中枢外源性P物质对大鼠胃电-机械活动的影响

目的 大鼠侧脑室给药观察中枢外源性P物质(SP)对胃电-机械活动和体表胃电活动(EGG)的影响，应用SP受体拮抗剂和阿托品探究SP作用的受体机制；比较冷应激后胃对SP和SP受体拮抗剂的动力学反应性的变化。方法 雄性Wistar大鼠44只，随机分为7组：正常对照，SP，SP受体拮抗剂，阿托品，冷应激对照，冷应激+SP，冷应激+SP拮抗剂。冷应激大鼠模型制备后，进行体内慢波、快波及胃窦环行肌运动、体表胃电记录。结果 ①侧脑室SP给药10μL(1&;#215;10^-8mol／L)，能引起胃窦运动明显增强(P&;lt;0．05)。②应激使胃运动幅度极显著升高、频率加快(P&;lt;0．01)，应激后大鼠对侧脑室注入P物质的胃动力学反应性较前明显增强(P&;lt;0．05)。③在本实验中，未发现侧脑室注射SP受体拮抗剂([D-Pro^2，D-Phe^7，D-Trp^9]-Substance P)10μL(1&;#215;10^-8mol／L)，有阻断内源性SP引起胃窦收缩的作用。侧脑室注射M受体阻断剂阿托品10μL(1&;#215;10^-7mol／L)，不能阻断脑内P物质对胃的收缩效应。结论 中枢注入的P物质可以作为促进胃电-机械活动的调节因子参与中枢增强胃肠的调控。     

下丘脑瘦素对大鼠胃运动的作用

目的:观察下丘脑外侧区(LH)及腹内侧区(VMH)微量注射瘦素对大鼠胃运动的作用。方法:应用慢性植入应力传感器记录清醒大鼠胃体和胃窦运动,颈外静脉插管取血样品,血清瘦素用放射免疫分析法(RIA)测定。采用不锈钢管插入LH及VMH,供注射瘦素用。结果:大鼠胃运动类型:空腹胃体与胃窦出现典型的消化间期移行性复合运动(MMC),分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ时相,其Ⅲ相高振幅收缩波可从胃体传至胃窦;下丘脑注射瘦素对胃运动的作用:下丘脑LH和VMH注射0.3、0.6、1.2μg/2μl瘦素均明显抑制大鼠胃体和胃窦MMCⅢ相收缩运动(均P<0.01),呈剂量反应效应。VMH与LH瘦素两者对胃运动抑制作用比较,VMH瘦素对MMCⅢ相收缩活动的抑制作用强于LH(P<0.05);下丘脑注射瘦素对外周瘦素影响:当给LH和VMH注射瘦素时外周血中瘦素浓度上升,与胃运动抑制同步。LH与VMH注射瘦素分别使血清瘦素较对照组增加(38.21±9.42)%(P<0.05)和(54.25±11.37)%(P<0.01);迷走神经和拮抗剂作用:切断膈下迷走神经,阿托品及胆囊收缩素A(CCK-A)受体拮抗剂loxiglumide均可阻断下丘脑瘦素对胃运动的抑制效应及外周释放瘦素的作用。结论:下丘脑瘦素对胃运动有持续性抑制作用,其作用可能通过迷走-胆碱能神经及CCK-A受体介导。     

大鼠侧脑室内注射五肽胃泌素对肺动脉压的影响

目的:探讨五肽胃泌素对大鼠肺动脉压的影响及其所产生的中枢性作用。方法:实验于2003-10/2004-06在郧阳医学院机能实验中心完成。实验选用SD雄性大鼠56只,将大鼠随机分为6组。①生理盐水组(n=6):于侧脑室内注射生理盐水40μL连续观察30min。②侧脑室注射五肽胃泌素组(n=8):于大鼠侧脑室内注射五肽胃泌素0.2g/L。③生理盐水+五肽胃泌素组(n=6):于大鼠侧脑室预先注射生理盐水40μL,5min后从原导管注射五肽胃泌素0.2g/L,连续观察30min。④酚妥拉明+五肽胃泌素组(n=12):于大鼠侧脑室注射酚妥拉明((受体阻断剂)0.25g/L,连续观察30min肺动脉压,5min后从原导管注射五肽胃泌素0.2g/L。⑤普萘洛尔(β受体阻断剂)+五肽胃泌素组(n=12):于大鼠侧脑室预先注射普萘洛尔0.1g/L,5min后从原导管注射五肽胃泌素0.2g/L,连续观察30min。⑥阿托品(M受体阻断剂)+五肽胃泌素组(n=12):于大鼠侧脑室预先注射阿托品0.1g/L,5min后从原导管注射五肽胃泌素0.2g/L,连续观察30min。以肺动脉压为指标,在氨基甲酸乙酯麻醉、三碘季铵酚制动、呼吸机控制呼吸的SD大鼠上,观察给药前,给药后1,5,10,15,20,25,30min大鼠肺动脉压的变化。结果:56只大鼠均进入结果分析。①侧脑室注射五肽胃泌素组给药后5,10,15min大鼠肺动脉压明显高于给药前犤(20.6±1.0),(21.2±1.2),(20.4±1.0),(18.8±1.0),(18.7±0.8),(18.9±1.0)mmHg,P<0.01犦。②酚妥拉明+五肽胃泌素组大鼠在给药5,10,15min后肺动脉压明显低于生理盐水+五肽胃泌素组犤(18.6±1.1),(18.8±1.0),(18.6±1.1)mmHg;(20.1±1.0),(20.9±0.9),(21.1±1.0)mmHg,P<0.01犦。③普萘洛尔+五肽胃泌素组、阿托品+五肽胃泌素组大鼠在给药5,10,15min后肺动脉压与生理盐水+五肽胃泌素组比较,无明显差异犤(19.6±1.0),(20.4±1.1),(21.0±1.2)mmHg;(19.5±1.1),(20.6±1.2),(21.4±1.0)mmHg,P>0.05犦。结论:五肽胃泌素具有中枢性升高肺动脉压的作用,此作用可能部分由脑内β受体介导。     

蛋白激酶C和蛋白激酶G对失血性休克大鼠血管平滑肌细胞钙敏感性的调节作用

目的探讨蛋白激酶C(PKC)、蛋白激酶G(PKG)对失血性休克大鼠血管平滑肌细胞钙敏感性的调节作用。方法经股动脉放血使平均动脉压维持在40mmHg(1mmHg=0.133kPa)2h制备失血性休克大鼠模型。采用离体血管环张力测定技术,测定在失血性休克大鼠肠系膜上动脉(SMA)血管环去极化状态下(120mmol/LK+)对梯度浓度Ca2+的收缩反应性(钙敏感性)变化;同时观察PKC、PKG活性调节剂对钙敏感性的影响。测定大鼠SMA的PKC、PKG活性变化,分析PKC、PKG活性变化与血管钙敏感性变化间的关系。结果休克2hSMA血管环对钙敏感性明显降低,其量-效曲线明显右移,最大收缩力(Emax)明显降低(P均<0.01)。PKC激动剂PMA1×10-7mol/L可明显提高休克血管环对钙敏感性,PKC拮抗剂staurosporine1×10-7mol/L可降低休克血管环对钙敏感性(P<0.05或P<0.01);PKG激动剂8Br-cGMP1×10-4mol/L可使休克血管钙敏感性降低,其拮抗剂KT-58231×10-6mol/L可提高休克血管钙敏感性(P均<0.05)。休克2hSMA的PKC活性明显降低,PKG活性明显升高(P<0.05和P<0.01),分别与休克血管钙敏感性变化呈正相关和负相关(P均<0.01)。结论PKC和PKG参与了失血性休克血管平滑肌细胞钙敏感性的调控,PKC可上调血管平滑肌细胞的钙敏感性,PKG可下调其钙敏感性。     

胃电起搏对大鼠胃窦Cajal间质细胞的影响

目的研究胃电起搏对大鼠Cajal间质细胞(ICC)数量和C-kit受体表达的影响,探讨ICC在胃电起搏调控胃慢波活动中的作用。方法建立Wistar大鼠胃起搏模型,将大鼠分为起搏组(n=8)和对照组(n=8)。选用适宜的起搏参数以控制胃电慢波,持续刺激1 h,连续刺激20 d后处死大鼠并取胃窦组织,以免疫组织化学方法结合图像分析技术和Western blot方法分析C-kit受体免疫反应阳性细胞和C-kit蛋白表达变化。结果起搏组大鼠胃肌间神经丛内C-kit免疫反应阳性产物面积和平均光密度值均显著高于对照组[(1976.76±336.67)vs(1368.23±459.32),P<0.05;(0.19±0.50)vs(0.12±0.52),P<0.05],刺激组大鼠胃窦组织C-kit蛋白表达显著增高[(0.50±0.09)vs(0.29±0.02),P<0.05]。结论胃电起搏后胃窦肌间神经丛ICC数量增多,参与了胃电起搏调控胃慢波活动。     

大鼠脑海马CA1区神经元诱发放电过程中催产素与阿片受体的参与和调制作用

背景中枢内催产素可作为一种神经递质或调质参与学习记忆、性行为、痛觉调节以及阿片耐受与依赖,海马内催产素能系统与阿片系统具有一定的相互作用.目的探讨侧脑室注射催产素对大鼠脑左背侧海马CA1区神经元诱发放电的影响以及催产素与阿片受体之间可能的相互作用.设计随机对照实验.单位广东医学院生理教研室,武汉大学医学院生理系,武汉大学医学院病理学教研室.材料实验于2002-09/2003-09在武汉大学医学院生理系完成,选用雄性SD大鼠36只.随机分为6组,生理盐水对照组、催产素处理组(0.2,2,20 mg/L)、催产素受体拮抗剂+催产素(2 mg/L)组、纳洛酮+催产素(2 mg/L)组,每组6只.方法脑海马CA1区细胞外记录采用玻璃微电极记录用微电极推进器将电极插入脑海马CA1区.神经元放电经微电极放大器放大后,显示在示波器上进行观察.记录到神经元放电后,经双极不锈钢电极每隔5 min刺激坐骨神经1次,共刺激50min 10次.催产素0.2,2,20mg/L处理组通过侧脑室给药管匀速而缓慢注入催产素0.2,2,20 mg/L 5 μL.催产素受体拮抗剂+催产素(2 mg/L)组侧脑室预先注射80 mg/L催产素受体拮抗剂2.5μL,然后再注射2 mg/L催产素2.5μL.纳洛酮+催产素(2 mg/L)组侧脑室预先注射400 mg/L纳洛酮2.5μL,然后再注射2 mg/L催产素2.5μL.以放电频率变化率为观察指标,检测不同剂量催产素对海马CA1区神经元诱发放电的影响及催产素受体拮抗剂、纳洛酮对催产素的作用.主要观察指标各组大鼠刺激前后脑海马CA1区神经元诱发放电频率的变化率.结果36只大鼠均进入结果分析.①侧脑室分别注射0.2,2,20 mg/L催产素5 μL使海马CA1神经元诱发放电频率明显降低,剂量依赖关系明显.②催产素(2 mg/L)对CA1神经元诱发放电的抑制作用可被侧脑室预先注射催产素受体拮抗剂(80 mg/L,2.5μL)所阻断.③侧脑室注射纳洛酮(400 mg/L,2.5μL)可明显减弱催产素(2 mg/L)的作用.结论催产素通过激活催产素受体可抑制海马CA1神经元对外周传入电信号的反应,中枢内阿片系统也参与催产素的抑制作用,当用纳洛酮阻断阿片受体后,催产素的抑制作用明显减弱.     

P物质对体外培养大鼠心肌细胞β1-肾上腺素能受体表达下调作用的研究

目的 观察P物质(SP)对体外培养新生大鼠心肌细胞β1-肾上腺素能受体(β1-AR)表达的影响.方法 选择出生1～3 d的SD大鼠.分离、培养心肌细胞,将细胞培养至72 h待用.用6孔培养板将细胞随机分为对照组与10-7mol/L SP组,每组3孔;采用免疫细胞化学技术测定心肌细胞中β1-AR的表达.另取15孔培养板将细胞随机分为对照组(不加药物干预)与SP组(分别给予10-9、10-8、10-7、10-6mol/L SP干预),每组3孔;采用流式细胞术测定心肌细胞膜表面β1-AR的表达.结果 免疫细胞化学结果显示,SP组心肌细胞β1-AR阳性单位和平均吸光度(A)值均低于对照组(阳性单位:179.61±48.18比205.79±117.42,A值:128.26±22.72比157.35±33.11,P均<0.05).流式细胞术结果显示,不同浓度SP组β1-AR表达均低于对照组.除10-9mol/L SP组(158.87±3.12)外,10-8、10-7、10-6mol/L SP组与对照组比较差异有统计学意义(151.85士4.63,135.00±6.84,121.41±5.22比161.35±3.09,P均<0.05),且呈剂量依赖性.结论 SP可以抑制体外培养大鼠心肌细胞β1-R的表达.     

血小板活化因子受体拮抗剂的神经保护作用

目的:探讨血小板活化因子(platelet-activatingfactor,PAF)所致的神经元损伤是否通过PAF受体而起作用,PAF受体拮抗剂对神经元损伤是否具有保护作用。方法:实验于2003-05/2004-05在南京大学医学院附属鼓楼医院神经科研究室和美国约翰霍普金斯大学Dr.Tao实验室完成。使用原代野生型小鼠皮质神经元细胞培养系统;不同剂量PAF处理神经元细胞24h,并经PAF拮抗剂5μmol/LBN52021预处理;碘化物/钙黄绿素染色检测细胞凋亡,MTT法测定神经元生存能力。结果:0.3和0.6μmol/LPAF明显增加神经元细胞死亡率,0.01和0.10μmol/L增加死亡率不明显;PAF受体拮抗剂5μmol/LBN52021明显地抑制0.3μmol/LPAF所致的神经毒性。结论:PAF介导的神经元损伤是通过其受体而作用的,PAF受体拮抗剂对神经元损伤具有保护作用。     

大鼠脑海马CA1区神经元诱发放电过程中催产素与阿片受体的参与和调制作用

背景：中枢内催产素可作为一种神经递质或调质参与学习记忆、性行为、痛觉调节以及阿片耐受与依赖，海马内催产素能系统与阿片系统具有一定的相互作用。 目的：探讨侧脑室注射催产素对大鼠脑左背侧海马CA1区神经元诱发放电的影响以及催产素与阿片受体之间可能的相互作用。 设计：随机对照实验。 单位：广东医学院生理教研室，武汉大学医学院生理系，武汉大学医学院病理学教研究。 材料：实验于2002-09／2003-09在武汉大学医学院生理系完成，选用雄性SD大鼠36只。随机分为6组，生理盐水对照组、催产素处理组（0．2，2，20mg／L）、催产素受体拮抗剂＋催产素（2mg／L）组、纳洛酮＋催产素（2mg／L）组，每组6只。 方法：脑海马CA1区细胞外记录采用玻璃微电极记录：用微电极推进器将电极插入脑海马CA1区。神经元放电经微电极放大器放大后，显示在示波器上进行观察。记录到神经元放电后，经双极不锈钢电极每隔5min刺激坐骨神经1次，共刺激50min 10次。催产素O．2，2，20mg／L处理组通过侧脑室给药管匀速而缓慢注入催产素O．2，2，20mg／L5μL。催产素受体拮抗剂＋催产素（2mg／L）组：侧脑室预先注射80mg／L催产素受体拮抗剂2．5μL，然后再注射2mg／L催产素2．5μL。纳洛酮＋催产素（2mg／L）组：侧脑室预先注射400mg／L纳洛酮2．5μL，然后再注射2mg／L催产素2．5μL。以放电频率变化率为观察指标，检测不同剂量催产素对海马CA1区神经元诱发放电的影响及催产素受体拮抗剂、纳洛酮对催产素的作用。主要观察指标：各组大鼠刺激前后脑海马CA1区神经元诱发放电频率的变化率。 结果：36只大鼠均进入结果分析。①侧脑室分别注射0．2，2，20mg／L催产素5μL使海马CA1神经元诱发放电频率明显降低，剂量依赖关系明显。②催产素（2mg／L）对CA1神经元诱发放电的抑制作用可被侧脑室预先注射催产素受体拮抗剂（80mg／L，2．5μL）所阻断。③侧脑室注射纳洛酮（400mg／L，2．5μL）可明显减弱催产素（2mg／L）的作用。 结论：催产素通过激活催产素受体可抑制海马CA1神经元对外周传入电信号的反应，中枢内阿片系统也参与催产素的抑制作用，当用纳洛酮阻断阿片受体后，催产素的抑制作用明显减弱。     

γ-氨基丁酸在中枢神经系统痛觉调制中的作用

目的:观察大鼠脑室或伏隔核加入外源性γ-氨基丁酸后,伏隔核痛反应神经元的电变化,以及γ-氨基丁酸A受体拮抗剂荷包牡丹碱的阻断效应,进一步研究γ-氨基丁酸在痛觉信息通路中的作用。方法:实验于2004-07／12在哈尔滨医科大学电神经生理学实验室进行。①取30只成年Wistar大鼠随机分为γ-氨基丁酸组和对照组两组各15只,侧脑室注射γ-氨基丁酸(50 g／L)10μL或等量的生理盐水。②取26只大鼠随机分为γ-氨基丁酸组和对照组两组各13只,伏隔核内注射γ-氨基丁酸(50 g/L)10μL或等量的生理盐水。③取24只大鼠随机分为γ-氨基丁酸组和对照组两组各12只,伏隔核内注射γ-氨基丁酸(50 g／L)10μL后2 min,侧脑室注荷包牡丹碱(1 g／L,Sigma)10 μL,对照组给予等量生理盐水。所有大鼠由脉冲强直刺激坐骨神经作为伤害性痛刺激,玻璃微电极细胞外记录注药前后痛反应神经元的电变化,以刺激坐骨神经引起的伏隔核中痛兴奋神经元诱发放电秒净增值、潜伏期和痛抑制神经元诱发放电秒净增值、抑制时程为主要指标。结果:80只大鼠进入结果分析。①侧脑室注射γ-氨基丁酸后,痛兴奋神经元诱发放电潜伏期延长,诱发放电秒净增值减少;痛抑制神经元诱发放电抑制时程缩短,诱发放电频率增加,而后逐渐恢复接近注药前水平。②伏隔核内洼射γ-氨基丁酸使痛兴奋神经元诱发放电潜伏期延长,诱发放电秒净增值减少,而后逐渐恢复接近注药前水平;痛抑制神经元诱发放电抑制时程缩短,诱发放电频率增加,而后逐渐恢复接近注药前水平。③侧脑室注入荷包牡丹碱能够阻断γ-氨基丁酸的上述效应。结论:脑室和伏隔核外源性增加γ-氨基丁酸后均可提高伏隔核中痛兴奋神经元的兴奋性而抑制痛抑制神经元的电活动,证实γ-氨基丁酸在痛觉调制中起抑制性作用,介导中枢伤害性信息的传递,荷包牡丹碱能够阻断其效应。     

电针足三里对应激大鼠血浆内皮素、一氧化氮、降钙素基因相关肽的影响

Usingsynchronousmethod,weobservedthecontentchangesofET,NOandCGRPinstressratsafterEAinordertoinvestigatemechanismofEAonserumhormones.1Subjectsandmethods1.1Subjects32maturemaleSDrats,weight200-250g,wererandomlydividedintocontrolgroup,stressgroup,EAafterstressgroupandstressafterEAgroup.Therewere8ratsineachgroup.Alltheratsfasted24hoursbeforeoperation.1.2MethodsWeputratsintocageandfixed.Incontrolgroup,alltheratswerereleasedwithoutreceivingEA;instressgroup,ratswereputintorefrigeratorin4℃,…     

超敏C反应蛋白、一氧化氮与急性高血压性脑出血关系的研究

目的 探讨超敏C反应蛋白(hs-CRP)和一氧化氮(NO)在急性高血压性脑出血患者炎症状态及预后判断中的作用.方法 采用颗粒增强免疫透射比浊法、硝酸还原酶法分别测定126例急性高血压性脑出血患者血清hs-CRP和NO水平,并与120例健康者进行比较.结果 急性高血压性脑出血患者血清hs-CRP[(26.89±17.13)mg/L]和NO[(67.15±14.66)μmol/L]水平均明显高于健康对照组[(1.48±0.91)mg/L和(33.05±6.11)μmol/L](P<0.01).与预后佳组比较,预后不佳组血清hs-CRP[(45.73±17.03)mg/L]和NO[(83.15±7.75)μmol/L]水平升高更为明显(P<0.01).结论 hs-CRP和NO是介导急性高血压性脑出血患者高炎性状态和继发性脑损害的关键效应分子.血清hs-CRP和NO水平的高低与患者的预后有关.     

甘草酸单铵盐调节急性早幼粒细胞白血病细胞NB4肿瘤干细胞样特性、氧化应激及线粒体的功能

目的:探讨甘草酸单铵盐(MAG)对急性早幼粒细胞白血病细胞NB4肿瘤干细胞样特性、氧化应激及线粒体功能的影响.方法:CCK-8法检测急性早幼粒细胞白血病细胞NB4活力,筛选合适剂量;克隆法检测NB4细胞增殖;Western blot检测细胞周期相关蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡并分选NB4干细胞阳性(CD133+);...     

雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α1基因及成骨细胞生成的影响

目的研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的条件培养体系中, 17β-雌二醇( E2)对其核结合因子α 1 (Cbfα 1 )基因表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用.方法取自 1只 3月龄雌性 SD大鼠骨髓基质细胞在生长培养基中传代后,用 1,25(OH)2D3和地塞米松( DEX)诱导骨髓基质细胞向成骨细胞分化.应用半定量 RT- PCR技术,观察不同浓度 E2对骨髓基质细胞分化过程中核结合因子α 1mRNA表达的影响,以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶的活性, Van Gieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量.结果 E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中 Cbfα 1 mRNA的表达,且呈剂量依赖性.E2浓度为 0,1× 10- 10, 1× 10- 8和 1× 10- 6mmol/L时, Cbfα 1 mRNA的表达量分别为 23.4%± 1.8%, 21.8%± 2.0%, 15.8%± 1.5% ( t=6.3, P< 0.01)和 5.8%± 0.8%( t=17.8, P< 0.01).Northern blot 结果显示 Cbfα 1 mRNA的表达量分别为 4.22± 0.11, 2.51± 0.12( t=21, P< 0.01), 1.88± 0.10( t=31, P< 0.01)和 1.17± 0.09( t=41, P< 0.01).ALP活性随 E2浓度增加而降低,在上述 E2浓度时, ALP活性分别为 (42.6± 2.5)U/g,(17.9± 2.0)U/g( t=15, P< 0.01) ,(10.8± 1.5) U/g( t=21, P< 0.01)和 (3.6± 0.7)U/g( t=29, P< 0.01).细胞Ⅰ型胶原的含量随 E2浓度增加而降低.结论 E2能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中 Cbfα 1mRNA的表达,减少成骨细胞的生成.     

二氢石蒜碱对家兔脑血管的选择性作用特点

背景:二氢石蒜碱在外周能抑制交感神经末梢释放儿茶酚胺,阻断α,β肾上腺素能受体,具有扩血管、降血压,抗缺糖、缺氧作用.目的:应用重酒石酸去甲肾上腺素和KCl引起血管收缩反应,观察二氢石蒜碱对家兔脑基底动脉、胸主动脉及心室乳头肌的选择性作用.设计:观察性对比实验.单位:郧阳医学院药理教研室.材料:实验于2001-03/07在郧阳医学院药理教研室的科研室进行,选择46只成年健康新西兰白兔.方法:新西兰白兔在麻醉下耳缘静脉注射10 mL空气处死,迅速取出脑、胸主动脉及心脏.将基底动脉、胸主动脉制成4.0～5.0mm的血管环,打开心脏分离心室乳头肌,分别连接张力换能器.实验观察:①记录重酒石酸去甲肾上腺素或KCl单用时收缩曲线的变化:胸主动脉给予重酒石酸去甲肾上腺素0.1 mmol/L或KCl60mmol/L引起血管亚最大收缩,待收缩曲线平稳后,分别用累积法加入不同浓度的二氢石蒜碱或尼莫地平.基底动脉给予重酒石酸去甲肾上腺素0.1 mmol/L或KCl 60 mmol/L,待血管收缩达峰值后,冲洗液每20 min换1次,共3次.再用不同浓度二氢石蒜碱或尼莫地平,20 min后再加入重酒石酸去甲肾上腺素或KCl,待曲线平稳后,观察每单剂药物所致收缩曲线的变化.②记录电刺激心室乳头肌时收缩的幅度变化:1次/s,波宽3 ms,阈电压的120%强度电刺激以引发心室乳头肌同步收缩活动,待收缩曲线平稳后,分别用累加法加入二氢石蒜碱或尼莫地平.主要观察指标:①离体基底动脉、胸主动脉及心室乳头肌收缩张力变化.②二氢石蒜碱或尼莫地平对重酒石酸去甲肾上腺素或KCl所致家兔血管环收缩的半数有效浓度值.结果:46只家兔离体基底动脉、胸主动脉及心室乳头肌标本均进入实验分析.①二氢石蒜碱使基底动脉静息张力升高,尼莫地平则使其降低,对胸主动脉无影响.②重酒石酸去甲肾上腺素、KCl所致基底动脉及胸主动脉收缩,二氢石蒜碱使之呈剂量依赖性松弛,其半数有效浓度值:对基底动脉分别为(6.69±3.12)×10-,(3.41±1.52)×10-3 mmol/L;对胸主动脉分别为(1.49±0.59)×10-3,(2.91±0.99)×10-3 mmol/L.拮抗重酒石酸去甲肾上腺素所致基底动脉收缩作用明显强于KCl.尼莫地平对KCl所致收缩的抑制显著强于对重酒石酸去甲肾上腺素.③重酒石酸去甲肾上腺素或尼莫地平对电刺激诱发心室乳头肌的收缩均有剂量依赖性抑制作用,二氢石蒜碱对电刺激诱发心室乳头肌收缩的半数有效浓度显著高于重酒石酸去甲肾上腺素所致基底动脉.结论:二氢石蒜碱对家兔基底动脉有明显的选择性作用,在基底动脉可能存在使该血管平滑肌收缩的α1受体亚型和使之舒张的β受体.二氢石蒜碱作用可能与对这些受体的阻断作用相关.其选择性作用可能有助于改善缺血区的血液供给.     

NR2B受体拮抗剂抑制成年大鼠齿状回新生神经元诱导的长时程增强

背景:新生神经元可诱导产生长时程增强,NMDA受体亚基NR2B的激活在成熟神经元诱导的长时程增强中有重要作用,但其对由新生神经元诱导的长时程增强的影响尚未见报道.目的:观察NR2B受体拮抗剂Ro25-6981在大鼠齿状回新生神经元诱导的长时程增强中的作用.设计、时间及地点:脑片电生理实验,于2007-02/06在山西医科大学神经生物实验室完成.材料:3月龄雄性Wistar大鼠26只,由山西医科大学实验动物中心提供.方法:大鼠麻醉后断头取脑,分离海马,制备400μmol/L脑片.采用细胞外微电极记录技术,于海马齿状回分子层内侧1/3处采用双极钨电极进行低频刺激,获得稳定的刺激曲线后,在高频强直刺激下诱导长时程增强.长时程增强的诱导程序为每串刺激频率100 Hz,持续500 ms,间隔20 s,共4串刺激,记录到兴奋性突触后电位＞1 mV以上的脑片用于下述两项实验.①NR2B拮抗剂R025-6981阻断人工脑脊液诱导的长时程增强:脑片分为2组,人工脑脊液组持续通以含有95%O2和5%CO2的人工脑脊液,人工脑脊液+Ro25-6981组在强直刺激前应用3 μmol/L NR2B拮抗剂Ro25-6981作用10 min,后续步骤同上组.②NR2B拮抗剂Fo25-6981抑制荷包牡丹碱诱导的长时程增强:脑片分为2组,荷包牡丹碱组在强直刺激前给予10 μ mol/L荷包牡丹碱灌流10 min,荷包牡丹碱+Ro25-6981组在强直刺激前同时给予3 μ mol/L Ro25-6981和10 μmol/L荷包牡丹碱灌流10 min.主要观察指标:长时程增强记录结果.结果:①强直刺激后50～60 min,人工脑脊液组长时程增强(107.85±1.34)%,人工脑脊液+Ro25-6981组长时程增强(100.75±2.75)%,两组比较差异有显著性意义(P＜0.05).②强直刺激后50～60 min,荷包牡丹碱组长时程增强(164.67±2.40)%,荷包牡丹碱+Ro25-6981组长时程增强(147.56±6.63)%,两组比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论:在大鼠海马齿状回区域,NR2B受体拮抗剂Ro25-6981阻断了人工脑脊液诱导的长时程增强,并部分抑制了荷包牡丹碱诱导的长时程增强,提示NR2B受体拮抗荆可以抑制新生神经元诱导的长时程增强.     

Mechanisms of substance P-induced pulmonary oedema in the rabbit: interactions between parasympathetic and excitatory NANC nerves

Summary— The pharmacological mechanisms involved in the substance P (SP)-induced pulmonary oedema were studied in isolated perfused rabbit lungs. Substance P induced a dose-dependent increase in the capillary filtration coefficient (Kf,c), responsible for oedema. Atropine, hemicholinium-3 and ruthenium red pretreatment partly protected the lungs against SP effects, while tetrodotoxin and hexamethonium did not significantly modify them. (±)CP96,345, a NK1 receptor antagonist, completely inhibited the SP-induced increase in the Kf,c. Like SP, acetylcholine (ACh) and capsaicin also increased the Kf,c. Atropine and (±)CP96,345 completely blocked the oedema induced by both drugs. Tetrodotoxin and ruthenium red strongly inhibited the response to capsaicin and acetylcholine. It was concluded that SP-induced pulmonary oedema is in part mediated by a stimulating action on cholinergic efferent nerves, with subsequent release of endogenous acetylcholine. Acetylcholine can, in turn, stimulate the release of SP from excitatory non adrenergic, non cholinergic nerves. The effects induced by capsaicin and exogenous acetylcholine, thus endogenous SP, involve tetrodotoxin-sensitive mechanisms, while those produced by exogenous SP are tetrodotoxin-resistant.     

Pharmacological characterization of 5-hydroxytryptamine receptors in the canine terminal ileum and ileocolonic junction

The effects of 5-hydroxytryptamine (5-HT), the 5-HT1-like receptor agonist 5-carboxamidotryptamine and the 5-HT3 receptor agonist 2-methyl-5-hydroxytryptamine were studied on circular muscle strips of the canine terminal ileum and ileocolonic junction. Serial administration of 5-HT or of 5-carboxamidotryptamine induced slow tonic contractions that at higher concentrations of 5-HT (10(-4)-3 x 10(-4] were preceded by an initial relaxation and a fast phasic contraction. The concentration-response curves to both agonists were competitively shifted to the right by the mixed 5-HT1/5-HT2 receptor antagonist methysergide. The initial relaxation and fast phasic contraction were inhibited by the 5-HT3 receptor antagonist ICS 205-930 and tetrodotoxin. Atropine blocked the fast phasic contraction, but enhanced the relaxation. During acetylcholine-induced contractions, 5-HT and 2-methyl-5-hydroxytryptamine (greater than or equal to 10(-5) M), but not 5-carboxamidotryptamine, evoked relaxations that were blocked by ICS 205-930 and tetrodotoxin, but not by adrenoceptor antagonists. Thus, in the canine terminal ileum and ileocolonic junction, 5-HT stimulates neuronal 5-HT3 receptors and excitatory 5-HT1-like receptors located on smooth muscle. Stimulation of the 5-HT3 receptors results in an acetylcholine-mediated contraction and a relaxation mediated by an as yet unknown nonadrenergic noncholinergic neurotransmitter.     

Tachykinin antagonist FK224 inhibits neurokinin A-, substance P- and capsaicin-induced human bronchial contraction

Summary— To determine the roles of endogenously released tachykinins (substance P [SP] and neurokinin A [NKA]) in the human bronchial tissues, we studied the effects of tachykinin antagonist FK224 on bronchial smooth muscle contraction induced by SP, NKA and capsaicin in an organ bath. FK224 (10⁻⁶ M and 10⁻⁵ M, respectivly) significantly inhibited NKA-induced contraction and 10⁻⁵ M FK224 shifted the dose-response curve to more than one log unit higher concentration. Because SP- and capsaicin-induced contractions were small, we pretreated the tissues with the neutral endopeptidase inhibitor phosphoramidon (10⁻⁵ M), which inhibits degradation of exogenous tachykinins in order to potentiate the contractions. FK224 (10⁻⁵ M) significantly inhibited SP-induced contraction and it shifted the dose-response curves to about one log unit higher concentration. FK224 (10⁻⁵ M) also significantly inhibited capsaicin-induced contraction and it shifted the dose-response curves to more than one log unit higher concentration. In contrast, FK224 (10⁻⁵ M) did not affect on acetylcholine-, histamine-, and leukotriene D₄-induced contraction. These results suggest that FK224 is a tachykinin receptor antagonist in the human bronchial smooth muscle, and that capsaicin-induced contraction is due to endogenously released tachykinin-like substances in the human bronchus.