一效膏对糖尿病皮肤溃疡小鼠创面组织愈合相关因子不同时相影响

目的:通过实验研究探讨一效膏促进糖尿病皮肤溃疡创面修复的作用机制,为临床应用提供理论依据。方法:清洁级昆明种雄性小鼠120只,建立糖尿病皮肤溃疡模型后,随机分为一效膏组(实验组)、康复新液组(阳性对照组)、模型组3组,每组各40只,另取10只正常小鼠作为空白组。治疗后第7天、第14天、第21天按规定处死小鼠取创面组织制成组织切片,应用免疫组化方法观察不同时相创面组织中Ⅰ型胶原与纤维结合蛋白(FN)表达水平的变化,并计算各组小鼠创面平均愈合时间。结果:(1)与模型组比较,一效膏组创面愈合时间较短(P0.05)。(2)免疫组化法检测显示,各时相一效膏组Ⅰ型胶原与纤维结合蛋白(FN)光密度值均高于模型组。结论:一效膏能通过上调创面局部组织中Ⅰ型胶原与纤维结合蛋白(FN)的表达促进糖尿病皮肤溃疡愈合。     

回阳生肌拆方对糖尿病小鼠慢性皮肤溃疡创面愈合及巨噬细胞表型转化的影响

目的 研究回阳生肌拆方（益气温阳拆方和活血通络拆方）对糖尿病小鼠慢性皮肤溃疡创面愈合及创面巨噬细胞表型转化的影响。方法 db/m小鼠10只为正常组,db/db小鼠30只,随机分为模型组、益气温阳组、活血通络组,每组10只。制备背部创面,外用药物贴敷,隔天换药,创面拍照并测定创面面积;创伤后7天处死小鼠背部取创面组织。采用苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色法对创面组织染色并观察病理学改变;采用实时定量PCR法检测创面局部M1型与M2型细胞因子mRNA相对表达。结果 模型组创面面积明显大于正常组（P<0.05）;回阳生肌益气温阳拆方与活血通络拆方组创面面积均明显小于模型组（P<0.05）。模型组IL-12、TNF-α mRNA表达水平高于正常组（P<0.05）,VEGF、TGF-β mRNA表达水平低于正常组（P<0.05）;益气温阳与活血通络组IL-12、TNF-α mRNA表达水平低于模型组（P<0.05）,VEGF、TGF-β mRNA表达水平高于模型组（P<0.05）。益气温阳组IL-12、TNF-α mRNA表达水平低于活血通络组（P<0.05）,TGF-β mRNA表达水平高于活血通络组（P<0.05）。结论 db/db小鼠存在创面愈合迟缓;回阳生肌拆方可促进db/db小鼠创面愈合;减少M1型巨噬细胞含量,升高M2型巨噬细胞含量,可能是其作用机制之一;对于糖尿病慢性皮肤溃疡小鼠,益气温阳拆方促进巨噬细胞表型转化作用优于活血通络拆方。     

透明质酸寡糖通过影响核因子E2相关因子2信号通路促进糖尿病皮肤溃疡创面愈合的机制研究

背景 氧化应激水平过高、长期的炎症状态严重影响糖尿病患者的创面愈合，目前治疗糖尿病皮肤溃疡（DCU）的药物有生物制剂、中药、干细胞疗法等，但由于其缺乏安全性、有效性的充足证据，在临床应用中受到限制，亟需发现新的药物。透明质酸寡糖（o-HA）具有抗氧化性和抗炎性，是治疗DCU的重要方法。 目的 观察o-HA对DCU创面愈合作用并探究其对氧化应激核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路的影响。 方法 实验时间为2021年4—12月，取6周龄SPF级雄性昆明小鼠90只，留取10只作为正常对照组（NC组），其余经腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠模型，建模成功的60只糖尿病小鼠按照随机数字表法分为6组，每组10只，即糖尿病模型组（DM组）、重组人表皮生长因子阳性对照组（rhEGF组）、空白基质阴性对照组（matrix组）、低剂量o-HA治疗组（0.5% o-HA组）、中剂量o-HA治疗组（1% o-HA组）、高剂量o-HA治疗组（2% o-HA组）。所有小鼠利用全层皮肤切除环形夹板法建立创面模型，NC组和DM组小鼠创面不做任何处理，其他各组每日创面及创周常规消毒后，均匀涂抹各组相应药物于创面及创周，rhEGF组给药1次/d，0.5%、1%、2% o-HA组给药2次/d，连续给药14 d。治疗后第1、7、14天拍照记录DCU小鼠创面愈合情况，利用HE染色、Masson染色、CD34免疫组化染色观察给药14 d后小鼠创面肉芽组织形态变化、胶原纤维生成和新生血管，试剂盒检测给药14 d后小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平，Western-blotting检测给药14 d后小鼠创面组织Nrf2、血红素加氧酶1（HO-1）、NAD（P）H醌氧化还原酶1（NQO1）的蛋白表达水平。 结果 给药第7天，rhEGF组、1% o-HA组创面愈合率高于DM组，0.5% o-HA组、2% o-HA组创面愈合率低于NC组、高于DM组；给药第14天，rhEGF组、0.5% o-HA组、1% o-HA组、2% o-HA组创面愈合率高于DM组（P<0.05）。组织形态学显示o-HA软膏干预后创面肉芽组织、胶原纤维、新生血管密度明显增多。rhEGF组、0.5% o-HA组、1% o-HA组、2% o-HA组MDA水平低于DM组，SOD水平高于DM组；0.5% o-HA组、2% o-HA组MDA水平高于NC组（P<0.05）。rhEGF组、1% o-HA组Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平均高于NC组和DM组；0.5% o-HA组Nrf2、NQO1蛋白表达水平高于DM组，HO-1蛋白表达水平高于NC组和DM组；2% o-HA组HO-1蛋白表达水平高于NC组和DM组，NQO1蛋白表达水平高于DM组（P<0.05）。 结论 o-HA对DCU小鼠创面有潜在促愈合作用，以1% o-HA软膏愈合效果最好，可加速创面闭合、再上皮化，促进血管新生，影响Nrf2途径，加速创面愈合，具有安全性高、稳定性好的优势，在临床DCU创面修复方面极具潜力。     

蜂蜜、蜂胶对大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响

[目的] 研究蜂蜜、蜂胶外用对皮肤溃疡模型大鼠创面愈合的影响。[方法] 采用2.5 mol/L NaOH外涂建立大鼠皮肤溃疡模型。观察蜂蜜、蜂胶外用对溃疡创面愈合时间的影响,观察创面皮肤组织学变化,检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。[结果] 蜂蜜、蜂胶外用能明显缩短创面愈合时间(P<0.05或P<0.01);能显着提高大鼠血清中SOD含量(P<0.05或P<0.01);能降低血清中MDA含量(P>0.05).[结论] 蜂蜜、蜂胶外用能够促进皮肤溃疡创面愈合。     

生肌橡皮膏对感染创面愈合的影响

目的探讨分析用生机橡皮膏对感染创面进行治疗时的疗效,根据治疗结果总结经验,寻求非手术治疗的有效方案,扩大临床治疗感染创面方法的选择范围。方法将该院资料完整的150例感染创面的患者为研究对象,治疗组79例,创面涂抹生机橡皮膏;对照组71例,外科常规换药,优锁纱布湿敷创面。两组患者在该院治疗时,选用同一组医生,在用药前和治疗后的四星期患者创面的分泌物分别进行采集,分别做细菌培养,4周后对患者创面的愈合情况进行评估,对细菌培养的阳性率和患者的总体治疗疗效做出比较和观察。结果治疗组的治疗疗效高于对照组。患者用药4星期后,采用生机橡皮膏治疗组治愈率为74．68％,对照组为42．25％,差异有统计学意义（X2=-20．44,P〈O．01）;治疗组对细菌的抑制作用高于对照组。患者用药前,对两组创面分泌物进行的细菌培养比较,4个星期后采用生机橡皮膏治疗组呈阳性率分别为12．65％、对照组为33．80％,统计学处理差异有统计学意义（X2=12．92,P〈O．01）。结论生机橡皮膏可以有效的提高感染创面的愈合率。     

桂林西瓜霜对小鼠皮肤创面愈合影响的研究

目的探讨桂林西瓜霜喷剂对小鼠皮肤创面愈合的影响。方法将80只小鼠随机分为对照组和实验组,每组内分3、7、14、21 d,4个亚组,每亚组10只。所有小鼠建立皮肤创面模型,对照组小鼠仅使用生理盐水清洁伤口;实验组小鼠伤口创面除使用生理盐水清洁伤口外,予以西瓜霜喷剂喷涂覆盖全部创面(每日早晚各1次),连续给药10 d。分别于第3、7、14、21 d检测小鼠皮肤创面愈合率和创面肉芽组织微血管密度。结果对照组及实验组皮肤创面愈合率均逐步上升,但与对照组相比,治疗组愈合率升高更为显著(P0.01);与对照组相比,实验组第3 d,第7 d时微血管密度明显高于对照组(P0.01)。结论桂林西瓜霜喷剂对皮肤创面愈合有一定的促进作用,其机制可能与其促进皮肤创面组织微血管新生有关。     

萝卜硫素对糖尿病小鼠溃疡创面愈合的作用与机制研究

目的 探讨萝卜硫素对糖尿病小鼠溃疡创面愈合的影响并研究其作用机制。方法 选取48只C57BL/6小鼠,分成正常组、模型组、萝卜硫素组（0.95g/kg）、贝复济组（0.8g/kg）,每组再设置7天和14天,共8组,每组各6只。除正常组外,其他组小鼠在高糖高脂饲养下腹腔注射链脲佐菌（STZ）建立糖尿病小鼠模型。所有组别小鼠背部两侧进行直径约8mm圆形皮肤创伤,构建糖尿病溃疡小鼠创面模型。qRT-PCR法检测小鼠创面组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10与抗氧化应激因子SOD、CAT、HO-1 mRNA水平;ELISA法检测血清中VEGF、CD31水平;Western Blot法检测创面组织炎症通路蛋白NF-кB、氧化应激通路蛋白Nrf 2表达水平。采用细胞划痕试验检测萝卜硫素对HaCaT细胞迁移的影响;CCK-8法检测萝卜硫素对HaCaT细胞生长的影响。结果 与模型组比较,萝卜硫素组和贝复济组糖尿病溃疡小鼠创面愈合速率增加（P<0.05）,显著下调TNF-α、IL-6水平（P<0.05）,上调IL-10、SOD、CAT、HO-1m RNA水平（P<0.05）,增...     

回阳生肌脂质体凝胶促进慢性皮肤溃疡大鼠创面愈合机制的研究

目的 观察回阳生肌脂质体凝胶促进慢性皮肤溃疡愈合的作用,探讨其治疗阴证疮疡的药理机制.方法 SD大鼠80只随机分为4组:正常组、模型组、传统回阳生肌膏治疗组(传统组)和回阳生肌脂质体凝胶治疗组(脂质体组).采用"激素干预-皮肤缺损-细菌感染"复合因素叠加法制备慢性皮肤溃疡大鼠模型.观察大鼠一般生活行为,检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-8(IL-8)含量,免疫组化法检测疮疡区组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)表达,并行图像分析.结果 与正常组比较,模型组大鼠血清中TNF-α和IL-8含量显著升高,溃疡区组织中PCNA表达增多、VEGF表达减少(P＜0.05).与模型组比较,脂质体组大鼠血清中TNF-α和IL-8含量均呈下降的趋势(P＜0.05或P＜0.01).脂质体组大鼠溃疡面可见丰富的新生毛细血管且向伤口处聚集分布,VEGF在再生的血管壁胞浆表达阳性,真皮层中见到较多PCNA阳性细胞,而且还在新生血管内皮细胞中可见到棕黄色颗粒表达.与模型组比较,脂质体组 PCNA和VEGF表达均有统计学差异(P＜0.05).结论 回阳生肌脂质体凝胶具有促进慢性皮肤溃疡愈合的作用,其作用机制可能与该药促进慢性皮肤溃疡创面细胞增殖、调动血管内皮生长因子参与血管再生、减轻机体炎症反应有关.     

两种2型糖尿病小鼠溃疡创面愈合比较

目的比较目前常用的基因自发突变2型糖尿病小鼠C57BL/6J-db/db和STZ诱导的C57BL/6J小鼠的溃疡创面愈合特征,为应用稳定的糖尿病小鼠溃疡模型进行相关动物实验研究提供依据。方法建立糖尿病小鼠溃疡模型,统计0、3、5、7、10、14 d小鼠创面动态愈合率及愈合时间;7、14 d取组织,HE染色和Masson染色,免疫组化(CD31和PCNA)观察创面病理组织变化;荧光定量测定愈合相关因子collagen-IIIα、α-SMA的基因表达。结果基因突变db/db小鼠较STZ诱导小鼠的创面愈合时间显著延迟,由(16.6±0.8)d延长至(20.2±1.3)d(P0.001);db/db组较STZ组肉芽组织生长缓慢,新生上皮长度不足、胶原沉积紊乱,创面愈合较差;7 d,db/db组的CD31和PCNA显著性低表达(P0.01);7、14 d,db/db组基因上调量的倍数明显低于STZ组。结论两种糖尿病小鼠创面均出现愈合延迟,但基因突变糖尿病db/db小鼠相比于STZ诱导组小鼠在创面愈合延迟的程度上和愈合难易程度上,更适合进行糖尿病溃疡创面的研究。     

大黄多糖对糖尿病大鼠皮肤创面愈合的影响

糖尿病状态下皮肤愈合困难,皮肤溃疡及创面迁延不愈严重影响患者生活质量。本研究链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,糖尿病大鼠成模2周后手术制作背部创面模型。糖尿病大鼠创面给予生理盐水即糖尿病组,糖尿病大鼠创面敷药大黄多糖组即大黄多糖组,糖尿病大鼠创面敷大黄多糖及SB431542(转化生长因子受体抑制剂)即大黄多糖-SB431542组,另取正常大鼠制作背部创面模型给予生理盐水为对照组。2周后检测创面面积,计算创面愈合率,试剂盒检测大鼠创面中羟脯氨酸(OHP)的含量,HE染色观测创面的肉芽组织生长情况,免疫组化染色结合Image J软件检测TGFβ1表达。结果表明,与对照组相比,糖尿病组及大黄多糖-SB431542组创面愈合率降低较为明显,羟脯氨酸含量减少(P<0.01),大黄多糖组差异不显著(P>0.05)。对照组与大黄多糖组真皮层较厚,皮下胶原纤维含量丰富,而糖尿病组与大黄多糖-SB431542组真皮层较薄,胶原纤维含量亦较少。糖尿病组转化生长因子(TGFβ1)表达较对照组减少,大黄多糖组和大黄多糖-SB431542组的TGFβ1表达上调。结果表明,大黄多糖能诱导TGFβ1表达,这可能是大黄多糖促进糖尿病大鼠皮肤创面愈合的重要机制之一。     

生肌象皮膏对糖尿病大鼠难治性溃疡愈合速度的影响

目的观察生肌象皮膏对糖尿病大鼠难治性溃疡愈合速度的影响。方法将Wistar大鼠随机分成四组，一组为空白组，其余三组采用STZ尾静脉注射制备糖尿病动物模型。模型成功后，四组动物均于背部打孔，造成溃疡模型。三组糖尿病溃疡动物按照血糖和体重分层随机分为糖尿病空白对照组、凡士林组、生观象皮膏组。生肌象皮膏组外用生肌象皮膏纱条外敷，凡士林组用凡士林纱条外敷，空白组、糖尿病对照组均以生理盐水纱条外敷，甩照相法记录创面大小，采用计算机图像分析系统进行处理，以计算创面愈合速度。结果生肌象皮膏组在糖尿病溃疡创面的愈合速度上与糖尿病对照组比较于第5、7、14、21天有显著性差异；第5、7、14、21天空白组、生肌象皮膏组与凡士林组比较有显著性差异。结论生肌象皮膏明显缩短糖尿病难治性溃疡的愈合时间。     

局部应用油酸对糖尿病小鼠创面愈合的影响

目的 探讨局部应用油酸对糖尿病创面炎症反应和组织愈合的影响.方法 84只C57BL/6小鼠经链脲霉素诱导建立糖尿病模型,建模后1个月于小鼠背部制作直径1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,根据创面处理方式的不同将小鼠分为油酸组(30mmol/L油酸溶液)和对照组(使用等体积溶剂代替油酸溶液),每组各42只.以数码照相获取图像观察创面愈合情况,计算创面愈合率;采集创面标本经免疫组织化学染色结合计算机图像软件计数创面内中性粒细胞(PMN)和巨噬细胞(M(φ));利用ELISA法测定创面组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达.结果 从伤后5d起,油酸组创面愈合率均显著高于对照组(P＜0.01).油酸组和对照组创面愈合时间分别为(17.2 ±2.6)d和(19.5±1.9)d(P ＜0.05).油酸组伤后12、24 h的创面PMN计数和伤后3、5d的创面M(φ)计数均显著高于对照组(P＜0.01),伤后10、15 d时创面PMN计数和M(φ)计数则明显低于对照组(P ＜0.05或P＜0.01).油酸组伤后3d时创面TNF-α表达及伤后12、24 h和3d时创面IL-6表达均明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01),伤后10 d时创面TNF-α和IL-6表达均显著低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 油酸能够在创伤早期加速糖尿病创面的早期炎症反应进程,在后期避免炎症反应的持续,从而促进糖尿病小鼠创面的愈合.     

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对糖尿病小鼠创面愈合的作用

目的探讨粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对糖尿病小鼠创面愈合的作用。方法C57BL/6小鼠42只,链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病小鼠模型。腹腔麻醉后在糖尿病小鼠背部中线两侧各制作0.8 cm×0.8 cm创面,左侧创面外用GM-CSF凝胶(GM-CSF处理组),右侧创面则给予不含药物的凝胶(对照组)。在创面形成后不同时相点,分别测量计算两组糖尿病小鼠创面的愈合率;组织M asson染色观察创面再上皮化程度和胶原纤维的沉积情况;碱性水解法测定反映局部胶原蛋白合成量的指标羟脯氨酸水平。结果GM-CSF处理组创面愈合率较对照组明显增加,从创面形成后3 d起两组差异显著(P<0.01);Masson染色组织学观察显示,GM-CSF处理组创面形成后不同时相点的再上皮化速率和胶原纤维沉积均较对照组明显加快;创面形成后3 d起,GM-CSF处理组羟脯氨酸水平较对照组明显增高。结论糖尿病小鼠创面外用GM-CSF凝胶,可诱导创面再上皮化和胶原蛋白合成,从而促进创面愈合。     

生肌象皮膏对感染创面愈合的影响

目的探讨生肌象皮膏治疗感染创面的疗效,总结经验。方法将200例患者随机分为两组,治疗组103例,创面涂抹生肌象皮膏;对照组97例,外科常规换药,优锁纱布湿敷创面。两组患者分别于用药前及治疗后第4周采集创面分泌物做细菌培养,4周后评估创面愈合情况,观察比较总体疗效及细菌培养阳性率。结果两组治愈率分别为73．97％、42．27％（x^2=20．44,P〈0．01）;两组细菌培养阳性率分别为12．62％、34．02％（x^2=-12．92,P〈0．01）,具有显著统计学意义。结论生肌象皮膏能够有效促进感染创面愈合。     

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对糖尿病小鼠创面愈合的作用

目的 探讨粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对糖尿病小鼠创面愈合的作用.方法 C57BL/6小鼠42只,链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病小鼠模型.腹腔麻醉后在糖尿病小鼠背部中线两侧各制作0.8cm×0.8cm创面,左侧创面外用GM-CSF凝胶(GM-CSF处理组),右侧创面则给予不含药物的凝胶(对照组).在创面形成后不同时相点,分别测量计算两组糖尿病小鼠创面的愈合率;组织Masson染色观察创面再上皮化程度和胶原纤维的沉积情况;碱性水解法测定反映局部胶原蛋白合成量的指标羟脯氨酸水平.结果 GM-CSF处理组创面愈合率较对照组明显增加,从创面形成后3d起两组差异显著(P＜0.01);Masson染色组织学观察显示,GM-CSF处理组创面形成后不同时相点的再上皮化速率和胶原纤维沉积均较对照组明显加快;创面形成后3 d起,GM-CSF处理组羟脯氨酸水平较对照组明显增高.结论 糖尿病小鼠创面外用GM-CSF凝胶,可诱导创面再上皮化和胶原蛋白合成,从而促进创面愈合.     

内皮高表达脂多糖相关因子1通过影响NF-κB信号通路促进糖尿病小鼠皮肤创面愈合的研究

目的 探讨内皮高表达脂多糖相关因子1（endothelial-overexpressed lipopolysaccharide-associated factor 1,EOLA1）对2型糖尿病小鼠皮肤创面促愈合效果及机制。方法 选取SPF级6周龄db/db糖尿病小鼠,构建全层皮肤创面模型,在创口周边注射EOLA1高表达慢病毒。小鼠分为正常对照组、空载体慢病毒组、EOLA1慢病毒组。除正常对照组外,拍照记录不同时期小鼠创口愈合情况,造模第15天取创口及周边皮肤,HE染色观察创面肉芽组织及炎性浸润,Masson染色观察创面胶原纤维沉积,免疫荧光检测ARG1、iNOS观察巨噬细胞分型,Western blot及Real-time PCR检测NF-κB信号通路IκB-α、p-IκB-α、p65蛋白表达和EOLA1、TLR4、TNF-α、IL-1β基因表达水平。结果 与空载慢病毒组相比,EOLA1慢病毒组小鼠皮肤伤口愈合速度加快,肉芽组织及胶原纤维形成增多。EOLA1慢病毒组M2型巨噬细胞标志物ARG1表达升高,M1型巨噬细胞标志物iNOS表达降低。EOLA1慢病毒组IκB-α蛋白表达升高,p-IκB-α蛋白表达降低,TNF-α、IL-1β基因表达水平下调。结论 EOLA1可抑制糖尿病小鼠皮肤创面局部炎症,加速创面愈合,其机制可能为通过上调巨噬细胞内IκB-α表达,封闭p65活性,从而抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的释放,巨噬细胞的表型也表现为从促炎症的M1型向促愈合的M2型转变。提示EOLA1在糖尿病创面具有抗炎促愈的潜力。     

莪术醇软膏对糖尿病溃疡创面愈合的作用

目的：研究莪术醇软膏对糖尿病溃疡愈合的治疗作用。方法：SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ,55mg/kg）建立糖尿病模型,1周后测定血糖,血糖值大于16.7mmol/L为造模成功。2周后,在大鼠背部脊柱两侧用手术剪各剪切2个直径为1.8cm的圆形全层皮肤,糖尿病溃疡造模成功后,随机将大鼠分为3组：空白基质组、5%莪术醇软膏组和10%莪术醇软膏组。给药后于第3、第7、第14和第21天对溃疡愈合率、组织形态学进行观察与检测。结果：实验造模成功后,莪术醇软膏组的创面愈合明显比空白基质组快（P＜0.05）,且高剂量组创面愈合较低剂量组愈合更佳。病理切片HE染色及免疫组织化学染色的结果表明3组中10%莪术醇软膏组在促进创面愈合,加快胶原合成,增加内皮细胞黏附分子（CD31）的阳性表达,上调转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白阳性表达上效果最好。结论：莪术醇软膏可促进糖尿病溃疡的愈合,为临床使用外用药治疗糖尿病性溃疡提供实验参考。