参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能和细胞凋亡相关蛋白表达的影响

 目的　研究糖尿病性脑病病变机制以及参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能和细胞凋亡相关蛋白表达的干预作用。方法　采用在大鼠腹腔注射链脲佐菌素 (streptozotocin ,STZ ,6 0mg·kg^-1 )引起糖尿病的基础上 ,再行双侧颈动脉缺血再灌手术建立糖尿病脑病动物模型。经参乌胶囊小剂量 (0.45g·kg^-1·d^-1 )、中剂量 (0.9g·kg^-1 ·d^-1 )和大剂量 (1.8g·kg^-1·d^-1 )灌胃治疗 30d后,用Morris水迷宫实验对动物行为学进行评价 ,用Westernblotting法对大鼠海马中的细胞凋亡相关蛋白进行测试。结果　糖尿病复合脑缺血模型大鼠到达站台游动时间比正常对照组增长63.4%;而参乌胶囊小剂量组较模型组动物缩短61.3%,参乌胶囊中剂量组较模型组动物缩短75.3%(P <0.01) ;Bcl-2在模型组表达明显比对照组少,而在参乌胶囊中剂量组和大剂量组中比模型组表达多 ;caspase-3在模型组中的表达明显比对照组多 ,caspase-3和Bax在参乌胶囊中剂量组和大剂量组中的表达明显比模型组少。结论　本实验建立的糖尿病脑病动物模型可使大鼠存在认知功能障碍 ;糖尿病脑病发生机制与神经元细胞凋亡有关 ;参乌胶囊有改善模型大鼠的学习记忆功能和抑制神经元细胞凋亡的功能。     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对60Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用

目的 以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路为靶点,探讨左归丸对⁶⁰Co-γ射线早衰大鼠的保护作用。方法 采用⁶⁰Co-γ射线一次性照射（6.0 Gy,LD₄₀）性成熟雌性SD大鼠60只,随机分成模型组、补佳乐组（0.18 g·kg^-1·d^-1）、补佳乐（0.09 g·kg^-1·d^-1）+左归丸高剂量（23.625 g·kg^-1·d^-1）组、左归丸高剂量（23.625 g·kg^-1·d^-1）组、左归丸中剂量（9.45 g·kg^-1·d^-1）组和左归丸低剂量（4.725 g·kg^-1·d^-1）组,每日1次,治疗21 d,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清［卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和雌二醇（E₂）］,苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢的组织形态变化,原位末端标记法（TUNEL）检测颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织磷酸化（p）-PI3K、p-Akt、p-mTOR和B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的蛋白表达结果。结果 与正常组比较,模型组大鼠血清FSH显著上升（P<0.01）,E₂明显下降（P<0.05）,卵巢早期卵泡和黄体数量减少（P<0.01）;颗粒细胞凋亡率显著增加（P<0.01）;卵巢组织p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达显著增加（P<0.01）;与模型组比较,各给药组干预后卵巢内早期卵泡数量增加,颗粒细胞凋亡率降低,p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达有增加趋势,Bax蛋白表达有下降趋势,尤以补佳乐+左归丸高剂量组差异均具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 左归丸对辐射损伤卵巢的保护作用机制可能是通过活化卵巢组织PI3K/Akt/mTOR蛋白表达,增加Bcl-2蛋白量和抑制Bax蛋白表达。     

大黄素对大鼠肝移植后肝细胞凋亡的影响

目的:探讨大黄素对大鼠肝移植后肝细胞凋亡的影响。方法:建立LEW→BN大鼠肝移植动物模型,随机分为A,B,C,D4组,每组6只动物,术后每天分别腹腔注射生理盐水0.5mL.d^-1、环孢素A(CsA)10.0mg.kg^-1.d^-1、大黄素50.0mg.kg^-1.d^-1、大黄素50.0mg.kg^-1.d^-1+CsA10.0mg.kg^-1.d^-1,连续用药8d,停药7d后处死动物取肝脏组织观察排斥活动指数(RAI)和肝细胞凋亡指数(AI)。结果:A,B,C,D组RAI分别是(7.67±0.98),(5.17±0.40),(5.83±0.75),(3.83±0.75),AI分别是(35.83±2.32),(15.83±1.33),(16.50±2.35),(11.50±1.05)。B,C,D组的RAI,AI较A组均明显降低(P<0.01),而D组较B,C组也均有明显降低(P<0.05),B,C组间差别均无意义。结论:大黄素能有效减少大鼠移植肝术后肝细胞凋亡,抑制排斥反应,且和CsA有协调作用。     

地锦草水提液对移植性肝癌的抑制作用及对凋亡蛋白表达的影响

目的: 研究地锦草对移植性肝癌H22小鼠的抑制作用及对凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和Caspase-3表达的影响。 方法: 复制小鼠移植性肝癌模型后,随机分为模型组、地锦草组和环磷酰胺组。地锦草低、中、高剂量组分别以66,132,264 mg·kg^-1 ig,环磷酰胺组1 mg·kg^-1 iv 1次,模型组和环磷酰胺组灌服同体积的蒸馏水,14 d后处死小鼠,剥离瘤组织,称肿瘤质量;比色分析法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;免疫组化法观察肿瘤组织Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白表达。 结果: 与模型组比较,地锦草治疗后肿瘤质量明显减轻(P<0.05);地锦草各剂量组与环磷酰胺组小鼠血清SOD均升高(P<0.05,P<0.01),血清MDA含量均下降(P<0.05,P<0.01);地锦草高、中剂量组及环磷酰胺组降低Bcl-2蛋白表达,同时提高Bax,Caspase-3蛋白表达(P<0.05),降低Bcl-2/Bax。 结论: 地锦草抗肿瘤机制可能是通过增强抗氧化防御系统抑制肿瘤细胞的生长,纠正机体凋亡蛋白与抗凋亡蛋白失衡,激活Caspase-3酶活性而诱导肿瘤细胞凋亡。     

稳心颗粒调控内质网应激途径抑制心梗大鼠心肌凋亡的机制

目的 探讨稳心颗粒对心梗大鼠内质网应激凋亡通路的影响及分子机制。方法 结扎左冠状动脉前降支建立心梗大鼠模型,术后随机分为假手术组,模型组,稳心颗粒低剂量组、高剂量组及倍他乐克组,每组10只,假手术组与模型组给予10 mL?kg^-1?d^-1去离子水灌胃,稳心颗粒低剂量及高剂量组分别给予1.35,2.7 g?kg^-1?d^-1水溶液灌胃,倍他乐克组给予2.25 mg?kg^-1?d^-1水溶液灌胃,治疗2周后,采用导管法检测心脏血流动力学,之后处死大鼠取材,苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠心肌组织病理形态的变化,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）,蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）,磷酸化激活的PERK（p-PERK）,活化转录因子6（ATF6）,细胞核转录因子X盒结合蛋白（XBP1）和凋亡蛋白C/EBP同源蛋白（CHOP）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达变化,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡。结果 与假手术组比较,模型组的左室内压最大上升速率（+dp/dt_max）,下降速率（-dp/dt_max）,左室收缩压（LVSP）明显降低（P<0.05）,左室终末舒张压（LVEDP）明显上升（P<0.05）,内质网应激蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6及XBP1表达均明显升高（P<0.05,P<0.01）,凋亡蛋白CHOP和Bax表达显著增高（P<0.01）,Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著降低（P<0.01）,凋亡指数显著增加（P<0.01）;与模型组比较,稳心颗粒低剂量组-dp/dt_max及Bcl-2蛋白表达明显增加（P<0.05）,心肌细胞凋亡指数显著降低（P<0.01）;稳心颗粒高剂量组+dp/dt_max与-dp/dt_max明显增加（P<0.05,P<0.01）,内质网应激通路蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6,XBP1及凋亡相关蛋白CHOP,Bax表达均显著降低（P<0.01）,Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著增加（P<0.01）,凋亡指数显著降低（P<0.01）。结论 稳心颗粒可抑制过度的内质网应激,减少心肌细胞凋亡,进而改善心梗大鼠心脏血流动力学,其分子机制与下调GRP78,PERK,p-PERK,ATF6,XBP1表达,减少CHOP,Bax表达,增加Bcl-2表达有关。     

黄芪注射液对大鼠失血性休克再灌注肠黏膜NO和ET的影响

目的 :探讨黄芪注射液对失血性休克 再灌注后肠黏膜组织一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)含量的影响。方法 :雄性SD大鼠 32只 ,随机分成 :正常组、模型组、黄芪低剂量组 (黄芪注射液 10g·kg^-1)和黄芪高剂量组 (黄芪注射液 20g·kg^-1)。复制重度失血性休克及复苏动物模型 ,黄芪注射液于再灌注前静脉注入 ,造模完成后观察各组动物肠黏膜病理学变化 ,检测肠黏膜组织乳酸、一氧化氮和和内皮素含量。结果 :病理检查结果显示 :模型组肠黏膜损伤最重 ,黄芪具有保护失血再灌注肠黏膜的作用 ,以黄芪高剂量组效果最佳 ,正常组肠黏膜正常 (P <0 .0 1)。模型组和黄芪低剂量组小肠黏膜组织乳酸含量高于黄芪高剂量组和正常组 (P <0 .0 5 )。模型组和黄芪低剂量组小肠黏膜组织NO含量低于黄芪高剂量组和正常组 (P <0 .0 1)。小肠黏膜组织ET含量以模型组最高 ,与其他 3组比较均有统计学意义 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,黄芪低剂量组黏膜组织ET含量高于正常组和黄芪高剂量组 (P <0 .0 5 )。结论 :黄芪注射液能减轻大鼠失血性休克再灌注肠黏膜损害 ,可能与其减轻肠黏膜组织血管内皮功能紊乱有关。     

氧化苦参碱对心肌损伤大鼠线粒体保护作用的研究

目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对异丙基肾上腺素(isoproterenol,ISO)致心肌损伤大鼠线粒体(mitochondria,Mit)的保护作用及其机制。方法:健康雄性SD大鼠24只,随机分为4组:对照组、模型组、OMT低、高剂量组,每组6只。皮下注射ISO5 mg.kg^-1.d^-1复制心肌损伤模型,低、高剂量组分别腹腔注射OMT100,150 mg.kg^-1.d^-1,连续10 d。差速离心法提取心肌Mit,比色法测定血浆乳酸(lactic acid,LD)、丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)的含量与乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的活性和心肌Mit中MDA的含量与琥珀酸脱氢酶(succinicdehydrogenase,SDH),SOD,GSH-PX的活性,原子吸收法测定心肌Mit的钙含量。HE染色观察心肌组织的病理学改变,电镜下观察Mit超微结构的改变。结果:与模型组相比,低、高剂量OMT均可减轻心内膜下心肌缺血性损伤,保护心肌Mit超微结构的完整性,且二者均可显著降低心肌线粒体MDA和钙含量(P<0.01),增加线粒体SOD与GSH-PX活性(低剂量组P<0.05,高剂量组P<0.01),升高SDH活性P<0.01),降低血浆LDH活性(P<0.01)和LD含量(低剂量组P<0.05,高剂量组P<0.01)。结论:OMT可保护ISO致心肌损伤大鼠Mit的结构和功能,其机制可能与抑制脂质过氧化、减轻钙超载、改善心肌细胞的代谢有关。     

黄芪对失血性休克再灌注肠黏膜肥大细胞活性及肠黏膜炎症反应的影响

目的：探讨黄芪对失血性休克再灌注后肠黏膜肥大细胞活性及肠黏膜炎症反应的影响。方法：Wistar大鼠32只,随机分成正常组、模型组、黄芪高,低剂量组(20,10 g·kg_-1)。复制重度失血性休克及复苏动物模型,观察各组动物肠黏膜病理学变化,测定小肠组织丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及组胺浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察肠黏膜肥大细胞(intestinal mucosal mast cells,IMMC)数量及超微结构变化。结果：模型组Chiu’s评分,类胰蛋白酶表达,IMMC数目,MDA,TNF-α明显升高及SOD活性、组胺明显降低且出现明显脱颗粒现象；黄芪能减轻上述变化(P<0.05)。相关分析显示Chiu’s评分与小肠组胺浓度呈负相关,与TNF-α浓度呈正相关,SOD活性与组胺浓度呈正相关(P<0.05)。结论：黄芪注射液能减轻大鼠失血性休克再灌注肠黏膜损害,可能与抑制肥大细胞活化有关。     

红花注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的疗效及机制研究

目的：探讨红花注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的疗效及机制。方法: 将75只SD大鼠分为正常对照组、缺血再灌注组、红花注射液低剂量(62.5 mg·kg^-1)、中剂量(125 mg·kg^-1)和高剂量治疗组(250 mg·kg^-1),建立肾缺血再灌注损伤模型,采用血清肌酐、尿素氮和血尿渗透压值评价肾功能,TUNEL检测肾组织细胞凋亡率,免疫组化检测肾组织caspase-3蛋白表达的变化。结果: 缺血再灌注损伤后,肾功能明显减退,细胞凋亡率和caspase-3表达显著升高(P<0.01)；运用红花注射液治疗后,肾功能显著改善,细胞凋亡率和caspase-3表达显著降低 (P<0.01)。结论: 红花注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤所致的肾功能损害具有显著的保护作用,该作用可能与红花抑制细胞凋亡及caspase-3表达有关。     

大黄总蒽醌对大鼠远端结肠AQP2表达的调节效应

目的：探讨大黄总蒽醌对大鼠远端结肠水通道蛋白2(aquaporin2，AQP2)表达的调节作用。方法：32只SD大鼠随机分为正常组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组(0.14,2.5, 4.5 g·kg^-1·d^-1，灌胃)，正常组给予生理盐水灌胃。大鼠 5 d后麻醉处死，取全段结肠内粪便，干燥后检测粪便含水量；留取远端结肠，运用免疫组织化学、Western blot及RT-PCR检测远端结肠AQP2表达的变化。结果：低剂量组大鼠没有出现泻下现象，其远端结肠AQP2表达无显著差异；中剂量组(2.5 g·kg^-1·d^-1)大鼠出现软便及稀便，高剂量组(4.5 g·kg^-1·d^-1)大鼠出现稀便和水样便，粪便含水量显著性增加，其远端结肠AQP2表达亦显著降低(P＜0.01)。结论：大黄总蒽醌能抑制大鼠远端结肠AQP2的转录与翻译、增加粪便的含水量，这可能是其泻下效应产生的机制之一。     

芪黄煎剂对缺血-再灌注大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡的影响

目的 观察中药芪黄煎剂对缺血－再灌注（ischemia reperfusion,I/R）损伤大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡的影响。方法 建立肠黏膜I/R大鼠模型,即夹闭大鼠肠系膜上动脉45 min,再灌注1 h后取标本。观察各组大鼠肠黏膜病理形态变化及肠黏膜上皮细胞凋亡情况。结果 病理形态学：假手术组大鼠肠绒毛完整;I/R 组大鼠肠绒毛上皮下间隙扩张,上皮顶端与固有层明显分离伴固有层毛细血管暴露、出血和溃疡;谷氨酰胺组部分肠绒毛上皮下间隙扩张, 部分绒毛上皮顶端与固有层分离、部分肠绒毛有出血和溃疡;芪黄煎剂组与I/R 组及谷氨酰胺组比较,肠绒毛损伤程度较轻, 绒毛上皮顶端与固有层部分分离、部分肠绒毛有出血。肠黏膜病理Chiu氏评分：假手术组最低（0分）;I/R组评分最高; 谷氨酰胺组评分低于I/R组（P<0.05）;芪黄煎剂组评分明显低于I/R组(P<0.05 ),但与谷氨酰胺组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。肠黏膜上皮细胞凋亡显示：假手术组肠上皮存在一定数量的凋亡细胞,比其他3组少(P<0.05);I/R 组肠上皮凋亡细胞数明显大于其他3组（P<0.05）;谷氨酰胺组凋亡细胞数少于I/R 组（P<0.05）,但多于假手术组和芪黄煎剂组;芪黄煎剂组肠上皮细胞凋亡数高于假手术组,低于I/R组和谷氨酰胺组,与I/R 组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,与谷氨酰胺组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 芪黄煎剂可减少I/R对大鼠肠黏膜上皮造成的损伤,其作用机制可能与抑制肠黏膜上皮细胞凋亡有关。     

复方蜥蜴散不同微粒组合剂对CAG模型大鼠细胞凋亡基因Bcl-2与Bax表达影响的实验研究

目的研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂对慢性萎缩性胃炎(CAG)细胞凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从分子生物学水平揭示其治疗CAG的机制及其效果。方法将90只SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,复方蜥蜴散大、中、小剂量组及维酶素组,除正常组外,均采取55℃热盐水、2%水杨酸、20mmol/L脱氧胆酸钠3个致萎缩因素配合饥饱失常造成CAG模型。分别运用复方蜥蜴散不同微粒组合剂大、中、小剂量及维酶素治疗,应用免疫组化法检测大鼠胃组织Bcl-2及Bax蛋白表达,光镜观察胃黏膜病理组织学变化。结果通过人工计数法对免疫组化结果分析各组大鼠细胞凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白的阳性表达率有显著差异(P<0.05)。通过图像分析系统对免疫组化图像光密度的测算,复方蜥蜴散不同微粒组合剂大、中、小剂量组细胞凋亡基因Bcl-2蛋白的阳性表达率显著低于模型组(P<0.01),复方蜥蜴散不同微粒组合剂大、中剂量组细胞凋亡基因Bcl-2蛋白的阳性表达率显著低于维酶素组(P<0.05)。复方蜥蜴散不同微粒组合剂大、中、小剂量组细胞凋亡基因Bax蛋白的阳性表达率显著高于模型组(P<0.05),复方蜥蜴散不同微粒组合剂大、中剂量组细胞凋亡基因Bax蛋白的阳性表达率显著高于维酶素组(P<0.05)。结论胃黏膜细胞凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白表达异常是CAG发生的重要因素之一,复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃黏膜的损害具有保护作用,且能降低Bcl-2蛋白的表达并且提高胃黏膜Bax蛋白表达,部分逆转胃黏膜病理变化,揭示了复方蜥蜴散不同微粒组合剂治疗CAG的作用机制。     

四逆汤抗缺血再灌注引起小鼠心肌细胞凋亡的作用观察及其机制研究

目的:探讨心肌缺血再灌注模型中细胞凋亡的发生及四逆汤的保护作用机制。方法:昆明种小鼠随机分为四逆汤组、模型组和正常组,观察心肌细胞 DNA ladder,检测超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、Bcl-2蛋白、Caspase-3活性和 Bcl-2、Caspase-3mRNA 转录情况。结果:模型组存在氧化损伤,出现 DNA lad-der,凋亡指数增加;四逆汤可减少凋亡对抗氧化损伤。模型组 Bcl-2蛋白表达增加,四逆汤组更为显著,与mRNA 转录结果一致;模型组明显升高的 Caspase-3活性在四逆汤组被显著抑制,mRNA 转录未见明显变化。结论:此缺血再灌注模型存在心肌细胞凋亡,四逆汤可能通过提高机体抗氧化能力,增加 Bcl-2蛋白表达,抑制 Caspase-3激活减少凋亡发生。     

慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜细胞凋亡与中医证型的相关性

目的探讨大鼠不同证型慢性萎缩性胃炎(CAG)证候发生时胃黏膜细胞凋亡及调控蛋白表达水平的变化,从细胞凋亡的角度揭示CAG各证候的实质。方法复制大鼠脾虚证、肝郁证和湿热证CAG病证结合模型,检测胃黏膜上皮细胞凋亡水平和胃黏膜细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Fas抗原的表达水平。结果各模型组大鼠胃黏膜细胞凋亡指数均显著高于正常对照组,各证候模型组中以脾虚CAG组最高。各模型组大鼠胃黏膜Bcl-2、Fas蛋白表达量均显著高于正常对照组,各证候模型组中以脾虚CAG组最高。结论CAG大鼠胃黏膜细胞凋亡指数、Bcl-2、Fas蛋白表达与CAG证候有一定的相关性,以脾虚CAG组大鼠胃黏膜细胞凋亡指数最高和Bcl-2、Fas表达量最高。     

四逆汤预防性给药抗心肌细胞凋亡的作用机制探讨

目的：探讨四逆汤预防性给药24 h后能否抑制心肌缺血再灌注（MI/R）后心肌细胞凋亡的发生及其可能涉及的线粒体机制。方法： SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、四逆汤预处理组。缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎，缺血1 h，再灌1 h。四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5 g·kg^-1·d^-1)连续3 d，末次灌药24 h后心肌缺血1 h，再灌1 h。流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率，进行细胞色素C及抗凋亡蛋白bcl-xl的Western blotting分析并检测caspase-3的活性。结果：四逆汤预处理24 h后可以减少MI/R后心肌细胞凋亡率，减少细胞色素C自线粒体的释放，上调bcl-xl蛋白的表达，抑制caspase-3的活化。结论：四逆汤预防性给药24 h后可以减少MI/R造成的细胞凋亡，其机制可能与抑制细胞凋亡的线粒体信号转导通路有关。     

冠心舒通胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡影响的实验研究

目的:探讨冠心舒通胶囊对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤细胞凋亡的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(10只)、药物组(10只)。模型组和药物组大鼠通过穿线结扎左冠状动脉前降支与松开的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型(心肌缺血30min,再灌注3h)。假手术组只穿线不结扎。药物组大鼠在模型建立前5天开始每天给予冠心舒通胶囊,每次按1.5g/kg取药,溶于生理盐水,6mL/kg灌胃,每天两次,假手术组和模型组只给予同等剂量的生理盐水灌胃。各组心肌缺血30min,再灌注3h取材,采用缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数(AI);免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax基因蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组Bax表达增强,Bcl-2表达减弱(P<0.01);与模型组比较,冠心舒通胶囊组,AI、Bax表达下降(P<0.01),Bcl-2表达上调(P<0.05)。结论:冠心舒通胶囊通过抑制心肌细胞凋亡,下调Bax基因蛋白表达,上调Bcl-2基因蛋白表达,起到心肌缺血再灌注损伤的保护作用。     

慢性浅表性胃炎大鼠胃黏膜细胞凋亡与中医证型的相关性

目的探讨慢性浅表性胃炎（chronic superficial gastritis,CSG）大鼠不同证型胃黏膜细胞凋亡及其调控基因B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lym-phoma/Leukemia-2,Bcl-2）mRNA表达水平的变化,从细胞凋亡的角度揭示CSG各证候的实质。方法复制大鼠单纯CSG模型、脾虚CSG和湿热CSG模型,检测胃黏膜上皮细胞凋亡指数及其调控基因Bcl-2mRNA表达水平。结果三个模型组大鼠胃黏膜细胞凋亡指数均显著高于正常对照组,以脾虚CSG组最高。三个模型组较正常组Bcl-2mRNA表达均降低,以脾虚CSG组最低。结论 CSG大鼠胃黏膜细胞凋亡指数、Bcl-2mRNA表达水平与CSG证候有一定的相关性,以脾虚CSG组大鼠胃黏膜细胞凋亡指数最高和Bcl-2mRNA表达水平最低。     

地黄寡糖对血管性痴呆大鼠海马区神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:探讨中药提取物地黄寡糖(rehmannia glutinosa oligosaccharides,ROS)对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响.方法:选用SD成年大鼠,随机分为伪手术组、模型组和地黄寡糖高、低剂量组(9.0,45 g·kg-1·d-1).采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制作血管性痴呆大鼠模型,采用行为学评分法评价大鼠的行为学障碍程度,HE染色法观察大鼠海马CA1区病理组织形态学变化,TUNEL法检测大鼠海马CA1区的神经元细胞凋亡情况,免疫组化法检测大鼠海马区凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-相关x蛋白(Bax)的表达含量的变化,并检测大鼠海马组织匀浆中神经毒性氨基酸谷氨酸及海马组织和血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.结果:ROS能够显著改善缺血再灌注型血管性痴呆的大鼠的行为学障碍,降低其行为学评分(P＜0.01),减轻海马CA1区神经组织的病理性改变,降低神经元凋亡细胞比例(P＜0.01),并显著升高血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元细胞中Bcl-2蛋白表达(P＜0.01)、降低Bax蛋白表达(P＜0.01),Bcl-2/Bax显著升高,从而抑制了该区域神经元细胞的凋亡.此外,ROS给药能够显著减少血管性痴呆大鼠血清及海马组织中MDA的积累(P＜0.01),提高SOD的活性(P＜0.01),降低海马组织中谷氨酸的水平(P＜0.01).结论:ROS能够显著减少脑缺血再灌注损伤所致的大鼠海马CA1区神经元凋亡,其作用机制可能是通过调控Bcl-2/Bax相关蛋白的表达来实现的.此外与ROS减少组织中谷氨酸的水平和MDA的含量,提高SOD活性等,也提示ROS对血管性痴呆有一定的治疗作用.     

四逆汤抗阿霉素性心力衰竭的超氧化物歧化酶机制探讨

目的:探讨超氧化物歧化酶(SOD)在阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭中的作用以及四逆汤的可能的保护机制。方法:SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(含生药3.75 g·kg^-1·d^-1),实验结束时测定各组大鼠心功能,留取心肌组织并提取心肌细胞线粒体,以TBA法测定丙二醛(MDA)含量,邻苯三酚法测定SOD活性,RT-PCR法检测铜-锌SOD和锰SOD mRNA表达情况。结果:与对照组相比,心衰组大鼠心脏左室内压及左室内压变化速率明显降低,左室舒张末期压力明显增高,心肌组织铜.锌SOD和锰SOD活性及其mRNA表达明显降低,心肌组织和心肌细胞线粒体MDA含量明显增多;而四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,并提高铜-锌SOD和锰SOD的活性,增加其mRNA表达,并明显减少心肌组织和心肌细胞线粒体MDA的含量。结论:阿霉素性心力衰竭中心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以改善心功能,减轻此氧化应激反应,其机制可能与提高SOD活性密切相关。     

四逆汤抗失血性休克大鼠肠黏膜损伤 及菌群移位药效研究

目的:研究四逆汤对失血性休克大鼠肠黏膜损伤及肠道菌移位的影响。方法:动物分为空白组、失血性休克组、四逆汤高、低剂量组(按生药量计4.8,2.4 g.kg-1)。通过定血量放血建立大鼠失血性休克模型,观察复苏3 h后肠黏膜损伤程度,并取肝、脾、肾和肠系膜淋巴结进行细菌培养,测定肝门静脉血浆内毒素、动脉血浆D-乳酸(D-Lac)含量。并通过血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、总一氧化氮合酶(t-NOS)的测定进行作用机制的探讨。结果:四逆汤与模型组比较,肠黏膜病理学改变得到显著改善,细菌培养计数、内毒素及D-Lac含量显著减少。血浆t-NOS显著减少,TNF-α有降低趋势,四逆汤药效作用呈剂量依赖性增强。结论:四逆汤能够抑制肠道菌移位,减轻肠黏膜损伤。作用机制可能与抑制t-NOS,TNF-α有关。