紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移的影响

目的探讨紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移的影响。方法在DMEM培养液(含15%胎牛血清)中加入细胞,在37℃、5%CO2培养箱中培养,到80%左右融合后分为试验组、空白对照组(只含DMEM培养基),试验组又分为3μmol/L紫杉醇组(紫杉醇组)、30μmol/L顺铂组(顺铂组)、3μmol/L紫杉醇+30μmol/L顺铂联合用药组(联合用药组),MTT法检测细胞相对活力,流式细胞数检测细胞周期,细胞迁移试验,细胞侵袭试验,Western blot法检测相关蛋白表达,然后统计分析各组细胞活力、细胞周期、细胞迁移、侵袭能力、AKT信号通路、细胞周期相关蛋白、细胞MMP表达。结果联合用药组细胞活力、细胞周期S、G2、细胞迁移、细胞侵袭能力均显著低于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05),细胞周期G1显著高于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05)。顺铂组、紫杉醇组细胞活力、细胞周期S、G2、细胞迁移、细胞侵袭能力均显著低于空白对照组(P0.05),细胞周期G1均显著高于空白对照组(P0.05)。联合用药组PTEN/GADPH、P27/GADPH表达均显著高于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05),P-AKT/AKT、CyclinD1/GADPH、MMP-2/GADPH、MMP-9/GADPH表达均显著低于顺铂组、紫杉醇组、空白对照组(P0.05)。顺铂组、紫杉醇组PTEN/GADPH、P27/GADPH表达均显著高于空白对照组(P0.05),P-AKT/AKT、CyclinD1/GADPH、MMP-2/GADPH、MMP-9/GADPH表达均显著低于空白对照组(P0.05)。结论紫杉醇联合顺铂能够显著抑制甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移。     

恩度联合紫杉醇和顺铂治疗晚期食管鳞癌的临床观察

目的研究重组人血管内皮抑制素注射液(恩度)联合紫杉醇和顺铂治疗晚期食管鳞癌的疗效和毒副反应.方法20例晚期食管鳞癌患者中,I I期病例3例,IV期病例17例,平均年龄55.8岁.紫杉醇155 mg/m2,3 h,d 1;顺铂40 mg/m2,d 1-3;恩度15 mg/次,1次/d,d1-14;21d为一个周期.结果20例患者完全缓解2例(10.5%),部分缓解10例(52.6%),有效率为63.1%,中位疾病进展时间为5个月,中位生存时间10.5个月,1年生存率为34.8%.可评价毒副反应20例,其主要的毒副反应为脱发,有4例患者出现III-IV度中性粒细胞降低,1例患者发生重度肝功能异常.结论恩度联合紫杉醇和顺铂治疗晚期食管鳞癌疗效优于单用化疗药物,可以作为晚期食管鳞癌的治疗方案之一.     

贝伐珠单抗联合紫杉醇脂质体方案对晚期胃癌患者血清基质金属蛋白酶2和9及预后的影响

目的分析贝伐珠单抗联合紫杉醇脂质体方案对晚期胃癌患者血清基质金属蛋白酶(MMP)-2、9及预后的影响。方法选取2012年1月至2014年5月第三军医大学附属新桥医院收治的晚期胃癌患者96例,采用随机数字法将其分为观察组(50例)和对照组(46例)。对照组患者给予替吉奥胶囊口服,80 mg/(m~2·d),第1~28天;注射用紫杉醇脂质体静脉滴注,135 mg/m~2,第1、8、15、22天;观察组在对照组基础上给予75 mg/kg贝伐珠单抗静脉滴注,第1、22天,6周为1个治疗周期,两个治疗周期后进行疗效评价。比较两组患者近期疗效、生活质量、毒性反应、血清MMP-2、MMP-9水平以及生存情况。结果治疗前两组患者卡氏评分(KPS)差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组患者KPS评分均较治疗前显著升高(P<0.05),且治疗后观察组KPS评分显著高于对照组(P<0.05);两组患者化疗毒性反应(白细胞减少、腹泻、肝肾功能异常、恶心呕吐、血小板减少、脱发)比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组血清MMP-2、MMP-9均较治疗前显著降低(P<0.05),且观察组治疗后血清MMP-2、MMP-9均显著低于对照组[(54±9)μg/L比(78±13)μg/L,(218±51)μg/L比(310±95)μg/L,P<0.05];观察组中位生存时间为12.91个月,对照组为9.59个月,观察组中位生存时间显著长于对照组(P<0.05)。结论贝伐珠单抗联合紫杉醇脂质体方案治疗晚期胃癌能有效提高患者的近期疗效和生存质量,且不增加化疗毒性反应,同时能有效抑制MMP-2、MMP-9表达,从而抑制肿瘤细胞的侵袭和转移,有效改善患者预后。     

miR-134靶向基质金属蛋白酶1对喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

目的 探讨miR-134靶向基质金属蛋白酶1(MMP1)对喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.方法 双荧光素酶报告基因实验验证MMP1基因是否为miR-134的靶向基因.转染实验分为miR-134 mimics组、miR-134 antagomir组和空白对照组,采用CCK-8、流式细胞术和Transwell法检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移情况,Western blot检测过表达或降低miR-134对MMP1蛋白表达的影响.结果 双荧光素酶报告基因结果显示miR-134能和MMP13'-UTR端结合且明显抑制荧光素酶活性.miR-134 mimics组细胞在转染后24 h的细胞活力明显低于空白对照组(P<0.01),而miR-134 antagomir组明显高于空白对照组(P<0.05).与空白对照组凋亡率[(4.32±0.36)％]比较,miR-134 mimics组[(12.02±0.45)％]明显增加(P<0.01),而miR-134 antagomir组[(2.31±0.26)％]明显降低(P<0.05).与空白对照组比较,miR-134 mimics组的细胞侵袭和迁移能力明显减弱、MMP1蛋白表达明显降低(P<0.05),miR-134 antagomir组的细胞侵袭和迁移能力明显增强、MMP1蛋白表达明显升高(P<0.05).结论 miR-134在转录后水平调控MMP 1蛋白表达来影响喉癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移.     

低相对分子质量肝素联合紫杉醇对鼻咽癌细胞侵袭和迁移能力的影响

目的探讨低相对分子质量肝素（LMWH）联合紫杉醇对鼻咽癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其相关的分子机制。方法
采用MTT法检测药物对鼻咽癌细胞CNE1、CNE2的增殖抑制效应;细胞划痕实验、Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能
力;Western blot检测基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1 （TIMP-1）的表达;ELISA法检测细胞培养液
中乙酰肝素酶（HPA）的表达。结果MTT结果显示,不同浓度LMWH和紫杉醇对鼻咽癌细胞CNE1、CNE2均具有显著的增殖
抑制作用。200 U·ml^-1LMWH与0.1μmol·L^-1紫杉醇联合作用于CNE1、CNE2细胞24 h的迁移抑制率分别为66.70%、70.53%,
较单用紫杉醇的迁移抑制率明显提高。同时LMWH与紫杉醇联合作用于CNE1、CNE2细胞的侵袭抑制作用也明显高于单用
紫杉醇的作用。LMWH与紫杉醇均可下调MMP-9和HPA的表达,且合用时作用更加明显。结论LMWH具有增强紫杉醇抑
制鼻咽癌细胞侵袭和迁移的作用,其机制可能与下调MMP-9和HPA的表达有关。     

茶碱对哮喘患者诱导痰基质金属蛋白酶及金属蛋白酶抑制剂水平的影响

目的 观察茶碱治疗前后哮喘患者诱导痰基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的变化,探讨MMPs/TIMPs比例失衡与哮喘的关系以及茶碱的作用机制.方法 选择支气管哮喘患者60例,随机分为茶碱治疗组和对照组,治疗组早餐及睡前各服缓释茶碱100 mg,吸入沙丁胺醇200 μg,每日3次;对照组吸入沙丁胺醇200 μg,每日3次,两组疗程均为8周.以诱导痰法收集两组患者治疗前后痰液标本,采用ELISA法测定痰中MMP-9、TIMP-1含量.结果 两组患者治疗前后痰中MMP-9水平改变无统计学意义.茶碱治疗组治疗前TIMP-1为(654.10±21.50) ng/mL,治疗2月后为(986.50±27.40) ng/mL,与治疗前和对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).茶碱治疗组的MMP-9/TIMP-1的比例在治疗2月后即明显下降,为0.67±0.08,与治疗前和对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).茶碱治疗组的有效率为73.3%,对照组为46.7%,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MMPs/TIMPs失调在哮喘发病中具有重要作用,茶碱对哮喘患者痰中MMP-9无明显影响,但能增加TIMP-1水平,此可能为茶碱治疗哮喘的作用机制之一.     

毛蕊异黄酮对人黑色素瘤细胞A375增殖、迁移及侵袭的影响

目的：研究毛蕊异黄酮对人黑色素瘤细胞A375增殖、迁移及侵袭的影响.方法：以人黑色素瘤细胞A375为研究对象,MTT法检测不同浓度的毛蕊异黄酮对A375细胞活性的影响,划痕实验检测A375细胞的迁移,Transwell小室检测A375细胞的侵袭作用;qPCR检测A375细胞中基质金属蛋白酶2（MMP-2）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达水平.结果：毛蕊异黄酮在6.25 ～ 100 μmol/L浓度内不能抑制A375细胞的增殖,划痕实验及Transwell检测结果显示毛蕊异黄酮可显著抑制A375细胞的迁移及侵袭（P＜0.01）,qPCR结果显示毛蕊异黄酮能抑制A375细胞MMP-2及MMP-9的表达.结论：毛蕊异黄酮在小于100 μmol/L浓度时抑制A375细胞的迁移及侵袭,其机制可能与抑制MMP-2及MMP-9表达有关.     

基质金属蛋白酶-9对骨肉瘤增殖、侵袭及迁移能力的影响及其临床意义

目的:通过研究骨肉瘤组织中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)的表达情况,及沉默MMP-9后对骨肉瘤细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响,阐明MMP-9对骨肉瘤进展的影响及其临床意义。方法:通过定量PCR分别检测5例原发性骨肉瘤及5例正常骨组织标本中MMP家族的表达情况;通过慢病毒载体介导shRNA-MMP-9转染至骨肉瘤细胞Saos2中,将实验分为空白对照组(磷酸盐缓冲液,PBS)、阴性对照组(转染shRNA-NC序列)及转染组(转染shRNA-MMP-9序列),检测MMP-9沉默后Saos2细胞增殖、侵袭及迁移能力的变化;根据MMP-9在患者骨肉瘤标本中的表达水平,对64例随访病例分组,进行生存分析。结果:筛查MMP家族基因,检测发现骨肉瘤组织中MMP-9的表达水平明显高于正常骨组织(t=12.040,P=0.000)。骨肉瘤细胞Saos2转染shRNA-MMP-9后,转染组细胞MMP-9 mRNA及蛋白表达水平均明显下降,提示在Saos2细胞中成功沉默MMP-9。在细胞增殖、侵袭及划痕实验中,空白对照组与阴性对照组均无统计学差异,但转染...     

紫杉醇与mTOR抑制剂雷帕霉素联合抑制非小细胞肺癌增殖

目的研究紫杉醇对非小细胞肺癌A549细胞mTOR信号通路的影响,以及紫杉醇与mTOR抑制剂雷帕霉素的联合作用。方法在紫杉醇和／或雷帕霉素处理细胞后,采用流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡;免疫印迹技术分析信号分子表达与磷酸化;采用细胞计数法检测细胞增殖。结果（5×10^-6）g/L紫杉醇作用24h可诱导（31．26±2．52）％细胞发生凋亡;但随紫杉醇浓度增加,细胞凋亡率下降而G2／M期阻滞效应增加。紫杉醇对mTOR分子的表达无影响,但与其结合的raptor和rictor,以及抗凋亡分子survivin表达随浓度增加而增加,mTOR下游分子S6K1磷酸化也被上调。雷帕霉素与紫杉醇同时或在紫杉醇作用后加入培养体系可增强其对肿瘤增殖的抑制作用,并促进紫杉醇诱导细胞凋亡。结论紫杉醇对A549细胞mTOR信号通路的活化有上调作用,mTOR抑制剂与雷帕霉素可协同抑制非小细胞肺癌增殖。     

铁转运蛋白影响非小细胞肺癌增殖迁移的研究

目的 观察铁转运蛋白(FPN)在非小细胞肺癌(NSCLC)中差异表达及探讨FPN作用NSCLC细胞迁移与增殖的机制.方法 免疫组化(IHC)检测肺癌标本(60例)及正常肺组织标本(20例)FPN表达水平.蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞系中FPN表达水平.分别构建FPN过表达体系(PCDH-FPN-F)和敲低体系(shFPN),通过West-emn blot和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证.划痕实验检测FPN对肺癌细胞迁移的影响.生长曲线法检测FPN对肺癌细胞增殖能力的影响.结果 相比于正常肺组织,肺癌组织标本中FPN表达显著降低(P = 0.000);相比于正常肺细胞系,肺癌细胞系中FPN表达量显著降低(P＜0.000 1).与对照组比较,过表达组FPN表达量显著升高(Western blot:P＜0.01,qRT-PCR:P＜0.000 1);与对照组比较,敲低组 FPN 表达量显著降低(Western blot:P＜0.001,qRT-PCR:P＜0.001).过表达FPN后,细胞划痕间伤口愈合距离在18 h和36 h明显低于对照组;细胞数目在第2天和第4天明显低于对照组.而敲低FPN后,细胞划痕间伤口愈合距离在18 h和36 h明显高于对照组;细胞数目在第2天和第4天明显高于对照组.结论 低表达FPN后,肺癌细胞迁移及增殖能力增强,这可能是肺癌中FPN差异表达的原因.     

长链非编码RNA PVT1对非小细胞肺癌细胞增殖和迁移能力的影响及其机制研究

目的 通过上调或者下调PVT1的表达，分析探究长链非编码RNA PVT1在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和迁移能力中的作用及机制，并在此基础上运用RNA-Seq分析PVT1的靶向基因，说明其作用机理。 方法 ①通过TCGA数据库(The Cancer Genome Atlas)分析NSCLC细胞中PVT1的表达与NSCLC患者生存时间之间的关系；②探究PVT1上调或下调对NSCLC细胞增殖及迁移能力的影响；③运用RNA-seq技术探究PVT1的下游靶基因，然后运用siRNA沉默该基因，探究此基因对NSCLC细胞增殖和迁移能力。 结果 ①PVT1的高表达与肺癌患者存活时间减少有显著关系(P<0.001)；②PVT1高表达可以显著促进肺癌患者肿块体积的增大，并且与肿瘤分期和淋巴结转移程度密切相关(均P<0.05)；③过表达PVT1可以促进NSCLC细胞的增殖及迁移；④用Si-RNA下调PVT1可以抑制NSCLC细胞的增殖及迁移；⑤PVT1下调会使LATS2的表达水平显著升高。 结论 PVT1通过表观调控LATS2促进NSCLC细胞增殖和迁移能力。      

参麦注射液对NSCLC靶向耐药患者靶向联合化疗期间免疫细胞、细胞因子及肿瘤标记物的影响

摘要 目的：分析参麦注射液对非小细胞肺癌（NSCLC）靶向耐药患者靶向联合化疗期间免疫细胞、细胞因子及肿瘤标记物的影响。方法：选取2020年1月~2020年7月在我院进行治疗的NSCLC患者50例,按照随机数字表法随机分为研究组与对照组,每组患者25例。对照组给予吉西他滨+顺铂治疗,研究组在对照组基础上给予参麦注射液治疗,以3周为一疗程,连续治疗6周。比较两组患者基本资料、临床疗效、免疫指标、细胞因子及肿瘤标记物变化,比较两组毒副反应发生情况。结果：与对照组对比,研究组患者疾病有效率及控制率均有所升高,但无明显差异（P>0.05）。与治疗前对比,治疗后,两组患者水平CD8+明显降低,且研究组明显低于对照组（P<0.05）;NK、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显升高,且研究组明显高于对照组（P<0.05）。与治疗前对比,治疗后,两组患者IL-10、IL-6及CEA、CA125、CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平均明显降低,且研究组明显低于对照组;IL-2、TNF-、IFN-γ明显升高,且研究组明显高于对照组（P<0.05）。与对照组对比,研究组患者毒副反应发生率明显降低（P<0.05）。结论：参麦注射液联合化疗能够明显提高患者的免疫功能,有效控制肿瘤的发展,降低毒副反应的发生。     

KRAS突变对非小细胞肺癌增殖的影响及其机制

目的 观察在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中KRAS突变对炎症因子IL-6和NADPH氧化酶4(NOX4)表达的影响,并研究由KRAS突变引起的IL-6分泌和NOX4的表达对NSCLC细胞增殖能力的影响.方法 分别通过质粒pBabe puro-KRASG12V和siRNA转染细胞,制备KRASG12V过表达的Calu3细胞株和KRASG12V干扰的H411细胞株,采用Western blotting法对NOX4的表达进行检测;采用ELISA法检测IL-6的分泌水平;采用MTT法检测Calu3细胞的增殖能力.结果 与对照组相比,经质粒pBabe puro-KRASG12V转染后,Calu3细胞中NOX4的蛋白表达水平和IL-6的分泌水平均显著升高;经siRNA转染干扰KRASG12V后,H411细胞中NOX4表达和IL-6的分泌量均显著降低;在KRASG12V过表达的基础上,在Calu3细胞中加入IL-6的中和抗体Sihuximab可降低NOX4的表达,而干扰NOX4后可减少IL-6的分泌;在过表达KRASG12V的Calu3细胞中,分别干扰NOX4的表达或加入Siltuximab,均可显著抑制细胞的增殖能力.结论 在NSCLC细胞中,KRAS的突变能引起IL-6的分泌和NOX4的表达,并通过IL-6和NOX4的相互激活共同促进癌细胞的恶性增殖.     

microRNA-335对人非小细胞肺癌细胞迁移?侵袭及增殖能力的影响

目的:研究 microRNA-335(miR-335)在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞迁移?侵袭能力与增殖能力的影响?方法:采用荧光实时定量PCR检测miR-335在12对非小细胞肺癌与癌旁正常组织中的表达差异,以及miR-335在非小细胞肺癌SPCA-1细胞与肺正常上皮细胞16HBE中的表达差异;应用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335下调SPCA-1细胞中miR-335的表达,并通过荧光实时定量PCR验证;划痕实验检测 miR-335对SPCA-1细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测miR-335对SPCA-1细胞侵袭能力的影响;MTT实验及克隆形成实验检测miR-335对SPCA-1细胞增殖能力的影响?结果:与癌旁正常组织比较,miR-335在非小细胞肺癌组织中显著高表达(P < 0.05);与16HBE细胞比较,miR-335在SPCA-1细胞中显著高表达(P < 0.05);利用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335入SPCA-1细胞24 h时miR-335表达明显减弱(P < 0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞迁移和侵袭能力有显著的抑制作用,抑制率分别为(42.8 ± 2.7)%(P < 0.01)及(73.25 ± 4.4)%(P < 0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响?结论:miR-335在非小细胞肺癌中呈高表达,miR-335低表达能显著抑制SPCA-1细胞的迁移和侵袭能力,但对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响?     

新辅助化疗对NSCLC患者肿瘤标记物和淋巴细胞亚群的影响

目的探讨新辅助化疗对费小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤标记物、淋巴细胞亚群的影响。方法比较NSCLC肿瘤患者CEA、CA-125、CYFRA21-1的水平及CD3+、CD4+、CD8+比例变化。结果腺癌、鳞癌患者CEA、CA-125和CYFRA21-1水平均显著增高;鳞癌患者CEA升高水平低于腺癌,而鳞癌CA-125和CYFRA21-1升高水平高于腺癌。腺癌、鳞癌患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著降低,而CD8+升高。2个周期化疗后,缓解和部分缓解共18例,稳定和进展共22例。新辅助化疗后,鳞癌患者CA-125和CYFRA21-1显著降低,腺癌患者血清CEA和CYFRA21-1水平显著降低,鳞癌、腺癌患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高,CD8+降低。结论 NSCLC的血清肿瘤标记物表达有差异,可作为评价新辅助化疗疗效的指标。