗组两药用法同前;模型组给予等量的生理盐水灌胃和腹腔注射,给药第15天用颈椎脱臼法处死小鼠,取瘤体称重并计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤组织中HIF-10a、VEGF表达。结果中药组瘤重较模型对照组减轻（P〈O．05）;联合治疗组的瘤重低于顺铂组（P〈0．05）;联合治疗组的抑瘤率高于顺铂组、中药组（P〈0．05）。免疫组化结果显示各治疗组HIF-1a、VEGF表达均较模型对照组减低（P〈0．05）。结论黄芪扶正汤可抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,其机制可能与抑制肿瘤组织HIF-la、VEGF表达有关。     

注射用黄芪多糖对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP耐药逆转作用研究

目的 探讨注射用黄芪多糖药物血清在体外对耐顺铂（DDP）人肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用。方法 通过建立小鼠肿瘤模型,运用血清药理学方法,以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/DDP为研究对象,采用细胞毒实验（MTT）方法,探讨注射用黄芪多糖对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP的耐药逆转作用。结果 注射用黄芪多糖药物血清高、中、低剂量组分别与DDP合用时对A549/DDP细胞的耐药逆转倍数分别为1.24、1.41、1.34;且中、高剂量组与阳性对照DDP组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 注射用黄芪多糖能明显增加A549/DDP耐药细胞对DDP的敏感性,提高细胞死亡率,具有耐药逆转作用。     

Accumulation of Protein-Loaded Long-Circulating Micelles and Liposomes in Subcutaneous Lewis Lung Carcinoma in Mice

Purpose. The purpose of our work was to compare the biodistribution and tumor accumulation of a liposome- or micelle-incorporated protein in mice bearing subcutaneously-established Lewis lung carcinoma. Methods. A model protein, soybean trypsin inhibitor (STI) was modified with a hydrophobic residue of N-glutaryl-phosphatidyl-ethanolamine (NGPE) and incorporated into both polyethyleneglycol(MW 5000)-distearoyl phosphatidyl ethanolamine (PEG-DSPE) micelles (< 20 nm) and PEG-DSPE-modified long-circulating liposomes (ca. 100 nm). The protein was labeled with ¹¹¹In via protein-attached diethylene triamine pentaacetic acid (DTPA), and samples of STI-containing liposomes or micelles were injected via the tail vein into mice bearing subcutaneously-established Lewis lung carcinoma. At appropriate time points, mice were sacrified and the radioactivity accumulated in the tumor and main organs was determined. Results. STI incorporated into PEG-lipid micelles accumulates in sub-cutaneously established Lewis lung carcinoma in mice better than the same protein anchored in long-circulating PEG-liposomes. Conclusions. Small-sized long-circulating delivery systems, such as PEG-lipid micelles, are more efficient in the delivery of protein to Lewis lung carcinoma than larger long-circulating liposomes.     

蠲毒消瘤饮抑制结肠癌细胞的作用机理

目的 探讨中药蠲毒消瘤饮对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 以人结肠癌HCT116细胞为模型,分别使用平板克隆形成实验,对细胞的克隆形成能力进行增殖检测;运用Transwell 肿瘤细胞侵袭实验和细胞划痕运动实验,分别检测中药蠲毒消瘤饮对HCT116细胞侵袭和迁移的影响;采用Western blot实验检测蠲毒消瘤饮对VEGF/MEK/Ras/Raf 信号通路上关键蛋白表达。结果 中药蠲毒消瘤饮作用后,HCT116细胞增殖、迁移和侵袭受到显著抑制,细胞内VEGF/MEK/Ras/Raf蛋白表达水平显著降低。结论 中药蠲毒消瘤饮在体内体外具有抑制结肠癌细胞生长的作用。