中药组方对小鼠Lewis肺癌细胞抑制作用的机理研究

目的 :探讨中药组方抑制小鼠Lewis肺癌细胞的作用机理。方法 :复制小鼠Lewis肺癌模型 ,用免疫组织化学方法 ,检测中药组方、替加氟生理盐水对各组肿瘤细胞周期蛋白D1(cyclinD1) ,增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的影响 ,并测定各组小鼠的皮下瘤重 ,计算抑瘤率。结果 :中药组方治疗组的皮下瘤重 ,cyclinD1标记指数和PCNA标记指数均低于生理盐水组(P <0 .0 1) ,且抑瘤率为 4 3.0 9% ,与替加氟组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :中药组方能有效降低小鼠Lewis肺癌细胞cy clinD1的表达 ,抑制细胞增殖 ,从而抑制肺癌细胞生长     

中药组方对小鼠Lewis肺癌细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 :探讨中药组方对小鼠Lewis肺癌细胞周期蛋白D1的表达及肺癌细胞转移的影响。方法 :复制小鼠lewis肺癌 ,用免疫组织化学方法检测中药组方对肿瘤细胞cyclinD1的表达 ,记数小鼠肺组织内肿瘤转移结节数量等数据。结果 :生理盐水组cyclinD1阳性表达率与中药组方组和替加氟组有显著性差异 ,而后两组差异无显著性 ;中药组和替加氟组转移瘤结节数量显著少于生理盐水组。结论 :中药组方能有效降低小鼠Lewis肺癌细胞cyclinD1的表达 ,抑制肿瘤细胞的转移     

抑癌基因p16及Rb在肺癌细胞中表达的实验研究

目的研究中药组方对小鼠肺癌细胞的抑制作用及其分子机制。方法将小鼠Lewis肺癌细胞复苏后,于小鼠右腋窝皮下传代后构建小鼠Lewis肺癌模型30只,随机分为3组,各10只,雌雄各半。接种后第2d开始灌胃,中药治疗组予中药稀释液（相当于生药量60g/kg）,替加氟组予替加氟稀释液（相当于替加氟药量78mg/kg）,0.9%氯化钠注射液组予0.9%氯化钠注射液,各组均为0.4mL,每日1次灌注。观察中药组方、替加氟和0.9%氯化钠注射液对各组瘤体大小的影响,并用免疫组化方法检测不同组别间抑癌基因p16和Rb蛋白的表达情况,比较各实验组的变化。结果治疗3周后,中药治疗组和替加氟组小鼠皮下肿瘤平均质量均比0.9%氯化钠注射液组小（P〈0.01）;中药治疗组、替加氟组抑瘤率均〉40%,2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,说明中药组方具有一定的抑制肿瘤生长的作用。0.9%氯化钠注射液组p16的标记指数（LI）、Rb-LI显著低于中药治疗组和替加氟组（P〈0.01,P〈0.01）。镜下可见,p16、Rb蛋白阳性细胞在各组中表达不一,0.9%氯化钠注射液组阳性细胞呈棕黄色,细胞形态较完整,数量较少,呈散在分布;中药治疗组和替加氟组阳性细胞呈棕黄色,深浅不一,细胞形态相对不完整。结论中药组方对小鼠Lewis肺癌的细胞生长具有抑制作用,其机制可能与中药激活抑癌基因,影响细胞周期的发生和阻断细胞脱氧核糖核酸（DNA）合成有关。     

消积饮抑制Iewis肺癌细胞周期及其机制的研究

临床研究表明，消积饮（中药复方制剂）是根据扶正培本，化瘀解毒法则配伍组成的方剂，能有效稳定病灶，抑制转移，使中层得带瘤生存，复制小鼠Iewis肺癌模型，观察该组方对Iewis肺癌的生长及对肺癌细胞周期的影响。结果有效抑制Iewis肺癌的生长（抑瘤率为43．09％），降低小鼠Iewis肺癌细胞cyclinD1的表达，影响其细胞周期G1／S调控点，有效地阻止肿瘤细胞周期于G0、G1期，使其不能进入S期进行DNA复制，从而抑制细胞分裂增殖，对肿瘤细胞起抑制作用；cyclinD1与细胞周期相关性显示：cyclinD1可能为中药复方的作用靶点，对cyclinD1表达的抑制作用表现为该复方的临床抑癌、抗癌效果。     

消积饮对Lewis肺癌细胞周期影响的实验研究

目的：探讨消积饮对Lewis肺癌生长的作用机制,方法：将Lweis肺癌细胞接种在C57BL／6小鼠皮下,把小鼠随机分成消积饮组,替和氟组和生理盐水组,分别给预消积饮,替加氟和生理盐水灌胃,每d1次,21d后停药,测定各组小殷的皮下瘤重并计算抑瘤率以及运用流式细胞仪分析观察各组小鼠肿瘤细胞细胞周期各时相分布的情况,结果：消积饮组的皮下瘤重较生理盐水组低（P＜0．01）,抑瘤率是43．09％,消积饮组的肿瘤细胞G0／G1期细胞比例增高,S期细胞比例降低（P＜0．01）,呈现明显的G０／G1期阻滞现象,结论：消积饮通过促使肿瘤细胞发生Ｇ０／Ｇ１期阻滞,阻断细胞ＤＮＡ合成而抑制Ｌewis肺癌生长。     

中药莪术油对小鼠Lewis肺癌抑制作用的实验研究

目的：探讨中药莪术油对肺癌的抑瘤作用及机理。方法：采用Lewis肺癌瘤小鼠腹水于小鼠右腋皮下接种造模，以5—Fu做阳性对照，观察小鼠瘤重，并用免疫组化法检测细胞增殖核抗原(PCNA)视网膜母细胞瘤蛋白(RB)的表达。结果：莪术油组小鼠瘤重明显较模型组轻，与5—Fu组无明显差异，PCNA指数明显降低，RB蛋白标记指数显著升高，与5—Fu组接近。结论：莪术油能有效抑制Lewis肺癌细胞，抑制细胞增殖，上调RB蛋白表达是其可能的作用机理之一。     

中药组方消积饮抗肿瘤的机制研究

目的研究消积饮治疗肿瘤的作用机制。方法对比中药消积饮和替加氟对小鼠lewis肺癌细胞凋亡及survivin表达的影响。结果中药组方组和替加氟组小鼠皮下肿瘤平均质量均比生理盐水组小,有显著性差异(P均<0.01);中药组方组和替加氟组的抑瘤率均大于30%;中药组方组与替加氟组的抑瘤率无显著性差异(P>0.05)。生理盐水组ISEL阳性细胞率显著高于消积饮组和替加氟组(P均<0.01),而替加氟组与中药组方组的阳性率则无显著性差异(P>0.05)。结论中药组方能有效下调小鼠lewis肺癌细胞survivin表达,诱导细胞凋亡,从而起到抑癌、抗癌作用。     

温下肠腑方对Lewis肺癌PCNA、p16、CyclinD1蛋白表达的影响

目的 观察温下肠腑方对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及对PCNA、p16、cyclinD1表达的影响.方法 :C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌,随机分为4组,即模型组,化疗组,温下方组和综合治疗组,化疗组和综合治疗组DDP 0.1 mg腹腔注射3 d,温下方组和综合治疗组中药灌胃10 d.计算抑瘤率,免疫荧光组织化学方法,激光共聚焦显微镜观察PCNA、p16、cyclinD1的表达.结果 温下方组抑瘤率为34.5%,平均瘤重低于模型组(P＜0.05);温下方组、综合治疗组和化疗组PCNA、cyclinD1表达明显低于模型组(P＜0.05),其余各组无显著差异.结论 温阳除滞法为主的温下肠腑方有一定的抑制肺癌生长的作用,且与顺铂有协同作用,温下肠腑方可能通过对PCNA、cyclinD1的抑制,从而抑制肿瘤生长.     

消积饮抑制lewis肺癌细胞周期及其机制的研究

临床研究表明 ,消积饮 (中药复方制剂 )是根据扶正培本、化瘀解毒法则配伍组成的方剂 ,能有效稳定病灶、抑制转移 ,使患者带瘤生存。复制小鼠lewis肺癌模型 ,观察该组方对lewis肺癌的生长及对肺癌细胞周期的影响。结果能有效抑制lewis肺癌的生长 (抑瘤率为 4 3.0 9% ) ,降低小鼠lewis肺癌细胞cyclinD1的表达 ,影响其细胞周期G1/S调控点 ,有效地阻止肿瘤细胞周期于G0 、G1期 ,使其不能进入S期进行DNA复制 ,从而抑制细胞分裂增殖 ,对肿瘤细胞起抑制作用 ;cyclinD1与细胞周期相关性显示 :cyclinD1可能为中药复方的作用靶点 ,对cyclinD1表达的抑制作用表现为该复方的临床抑癌、抗癌效果。     

消积饮抑制Iewis肺癌细胞周期及其机制的研究

临床研究表明,消积饮(中药复方制剂)是根据扶正培本、化瘀解毒法则配伍组成的方剂,能有效稳定病灶、抑制转移,使患者带瘤生存.复制小鼠lewis肺癌模型,观察该组方对lewis肺癌的生长及对肺癌细胞周期的影响.结果能有效抑制lewis肺癌的生长(抑瘤率为43.09%),降低小鼠lewis肺癌细胞cyclinD1的表达,影响其细胞周期G1/S调控点,有效地阻止肿瘤细胞周期于G0、G1期,使其不能进入S期进行DNA复制,从而抑制细胞分裂增殖,对肿瘤细胞起抑制作用;cyclinD1与细胞周期相关性显示cyclinD1可能为中药复方的作用靶点,对cyclinD1表达的抑制作用表现为该复方的临床抑癌、抗癌效果.     

硇砂提取物治疗小鼠Lewis肺癌的效果初步评价

目的评价硇砂提取物治疗小鼠Lewis肺癌的效果及对免疫系统的毒性.方法采用MTT法及流式细胞仪分别检测Lewis肺癌细胞的增殖和细胞周期,采用小鼠Lewis肺癌皮下移植肿瘤模型观察硇砂提取物的抗肿瘤作用,通过小鼠碳粒廓清和迟发性变态反应考察硇砂提取物对免疫系统的毒性.结果硇砂提取物可剂量依赖性抑制Lewis肺癌细胞的增殖,使细胞周期停止于S期.硇砂提取物水溶液连续瘤内给药8 d对小鼠Lewis肺癌皮下肿瘤的抑瘤率为46.7%,但同时灌胃给药对肿瘤的抑瘤率仅为15.7%.硇砂提取物水溶液皮下注射或灌胃给药对小鼠碳粒廓清能力及迟发性变态反应均无明显影响.结论硇砂提取物的抗肿瘤作用与给药途径有关,其对机体自身的免疫功能无明显影响.     

清热解毒法对小鼠Lewis肺癌瘤组织MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的：观察清热解毒中药对小鼠Lewis肺癌瘤组织金属蛋白酶基因MMP-9及其抑制基因TIMP-1表达的影响。方法：将荷Lewis瘤肺癌小鼠随机分为5组,分别给予清热药、养阴药、补肾药、健脾药,对照组予生理盐水灌胃,连续20天,第22天处死小鼠,检测不同治法的抑瘤率,对小鼠的移植瘤体积、重量和肺部转移灶数目的影响,并采用RT-PCR法检测MMP-9、TIMP-1值。结果：各给药组与对照组相比,在抑瘤率、移植瘤体积、肿瘤重量方面无明显差别;各给药组转移灶数目低于对照组,且有统计学差异;清热组具有下调MMP-9表达及上调TIMP-1表达的作用,与对照组相比有显著性差异。结论：清热解毒法能降低肺癌组织MMP-9表达,上调TIMP-1表达,从而抑制小鼠Lewis肺癌的转移;各组药物均能不同程度地抑制荷瘤小鼠肺转移灶数目,但其作用机理有待进一步研究。     

莪术油对小鼠肝癌细胞抑制作用的分子机理

目的 :研究莪术油抑制小鼠HepA肝癌细胞的分子机制。方法 :建立小鼠HepA肝癌模型 ,进行莪术油抑癌试验 ,并用免疫组化法检测细胞增殖核抗原 (PCNA)、细胞周期素D1(cyclinD1)的表达 ,探讨莪术油抑制小鼠肝癌的分子机理。结果 :莪术油治疗组的瘤重、PCNA标记指数、cyclinD1标记指数均低于生理盐水组 (P <0 .0 1)。结论 :莪术油可能是通过下调cyclinD1的表达 ,抑制PCNA的阳性表达率 ,进而抑制肿瘤的生长。     

芪灵益肝煎对小鼠肝癌腹水型细胞系Hca-F25/CL-16A3 cyclinD1表达的影响

目的：研究芪灵益肝煎对小鼠肝癌的抑制作用及其对cyclinD1表达的影响。方法：小鼠右腋皮下肿瘤造成实体瘤模型，用药21天后取瘤称重计算抑瘤率，采用免疫组化技术检测cyclinD1的表达，结果：芪灵益肝益对小鼠肝癌细胞的生长抑制率为36．32％，免疫组化技术分析表明，cyclinD1在两组中均呈阳性表达，但经秩和检验，芪灵肝煎组cyclinD1表达下调。结论：芪灵益肝煎对肝癌Hca-F25/CL-16A3细胞的增殖有明显的抑制作用，可使细胞中cyclinD1表达下调。     

白金消积胶囊对Lewis肺癌小鼠抑瘤作用及生存期影响的实验研究

目的：研究白金消积胶囊（BJXJ）方对Lewis肺癌荷瘤小鼠抑瘤作用及生存期的影响。方法：抑瘤作用观察：荷Lewis肺癌昆明鼠,造模后随机分成生理盐水组、BJXJ等效剂量组、BJXJ高剂量组、BJXJ等效剂量组＋顺铂（DDP）组、平消胶囊组、顺铂（DDP）组,造模第2 天开始用药,于第15 天脱颈椎处死动物,剥离瘤块, 称取瘤重。生存期观察：荷Lewis肺癌昆明鼠,截尾期为对照组出现第1 只动物死亡为止,记录小鼠存活时间。结果：1）对荷Lewis肺癌昆明鼠：除BJXJ 等效剂量组外,其余各组抑瘤率均超过30%,抑瘤作用明显（P〈0.05）,BJXJ等效剂量＋DDP组抑瘤率为51.91%,优于其他各组,说明中药对DDP 有增效作用。2）对荷Lewis 肺癌昆明鼠生存率影响：BJXJ 高剂量组及等效剂量组加DDP 组荷瘤小鼠生存期及中位生存天数明显延长,生存率明显提高有统计学意义。结论：白金消积胶囊对Lewis肺癌小鼠癌细胞生长有抑制作用,并明显延长荷Lewis肺癌昆明鼠生存期。     

康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠增殖细胞核抗原表达的影响

目的通过检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，阐明康莱特注射液的抑瘤作用及其可能的作用机制。方法50只C57小鼠复制Lewis肺癌模型后。随机分为5组。分别腹腔注射相应药物14d后处死，称瘤质量，计算抑瘤率，免疫组化法检测各组小鼠肺癌组织中PCNA蛋白表达。结果CTX组、康莱特低剂量组、康莱特中剂量组、康莱特高剂量组抑瘤率分别为60．71％，45.24％，47.02％，55.36％；PCNA的阳性表达率分别为（90．78±5.51）％，（53.63±3．56）％，（72．87±4．12）％，（67．61±3．23）％，（53.51±3．20）％。结论抑制PCNA在肿瘤细胞中的表达可能是康莱特注射液抑制肿瘤生长的机制之一。     

中药祛毒扶正汤对肺癌小鼠血清TK1表达及肺癌细胞周期影响的实验研究

目的研究中药祛毒扶正汤对肺癌小鼠血清TK1表达及对肺癌细胞周期的影响,初步探讨其抑制小鼠Lewis肺癌肿瘤生长的作用及分子机制。方法 C57BL/6纯系小鼠80只,构建小鼠肺癌模型,随机分成4组:生理盐水组(A组),祛毒扶正方低剂量组(B组)、高剂量组(C组),顺铂(DDP)组(D组),每组20只。测定各组小鼠的皮下瘤重,计算抑瘤率;采用增强化学发光法测定各组小鼠血清胸苷激酶(TK1)的含量;应用流式细胞术进行肺癌细胞周期测定。结果①B组、C组、D组小鼠的肿瘤生长均受到不同程度的抑制,其抑瘤率分别为26.87%、34.35%、57.14%;在减轻瘤重方面,与A组比较均具有显著性差异(P<0.05),且C组的瘤重低于B组(P<0.05),D组的瘤重低于B组、C组(P<0.05);②增强化学发光法测定结果显示各治疗组小鼠血清TK1表达均较A组降低(P<0.05);③流式细胞术检测各治疗组均能影响肿瘤的细胞周期,能有效地阻滞细胞于G0、G1期,从而减少S期细胞的分布(P<0.01)。结论祛毒扶正方能有效降低小鼠Lewis肺癌血清TK1的表达和抑制细胞增殖作用,从而抑制Lewis小鼠肺癌肿瘤生长,其抑瘤机制可能与降低血清TK1水平及抑制肺癌细胞增殖周期有关。     

扶肺煎联合顺铂对Lewis肺癌移植瘤生长及VEGFA、VEGFR-2的影响

目的:观察扶肺煎对C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用,研究其对增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGFA)及其受体(VEGFR-2)的影响。方法:70只雄性SPF级C57BL/6小鼠随机建立Lewis肺癌移植瘤模型,分别为空白对照组、模型对照组、扶肺煎低剂量组、扶肺煎中剂量组、扶肺煎高剂量组、顺铂组、扶肺煎中剂量联合顺铂组。每天观察动物一般情况及各组小鼠皮下结节情况并称重。第15天脱颈处死全部小鼠,完整剥离肿瘤组织并称重,计算各组抑瘤率及增效率,检测PCNA、VEGFA及VEGFR-2的表达。结果:扶肺煎联合顺铂组的抑瘤率最高,为65.81%。扶肺煎联合顺铂组增效率为107.91%,表明其对顺铂具有较好的增效作用。扶肺煎联合顺铂组PCNA阳性表达率低于其余各组,但差异无统计学意义(P0.05)。扶肺煎联合顺铂组VEGFA、VEGFR-2的表达量均小于其余各组。结论:扶肺煎联合化疗可降低C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤中PCNA的表达并抑制肿瘤生长,降低Lewis肺癌移植瘤中VEGFA、VEGFR-2的表达,起到抑制肿瘤血管生成及增敏增效的作用。     

消积饮抑制小鼠Lewis肺癌细胞增殖及其分子机制

目的:研究消积饮抑制小鼠Lewis肺癌细胞增殖及其分子机制。方法:构建小鼠Lewis肺癌模型,进行消积饮抑癌试验,并用免疫组化法检测不同组别间细胞增殖核抗原(PCNA)和视网膜母细胞瘤蛋白(RB蛋白)的表达情况,比较各实验组的变化,探讨消积饮抑制肺癌的分子机制。结果:消积饮治疗组小鼠皮下肿瘤重量、PCNA标记指数均低于生理盐水组,RB蛋白标记指数高于生理盐水组,且差异有显著性(P<0.01),而与替加氟组相比较,3种指标的差异均无显著性(P>0.05)。结论:消积饮可能是通过上调RB蛋白的表达,抑制PCNA的阳性表达率,进而抑制肿瘤细胞的生长而起到抑癌作用。     

肺抑宁2号诱导Lewis肺癌小鼠细胞凋亡的实验研究

目的：探讨肺抑宁2号对Lewis肺癌小鼠细胞凋亡的影响。方法：建立Lewis肺癌小鼠模型,随机分为模型组、中药组、西药组,用肺抑宁2号治疗Lewis肺癌小鼠,计算抑瘤率,进行光镜和电镜下瘤细胞凋亡的形态学观察。结果：抑瘤率中药组与模型组比较明显提高（P〈0.05）,光镜下可见中药组肿瘤团块小,细胞体积小,异型性不明显,病理性核分裂像少,电镜下可见凋亡小体。结论：肺抑宁2号能诱导Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡,可能是该方抗肺癌机制之一。