放疗对兔下颌骨牵张成骨骨再生的影响

目的：探讨兔下颌骨放疗后牵张成骨（DO）的可行性及其骨再生的特点。方法：将12只成年新西兰大白兔随机分为放疗组和未放疗组，每组6只：放疗组用^60Co机照射大白兔下颌骨，5．4Gy／次，隔天1次，共5次，总剂量为27Gy。3个月后，在2组动物下颌骨的双侧截骨处安装牵张器，经5天延迟期开始牵张，速率为1mm／d，0．5mm／次，每天2次．连续7d，共延长下颌骨7mm．固定期的第4、6周拍摄下颌骨侧位X线片，取双侧新生骨痂行组织学和扫描电镜检查，观察其成骨特征。结果：X线片显示，2组动物同一固定时间牵张间隙内透射密度无明显差异；组织学观察显示，牵张区以膜内成骨为主，但放疗组有更多的软骨形成，放疗组较未放疗组新骨骨小梁细小、稀疏；扫描电镜示同定第6周时，放疗组新骨不如未放疗组致密、成熟。结论：在兔下颌骨放射损伤区行DO是可行的，但成骨质量较差，成骨方式以膜内成骨为主，放射线照射可促进软骨成骨。     

BMP-2、bFGF在牵引成骨中的表达及意义

目的 :通过两种不同术式的比较 ,研究骨形态发生蛋白 - 2 (BMP - 2 )、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达水平和成骨的关系 ,探讨牵引成骨的成骨机制。方法 :2 8只狗随机分为牵引成骨组和直接延长组各 12只及正常对照组 4只 ,用免疫组化染色方法观察比较BMP - 2、bFGF在两组牵引第 6天、固定 2周、固定 8周时的表达情况。结果 :两组在牵引第 6天骨断端附近的新生编织骨边缘基质及周缘的活跃的成骨细胞、骨膜下及牵开区增生活跃的间充质细胞、成纤维细胞、胶原纤维基质均可见BMP - 2、bFGF强阳性的染色 ,染色平均灰度比较均无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ;牵引后固定 2周 ,牵引组新生编织骨边缘的成骨细胞、软骨细胞、牵开区纤维结缔组织仍可见BMP - 2、bFGF阳性染色 ,而直接延长组的BMP - 2、bFGF在牵开区的染色强度明显降低 (P <0 .0 5 ) ;牵引后固定8周 ,BMP - 2、bFGF在牵引组和直接延长组的组织中的染色强度均明显减弱 ,染色灰度比较均无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :在下颌骨牵引成骨过程中 ,在机械的牵引力和微创伤等多种因素刺激下 ,局部牵开区BMP - 2和bFGF持续高表达。两种生长因子可能共同参与促进了牵开区大量新骨的形成。     

山羊颌骨牵引成骨的组织学特点及bFGF的表达

目的研究山羊牵引成骨的组织学特点和bFGF组织表达特点。方法建立山羊下颌骨牵引成骨动物模型后,分别于牵引完成时、牵引后2、4、6、8周处死2只山羊。处死后,分别拍摄标本的CR-X线片,并将牵张区新生骨组织分成三份,分别进行生物力学分析、HE染色、扫描电镜观察及免疫组化实验。结果CR-X线片显示,牵引完成后,随着固定时间的延长,灰度逐渐增加。生物力学结果显示,新生骨组织的抗压强度随着固定时间的增加而增大。HE组织病理学和扫描电镜表明,牵引完成时牵引间隙充满胶原纤维组织,新生血管丰富,4周后骨小梁相对成熟,观察到成骨和破骨活动,8周时牵引区骨组织趋于成熟。免疫组化显示:bFGF表达在牵引期强于固定期,牵引8周后仍有较弱的表达。结论DO早期阶段新生骨组织骨密度,抗压强度增加迅速,6周后趋于平稳。山羊颌骨牵引成骨表现为骨膜内成骨和软骨化成骨。bFGF在牵引期和固定期对新生骨组织具有很重要的调节作用。     

局部应用β1转化生长因子对兔下颌牵张成骨的影响

目的：研究外源性β1转化生长因子对牵张成骨的作用。方法：将16口大耳白兔随机分为A、B两组，每组8只。在兔双侧下颌骨前部行骨切开术后用自行研制的牵张器延长双侧下颌骨6mm。从牵张开始第1天在A组动物牵张区每日注射TGF－β140ng，连续12d。不注射TGF－β1的B组动物用作对照。在牵张结束后第2和第4周分别处死A、B两组各4只动物，取下颌骨标本及牵张区新生骨痂进行X线和组织学检查。结果：注射TGF－β1的A组动物牵引间隙内新骨形成并不优于B组动物。相反，在第2周时还发现有较多的纤维组织和软骨形成。结论：导入外源性TGF－β1可能没有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

带拔牙创传送盘牵引成骨修复犬下颌骨节段缺损的实验研究

目的：探讨带拔牙创传送盘行牵引成骨修复犬下颌骨节段缺损的可行性。方法：选用8只本地杂种成年犬随机分为A、B两组,每组各4只。分别采用自行研制的两款牵引器,构建带右下颌第一磨牙拔牙创的传送盘行传送盘牵引成骨修复右下颌骨前磨牙区节段缺失的杂种犬动物模型,同时拔除对侧第一磨牙做为对照。固定期8周后处死取材,观察牵张区新骨生成情况,传送盘改建情况及对侧第一磨牙（M1）拔牙创愈合情况。结果：B组犬在间歇期先后出现传送盘感染坏死。A组4只犬顺利完成牵引,固定8周的组织学观察证实牵张区新骨成熟,传送盘表现为广泛活跃的膜内成骨过程,对侧拔牙创愈合良好。结论：带拔牙创的传送盘牵引成骨修复下颌骨节段缺损是可行的;传送盘与牵引器固定钛钉应避免打入拔牙创内,否则可导致传送盘感染坏死。     

变速牵引与常速牵引成骨对下牙槽神经影响的比较研究

目的:通过比较变换速度和常规速度牵引成骨对下牙槽神经的影响,探讨较大距离牵引时提高牵引成骨效率的可能途径。方法:新西兰白兔9只,随机分成2组,单侧下颌骨截开。延迟5 d。变速组5只,以0.75mm×2/d,牵引9 mm,继续以0.5 mm×2/d,牵引6 mm,最长固定30周。常速组4只,以0.5 mm×2/d,牵引15mm,最长固定15周。分别行大体观察、电生理检查和组织学观察。结果:下颌骨延长15 mm,两组新骨都生长良好。牵引后两组下牙槽神经出现严重变性,感觉神经动作电位波幅明显下降,潜伏期延长,固定15周时,两组波幅都出现恢复趋势,潜伏期基本恢复,固定30周时,变速组神经结构和功能基本恢复正常。结论:变速牵引成骨可以在不增加下牙槽神经损伤的情况下,提高牵引成骨的效率。     

羊下颌骨牵张骨形成实验

目的 观察山羊下颌骨牵拉后的新骨形成情况。方法 将8只山羊下颌骨单侧皮质骨切开后,每日2次,每天牵拉1mm,共8天,后继续以牵开器固定,行组织学、放射学观察。结果 牵拉术后颌骨成骨明显牵拉后2周,X线示骨间隙内新生骨已基本连接骨缺损,4周时骨化明显,组织学见大量新骨形成,随稳固期延长而渐成熟,部分形成板层骨。结论 山羊为一良好的下颌牵张模型动物。新骨形成以膜内成骨为主。     

血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子-1在下颌骨牵张成骨与骨缺损中的表达和意义

目的研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)和胰岛素样生长因子(IGF)-1在牵张成骨和骨缺损修复中的表达和意义。方法28只犬随机分为牵引组和直接延长组各12只及正常对照组4只,在牵张第6天,固定2周、固定8周时两组分别处死4只动物,取牵张区新骨组织用免疫组化染色方法观察比较VEGF、IGF-1的表达。结果下颌骨牵张组和直接延长组VEGF、IGF-1均呈高水平表达,牵张6 d和牵张2周时,牵张组VEGF的表达较直接延长组增高(P<0.05),而IGF-1的表达则在牵张固定2周时牵张组较直接延长组增高(P<0.05),两者随着固定时间的延长,表达逐渐下降。结论VEGF、IGF-1可能共同参与促进下颌骨牵张成骨新骨的形成。     

下颌骨牵引成骨过程中血运重建方式初步探讨

目的通过建立兔下颌骨牵引成骨实验动物模型,观察其动态过程,初步探讨血运重建方式及机制。方法选用新西兰白兔30只,6只动物做空白对照组;24只动物行右侧下颌骨植入外置式颌骨牵引器。经7d延迟期后,按1mm/d速率延长下颌骨7d,然后固定8周。在延迟期第7天,牵引期第2、4、7天,固定期第1、3、6、8周时分别处死3只动物,用X线片、苏木精-伊红染色、免疫组化方法检测血管和新骨生成情况,以及微血管密度变化规律。结果实验组22只兔成功进行下颌骨牵引延长,牵引区血管生成方式以芽生和血管上皮岛为主。在牵引期第2天,骨断端微血管密度为28.2±7.0,明显高于其他各组(P<0.01),在固定期下降明显,固定第8周时,微血管密度为4.3±1.3,与正常组无显著性差异(P>0.05)。结论在牵引初期牵引骨断端有强烈的微血管反应,血运重建先于新骨重建;固定期微血管密度降低,血管成熟,血运重建随新骨生成改建完成而结束。     

一氧化氮合酶在犬下颌骨牵张成骨过程中的表达和意义

目的研究一氧化氮合酶（NOS）在犬下颌骨牵张成骨及骨创伤修复过程的表达和意义。方法28只犬随机分成牵张组和直接延长组各12只及正常对照组4只,用免疫组化法检测牵张第6天、牵张后固定2周和8周NOS表达水平的变化。结果牵张第6天牵张组可见牵开区组织内炎性细胞浸润,血管周围和间质内较多红细胞漏出。牵张及固定早期,牵张组和直接延长组诱导型NOS（iNOS）与内皮型NOS（eNOS）阳性表达均明显高于正常对照组,直接延长组的iNOS和eNOS阳性表达低于牵张组,差异均有统计学意义（P<0.05）;牵张后固定8周iNOS和eNOS阳性表达3组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论NOS在牵张早期表达升高,结合在牵张早期组织内红细胞漏出,提示牵张成骨过程中存在某种程度的微创伤,这种微创伤可能是牵张成骨的重要启动因素之一。     

成纤维细胞生长因子对兔下颌牵张成骨的影响

目的 研究局部应用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对兔下颌牵引张成骨的影响。方法 成年大耳白兔8只，随机分为A、B两组，每组4只。用自行研制的牵张器延长双侧下颌骨6mm，用bFGF（20ng/ml）注入A组动物的牵张区，不注射bFGF的B组动物作为对照。在牵张结束后4周处死所有动物，取双侧下颌骨标本进行X线和组织学检查。结果 组织学分析结果显示，局部给予bFGF的A组动物下颌牵张后新骨生成速度和数量优于B组动物。结论 外源性导入碱性成纤维细胞生长因了可能有促进下颌牵引张成骨的作用。     

rhBMP-2对兔下颌骨牵引成骨区骨保护素表达的影响

目的：通过动物实验,研究应用外源性rhBMP-2对兔下颌骨牵引成骨区骨保护素（osteoprotegerin,OPG）的影响。方法：在48只成年大耳白兔的一侧下颌骨前部行骨切开术,分别将空白胶原、rhBMP-2 1.5mg胶原复合物植入下颌骨切开处,用牵引器延长一侧下颌骨4mm,稳定期第1、3、7、14天,分别处死各组动物,取牵引区新生骨痂行组织学及OPG免疫组化染色。结果：下颌牵引延长后牵引间隙均有新骨形成,应用rhBMP-2 1.5mg效果好。免疫组化染色OPG主要定位于成骨细胞的胞浆中。在同一时间内,应用rhBMP-2组较对照组有显著性差异（P〈0.05）。结论：动物实验表明,rhBMP-2能促进兔下颌骨牵引成骨区新骨的生成。     

硬腭两维牵张器的研制及体外实验研究

目的：探讨腭骨外固定两维牵张器在腭裂修复中关闭骨裂隙和后退腭骨的可行性。方法：设计并制作两维硬腭骨牵张器，在离体犬颅骨模型上制造人工腭裂模型，根据机械移动原理和牵张成骨原理，在硬腭后部设计2块可相对移动的转移盘，在一定范围内使骨块向内和向后移动，进行两维牵张成骨，并进行了手术模拟。结果：研制的两维缝牵张器可将转移盘前后方向移动16mm，近中方向左右各移动4mm，牵张器固定牢靠，转运盘稳定，牵张控制准确，在离体模型上可实现关闭裂隙、后退硬腭的设计要求。结论：设计的外固定两维牵张器可以向后、内牵张腭骨，从而达到关闭裂隙和硬腭后退的目的。     

Morphological features of cartilage observed during mandibular distraction in rabbits

Ossification during distraction osteogenesis can be classified as intramembranous or endochondral. It is not known whether cartilage in the distraction gap is transformed into new bone. The aim of this study was to investigate the morphological features of ossification in the transition of cartilage to bone during mandibular distraction osteogenesis in a rabbit model. A cortical osteotomy was performed and custom-made devices were applied. Immediately after surgery, the devices were lengthened by 0.25 mm every 12h for up 10 days, during which time four rabbits were killed at 0, 5 and 10 days and examined using histological staining and immunohistochemical methods. Apoptotic cells were identified by an in-situ detection assay for nuclear DNA fragmentation using a modified TUNEL procedure, with several sections analyzed using software for histomorphometric analysis. The results showed that the amount of cartilage in the distraction gap was significantly decreased. The cartilage had ossified in two ways, termed endochondral ossification and transchondroid bone formation.     

MSCs移植促进输送盘骨牵张术修复颅骨缺损的实验研究

目的 :研究自体骨髓间充质干细胞 (MSCs)对采用输送盘骨牵张术修复山羊颅骨缺损效果的影响。方法 :将成年雄性山羊 8只 ,随机分为A、B两组 ,每组 4只。在动物颅顶区制造全层颅骨缺损和输送盘 ,用自行研制的牵张器行输送盘骨牵张术修复颅骨缺损。牵张结束后 ,在A组动物牵张区注入体外培养的自体骨髓间充质干细胞 ;B组同期注入生理盐水作对照。在牵张结束后的第 4周处死A、B两组动物 ,取牵张区新生组织标本行组织学和扫描电镜分析。结果 :移植MSCs的A组动物牵张区新骨生成速度和钙化程度显著高于B组动物。结论 :局部移植MSCs可能有促进牵张成骨的作用。     

重组人骨形成蛋白-2促进兔下颌牵张成骨的研究

目的　研究局部应用基因重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对兔下颌牵张成骨的影响。方法　在12只成年大耳白兔的双侧下颌骨前部行骨切开术,将rhBMP-2与胶原复合植入一侧下颌骨切开处,另一侧单纯植入胶原作对照。用自行研制牵张器延长双侧下颌骨6 mm,在牵张结束后第4周处死动物,取双侧牵张区新生骨痂行组织学、扫描电镜及Ca/P元素测定。结果　下颌延长后两侧牵张间隙均有新骨形成,应用rhBMP-2的一侧牵张骨痂中的新骨组织比对照侧多而成熟,钙化程度较高。结论　基因重组人骨形成蛋白-2可能有促进兔下颌牵张成骨的作用。     

Immunohistochemical and in-situ hybridization study of hypoxia inducible factor-1alpha and angiopoietin-1 in a rabbit model of mandibular distraction osteogenesis

The endogenous release of angiogenic factors in a rabbit mandibular distraction osteogenesis model was investigated. The spatial and temporal expression of hypoxia inducible factor-1alpha (HIF-1alpha) and angiopoietin-1 (Ang-1) was compared at different phases. The lengthened calluses were harvested on post-osteotomy days 13, 20, 34 and 48, and then stained with haematoxylin & eosin. Immunohistochemical (IHC) and in-situ hybridization (ISH) examination of HIF-1alpha and Ang-1 staining was performed. The ossification in the distracted gap was predominantly intramembranous and slightly endochondral. Expression of HIF-1alpha and Ang-1 was mainly detected in the cytoplasm of fibroblast-like cells, osteoblasts and immature osteocytes on day 13 and 20, but declined with bone maturation. HIF-1alpha was also detected in the nuclei of some osteoblasts. These results suggest that the production of HIF-1alpha and Ang-1 in the distracted gap may contribute to new bone formation during gradual distraction of the mandible.     

Changes in the inferior alveolar nerve after mandibular lengthening with different rates of distraction.

PURPOSE: This study investigated the changes in the inferior alveolar nerve after mandibular lengthening with different rates of distraction. MATERIALS AND METHODS: Bilateral mandibular corticotomies were performed in 8 goats. The mandibles in 6 goats were lengthened 10 mm using a custom-made distractor with 2 different rates of distraction (1 mm/d [n = 3] and 2 mm/d [n = 3]); the other 2 nondistracted mandibles served as a control. The goats with distracted mandibles were killed at 2 weeks after completion of distraction. The inferior alveolar nerve specimens from all animals were harvested and processed for histologic and ultrastructural evaluation. RESULTS: The mandibles were lengthened successfully in the distracted animals. Morphologic changes in the inferior alveolar nerves were observed when compared with the nondistracted controls. Moreover, signs of nerve degeneration, such as demyelination, axonal swelling, axoplasmic darking, and decrease in the number of axons, were more extensive and prominent in those nerves distracted at a rate of 2 mm/d. CONCLUSIONS: Degenerative changes in the inferior alveolar nerve occur after mandibular lengthening by distraction osteogenesis. The distraction rate of 1 mm/d appears to be tolerable and safe for the inferior alveolar nerve, but rapid distraction may cause serious degeneration.     

不同牵张速率对下颌骨延长后新骨生成的影响

目的 :研究不同牵张速率延长下颌骨时对新骨生成的影响。方法 :将 12只山羊随机分为三组 ,行双侧下颌体骨皮质切开术后以三种不同牵张速率 (0 .5mm/d ,1mm/d ,2mm/d)向前延长下颌 10mm。牵张完成后第 2、4周各处死 2只山羊 ,取双侧牵张间隙内新骨组织作X光片、组织学、扫描电镜和能谱仪分析。结果 :以 0 .5mm/d和1mm/d牵张下颌骨后形成的新骨质量要好于 2mm/d。结论 :在牵张延长下颌骨时 ,1mm/d可能是最适宜的速率     

基质金属蛋白酶-3和金属蛋白酶组织抑制因子-1在兔下颌牵张成骨改建期的表达及意义

目的　研究基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在下颌骨牵张后形成的新骨组织中的定位表达。方法　对8只成熟大耳白兔按每天1 mm的牵张速率延长双侧下颌骨6 mm,在牵张结束后第4周处死动物,取牵张区新骨标本作组织学和免疫组化检测。结果　MMP-3与TIMP-1在牵张骨痂中均呈高水平表达,MMP-3阳性信号主要定位于新生骨小梁边缘的成骨细胞和埋入新骨基质中的骨细胞,TIMP-1则定位于成骨细胞。结论　MMP-3及TIMP-1可协同调节胞外基质的降解来影响牵张成骨的改建过程。