白血病患者cyclin E2、CDK2的表达与复发的关系

目的 探讨急性白血病患者细胞周期蛋白E2 (cyclin E2)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达情况及预后意义.方法 急性白血病(AL)患者70例,包括新近诊断急性白血病患者41例、复发患者10例和完全缓解期患者19例.14例健康人为正常对照.应用半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测骨髓或外周血单个核细胞cyclin E2和CDK2 mRNA表达水平.结果 Cyclin E2和CDK2 mRNA在初治的AL患者阳性表达明显高于正常对照组(70.7％ vs 0％,P＜0.05),cyclin E2在完全缓解组中阳性率低于初治组(47.4％ vs 70.7％,P＜0.05),初治组CDK2阳性率高于正常对照组(78.0％ vs 28.6％,P＜0.05).cyclin E2 mRNA阳性表达患者完全缓解率低于阴性表达者(48.3％ vs 91.7％,x2 =5.016,P＜0.05).结论 Cyclin E2和CDK2可望成为急性白血病早期预后指标和复发判断指标.     

白细胞介素3受体α在急性白血病中的表达及临床意义的研究

目的研究白细胞介素3受体α mRNA(IL-3RαmRNA)在急性白血病(AL)中的表达及其在急性白血病中的临床意义。方法对80例急性白血病患者(包括56例初治急性白血病患者、9例复发患者和15例缓解患者),另外,15例健康人为正常对照组,KG-1α细胞株为阳性对照,应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测各组IL-3RαmRNA水平。结果IL-3RαmRNA在初治AL患者中表达水平明显高与正常对照组(P<0.05);IL-3Rα mRNA在缓解组表达水平高于正常对照组,但差别无统计学意义(P>0.05),但缓解组表达水平低于初治AL组,且差别有统计学意义(P<0.05);复发组平均表达水平高于正常对照组(P<0.05);AL患者中42例可进行疗效评估,初治IL-3Rα mRNA阳性AL患者中分为高表达与低表达组,IL-3Rα低表达患者的缓解率明显高于高表达患者,两者比较差别有统计学意义(P<0.05);7例复发的AL患者,仅有1例用药后达到完全缓解(CR),其IL-3Rα mRNA表达均阳性;余6例均未达到CR。结论在急性白血病患者IL-3Rα mRNA有异常过度高表达;IL-3Rα mRNA高表达的患者缓解率低,表明与白血病的发病及疗效预后有关;可用来作为判断疗效预后的一新指标。     

细胞周期蛋白A在儿童急性白血病患者中的表达及意义

目的 探讨细胞周期蛋白A(Cyclin A)在儿童急性白血病患者中的表达及临床意义.方法 应用Western blot方法检测47例初诊急性白血病(AL)患儿和33例非血液系统恶性疾病患儿(对照组)骨髓单个核细胞Cyclin A的表达.结果 47例AL患儿Cyclin A表达水平(0.38±0.20)显著高于对照组(0.03±0.15)(P<0.01);急性淋巴细胞白血病(ALL)高危组(HR-ALL)患儿Cyclin A表达水平(0.62±0.38)高于ALL标危组(SR-ALL)(0.33±0.33)(P<0.05);33例外周血WBC≥50 × 109/L患儿组和14例外周血WBC<50×109/L患儿组Cyclin A的表达水平分别为0.64±0.36和0.39±0.38,差异有统计学意义(P<0.05);Cyclin A表达阳性的18例患儿中8例完全缓解(CR),CR率44.4%,较阴性患儿CR率(100%)低(P<0.01).结论 Cyelin A参与儿童急性白血病的发生、发展.     

P27^kip1与细胞周期蛋白G在急性白血病中的表达及相关性研究

为了探讨P27^kip1与细胞周期蛋白G（cyclin G）在急性白血病患者中的表达及其相关性,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测89例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27^kip1与cyclin G mRNA水平,采用Wes—tern blot检测39例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27^kip1与cyclinG蛋白表达水平。结果显示：急性白血病初治／复发组的cyclin G mRNA与蛋白表达水平均明显高于缓解组和正常对照组（P〈0．05或P〈0．01）;缓解组与正常对照组之间无显著差异（P〉0．05）。急性白血病初治／复发组的P27^kip1 mRNA水平与缓解组和正常对照组比较均无明显差异（P〉0．05）。而急性白血病缓解组和正常对照组的P27^kip1的蛋白表达水平高于初治／复发组（P〈0．05）,缓解组与正常对照组之间无显著差异（P〉0．05）。P27却。与cyclin G的表达呈低度负相关。结论：P27螂。与cyclin G在白血病患者中有异常表达,与白血病的发生发展有一定联系;P27^kip1的低表达与cyclin G的异常高表达可能是白血病预后不良的因素之一。     

Cyclin E2和Survivin在急性白血病的表达及其相关性

为了解细胞周期蛋白E2（cyclin E2）和存活蛋白（survivin）在急性白血病中基因表达及两者间的相关性，采用逆转录-聚合酶链反应的方法检测了84例成人急性白血病患者（16例复发患者，60例初治患者和8例持续缓解患者）和20例正常人的cycfin E2和survivin mRNA的表达。结果表明：①cyclinE2在急性白血病中表达的阳性率（70．24％）高于对照组（0％）；survivin在急性白血病中表达的阳性率（72．62％）高于对照组（30％）；②在急性白血病中cyclin E2的表达与survivin的表达呈正相关性，r=0．65；③cyclinE2阳性组缓解率（55．81％）低于cycfin E2阴性组（88．24％），cyclin E2阳性组复发率（41．67％）高于阴性组（20％）；复发组cyclin E2表达率在三组中最高。持续缓解组cyclin E2表达率在三组中最低，④cyclin E2在急性髓系白血病患者表达率（59．32％）低于急性淋巴细胞白血病患者的表达率（96％）；与发病时白细胞计数未见有统计学意义的相关。结论：首次证实cyclin E2在急性白血病中有异常表达，且对临床预后有不良影响；cyclin E2在急性白血病中的表达与survivin有正相关，提示cyclin E2在急性白血病中有可能作为一种微小残留病变的检测指标。     

急性白血病患者周期蛋白D1mRNA表达及其临床意义

目的　检测急性白血病患者周期蛋白 (cyclin)D1mRNA的表达 ,并探讨其与临床的关系。方法　采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 6 5例急性白血病患者及 5名正常人骨髓细胞cyclinD1mRNA。结果　正常骨髓未检测到cyclinD1mRNA表达 ;急性白血病患者阳性率 2 6 2 % ,急性淋巴细胞白血病与急性非淋巴细胞白血病之间差异无显著性 ;复发组患者的cyclinD1mRNA阳性率 (6 3 6 % )明显高于初治组 (2 1 4% )及缓解组 (8 3% )。结论　急性白血病患者中有cyclinD1mRNA过度表达的情况 ,且与临床复发关系较为密切。     

白血病患者SHIP和其他相关基因表达及其临床意义

目的 观察含有SH2结构域的肌醇5位磷酸酶(SHIP)基因在急性白血病(AL)患者的表达,评价SHIP基因的改变在急性白血病和慢性粒细胞白血病(CML)发病中的作用以及对预后的影响.方法 以半定量逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测78例AL患者、18例CML患者SHIP、半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)、半胱氨酸蛋白酶3(casepase-3)的表达.结果 在初治的AL组中,SHIP的阳性率为69.6%,平均表达水平为0.167±0.121,其表达水平明显低于正常对照组.复发AL组中患者SHIP的表达阳性率为54.5%,平均表达水平为0.211±0.224,其表达水平明显低于正常对照组(P＜0.05),较初治AL组相比表达水平低,差异无统计学意义(P＞0.05).在缓解AL组中,SHIP的阳性率为95.2%,平均表达水平为0.851±0.591,与正常对照组(1.945±1.804)相比表达水平显著降低(P＜0.05);同时表达高于初治AL组(P＜0.05).半胱氨酸蛋白酶1和半胱氨酸蛋白酶3在AL mRNA的阳性率为分别为80.0%和100.0%,表达水平分别为1.785±1.168和1.887±0.838,低于正常对照组(3.345±1.284)和(5.122±2.025)(P＜0.05).CML慢性期SHIP的表达阳性率为100.0%,表达水平为0.951±0.921,低于正常对照组(1.945±1.804)(P＜0.05);CML急变期SHIP mRNA表达阳性率为71.4%,表达水平为0.278±0.191,低于正常对照组(P＜0.05);SHIP的表达水平在CML慢性期和急变期比较,差异有统计学意义.AL组SHIP阳性缓解率为71.0%,AL组SHIP阴性缓解率为23.1%(P＜0.05).AL组半胱氨酸蛋白酶1阳性缓解率为63.9%,AL组半胱氨酸蛋白酶阴性缓解率为25.0%(P＜0.05).运用直线相关分析表明在AL中半胱氨酸蛋白酶1、半胱氨酸蛋白酶3与SHIP的相关系数分别为r=0.372,r=0.437,P＜0.05,半胱氨酸蛋白酶1、半胱氨酸蛋白酶3与SHIP表达呈正相关.结论 SHIP在急性髓系白血病患者中低表达或不表达,动态观察SHIP mRNA的表达可作为预测急性髓细胞白血病(AML)疗效的一个指标.     

Cyclin B1 and p21cipl在急性白血病中的表达及其相关性研究

细胞周期蛋白（cyclin）B1作为调节细胞进行有丝分裂的正性调节因子,在细胞增殖中起到重要作用.本研究旨在评价cyclin B1在急性白血病（AL）发生、发展中的作用及其对AL患者预后判断的价值.采用流式细胞术对136例初治AL成人患者、10例持续完全缓解（CCR）患者及17例正常人进行cyclin B1、p21^cipl蛋白表达水平检测和细胞周期分布分析;采用RT-PCR测定Cyclin B1、p21^cipl和增殖细胞核抗原（PCNA）mRNA水平.结果显示：136例初治AL患者cyclin B1蛋白表达水平明显高于正常对照组;复发AL患者的cyclin B1表达水平明显高于正常对照组,但低于初治AL患者;缓解AL患者及CCR的AL患者cyclin B1蛋白表达水平与正常对照比较均无显著性差异;所有cyclin B1高表达的AL患者出现非顺序表达（cyclin B1在G1期出现,有些甚至G2期高表达）,cyclin B1与p21^cipl的蛋白表达呈负相关;cyclin B1蛋白表达与其mRNA水平呈正相关;cyclin B1表达与PCNA及细胞增殖指数（PI）表达水平呈正相关;cyclin B1表达水平高的AL患者有较高的缓解率和生存率,但有较高的复发率.结论：本研究首次发现cyclin B1在成人AL患者有过度表达和异常分布,认为cyclin B1与AL发生、发展有关,是影响AL患者预后的因素之一.     

中期因子在急性白血病中的表达及其意义

目的 检测中期因子(Midkine,MK)基因在白血病患者中的表达,初步探讨其与白血病的关系.方法 应用实时定量逆转录PCR(RQ-RT-PCR)方法,对181例急性白血病(AL)患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测.结果 中期因子在初治和复发AL患者、AL完全缓解(CR)患者及正常人骨髓细胞均有表达.初治和复发AL患者中期因子表达明显高于正常人及CR患者(P＜0.01及P＜0.05).而正常人与CR患者相比差异无统计学意义.中期因子的表达在B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)各亚型(包括pro-B-ALL,common-B-ALL,pre-B-ALL)及各年龄段均有显著升高(P＜0.01),且与T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)、急性杂合性白血病及急性髓系白血病(AML)各FAB亚型问差异均有统计学意义(P值均＜0.01);与正常人相比,M2型患者中期因子表达明显升高(P＜0.01),与AML其他FAB亚型相比差异亦有统计学意义(P值均＜0.05);M3患者中期因子表达也较正常人明显升高(P＜0.05),但与除B-ALL和AML-M2外的其他白血病亚型间差异无统计学意义.CD34+患者较CD34-患者中期因子表达显著升高(P＜0.01),AML1-ETO融合基因阳性的M2患者较阴性的M2患者中期冈子表达显著升高(P＜0.05).结论 B-ALL、AML-M2和AML-M3型白血病患者中均存在中期因子基因不同程度的表达升高,为白血病诊断及其发病机制的研究提供了新的方向.     

初治急性白血病患者骨髓细胞S期激酶相关蛋白和细胞周期抑制蛋白及细胞周期蛋白表达及意义

目的探讨S期激酶相关蛋白(S phase kinase associated protein,SKP2)、细胞周期抑制蛋白(cell cycle inhibitor protein factor 27,P27)、细胞周期蛋白A1(cyclin A1)及细胞周期蛋白E(cyclin E)在急性白血病患者骨髓细胞中的表达及其意义。方法 57例急性白血病患者,其中22例初治急性非淋巴细胞白血病(acute non-lymphoid cell leukemia,ANLL)患者给予DA(柔红霉素+阿糖胞苷)方案治疗,15例初治急性淋巴细胞性白血病(acute lymphatic leukemia,ALL)患者给予VDP(长春新碱+柔红霉素+泼尼松)方案治疗,10例复发ANLL患者给予MA方案(米托蒽琨+阿糖胞苷)方案治疗,10例复发ALL患者给予VA(长春新碱+阿糖胞苷)方案治疗;采用免疫组织化学法检测其骨髓细胞SKP2、P27、cyclin A1及cyclin E表达水平,并与20例非恶性血液肿瘤疾病患者(对照组)进行比较;分析急性白血病患者骨髓细胞SKP2、P27、cyclin A1及cyclin E表达阳性率与临床特征的相关性。结果治疗3~4个疗程后,完全缓解9例(15.79%),部分缓解41例(71.93%),未缓解7例(12.28%);完全缓解者SKP2[(19.83±5.62)%]、cyclin E[(8.21±6.22)%]及cyclin A1[(5.96±4.83)%]表达水平明显低于部分缓解+未缓解者[(46.16±18.06)%、(41.19±12.16)%、(36.18±10.77)%](P0.05),P27表达水平[(26.04±7.08)%]明显高于部分缓解+未缓解者[(15.36±4.98)%](P0.05);治疗前,初治ANLL、初治ALL、复发ANLL、复发ALL患者骨髓细胞SKP2[(44.76±23.81)%、(39.75±21.64)%、(46.53±24.18)%、(43.28±24.92)%]、cyclin E[(27.18±11.56)%、(33.49±12.74)%、(40.32±12.35)%、(37.08±10.96)%]及cyclin A1[(34.47±15.64)%、(32.08±14.93)%、(36.28±13.67)%、(33.94±14.25)%]表达水平均高于对照组[(15.64±4.96)%、(5.83±4.72)%、(7.54±6.49)%](P0.05);复发ANLL、复发ALL患者骨髓细胞P27[(16.09±6.32)%、(18.37±6.38)%]表达水平低于对照组[(27.95±6.83)%],并低于初治ANLL和初治ALL患者,差异均有统计学意义(P0.05);初治急性白血病患者骨髓细胞SKP2、P27、cyclin E及cyclin A1阳性表达率在年龄、性别、乳酸脱氢酶水平上比较差异均无统计学意义(P0.05);白细胞计数≥30×109/L者SKP2阳性表达率(85.00%)高于白细胞计数30×10~9/L者(47.06%);经治疗完全缓解者SKP2阳性表达率(42.31%)低于部分缓解+未缓解者(81.82%),P27阳性表达率(69.23%)高于未缓解者(36.36%),差异均有统计学意义(P0.05)。结论急性白血病患者细胞周期调控因子SKP2、P27、cyclin E及cyclin A1在表达水平明显高于非恶性血液肿瘤疾病患者,SKP2、P27阳性表达与初治患者治疗效果有关。     

性连锁凋亡抑制蛋白及其拮抗蛋白在急性白血病中的表达及意义

为了研究急性白血病(AL)性连锁凋亡抑制蛋白(X-linkedinhibitorofapoptosisproteins,XIAP)和XIAP相关因子1(XIAP-associatedfactor1,XAF1)的表达及其临床意义,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测116例AL患者和17名正常人骨髓单个核细胞中XIAP、XAF1、Smac和HtrA2mRNA的表达,并分析其与临床治疗效果的关系。结果表明初治AL患者XIAPmRNA表达水平(0.990±0.337)明显高于正常对照(0.395±0.148)(P<0·01);初治AL患者XAF1mRNA阳性率及表达水平(56.3%,0.246±0.267)明显低于正常对照(100%,0.964±0.387)(P<0.01);69例初治AL患者中高表达XIAP患者完全缓解率明显低于低表达患者(P<0.01);XAF1阳性表达患者完全缓解率明显高于阴性表达患者(P<0.01)。结论XIAP在AL中异常高表达,XAF1在AL中异常低表达,XIAP高表达及XAF1低表达或阴性可能是AL患者不良预后的指标。     

WT1基因在骨髓增生异常综合征及急性白血病患者中的表达

为了研究WT1基因在骨髓增生异常综合征 (MDS)和急性白血病 (AL)患者中的表达及其与临床预后的关系 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 2 2例MDS和 6 9例AL的WT1mRNA的表达。结果表明 ,WT1mRNA在MDS RA及MDS RAS中低表达 ,阳性率为 10 % (1/10 ) ;在MDS RAEB和MDS RAEB t中高表达 ,阳性率为 91.7% (11/12 ) ,两者差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。WT1mRNA在各型急性白血病中均有表达 ,初发和复发急性白血病中WT1mRNA的阳性率 (6 9% )高于缓解患者 (12 .5 % ) (P <0 .0 1)。初发与复发AL的WT1mRNA的相对表达量无差异 ,而MDS RAEB和RAEB t的表达量低于初发AL患者。WT1mRNA阳性的AML患者的化疗缓解率 (4 1% )低于阴性患者 (78% ) ;WT1基因相对表达量≥ 1的AML患者的CR率 (18% )低于 <1的患者 (5 5 % )。结论 :WT1基因在MDS RAEB和MDS RAEB t中的表达明显高于MDS RA和MDS RAS ,动态监测WT1基因的表达可能有助于监测MDS的病情变化。WT1基因表达与否及表达高低与初发AL的预后有关 ;WT1基因是急性髓细胞白血病的一个独立的预后因素。     

急性白血病患者细胞周期蛋白B1表达的临床意义

目的　探讨细胞周期蛋白B1(cyclinB1)在白血病发生、发展中的作用及对成人急性白血病 (AL)预后的判断价值。方法　对 85例成人AL初治患者 ,并对其中 4 7例达到缓解及 18例复发的患者、10例持续完全缓解 (CCR)期的AL患者采用流式细胞术检测cyclinB1、p2 1cip1蛋白表达水平和细胞周期分布 ;采用半定量RT PCR检测cyclinB1、p2 1cip1、增殖细胞核抗原 (PCNA)mRNA水平。结果　 85例初治AL患者全周期或G1/S期cyclinB1蛋白表达水平明显高于正常对照 (P <0 .0 0 1) ;缓解患者cy clinB1蛋白表达与正常对照组比较差异无统计学意义 (P =0 .2 1) ,复发患者cyclinB1蛋白表达高于正常对照 (P <0 .0 5 ) ,但低于AL初治组 (P <0 .0 1) ,CCR组cyclinB1与正常对照组比较差异无显著性 (P=0 .6 94 ) ;初治AL患者的cyclinB1表达率高于正常对照组 (P <0 .0 0 1) ;cyclinB1蛋白高表达者均有G1期异常高表达 ;cyclinB1与p2 1的蛋白表达呈负相关 ;cyclinB1蛋白表达与其mRNA水平呈正相关 ;cy clinB1表达与细胞增殖指数 (PI)及PCNA表达水平呈正相关 ;cyclinB1表达水平高的患者有较高的治疗缓解率 (P <0 .0 1) ,但有较高的复发率 (P <0 .0 1) ,cyclinB1高表达者有较高的生存率。结论　cyclinB1在成人AL患者中有过度表达和周期分布 ,其     

TYK2、SOCS7基因在急性白血病患者中的表达及临床意义

目的探讨TYK2、SOCS7基因在白血病中的表达及临床意义。方法将入院患者分为急性白血病（AL）初治组、AL缓解组和正常对照（NC）组,采用RT-PCR方法检测白血病和NC组骨髓单个核细胞中TYK2、SOCS7mRNA的表达,及与侵袭性真菌感染的相关性。结果 TYK2在初治AL患者高表达,缓解后表达减低（P〈0.05）,且阳性病人易患侵袭性真菌感染。SOCS7在初治AL患者低表达,缓解后表达升高（P〈0.05）,SOCS7表达与侵袭性真菌感染呈负相关。TYK2＋组的缓解率为40%（12/30）,明显低于TYK2-组（100%,4/4）,两组之间有差异（χ^2=3.96,P=0.047）。SOCS7＋组的缓解率为31%（10/33）,明显低于SOCS7-的缓解率为100%（1/1）,两组之间有差异（χ^2=6.032,P=0.014）。初治TYK2＋比TYK2-易患侵袭性真菌感染（χ^2=4.073 P=0.044）。SOCS7-比SOCS7＋组亦易患侵袭性真菌感染（χ^2=4.331 P=0.037）。结论 TYK2的高表达及SOCS7低表达可能在白血病的发生发展中起重要作用,且与侵袭性真菌感染有相关性。     

CD133在急性白血病中的表达及其意义

目的　探讨CD133(AC133)在急性白血病 (AL)中的表达及其意义。方法　采用三色荧光流式细胞术测定 76例AL患者白血病细胞膜上CD133的表达 ;采用半定量逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)方法测定CD133mRNA的表达。结果　①正常对照和AL患者的CD133mRNA表达与CD133蛋白表达相一致 ,AL患者CD133表达水平显著高于正常对照。②AL患者CD133及CD133mRNA高表达阳性率分别为 4 2 .1%和 4 6 .1%。急性髓系白血病 (AML)M3 患者CD133均高表达阴性 ,AML和急性淋巴细胞白血病 (ALL)的CD133高表达率分别为 4 3.4 %和 38.1% ,差异无显著性。AML M4CD133高表达阳性率显著高于其它AML亚型 ,而T ALL和B ALL的CD133高表达率分别为 2 0 .0 %和 4 3.7% ,差异也无显著性。③AML患者骨髓细胞CD133表达与CD34、HLA DR显著相关 ,ALL患者骨髓细胞CD133表达与CD34无关。④CD133表达与细胞或分子遗传学异常、发病时外周血白细胞数、乳酸脱氢酶水平、多药耐药基因 (mdr1)表达及年龄等预后因素无显著相关。⑤CD133高表达阳性组完全缓解 (CR)率及总反应 (OR)率低于高表达阴性组 ,但仅有CD34/CD133共高表达阳性组CR率低于阴性组 (44 .4 %vs71.4 % ,P <0 .0 5 ) ,差异有显著性。结论　AL患者骨髓细胞CD133表达高于正常对照 ;检测CD133表达可能有     

Hippo信号通路核心元件MST1在急性白血病患者中的表达及意义

本研究旨在探讨Hippo信号通路核心元件MST1基因在急性白血病患者中的表达情况及其与白血病发生、发展的关系。采用实时定量PCR检测50例初治急性白血病患者、33例正常人、23例完全缓解缓解患者及12例难治/复发患者的MST1基因的表达情况,采用Western blot进一步验证其蛋白的表达水平,结合临床资料对患者的预后因素进行分析。结果表明,与正常人相比,急性白血病初治患者MST1基因的表达水平明显减低(P<0.05),完全缓解前后差异有统计学意义(P<0.05),难治/复发患者与初治患者MST1基因表达水平无明显差异(P>0.05),完全缓解患者与正常人MST1表达水平无明显差异(P>0.05)。结论:MST1基因的低表达与急性白血病的发病及预后相关。