MODS大鼠胸腺树突状细胞病理改变及作用研究

目的探讨树突状细胞在多脏器功能障碍综合征(MODS)发病机制中的作用,为严重创伤后脓毒症和MODS的基础研究与临床防治提供新的思路.方法运用光镜、电镜观察与免疫组化(CD1a、S-100)及TUNEL标记方法证实并研究了MODS大鼠胸腺中树突状细胞的变化及其与细胞凋亡的关系.结果MODS早期,胸腺树突状细胞增生和过高反应,伴淋巴细胞大量凋亡;在MODS期,树突状细胞数量减少形态萎缩,淋巴细胞凋亡减轻.结论树突状细胞是MODS的早发病变和启动因素之一,可能是影响全身炎症反应综合征(SIRS)或代偿性抗炎反应综合征(CARS)的形成和转归,使病程走向MODS的一个重要原因.     

人肝脏间质树突状细胞的分布与形态学观察

目的:观察人肝脏间质树突状细胞(DC)的形态、数量和分布特点,为进一步认识DC在肝脏免疫微环境中的构成特点提供依据。方法:运用光镜、电镜观察与免疫组化标记(CD11c、CD205、CD209)方法,观察研究人体肝脏间质DC的形态、数量和分布。结果:人肝脏间质DC超微形态具有特征性的胞质突起,细胞器不发达;CD11c标记DC的阳性率为(1.80±0.35)%,集中分布于肝汇管区、中央静脉旁和肝被膜下间质中;表达CD205和CD209的成熟DC含量较少,其阳性率分别为(1.33±0.21)%和(1.15±0.16)%,多位于肝汇管区血管周围。结论:间质DC是一种免疫前哨细胞,是肝脏免疫微环境的重要组成部分。     

人重症肌无力胸腺树突状细胞的分离和培养

目的　探讨人重症肌无力胸腺树突状细胞 (TDC)的分离方法和诱导培养的最佳条件 ,为研究胸腺树突状细胞的生理功能及其在重症肌无力抗原提呈中的作用奠定基础。方法　新鲜人胸腺组织经机械破碎 ,梯度离心获得胸腺低密度细胞 ,经粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)和干细胞因子 (SCF)诱导 ,所获得细胞通过透射电镜、扫描电镜观察 ,并用FITC标记的抗人S10 0b、HLA DR、CD11c抗体进行鉴定。结果　从胸腺组织可获取足够数量胸腺树突状细胞 ,体外培养 10～ 18d细胞生长较为活跃 ,第 14天左右达到最高值 ,维持 3～ 4d开始下降 ,2 0d内细胞数仍能维持在 (1.0～ 2 .5 )× 10 5个 /ml。结论　梯度离心法能成功分离胸腺树突状前体细胞 ,GM CSF和SCF体外诱导可提供胸腺树突状细胞原代培养较为满意的生长条件。     

脓毒症导致小鼠胸腺萎缩的原因探讨

目的 利用小鼠盲肠结扎穿刺模型探讨脓毒症导致胸腺萎缩的原因.方法 采用盲肠结扎穿刺(CLP)手术建立脓毒症小鼠模型(脓毒症组),以假手术(Sham)小鼠作为对照组.术后7 d,采用流式细胞仪检测小鼠胸腺中各群胸腺细胞和胸腺前体细胞比例的变化及胸腺细胞凋亡情况.结果 与对照组相比,脓毒症组小鼠的胸腺明显萎缩,胸腺细胞的绝对计数显著减少(P< 0.001);胸腺中的CD4-CD8-细胞(DN)、CD4+CD8+细胞(DP)、CD4+CD8-细胞、CD8+CD4-细胞数亦明显减少(P< 0.001);胸腺中Lin-CD44+CD117+前体细胞比例显著降低(P< 0.001);各群胸腺细胞凋亡的比例均显著增加(P< 0.001).结论 脓毒症模型小鼠胸腺萎缩不仅与胸腺细胞凋亡增加有关,与胸腺前体细胞减少也相关.     

树突状细胞体内回输对烫伤小鼠过度炎症反应的调控作用

目的:观察树突状细胞(DCs)与调节性树突状细胞(CD11clowCD45RBhigh DCs)体内回输对烫伤所致腹腔炎症反应的影响.方法:采用15%体表面积Ⅲ度烫伤[(99.0±0.5℃)沸水中8 s]小鼠模型.伤后即刻腹腔注射林格液(1 ml/只)抗休克治疗(烫伤组,n=21)或者腹腔注射加入自小鼠脾脏分离纯化而得...     

幽门螺杆菌热休克蛋白60诱导的抗原调节性T细胞及其对小鼠动脉粥样硬化的影响

目的 观察幽门螺杆菌热休克蛋白60(HP-HSP60)诱导的抗原特异性T细胞接种对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的影响.方法 制备小鼠骨髓单核细胞,体外诱导HP-HSP60特异性调节性T细胞分化,并接种CD4~+CD25~+T_(reg)细胞后,观察其对小鼠动脉粥样斑块形成的影响.结果 阿司匹林处理的树突状细胞CDS0(43.0%)和CD86(41.1%)表达减少,形态学表现为未成熟树突状细胞,但其能诱导更多的特异性CD4~+CD25~+T_(reg)细胞(13.0±1.94)%,实验组粥样斑块面积(2.37±0.96)mm~2显著小于对照组(P<0.05).结论 未成熟树突状细胞可诱导出HSP60抗原特异性调节性CD4~+CD25~+T_(reg)细胞,后者在体内能明显抑制动脉粥样斑块的形成.     

CD4+CD25-T淋巴细胞转化为CD4-CD8-调节T细胞的体外实验研究

目的 探讨体外诱导和纯化CD4+ CD25-T淋巴细胞(effector T cell,Teff)转化为CD4-CD8-双阴性调节T细胞(double negative regulatory T cell,DN Treg)的最适条件.方法 采用免疫磁珠分选方法提取C57BL/6小鼠的CD4+ CD25-T淋巴细胞、DBA/2小鼠的成熟树突状细胞共培养,加入不同剂量的IL-2,通过流式细胞检测CD4-CD8-T细胞的转化比例并确定最适条件,免疫磁珠阴性选择分选提纯转化的CD3+ CI4-CD8-T细胞,流式细胞仪检测转化的CD4-CD8-调节T细胞对CD4+ CD25-效应T细胞增殖抑制情况.结果 CD4+ CD25-T淋巴细胞与DBA/2小鼠的树突状细胞共培养6d后检测CD4-CD8-调节T细胞的转化比率为6.21％ ±2.03％,实验组加入不同浓度IL-2的转化率:A组(25 ng/ml)为14.77％±2.15％,B组(50 ng/ml)为21.29％±2.68％,C组(75 ng/ml)为43.45％ ±4.45％,D组(100 ng/ml)为28.59％±3.05％,IL-2浓度在75 ng/ml时,转化获得率最高(C组与对照组、实验A、B、D组比较分别t=10.700,8.288,6.158,3.932,均P＜0.05);分离提纯CD4-CD8-双阴性调节细胞纯度达到98.10％,CD4-CD8-双阴性调节细胞与CFSE染色的CD4+ CD25-T淋巴细胞、小鼠树突状细胞共培养6d,实验组增殖指数为1.15明显低于对照组2.07.结论 小鼠CD4+ CW25-T淋巴细胞在体外,成熟树突状细胞刺激下可转化为CD4-CD8-双阴性调节T细胞,IL-2可显著提高其转化率.     

免疫抑制细胞在早期脓毒症性腹膜炎中的作用

我们通过测定不同感染程度升结肠置管腹膜炎模型(CASP)术后外周血、脾脏中CD11b+ Gr1+肌源性干细胞(MDSC)与CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关细胞因子含量,观察免疫抑制细胞在脓毒症性腹膜炎中的作用. 一、材料和方法 1.材料:流式细胞仪(Calibur,美国BD公司)、小鼠感染CBA试剂盒(美国BD公司,编号552364);PerCP标记抗CD3;PerCP标记抗CD11b;藻红蛋白(PE)标记Gr1及相应的同型对照;PE标记抗CD8;APC标记抗CD4;PE标记抗CD25,Foxp3破膜缓冲液、裂解缓冲液(美国BD公司).     

足细胞中巢蛋白的表达及其相互作用分子的研究

目的 观察细胞骨架蛋白巢蛋白(Nestin)在肾脏足细胞的表达及其在足细胞中的作用方式。方法 免疫组化、免疫荧光、免疫电镜方法检测Nestin在人正常肾组织、体外培养的小鼠足细胞中的表达。免疫共沉淀方法检测足细胞中与巢蛋白相互作用的蛋白分子。结果 在正常肾组织中巢蛋白的表达局限于肾小球。免疫电镜证实巢蛋白主要表达于足细胞胞浆及初级足突，体外培养的足细胞中也可观察到巢蛋白丝状分布于胞浆。免疫共沉淀显示足细胞中Nestin与另两种细胞骨架蛋白波形蛋白(vimentin)、α-internexin相互作用。 结论 巢蛋白除了表达于中枢神经干细胞、胰岛干细胞等之外，在肾脏足细胞中也有表达，并与足细胞中其他细胞骨架蛋白相互作用，共同维持其正常形态和功能。     

尾静脉注射质粒巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子诱导扩增小鼠肝脏CD11c+树突状细胞

目的 探讨载粒巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因质粒在小鼠体内扩增肝脏CD11c+树突状细胞(DC)的方法.方法 采用快速尾静脉椎注法将含20 μg GM-CSF基因质粒的生理盐水2.0 ml导入小鼠肝脏内,对照组注射增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因.第7天取肝,胶原酶消化、密度梯度离心、磁珠标记等分选出DC.Giemsa染色作形态学观测,采用流式细胞术分析其免疫表型.结果 实验组小鼠肝脏非实质细胞(NPC)大量增殖,主要分布于门静脉及其周围区域,质粒处理组中CD11c+DC比例较对照组显著增多(29.31％比6.77％,P＜0.05).Giemsa染色显示两组DC细胞核形状不规则,胞质无颗粒,然而实验组DC较对照组有明显凸起.流式细胞仪检测结果显示实验组DC较对照组明显成熟,CD40、CD80、CD86表达显著增高(P＜0.05).结论 经快速尾静脉推注质粒GM-CSF的方法可显著可靠地扩增肝脏CD11c+DC的数量.     

胸腰椎骨折椎弓根内固定断裂与植骨融合方式的相关性分析

[目的]探讨胸腰椎骨折椎弓根螺钉内固定系统内固定术后,椎弓根螺钉断裂与植骨融合方式之间的关系,以探讨胸腰椎骨折植骨融合的最佳方式。[方法]回顾性研究1995年5月~2005年12月本院脊柱外科收治的胸腰椎骨折病人197例,其中A组单纯内固定(不植骨)患者14例,B组“H”形椎板植骨21例,C组横突间植骨67例,D组椎间、椎内联合横突间植骨95例。[结果]术后随访6~32个月,内固定断裂12例,其中A组4例,B组3例,C组5例,D组0例,4组中D组内固定断裂率显著低于其他3组(P<0.05)。[结论]椎间、椎体内联合横突间植骨重建脊柱三柱的稳定性,符合人体生物力学原理,能有效降低内固定断裂的发生。     

Study of the correlations between the volumes of the hypophysis, the epiphysis and the subfornical organ to the somatic weight and the volume of the hypothalamus in rodents]

The correlations between volume of the hypophysis, of the epiphysis and of the subfornical organ to body weight and volume of the hypothalamus were studied on 193 rodents belonging to 41 species. Concerning the volume of the hypophyseal lobes the regression slopes of Rodentia occupy an intermediate position between those of Isectivora and Prosimians studied by BAUCHOT. The volume of the epiphysis increases more rapidly with the weight of the body than that of the hypophyseal lobes, the volume of the subfornical organ increases on the contrary more slowly.     

Characteristics of the receptors in the isolated capsule of the hip in the cat

Summary The properties of the afferent fibres from the capsule of the hip joint have been studied in the cat in situ, in relation to joint rotation, and in an isolated capsule preparation which was opened and stretched directly with an actuator.In situ two types of afferent fibres were found, those having a full range of sensitivity and others having only a limited range in response to the joint rotation. When studied in isolated tissue the afferent fibres of the capsule were uniform in threshold and sensitivities, and no full range receptors were found. We conclude that the full range receptors which enter the articular nerve of the hip are spindle afferents and not capsule receptors. On the basis of these and previous results in animals and man the role of joint receptors in kinaesthesia and position sense is discussed.

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Résumé Les auteurs ont étudié les propriétés des nerfs afférents à la capsule de la hanche, chez le chat en imprimant à l'articulation des mouvements de rotation et sur des préparations de capsule isolée et ouverte en l'étirant directement grâce à un dispositif mécanique.In situ, on a trouvé deux types de nerfs afférents, les uns ayant en réponse à la rotation articulaire une étendue complète de sensibilité et les autres seulement une sensibilité limitée. Sur la capsule isolée les nerfs afférents sont indentiques en ce qui concerne le seuil et la sensibilité et on ne trouve aucun récepteur complet. On en conclut que les récepteurs de toute l'étendue de la sensibilité qui pénètrent les nerfs articulaires de la hanche sont des fibres en fuseau d'origine musculaire et non des récepteurs capsulaires. Sur ces bases et sur les résultats précédemment obtenus chez l'animal et chez l'homme, les auteurs discutent le rôle des récepteurs articulaires dans la cénesthésie et le sens des positions.