从胰岛细胞移植到胰腺干细胞移植，治愈糖尿病还有多远？

背景：胰岛细胞移植和胰腺干细胞移植是近年来糖尿病治疗的研究热点,也是治愈糖尿病最有希望的途径。目的：探讨胰岛细胞移植和胰腺干细胞移植治疗糖尿病的可行性、优势、面临的问题及解决的办法。方法：收集胰岛细胞移植和胰腺干细胞移植治疗糖尿病的相关实验和临床研究,进行实验数据分析两种细胞移植途径治疗糖尿病的影响因素,从细胞分子生物学水平认识胰岛细胞移植和胰腺干细胞移植治疗糖尿病的优势和缺点。结果与结论：胰岛细胞移植治疗糖尿病受供体不足的制约,胰腺干细胞移植解决了胰岛细胞供体短缺的有效途径,但胰腺干细胞移植的研究还停留在动物实验阶段,需要进行广泛的临床研究。首先要明确胰腺干细胞的特异性标志物,其次要掌握将相关干细胞诱导分化为胰腺干细胞的方法和技术。     

胰腺干细胞的分离培养与诱导分化

胰岛素替代治疗是目前最常用于治疗糖尿病的方法,许多难治型糖尿病患者则通过胰腺或胰岛移植成功地控制了血糖。但由于胰腺供体的缺乏以及移植排斥反应的存在,限制     

青年供体胰段移植的超微结构及解剖学基础

背景:在胰腺和胰岛移植中,青年供体胰腺血管吻合难度较小,成功概率大,但目前青年供体胰腺胰段移植的解剖学基础国内尚缺乏.目的:观察青年人胰腺胰尾的微细结构、胰岛B细胞胰高血糖素和胰岛素阳性表达面积及胰岛B细胞免疫阳性染色面积,以及青年尸体胰腺血管的解剖情况.方法:选择青年人尸体12例,取胰尾切片苏木精-伊红染色后光镜观察,显微测微器测量胰岛数量和面积,用胰高血糖素抗血清和胰岛素抗血清进行免疫组织化学染色.另取3例青年人尸体取胰尾组织块铀铅染色.透射电镜观察青年供体胰腺B细胞,胰岛形态和数量、结构及其分泌颗粒,以及青年供体胰腺血管情况.结果与结论:青年供体胰尾组织中胰岛B细胞内分泌颗粒多,内质网、高尔基复合体和线粒体等细胞器发达,胰岛数目分布多,胰岛B细胞的免疫阳性染色面积大.青年供体胰尾有较多而密的胰岛B细胞散在分布,胰岛B细胞分泌颗粒多.血管适合做端侧吻合.提示青年供体胰腺细胞的分泌活动旺盛,血管适合做端侧吻合,适宜作为胰腺胰段胰岛移植供体.     

不同幼年供体胰段的超微结构观察

背景:随着胰腺移植供体的不足,胰段移植已倍受关注.从解剖学角度认识胰腺各段胰岛和胰岛细胞(A,B细胞)的分布规律,可否得出胰段移植的最佳选择.目的:观察幼年大鼠胰腺胰尾的微细结构,胎尸胰腺胰尾的微细结构,胰岛B细胞胰高血糖素和胰岛素阳性表达面积及胰岛B细胞免疫阳件染色面积,并予以比较.设计、时间及地点:对比观察,于:2006-01/2007-06在福建医科大学人体解剖组织胚胎学系实验室完成.材料:出生1周内健康SD大鼠33只,3～10个月龄胎尸胰腺80个,每月龄10个.胰高血糖素抗血清为武汉博士德生物工程公司产品,胰岛素抗血清为北京中山金桥生物技术公司产品,图像处理系统(Videopro32型)由福建医科大学人体解剖实验审提供,Hu-12A型透射屯镜为日本电子株式会社产品.方法:随机选择30只大鼠,取胰尾切片苏木精-伊红染色后光镜观察,显微测微器测量胰岛个数和面积,用胰高血糖素抗血清和胰岛素抗血清进行免疫组织化学染色.另3只大鼠取胰尾组织块铀铅染色,每月龄胎尸各取2例胰尾组织,1例行ABC法胰岛素免疫组化染色,另1例行铀钳染色.主要观察指标:透射电镜观察并比较胎尸胰及幼年大鼠胰腺B细胞及胰岛形态和数量、结构及其分泌颗粒.结果:幼年大鼠胰尾组织中胰岛B细胞内分泌颗粒多,内质网、高尔基复合体和线粒体等细胞器发达,胰岛数目分布多,胰岛B细胞的免疫阳性染色面积大.胎尸胰尾有较多而密的胰岛B细胞散在分布,胰岛B细胞分泌颗粒多.结论:幼年大鼠和胎尸胰腺细胞的分泌活动均旺盛的,消化功能强,适宜作为胰腺胰段胰岛移植供体,且以胰尾为最佳.     

胰腺干细胞移植治疗糖尿病

目的分析胰腺干细胞移植治疗糖尿病的相关影响因素、胰腺干细胞的分化途径及其标记物。方法运用文献调查分析的方法，对胰腺干细胞及胰腺干细胞移植治疗糖尿病的研究现状进行回顾性分析。结果胰腺干细胞移植治疗糖尿病在近年取得了突破性进展，但供体的缺乏和移植排斥反应制约着胰腺干细胞移植的广泛应用。胰腺干细胞可能来源于神经前体细胞，胰腺前体细胞的特异性标记物对胰腺前体细胞的提取将有很大的帮助，胰腺干细胞可能由胰腺组织分化而来，也可能来源于其他组织干细胞的横向分化，可应用生物工程、基因工程技术将胰导管干细胞、胚胎干细胞或其他细胞转分化为胰岛素分泌细胞，但将这些细胞诱导成胰腺干细胞，目前仍处于实验室研究的初级阶段。结论随着分子、细胞和发育生物学以及干细胞定向诱导分化技术的研究进展，寻找合适的胰腺干细胞移植物，将为胰腺干细胞移植治疗糖尿病带来新的希望。     

胰腺干细胞移植治疗糖尿病

目的分析胰腺干细胞移植治疗糖尿病的相关影响因素、胰腺干细胞的分化途径及其标记物。方法运用文献调查分析的方法,对胰腺干细胞及胰腺干细胞移植治疗糖尿病的研究现状进行回顾性分析。结果胰腺干细胞移植治疗糖尿病在近年取得了突破性进展,但供体的缺乏和移植排斥反应制约着胰腺干细胞移植的广泛应用。胰腺干细胞可能来源于神经前体细胞,胰腺前体细胞的特异性标记物对胰腺前体细胞的提取将有很大的帮助,胰腺干细胞可能由胰腺组织分化而来,也可能来源于其他组织干细胞的横向分化,可应用生物工程、基因工程技术将胰导管干细胞、胚胎干细胞或其他细胞转分化为胰岛素分泌细胞,但将这些细胞诱导成胰腺干细胞,目前仍处于实验室研究的初级阶段。结论随着分子、细胞和发育生物学以及干细胞定向诱导分化技术的研究进展,寻找合适的胰腺干细胞移植物,将为胰腺干细胞移植治疗糖尿病带来新的希望。     

全胰腺移植空肠引流术的麻醉处理体会

胰腺移植是治疗胰岛素依赖型糖尿病最有效的方法之一 ,也是器官移植领域的一热点。胰腺移植、胰岛移植、胎胰移植、胰肝移植、胰肾移植[2 ,3] 等各种方法和术式各有利弊 ;全胰腺移植空肠引流术 ,较为符合正常生理情况 ,但手术难度亦较高 ,术后并发症较多。本院成功为 2例胰岛素依赖型糖尿病患者行全胰腺移植空肠引流术 ,现将其围术期麻醉处理情况报道如下。1　病例资料例 1,女 ,39岁 ,体重 4 2ｋｇ ,确诊为 1型糖尿病 19年 ,并发糖尿病肾病、白内障、周围神经病变 ,长期胰岛素治疗。术前经控制饮食 ,使用胰岛素 2 8Ｕ/ｄ ,空腹血糖由 2 0 .7…     

β细胞替代治疗1型糖尿病的研究进展

治疗1型糖尿病的主要目标是通过胰岛素注射控制血糖,以降低并发症发生。在胰岛素输注技术不足、有严重低血糖症或已接受肾脏移植治疗后服用免疫抑制的患者,启用β细胞替代治疗是一种安全且有效的治疗手段。其中同种异体胰岛移植是主要方法之一,肝内胰岛移植已被证实可以有效缓解上述不稳定1型糖尿病负担,有效预防糖尿病相关的急慢性并发症(包括曾进行过肾脏移植的患者)。患者的年龄、BMI、肾脏功能和心肺功能均会影响胰腺或胰岛移植的疗效,移植途径则受到胰腺细胞供者的数量和是否需要使用免疫抑制剂的限制。未来β细胞替代治疗的方法包括异种组织或人干细胞,肝外植入(例如网膜、皮下或肌内),诱导免疫耐受以及胰岛微包囊技术。     

干细胞移植定向分化为胰岛β细胞治疗糖尿病

糖尿病是由于胰岛β细胞破坏或胰岛素抵抗所致的胰岛素绝对或相对缺乏.干细胞具备的增殖能力和分化潜能使其成为胰岛素分泌细胞的潜在米源,还可以解决免疫排斥的难题.胰腺干细胞、胚胎干细胞、骨髓干细胞、脐血干细胞等可定向诱导分化为胰岛β细胞,或使用药物增加胰岛β细胞再生进而发挥治疗糖尿病作用.干细胞治疗糖尿病研究已取得了一定进展,部分实验已纠正糖尿病动物的高血糖状态.但尚需深入研究胰岛的发育和分化机制,这样才能从中获得信息用于诱导胚胎干细胞向β细胞分化,程序性、针对性应用诱导因子以取得更高的分化率,获得更成熟的胰岛素分泌细胞.     

胰腺干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞及对1型糖尿病模型鼠的治疗作用

背景：有实验证实人和动物起源的胚胎干细胞或成体干细胞可分化为胰岛素分泌细胞，但其分泌胰岛素的功能及对实验性糖尿病的治疗价值尚需要验证。 目的：观察从大鼠的胰腺组织分离纯化干细胞在体外将诱导分化胰岛素分泌细胞后胰岛素mRNA的表达、分泌胰岛素的能力及对1型糖尿病模型鼠的治疗作用。 设计：随机对照观察。 单位：中日友好医院临床医学研究所。 材料：实验于2004-08／2007—12在北京中日友好医院临床医学研究所病理生理研究室完成。选用8—10周龄雄性SD大鼠及雌性裸鼠各10只，均购自北京维通利华实验动物技术有限公司。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。尼克酰胺、链脲菌素均为Sigma公司产品，nestin抗体为BD Biosciences产品。大鼠胰岛素放射免疫检测试剂盒购自Linco research。胰岛素抗体及胰高糖素抗体为Santa Cruz产品。 方法：应用nestin结合的免疫磁珠从SD大鼠胰腺导管细胞中分离和纯化干细胞，经体外扩增及诱导分化形成胰岛素分泌细胞。①采用RT-PCR法检测细胞分化过程中胰岛素mRNA的表达。②将干细胞经诱导分化形成的胰岛进行冰冻切片，采用免疫荧光染色观察胰岛素及胰高糖素阳性细胞表达。③对干细胞分化胰岛的胰岛素释放功能进行评价，放射免疫法测定上清中胰岛素检测干细胞分化形成的胰岛分泌胰岛素的能力。④鼠按220mg／kg链脲菌素腹腔注射法制备为1型糖尿病模型，造模后随机摸球分为天然胰岛组及干细胞胰岛组，每组5只。将大鼠天然胰岛（SD大鼠分离）及干细胞分化形成的胰岛分别移植于糖尿病裸鼠左肾包膜下，观察移植后鼠尾静脉血糖变化。 主要观察指标：①细胞分化过程胰岛素mRNA表达。②胰岛样结构中胰岛素及胰高糖素阳性细胞表达。③干细胞分化形成的胰岛分泌胰岛素情况。④移植后鼠尾静脉血糖变化。 结果：①RT-PCR检测结果表明胰岛素mRNA的表达随诱导时间延长而明显升高。②免疫荧光染色结果显示胰岛结构的中间存在大量胰岛素阳性细胞，胰高糖素阳性细胞主要分布于胰岛样结构的周边。③干细胞分化的胰岛在高浓度葡萄糖刺激后明显缺乏快速相的胰岛素释放，而是表现细胞外上清中胰岛素浓度的缓慢升高。④天然胰岛组移植后3d使血糖降低到10mmol／L以下，至观察到60d仍维持在正常水平；干细胞胰岛在移植后8d使血糖降低至10mmol／L以下，且在移植35d后血糖逐渐升高并恢复到胰岛移植前的水平。 结论：大鼠胰腺干细胞经体外扩增和诱导分化后可分化胰岛素分泌细胞，但对葡萄糖的刺激没有快速相的胰岛素分泌。将胰岛素分泌细胞移植到1型糖尿病模型裸鼠后可一定程度地改善糖代谢的紊乱。