胶质瘤促血管生成素2基因表达与血管生成关系的实验研究

目的探讨胶质瘤促血管生成素2(Ang2)表达与血管生成的关系。方法采用RT-PCR检测52例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中Ang2基因表达;CD34单克隆抗体组织化学染色显示微血管,用微血管计数(MVC)测定肿瘤血管生成。结果50例脑胶质瘤和8例正常脑组织均可表达Ang2 mRNA片段。Ang2 mRNA表达与脑胶质瘤的血管生成呈正相关(r=0.821,P<0.01);高恶度胶质瘤Ang2mRNA表达、MVC分别显著高于低恶度胶质瘤(P<0 01);低恶度胶质瘤Ang2mRNA表达、MVC均显著高于正常脑组织(P<0.01)。结论Ang2可能通过参与胶质瘤血管生成,对胶质瘤的恶性进展起促进作用。     

血管内皮生长因子和血管内皮抑素在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)患者异位及在位子宫内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)和内皮抑素(ES)的表达及其在血管生成调控机制中的作用。方法:采用SABC免疫组织化学方法检测16例异位内膜组织(EMT,E)、20例在位内膜组织(eutopic,e)及20例正常对照子宫内膜组织中VEGF和ES的表达。结果:①VEGF在异位内膜组织中阳性表达率为93·75%,在在位内膜组织中阳性表达率为55·00%,对照组子宫内膜组织(control,c)中阳性表达率为20·00%。E—e阳性表达率比较,P<0·05;E—c阳性表达率比较,P<0·01;e—c阳性表达率比较,P<0·05。e组中分泌期阳性表达8例,增殖期阳性表达3例;c组中分泌期和增殖期均为2例;e组分泌期和c组相比有显著性差异(P<0·05)。②ES在E组中阳性表达率为75·00%,在e组中阳性表达率为35·00%,在c组中阳性表达率为5·00%。E—e阳性表达率比较,P<0·05;E—c阳性表达率比较,P<0·01;e—c阳性表达率比较,P<0·05。e组中分泌期阳性表达5例,增殖期阳性表达2例;c组中分泌期1例,增殖期无表达。e组分泌期和c组相比无显著性差异(P>0·05)。结论:VEGF和ES在EMT及在位内膜组织中表达异常可能与EMT的发生发展密切相关,二者表达失衡可能是EMT发病机制的关键。     

血管内皮生长因子、血管生成素-2表达及微血管密度与肺癌预后的关系

目的研究肺癌中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素-2(an-giopoietin-2,Ang-2)表达水平与微血管密度(Microvascular density,MVD)的相关性,探讨三者对肺癌生存率的影响及与生存期的相关性,为判断肺癌预后提供依据。方法免疫组化法检测96例肺癌手术切除标本中VEGF、MVD表达,western-blotting检测肺癌标本中Ang-2表达变化。结果肺癌标本中VEGF、Ang-2高表达,MVD高表达组患者5年累积生存率分别为17.2%、16.3%、15.5%,显著低于低表达组(37.5%、31.9%、36.8%)(P<0.01);VEGF、Ang-2基因表达,MVD与术后生存期负相关(P<0.05);VEGF、Ang-2基因表达水平与MVD正相关(P<0.05)。结论VEGF、Ang-2表达水平越高,MVD越大,肺癌患者生存率越低,生存期越短,是判断肺癌预后有价值的指标。抑制VEGF、Ang-2的表达来降低MVD可能成为治疗肺癌的新靶点。     

胃癌患者血清血管内皮生长因子和内皮抑素水平及意义

目的探讨胃癌患者血清血管内皮生长因子（VEGF）和血清内皮抑素水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验抗体夹心法检测36例胃癌患者（胃癌组）和30例健康体检者（对照组）的VEGF、内皮抑素水平,分析二者的相关性及与临床分期的关系。结果胃癌组VEGF和内皮抑素水平呈正相关（P〈0.01）;胃癌组VEGF和内皮抑素水平均显著高于对照组（P〈0.01）;胃癌组VEGF和内皮抑素水平与临床分期相关。结论胃癌患者VEGF和血清内皮抑素水平明显升高,二者可能共同调控肿瘤新生血管生成。     

人脑胶质瘤中细胞周期蛋白D1和血管内皮生长因子的表达和意义

目的检测细胞周期蛋白D1和血管内皮生长因子在胶质瘤中的表达,并探讨其与恶性程度的关系及二者之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测52例不同级别胶质瘤中细胞周期蛋白D1和血管内皮生长因子蛋白的表达,分析其相互关系。结果细胞周期蛋白D1和血管内皮生长因子在胶质瘤中的表达率分别是71．15％和78．85％,并随着胶质瘤病理分级的增加而增高,差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞周期蛋白D1和VEGF的表达间存在着密切关系（P〈0．005）。结论细胞周期蛋白D1和皮生长因子的高表达与胶质瘤的恶性进展有密切关系;且细胞周期蛋白D1和皮生长因子协同在胶质瘤的发生发展过程中起重要作用。     

胃癌患者血清血管内皮生长因子和内皮抑素水平及意义

目的 探讨胃癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)和血清内皮抑素水平及其临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验抗体夹心法检测36例胃癌患者(胃癌组)和30例健康体检者(对照组)的VEGF、内皮抑素水平,分析二者的相关性及与临床分期的关系.结果 胃癌组VEGF和内皮抑素水平呈正相关(P＜0.01);胃癌组VEGF和内皮抑素水平均显著高于对照组(P＜0.01);胃癌组VEGF和内皮抑素水平与临床分期相关.结论 胃癌患者VEGF和血清内皮抑素水平明显升高,二者可能共同调控肿瘤新生血管生成.     

月经病实寒证患者血清血管内皮生长因子、促血管生成素-2表达水平及其和子宫血流动力学的关系

目的探讨月经病实寒证患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、促血管生成素-2 (Ang-2)表达水平及其与子宫血流动力学之间的关系,为阐明月经病实寒证提供一定西医理论依据。方法选取2016年2月-2017年2月十堰市中医医院收治的47例月经病实寒证患者为研究对象(月经病组),同期选取47例正常健康妇女作为对照组,采集所有受试者肘静脉血10 ml,采用化学发光免疫分析法检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_2)、黄体生成素(LH)水平,采用彩色多普勒超声检测子宫血流动力学参数:收缩期峰值流速(PSV)、搏动指数(PI)、阻力指数(RI),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清VEGF、Ang-2水平。结果月经病组血清FSH、E_2、LH水平明显低于对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05);月经病组PSV水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05),而PI、RI水平明显高于对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05);月经病组血清VEGF、Ang-2水平明显低于对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05);相关性分析结果可见,RI水平与E_2呈明显负性相关(r=-0. 642,均P<0. 05),血清VEGF水平与PSV呈明显正相关(r=0. 497,P<0. 05),与PI、RI呈明显负性相关(r=-0. 672、-0. 715,P<0. 05),血清Ang-2水平与PSV呈明显正相关(r=0. 436,P<0. 05),与PI、RI呈明显负性相关(r=-0. 612、-0. 631,均P<0. 05),血清VEGF与Ang-2呈明显正相关(r=0. 528,P<0. 05)。结论 VEGF、Ang-2在月经病实寒证患者中呈低表达,推测二者与月经病发生发展密切相关。     

促血管生成素-2在反复自然流产绒毛膜中的表达

目的:探讨反复自然流产(RSA)与促血管生成素-2(Ang-2)的关系。方法:用免疫组化法检测33例反复自然流产患者和37例健康早孕人工流产妇女的绒毛膜组织中Ang-2的表达水平。结果:自然流产组Ang-2的表达高于人工流产组,差异有统计学意义(P<0.05);两组Ang-2的表达均与年龄无关(P>0.05);自然流产组Ang-2的表达与胚胎孕周呈正相关(P<0.05),而人工流产组Ang-2的表达与胚胎孕周无关(P>0.05)。结论:Ang-2的高表达可能是造成自然流产的原因之一。     

促血管生成素-2在妇科肿瘤检测中的应用

目的:分别选用Ang-2、CA125、CA19-9和SCC检测妇科肿瘤患者及正常人群,以评估Ang-2在妇科肿瘤检测中的应用价值。方法:对256例妇科肿瘤患者(110例宫颈癌患者、77例卵巢癌患者、41例子宫内膜癌患者、28其它妇科肿瘤患者)和139例正常人群分别以免疫比浊法检测Ang-2,微粒子酶免疫测定法检测SCC,电化学发光法法检测CA125、CA19-9。结果:Ang-2、CA125、CA19-9、SCC在妇科肿瘤患者中的检出率分别为68.0%、43.4%、37.1%和37.5%;在正常人群中的检出率分别为1.4%、10.1%、11.5%和3.6%;其中Ang-2、CA125、CA19-9、SCC在宫颈癌患者中的检出率分别为67.3%、42.7%、39.1%、47.3%;在卵巢癌患者中的检出率分别为70.1%、58.4%、37.7%、31.2%;在子宫内膜癌患者中的检出率分别为68.3%、22.0%、29.3%、26.8%。经过CA125、CA19-9、SCC检测为阴性的卵巢癌患者,宫颈癌、子宫内膜癌患者再进行Ang-2检测,发现Ang-2对其它3种检测指标有很好的互补性,最低互补检出率48.3%。结论:Ang-2作为一种国际公认的实体肿瘤的广谱标志物,它相对于其它标志物在妇科肿瘤患者的早期筛查及临床辅助诊断方面都有着显著的优势,具有重要的临床价值。     

血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及其意义

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在乳腺癌中的表达,探讨其与病理参数的关系。方法应用流式细胞术检测53例乳腺癌及15例正常乳腺组织中VEGF的表达。结果乳腺癌中VEGF表达的阳性率为81.1%,与正常乳腺组织表达差异有统计学意义。VEGF的表达随着组织学分级增高,VEGF在有淋巴结转移组高表达。结论VEGF可能参与乳腺癌的血管生成,与预后有一定相关性。     

血管生成素-2及其受体Tie-2在子宫内膜异位症中的表达

目的:探讨Ang-2及受体Tie-2在子宫内膜异位症(EMs)患者的在位内膜和异位内膜中的表达。方法:选取病理证实为EMs患者60例为研究组(异位内膜组、在位内膜组),选取同期因不孕症等行腹腔镜手术患者的子宫内膜组织36例为对照组。采用免疫组织化学染色方法检测Ang-2及受体Tie-2的表达。结果:①Ang-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,少数表达于间质细胞。Ang-2在EMs异位内膜、在位内膜的阳性表达率明显高于对照组(P<0.05);在位内膜同异位内膜间比较差异无显著性(P>0.05);EMs在位内膜组分泌期的阳性表达率高于增殖期(P<0.05);对照组增生期的阳性表达率高于分泌期(P<0.05)。Ang-2在EMs在位内膜组、正常对照组的表达均随月经呈周期性改变,差异均有显著性。②Tie-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,EMs组异位内膜和在位内膜Tie-2的表达明显高于对照组(P<0.05);EMs患者异位及在位内膜比较差异无显著性(P>0.05);Tie-2在正常子宫内膜、EMs在位内膜中的表达具有周期性,均为增生期高于分泌期(P<0.05)。结论:EMs患者异位及在位内膜中血管生成活跃,导致异位病灶组织中的血管数增加。异位内膜和在位内膜可能具有组织同源性。分泌期内膜更易在盆腹腔等处种植生长,增生期血管生成更为活跃。     

碱性成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶2在脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在脑胶质瘤中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学技术,对临床上经过石蜡包埋的56例胶质瘤和9例正常脑组织标本中bFGF和MMP-2的表达水平进行检测,并比较它们之间的相关性.结果 bFGF和MMP-2在高级别胶质瘤(Ⅲ、Ⅳ级)中阳性表达率分别为(41.23±12.35)％和(54.32±7.32)％;在低级别胶质瘤(Ⅰ、Ⅱ级)中阳性表达率分别为(24.78±7.57)％和(21.56±3.85)％;在正常脑组织中阳性表达率分别为(9.51±2.69)％和(7.18±2.12)％.在高、低级别胶质瘤和正常脑组织中bFGF和MMP-2阳性表达率两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05),且二者之间表达水平呈正相关(r＝0.71,P＜0.01).结论 bFGF和MMP-2表达水平和胶质瘤的组织学分级密切相关;bFGF和MMP-2的协同作用可能在胶质瘤细胞的侵袭性生长中有重要意义.     

血管生成素2与炎症因子在脓毒症患儿中的表达

目的探讨血清血管生成素(Ang)2、白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平与儿童脓毒症严重程度的相关性，为儿童脓毒症临床诊断及治疗提供依据。 方法选择2017年7月至2018年7月，在浙江大学金华医院儿科及浙江大学医学院附属儿童医院诊治的64例发热患儿为研究对象，其年龄为1个月至12岁。根据患儿是否罹患脓毒症及脓毒症分级标准，将其分为3组：A组(n＝22，脓毒症患儿)，B组(n＝24，感染不伴SIRS的的非脓毒症患儿)、C组(n＝18，严重脓毒症患儿)。选择同期于浙江大学金华医院儿童保健科进行体检的21例健康受试儿作为对照，纳入对照组，其年龄为3个月至12岁。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测4组受试儿血清Ang-2、IL-6、TNF-α水平。绘制4组受试儿血清Ang-2水平诊断严重脓毒症患儿的受试者工作特征(ROC)曲线，计算ROC曲线下面积(ROC-AUC)，根据约登指数最大原则，确定血清Ang-2水平诊断严重脓毒症患儿的最佳临界值，同时计算其敏感度和特异度。采用直线相关分析，对4组受试儿血清Ang-2水平分别与其血清IL-6、TNF-α水平进行相关性分析。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求，并与所有受试儿监护人签署临床研究知情同意书。 结果①4组受试儿年龄、性别构成比等一般临床资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。②4组受试儿血清Ang-2、TNF-α和IL-6水平分别总体比较，差异均有统计学意义(F＝261.24、33.82、28.00，P均<0.001)。进一步进行两两比较的结果显示，C组受试儿血清Ang-2、TNF-α水平，均显著高于A组、B组和对照组，并且差异均有统计学意义(血清Ang-2水平：LSD-t＝－5.35、－15.98、25.31，P均<0.001；血清TNF-α水平：LSD-t＝－2.24、P＝0.030，LSD-t＝－4.91、P<0.001，LSD-t＝8.59、P均<0.001)；C组受试儿血清IL-6水平分别显著高于B组和对照组，并且差异有统计学意义(LSD-t＝－4.93、8.50，P均<0.001)。③ROC曲线分析结果显示，4组受试儿血清Ang-2水平诊断严重脓毒症患儿的ROC-AUC为0.998(95%CI：0.946～1.000，P<0.001)。根据约登指数最大原则，血清Ang-2水平诊断严重脓毒症患儿的最佳临界值为163.4 ng/L，此时其诊断严重脓毒症患儿的敏感度为100.0%，特异度为98.5%。④4组受试儿中，其血清Ang-2水平分别与血清IL-6、TNF-α水平呈正相关关系(r＝0.606、0.556，P均<0.001)。 结论血清Ang-2水平随着脓毒症患儿病情严重程度增加而增高，可用于辅助判断脓毒症患儿病情严重程度。血清IL-6、TNF-α水平与血清Ang-2水平具有相关性，可以协助临床诊断脓毒症患儿。     

胃癌浸润转移与血清促血管生成素-2的关系

目的 探讨血清促血管生成素-2(Ang-2)的含量变化在胃癌诊断、复发与浸润转移中的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测158例胃癌患者(胃癌组)及30例健康志愿者(对照组)血清Ang-2与CEA的含量,并检测胃癌患者术后2周血清Ang-2与CEA含量的变化.术后随访2年,检测肿瘤复发患者(复发转移组,38例)与未复发患者(未复发组,93例)血清Ang-2与CEA含量.分析血清Ang-2含量变化与胃癌病理特征的关系.结果 胃癌组术前和复发转移组血清Ang-2含量[(331.8±64.3)、(318.7±72.9)μ g/L]和CEA含量[(42.6±37.3)、(40.5±36.7)μ g/L]均显著高于对照组[(187.4±32.7)、(4.2±3.1)μg/L](P＜0.01).术后2周血清Ang-2含量[(211.6±75.1)μg/L]与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而CEA含量[(33.4±30.6)μg/L]仍显著高于对照组(P＜0.01).血清Ang-2对胃癌诊断的敏感度显著高于CEA(P＜ 0.01).血清Ang-2含量与肿瘤分化程度、TNM分期、有无淋巴结转移、有无远处转移、浸润深度和肿瘤直径均相关(P＜0.01),而与组织学类型、肿瘤部位无相关性(P＞0.05).结论 血清Ang-2可作为一种新的具有一定临床价值的胃癌肿瘤标志物,有助于临床诊断、术后复发的监测和预后评价.     

磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在人神经胶质瘤中的表达及临床意义

目的 研究磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( pmTOR)在人神经胶质瘤中的表达及其与肿瘤抗凋亡和增殖能力的关系.方法 收集人神经胶质瘤石蜡标本87例,其中Ⅰ～Ⅱ级27例、Ⅲ级24例、Ⅳ级36例,应用免疫组织化学EliVision法检测组织中pmTOR、存活蛋白(Survivin)和增殖细胞核抗原(Ki-67)的表达,分析pmTOR与神经胶质瘤病理分级的关系及其与Survivin和Ki-67的相关性.结果 pmTOR在不同级别的神经胶质瘤中均有表达,Ⅰ一Ⅱ级阳性表达率为77.8％(21/27),Ⅲ级为75.0％(18/24),Ⅳ级为72.2％ (26/36),各级别神经胶质瘤中的阳性表达率比较差异无统计学意义(P＞0.05),但其表达强度随着肿瘤病理分级的增高而升高.pmTOR与Survivin和Ki-67的表达强度呈正相关(r=0.858,P＜ 0.01;r=0.708,P＜0.01).结论 pmTOR的表达强度与神经胶质瘤的恶性程度以及细胞抗凋亡和增殖能力有关,可作为基因治疗的有效靶点.     

血管生成素-1对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9表达的调控作用

目的分析血管生成素-1(Ang-1)对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的调控作用。方法将体外培养的人绒毛膜外滋养细胞株HTR8/SVneo分为空白对照组(未转染)、NC-siRNA组(转染阴性对照siRNA)及Ang-1-siRNA组(转染Ang-1 siRNA)。采用实时定量PCR法检测3组细胞中Ang-1 mRNA的表达,采用Western blot法检测Ang-1、MMP-2及MMP-9蛋白的表达,采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力。结果转染48 h后,空白对照组Ang-1 mRNA表达水平为(1.36±0.04),NC-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.98±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.24±0.02),3组比较差异有统计学意义(F=257.128,P<0.001)。空白对照组Ang-1蛋白水平为(0.54±0.03),NC-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.49±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.12±0.06),3...     

Ang2基因多态性与卵巢癌的相关性研究

目的:探讨促血管生成素2(angiopoietin-2,Ang2)基因1087G/A位点基因多态性与卵巢癌的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,对158例卵巢癌患者和160例健康对照者的Ang2基因1087G/A位点基因型进行检测。结果:Ang2基因1087G/A位点基因型频率和等位基因频率在两组人群中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Ang2基因1087G/A位点基因多态性可能与卵巢癌发生无关。