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相似文献
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1.
目的应用非标记microRNA芯片筛选在早产胎盘组织中差异表达的miRNA,并分析其相关的靶基因。方法收集早产儿16例为病例组,同期健康足月产儿18例为对照组,取胎盘组织。通过非标记miRNA芯片技术构建早产胎盘组织miRNA表达谱,采用荧光实时定量PCR进行验证,并分析差异表达miRNAs的靶基因。结果 miRNA芯片结果显示44种miRNAs在早产胎盘组织和对照组胎盘组织中差异表达,其中下调表达的11种,上调表达的33种,荧光实时定量PCR验证出miR-493-3p显著下调,mi R-4632-5p显著上调,与芯片结果一致。经软件分析,miRNA靶基因有IL16、SH2D2A、CCNG2、PHB、WNT1、CCDC92、GIT1和ST7L等相关靶基因。结论早产胎盘组织中存在差异表达的miRNAs,提示这些差异表达的miRNAs在早产的发生中有重要的调控作用。  相似文献   

2.
目的 为了筛选胃癌中miRNAs 的表达标记,验证胃癌相关miRNAs的作用靶点,建立一种新的诊断和治疗胃癌的方法.方法 运用基因芯片技术检测3个正常胃组织标本,24个胃癌组织标本,胃癌细胞SGC7901和正常胃黏膜细胞GES-1中328个miRNAs的表达情况.用以上方法检测出在胃癌组织和SGC7901中,miR-433的表达水平显著下调.为了确保结果的准确性,采用实时荧光定量PCR对其进行验证.并用基因克隆和Western印迹方法分析miR-433的作用靶点.结果 共有26个miRNAs在胃癌标本(包括24个胃癌组织和SGC7901)中异常表达.其中19个miRNAs下调,7个miRNAs上调.实时荧光定量PCR检测出miR-433在胃癌标本中的表达水平显著下调,该结果和基因芯片检测结果一致.另外,在本实验中发现miR-433与Grb2(growth factor receptor-bound protein 2)的表达呈负相关.结论 胃癌相关miRNAs已进行了初步筛选.其中,miR-433可能是胃癌中的标记性miRNAs之一,Grb2是其作用靶点.这为建立新的以miRNAs为基础的诊断和治疗胃癌的方法提供了相关信息.  相似文献   

3.
目的 筛选并鉴定在食管鳞癌(ESCC)及癌旁组织中miRNAs的差异表达,为进一步阐明其在ESCC发病机制中的作用奠定基础。方法 选取在邯郸市第一医院行食管癌切除术患者新鲜的鳞癌组织及癌旁正常组织,各3例,抽提总RNA,利用miRNAs芯片筛选其中差异表达的miRNAs,并对miR-106b-3p通过进一步RT-qPCR 技术进行验证。结果 miRNAs芯片从配对组织中共筛检出62个差异表达的miRNAs,其中41个miRNAs表达上调,21个miRNAs表达下调,鳞癌组织与癌旁正常组织中差异表达的miRNAs比较,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-106b-3p在ESCC组织中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),与芯片结果一致。结论 食管鳞癌组织中miRNAs的差异表达为进一步研究miRNAs在ESCC发病中的作用奠定了基础;miR-106b-3p的高表达可能与ESCC的发生、发展有关。  相似文献   

4.
目的:筛选高脂饮食诱导的胰岛素抵抗小鼠,以及应用Toll 样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)抑制剂TAK-242 干预的胰岛素抵抗小鼠血浆差异表达的微小RNA(microRNA,miRNA),探讨胰岛素抵抗、TLR4 和差异表达miRNAs 的关系。方法:血浆标本来自前期实验的3 组小鼠,即以普通基础饲料喂养(Low fat diet,LFD)的正常对照组、给予TAK-242 的高脂饮食组(Treated high fat diet,HFD-T)和单纯高脂饮食组HFD-C,应用小鼠miRNA 芯片检测血浆miRNA 表达谱,筛选差异表达的miRNAs;采用实时荧光定量PCR 方法验证芯片结果。应用生物信息学方法,以TLR4 及其信号传导通路为中心,预测差异表达miRNAs 的靶基因,并对靶基因分别进行GO 和KEGG 富集分析,以判定差异miRNAs 主要影响的生物学功能或者通路。结果:miRNA 基因芯片筛查结果显示,单纯高脂饮食组与正常饮食组比对,筛选出差异显著的miRNAs 共计185 种,其中6 种miRNAs 表达上调,179 种miRANs 表达下调;给予TAK-242 的高脂饮食组与正常饮食组比对,筛选出差异显著的miRANs共计171 种,均表达下调;给予TAK-242 的高脂饮食组与单纯高脂饮食组比对,筛选出差异表达的miRNAs 共计13 种,均为下调。生物信息学分析结果显示,以TLR4 为中心挖掘与其互作的蛋白质,共发现有10 种蛋白;在TAK-242 给予的高脂饮食组与单纯高脂饮食组中差异表达倍数均在1 000 以上的4 种miRNAs (mmu-miR-3095-3p、mmu-miR-5113、mmu-miR-709 和mmu-miR-335-3p),可在TLR4 的互作蛋白质或Toll 样受体信号通路中找到其作用的靶基因,发现这些靶基因74% 属于生物过程基因,其中转录调控因子占82%。实时荧光定量PCR 检测mmu-miR-3095-3p、mmu-miR-5113、mmu-miR-709 和mmu-miR鄄335鄄3p水平,变化趋势与芯片结果一致。结论:胰岛素抵抗发生时,血浆miRNAs 表达谱存在改变,此变化与TLR4 及其信号通路相关。该研究结果丰富了胰岛素抵抗发生的机制,为寻找胰岛素抵抗血浆miRNAs 诊断标志物提供了实验依据。  相似文献   

5.
目的 分析化学发光法和实时荧光定量PCR法检测肝癌患者血清中的EB病毒载量,探讨EB病毒在肝癌检测中的意义.方法 以化学发光法和实时荧光定量PCR对正常对照组、乙肝组、丙肝组及肝癌组患者血清中的EB病毒载量进行检测,并将两种检测结果进行对比分析.结果 化学发光检测肝癌组患者EB表达水平为1.99,均显著高于乙肝(1.25,u=5.129,P<0.05)、丙肝(1.31,u =4.497,P<0.05)、正常组(0.03,u=10.927,P<0.05).实时荧光定量PCR方法检测肝癌组患者的EB表达水平为1.89,高于乙肝(1.26,u=5.295,P<0.05)、丙肝(1.32,u=4.983,P<0.05)及正常组(0.04,u=11.394,P<0.05),差异具有统计学意义;肝癌患者术前EB表达水平(化学发光:1.87;实时荧光定量PCR:1.85)明显高于术后(化学发光:0.03,u=12.873,P<0.05);实时荧光定量PCR:0.04,u =11.936,P<0.05),差异具有统计学意义.两种检测方法结果无统计学差异(P>0.05).结论 化学发光法和荧光定量PCR具有特异性强、灵敏度高等优点,可以用于检测肝癌的早期诊断和分期.  相似文献   

6.
目的研究过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)在人垂体ACTH腺瘤组织中的分布情况和表达水平。方法免疫组织化学染色、Western blot方法检测PPARγ在人正常垂体及ACTH腺瘤中的分布及表达。结果PPARγ主要分布于细胞核,免疫组化和Western blot方法测定,PPARγ在人垂体ACTH腺瘤及正常垂体中均有表达,腺瘤中的表达水平高于正常垂体组织(P<0.05,P<0.01)。结论PPARγ在垂体ACTH腺瘤中表达明显高于正常垂体组织,PPARγ可能成为治疗垂体ACTH腺瘤的一个新靶点。  相似文献   

7.
目的探讨表皮生长因子 (EGF)、转化生长因子 α(TGF α)和表皮生长因子受体 (EGFR)在垂体腺瘤发生、发展过程中的作用。方法应用放射性原位分子杂交法 ,观察上述3种分子的表达。结果在检测的22例垂体腺瘤组织中 ,分别有17例 (77 % )、12例(55 %)和20例(91 %)显示有EGF ,TGF α和EGFRmRNA的过度表达 ,它们在正常垂体组织中的阳性率分别为42 % ,25 %和42 %。不同的垂体腺瘤组织中3种mRNA的表达强度有差异。结论垂体腺瘤中存在着EGF/EGFR或/和TGF α/EGFR自分泌系统 ,该系统在垂体腺瘤的分化及增殖过程中可能起着重要的作用。  相似文献   

8.
垂体腺瘤中MMP-9及TIMP-1表达与肿瘤生物学行为的关系   总被引:5,自引:2,他引:5  
目的 探讨MMP 9及其抑制因子TIMP 1在垂体腺瘤中表达与肿瘤生物学行为的关系。方法 应用免疫组化S P法检测上述基因蛋白在 2 3例侵袭性和 2 4例非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达。结果 侵袭性垂体腺瘤组中MMP 9的表达和MMP 9表达超过TIMP 1的比例高于非侵袭性腺瘤组 (P <0 0 5 ) ;TIMP 1在侵袭性垂体腺瘤组的表达有降低的趋势 ,但无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;MMP 9与TIMP 1表达呈正相关 (P <0 0 5 )。结论 MMP 9表达上调导致其和TIMP 1的表达失衡与垂体腺瘤侵袭性有关 ,MMP 9可作为评估垂体腺瘤侵袭性的分子生物学指标  相似文献   

9.
目的 检测胃癌组织和癌旁组织中microRNA (miRNA)的差异表达.方法 收集经病理确诊为胃癌进行外科手术切除的25例患者的胃癌组织及距离胃癌病灶5 cm以上的癌旁组织,选取其中7例标本提取总RNA,应用Illumina miRNA芯片检测胃癌和癌旁组织中差异表达的miRNA.应用定量实时PCR技术验证25例胃癌和癌旁组织标本中差异表达的miRNA,并分析25例患者的临床病理与胃癌组织中miRNA差异表达的关联.结果 Illumina miRNA芯片检测显示,HS-138,HS-153,HS-157在胃癌组织中表达下调,miR-181a,miR-21,miR-21*,miR-27a,miR-584,miR-93在胃癌组织中表达上调.定量实时PCR显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-181a表达上调(56.848±135.551比3.950±12.101,P<0.05),而miR-584在胃癌和癌旁组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05).胃癌组织miR-181a表达与患者胃癌淋巴结转移及年龄有关联(rp=0.462、0.414,P=0.009、0.023),与性别和病理分型无关联(P=0.220、0.106).结论 应用miRNA芯片技术和荧光定量PCR技术发现了胃癌组织中差异表达的miRNA.  相似文献   

10.
目的:应用基因芯片技术研究心房颤动(房颤)患者心房组织中miRNA的表达谱,分析差异表达的miRNA,为进一步研究miRNA在房颤发生、发展中的作用奠定基础。方法:采用miRNA基因芯片技术检测房颤患者和非房颤患者心房组织样本中miRNA的表达水平;采用实时定量PcR(quantitativereal,timePCR,qRT.PCR)对部分差异表达的miRNA进行验证。结果:MiRNA基因芯片分析结果显示,与非房颤组织相比,房颤组织中差异表达的miRNA共有26个,其中16AmiRNA表达上调,10个miRNA表达下调。qRT.PCR验证结果与芯片结果相一致。结论:MiRNA在房颤患者心房组织中存在差异性表达。  相似文献   

11.
目的:检测miR-146a、miR-224、miR-34c、miR-200a、miR-148b、miR-375 六种miRNAs 在原发性肝癌中的表达变化及其与HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc 和IL-12、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α等炎症因子表达的相关性,以验证循环miRNA 是否可作为理想的血源性新型生物标志物用于原发性肝癌的早期检测。方法:收集肝炎、肝硬化患者及健康对照组静脉血,并收集原发性肝癌患者癌组织和癌旁组织。提取总RNA 后通过实时定量PCR 检测并比较各组miRNA 的相对表达水平,同时检测miRNA 表达水平变化与血清肿瘤标志物AFP、CEA、CA19-9、CA125 表达的关系;并检测miRNAs 表达水平变化与HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc 和炎症因子IL-12、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α表达相关性。结果:相对于健康组,miR-34c、miR-224、miR-146a 在PHC 组血清和组织中表达显著上调;miR-200a、miR-148b、miR-375 在PHC 组血清和组织中表达显著下调,差异具有统计学意义。HBsAg 与血清miR-375 和miR-146a 存在回归关系,miR-375 随HBsAg 表达水平升高而降低,而miR-146a 随HBsAg 表达升高而升高。IFN-γ与miR-146a 存在回归关系, miR-146a 随IFN-γ表达水平降低而升高,miR-375 和miR-146a 诊断能力大于CA19-9 和AFP。结论:miR-146a、miR-224、miR-34c、miR-200a、miR-148b、miR-375 在原发性肝癌血清和组织中存在表达差异,其中miR-375 和miR-146a 诊断能力优于AFP 和CA19-9,血清miR-375 和miR-146a 可能成为新的肝癌早期诊断标志。  相似文献   

12.
目的构建慢性阻塞性肺疾病(COPD)动态大鼠模型不同时期肺组织miRNA表达谱,并对差异表达的miRNAs进行生物信息学分析,以了解COPD发生发展中miRNAs变化规律及可能涉及相关机制。方法 1)将大鼠随机分为对照组、吸烟2、4、6、8周组和15周+气管内滴注猪胰弹性蛋白酶组,每组5只,病理学观察其形态学改变;2)取对照组、吸烟4周和15周+气管内滴注猪胰弹性蛋白酶组大鼠肺组织各2例,用于miRNA表达谱芯片分析;3)实时荧光定量PCR法验证芯片数据;4)运用生物信息学法对miRNA表达谱进行靶基因预测及聚类分析。结果 1)成功建立COPD动态大鼠模型,该鼠肺组织早期以出现炎性细胞浸润为主,晚期出现肺气肿改变的动态病理变化;2)成功建立miRNAs动态表达谱,熏烟4周组共30个miRNAs异常表达,熏烟15周组共37个miRNAs异常表达;3)实时荧光定量PCR法证实miR-146a、miR-21、miR-206和miR-181a变化趋势与芯片一致;4)生物信息学分析显示异常表达的miRNAs可能与COPD发病机制密切相关。结论 1)成功构建动态COPD大鼠模型及miRNA表达谱。2)通过生物信息学分析异常表达的miRNA可能在COPD发病机制中发挥重要作用。  相似文献   

13.
目的研究锌指蛋白185(ZNF185)在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中的表达变化。方法应用免疫荧光组织化学染色法检测ZNF185在精子、间质、支持细胞和睾丸组织中的定位;实时定量PCR和Western blot法分别检测三种细胞中ZNF185 mRNA和蛋白表达水平的差异。结果免疫荧光细胞分析显示ZNF185在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中均表达,主要分布于间质和支持细胞胞质、精子细胞头部和尾部;实时定量PCR和Western blot结果显示,支持细胞ZNF185 mRNA和蛋白表达水平显著低于间质和精子细胞。结论 ZNF185分布于小鼠睾丸不同细胞,表达量存在差异。  相似文献   

14.
目的检测COL18A1基因在先天性小耳畸形中的甲基化及其RNA表达情况,进而探讨基因表达的异常与先天性小耳畸形发病之间的关系。方法收集先天性小耳畸形患者的残耳软骨组织及细胞为研究对象,非耳畸形患者的正常耳软骨组织及细胞作为对照。应用Spectro CHIP芯片对COL18A1基因的Cp G岛进行各个Cp G位点的检测,筛选出存在甲基化水平差异的Cp G位点;提取RNA,利用实时荧光定量PCR技术对各组的基因表达情况进行检测。结果 COL18A1_2_Cp G_17的位点存在统计学上的甲基化水平差异;软骨组织实验组与对照组在COL18A1基因的表达存在差异,且具有统计学意义。结论 COL18A1基因的表达异常可能与小耳畸形的发病相关。  相似文献   

15.
目的 探讨动态增强MRI(DCE-MRI)的定性、半定量、定量参数在垂体腺瘤诊断中的应用价值。方法 采用回顾性病例对照研究方法,收集2014年8月—2018年3月蚌埠医学院第一附属医院收治的23例垂体腺瘤患者的临床和影像资料,均经临床及病理等确诊,男9例、女14例,年龄29~70岁;其中垂体微腺瘤9例(垂体微腺瘤组)、垂体大腺瘤14例(垂体大腺瘤组);选取8例常规颅脑检查垂体正常者作为对照组,男3例、女5例,年龄28~67岁。研究对象均行DCE-MRI,获得感兴趣区域的时间-信号强度曲线(TIC)进行分型定性分析,并测量DCE-MRI半定量参数达峰时间(TTP)、最大上升斜率(MSI)和定量参数容积转运常数(Ktrans)、回流速率常数(Kep)值,采用单因素方差分析及Kruskal-Wallis 检验进行组间比较。结果 垂体微腺瘤组TIC Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分别为0、7、2例,垂体大腺瘤组分别为10、3、1例,对照组分别为7、1、0例,差异有统计学意义(Z=11.346, P<0.01);对照组与垂体微腺瘤组、垂体微腺瘤组与垂体大腺瘤组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。对照组的TTP[(48.52±15.83)s]小于垂体微腺瘤组[(80.79±19.32)s]和垂体大腺瘤组[(70.42±21.64)s],MSI(3.92%±1.24%)及Ktrans[(1.08±0.22)min-1]、 Kep[(1.34±0.40)min-1] 值均大于垂体微腺瘤组[1.89%±1.04%、(0.45±0.18)min-1、(0.86±0.22)min-1] 和垂体大腺瘤组[2.79%±1.06%、(0.69±0.28)min-1、(0.95±0.28)min-1],差异均有统计学意义(P值均<0.05);垂体大腺瘤组MSI、Ktrans均大于垂体微腺瘤组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 DCE-MRI中TIC曲线可以鉴别垂体腺瘤,半定量参数TTP、MSI和定量参数Ktrans、Kep能够进一步诊断垂体微腺瘤;MSI、Ktrans能够鉴别垂体微腺瘤和大腺瘤。  相似文献   

16.
张连群  郭常利 《医学信息》2007,20(6):528-531
目的探讨p27、p16、PCNA的蛋白表达与垂体腺瘤侵袭性的关系,为根治垂体腺瘤及减少肿瘤术后复发提供实验依据。方法应用免疫组化SP法检测43例侵袭性垂体腺瘤和37例非侵袭性腺瘤的p16、p27和PCNA蛋白表达水平,分析p16、p27蛋白表达水平与PCNA蛋白表达之间的相关性。结果垂体侵袭腺瘤p16、p27蛋白表达较非侵袭组明显减低;复发组p16蛋白表达的阳性率与非复发组之间无统计学意义。p27蛋白表达的阳性率较非复发组减低有显著差异。结论p16、p27蛋白表达异常与垂体腺瘤的发生及侵袭性有关,它们的表达情况能作为垂体腺瘤侵袭性的参考指标。  相似文献   

17.
目的 检测良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(PCa)组织标本HER-2及C-mvc mRNA相对值,探讨此值对PCa诊断的特异性意义.方法 通过实时荧光定量PCR检测63例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织HER-2及C-myc mRNA的表达,比较其在PCa与BPH中组织定量的差异.结果 相对于BPH,PCa HER-2及C-myc mRNA表达相对值分别为4.25±0.03,7.24±0.06,PCa HER-2及C-myc表达相对值较BPH高,差异有统计学意义(均为P<0.05).结论 实时荧光PCR定量检测HER-2及C-myc mRNA为PCa的诊断提供了重要的辅助指标.  相似文献   

18.
目的筛选及初步验证结直肠腺瘤-腺癌发展序列中差异表达的miRNA,初步探索其可能机制。方法 MicroRNA芯片检测15例结直肠腺瘤患者、3例结直肠早癌患者和3例健康对照者血清中差异表达的miRNA。在18例结直肠腺瘤,9例结直肠早癌,5例进展期癌及5例正常对照者中用实时荧光定量PCR进行初步验证。结果早癌组与腺瘤组比较,差异表达的miRNA有15个;早癌组与正常组比较,差异表达的miRNA有13个。选择miR-204、miR-193b与miR-150进行初步验证。进展期癌组血清miR-150表达显著低于正常对照组(P0.05);早癌组、进展期癌组血清miR-204表达均显著低于正常对照组(分别为P0.05,P0.01)。腺瘤组、早癌组和进展期癌组血清miR-193b表达均显著低于正常对照组(分别为P0.05、P0.01、P0.05)。miR-193b mimic转染HCT116细胞后显著抑制其增殖(P0.05),促进其凋亡(P0.001)。并可显著抑制K-ras与β-catenin蛋白的表达水平。结论血清miR-204与miR-193b可能成为诊断结直肠癌的生物标志物,miR-193b可能在腺瘤-腺癌序列中发挥抑癌作用。  相似文献   

19.
目的研究锌指蛋白185(ZNF185)在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中的表达变化。方法应用免疫荧光组织化学染色法检测ZNF185在精子、间质、支持细胞和睾丸组织中的定位;实时定量PCR和Western blot法分别检测三种细胞中ZNF185 mRNA和蛋白表达水平的差异。结果免疫荧光细胞分析显示ZNF185在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中均表达,主要分布于间质和支持细胞胞质、精子细胞头部和尾部;实时定量PCR和Western blot结果显示,支持细胞ZNF185 mRNA和蛋白表达水平显著低于间质和精子细胞。结论 ZNF185分布于小鼠睾丸不同细胞,表达量存在差异。  相似文献   

20.
目的探索微小RNA-190b在大鼠重度烧伤末期骨骼肌代谢中的变化及其意义。方法将8只Wistar大鼠按照随机数字表法分为对照组4只(致假伤)和烧伤组4只[背部造成30%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤,以下称烧伤]。两组分别于伤后经腹腔注射复方氯化钠溶液,创面外涂1%碘酊。于休克期末(伤后72 h)留取同侧胫骨前肌标本;应用Trizol法提取胫骨前肌中总RNA,采用丹麦锁核苷酸技术Exiqon miRCURY~(TM) LNA microRNA芯片,分别检测烧伤组与对照组胫骨前肌标本中微小RNA-190b的表达水平,实时荧光定量PCR验证以检验芯片数据的可靠性。组间数据差异比较使用t检验。结果芯片数据结果表明,微小RNA-190b在烧伤组的相对表达量为0.223,在对照组相对表达量为1.244,烧伤组与对照组相比明显降低差异有统计学意义(t=4.345,P0.05)。同时,应用荧光定量PCR验证芯片数据,结果显示,微小RNA-190b相对表达水平在烧伤组中相对表达量为1.230,在对照组中相对表达量为3.405,两组差异具有统计学意义(t=4.639,P0.05)。结果表明,芯片数据与定量PCR数据中微小RNA-190b的表达水平趋势一致。结论微小RNA-190b在大鼠重度烧伤后早期骨骼肌代谢过程中表达明显下调,其参与骨骼肌降解的作用机制需进一步研究证实。  相似文献   

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