NGF与CNTF联合治疗糖尿病大鼠胃肠神经病变的实验研究

 目的 为了研究重组人睫状神经营养因子（rhCNTF）与神经生长因子（NGF）联合给药对糖尿病大鼠胃肠神经功能紊乱的作用。方法 采用链脲佐菌素（streptozocin,STZ）诱发Ⅰ型糖尿病大鼠所致胃肠神经功能紊乱模型,动物随机分为正常组、模型组、NGF(0.02 mg·kg-1,im)组、rhCNTF(0.1 mg·kg-1,im)组、NGF和rhCNTF联合用药组,连续给药85 d。观察各组大鼠血糖、胃肠慢波电位、小肠壁内神经蛋白含量、胃肠推进功能以及胃肠对乙酰胆碱（Ach）、阿托品敏感性。结果 NGF和rhCNTF联合用药和单独用药对糖尿病大鼠血糖均无明显降低作用,十二指肠对Ach、阿托品的敏感性也未见明显改变,但均可改善糖尿病大鼠胃肠慢波电位,提高胃肠推进功能,同时增加了胃肠壁内神经蛋白含量,联合用药效果优于单独给药。 结论 NGF与RhCNTF联合用药具有较好的抗糖尿病导致的胃肠神经功能紊乱作用,其机制可能与他们对内脏植物神经的神经营养和神经保护作用有关,且具有一定的协同作用。     

复方麝香注射液对视神经挤压模型大鼠睫状神经营养因子表达的影响

目的探讨大鼠视神经挤压伤后及修复过程中睫状神经营养因子(ciliary neuro-trophic factor,CNTF)在视网膜上表达的变化及复方麝香注射液对其影响。方法 72只健康SD大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、药物治疗组3组,每组24只。模型对照组和药物治疗组大鼠均采用钳夹法建立视神经挤压伤实验模型,药物治疗组大鼠腹腔注射复方麝香注射液,正常对照组和模型对照组大鼠腹腔注射等容量的灭菌注射用水,分别于造模后第5、15、30d随机抽取各组8只大鼠处死,摘取眼球行视网膜中CNTF的免疫组化检测。结果实验证实正常视网膜中存在CNTF的表达;视神经损伤后5d、15d、30dCNTF表达均增高,伤后第5d最高,15d下降,但仍明显高于正常对照组(P0.05),至30d时其表达量与正常对照组已无显著性差异(P0.05);药物治疗组大鼠视神经损伤后5d、15d、30dCNTF表达均明显高于模型对照组(P0.05),至伤后治疗15dCNTF表达显著高于模型对照组(P0.01)。结论视神经损伤后视网膜中CNTF表达增加,复方麝香注射液能有效地促进视网膜中CNTF较长时间高表达,这可能是其对视网膜神经节细胞轴突损伤后的保护作用的机理之一。     

中医药对神经营养因子影响的研究

神经营养因子是中枢神经系统神经元损伤再生修复研究的热点,生物学家与临床专家高度重视.近年来,中医脑病学界也开展了大量神经再生研究的基础实验研究,相关研究表明中医药可以提高神经元抵抗损伤的能力,保护神经细胞,促进NSC增殖并诱导其定向分化为功能性神经元.     

加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA_1区神经营养因子-3表达的影响

目的探讨加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区神经营养因子3（NT-3）表达的影响。方法腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病大鼠模型,造模后以免疫组化法观察加味金匮肾气丸对大鼠脑海马CA1区NT-3表达的影响。结果加味金匮肾气丸治疗组比糖尿病组大鼠脑海马CA1区NT-3表达增加。结论加味金匮肾气丸可以有效防治糖尿病大鼠脑海马CA1区神经元退行性变化。     

筋脉通对高糖培养雪旺细胞炎性因子及神经营养因子的影响

目的探讨中药筋脉通(JMT)对高糖条件下雪旺细胞(SCs)炎性因子及神经营养因子蛋白表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为3组,分别以筋脉通胶囊、神经妥乐平(Ntp)及等体积蒸馏水灌胃制备含药血清和正常大鼠血清;原代培养SCs,分为正常组、高糖组、JMT组和Ntp组,48 h后用CCK-8法检测各组SCs细胞增殖,免疫印迹法检测各组SCs细胞IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、NGF及NT-3蛋白的表达,夹心法酶联免疫吸附法测定各组SCs上清液中IL-6、TNF-α、NGF的表达。结果与正常组比较,高糖组SCs增殖活性减低(P0.01),TNF-α蛋白表达上调、分泌量增加(P0.05),IL-1β、L-10蛋白表达上调(P0.05,P0.01),NGF的蛋白表达下调、分泌量减少(P0.05,P0.01),NT-3蛋白表达下调(P0.05)。与高糖组比较,JMT组细胞增殖活性提高(P0.01),TNF-α蛋白表达量及分泌量减少(P0.05),IL-1β、L-10蛋白表达量减少(P0.01),NGF蛋白表达量、分泌量及NT-3蛋白表达增加(P0.05);JMT组SCs细胞增殖活性提高,SCs中TNF-α表达及分泌受到抑制,IL-1β表达量减少,NGF蛋白表达增加,其作用优于Ntp组(P0.05,P0.01)。IL-6蛋白表达和分泌在各组间差异无统计学意义(P0.05)。结论 JMT含药血清能够提高高糖培养SCs的增殖活性,降低TNF-α、IL-1β、L-10等炎性因子表达,抑制TNF-α分泌,提高NT-3表达,促进SCs分泌NGF,从而起到防治DPN的作用。     

艾灸大椎穴对慢性应激大鼠神经营养因子的影响

目的 :观察艾灸大椎穴对慢性应激状态下大鼠海马神经元及脑源性神经营养因子的影响。方法 :SD雄性大鼠 18只 ,按随机表分为正常组、模型组、艾灸组。应用孤养和长期不可预见性的中等强度刺激造成应激失调模型 ,观察各组大鼠海马神经元的变化。采用HE染色、尼氏体染色的方法光镜下观察海马神经元形态的改变 ,用免疫组织化学的方法对海马脑源性神经营养因子 (BDNF)阳性神经元进行染色 ,并用图像分析仪定量分析。结果 :慢性应激可致大鼠海马神经元明显受损 ,神经营养因子阳性神经元数量亦显著减少 ,形态以空泡为主。艾灸大椎穴对此有明显改善作用。结论 :艾灸大椎穴对慢性应激大鼠脑源性神经营养因子有良性调节作用 ,并对海马神经元有保护作用。     

筋脉通胶囊对高糖培养雪旺细胞睫状体神经营养因子表达的影响

目的探讨筋脉通胶囊对糖尿病周围神经病变的作用及其机制。方法以Wistar大鼠按成人剂量15倍给药分别制成筋脉通和神经妥乐平含药血清。实验分为空白对照组(不加细胞)、正常对照组(加入正常大鼠血清)、高糖组(加入葡萄糖)、筋脉通组(加入筋脉通含药血清和正常大鼠血清)、神经妥乐平组(加入神经妥乐平含药血清),除空白对照组和正常对照组之外,其余各组均加入50mmol/L葡萄糖培养高糖雪旺细胞模型。采用免疫荧光法检测高糖培养雪旺细胞睫状体神经营养因子(CNTF)的表达,实时荧光定量PCR法检测CNTF-mRNA的表达。结果与正常对照组相比,高糖组、筋脉通组、神经妥乐平组雪旺细胞CNTF及CNTF-mRNA的表达均降低(P0.01);与高糖组相比,筋脉通组与神经妥乐平组雪旺细胞CNTF及CNTF-mRNA表达均增高(P0.01);且筋脉通组雪旺细胞CNTF-mRNA表达较神经妥乐平组增高(P0.05)。结论筋脉通胶囊可以上调高糖培养雪旺细胞CNTF蛋白及其mRNA的表达,从而对糖尿病周围神经病变具有一定的改善作用。     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠海马区神经营养因子及其受体表达的影响

目的:观察针刺治疗阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马区神经营养因子及其受体的变化,探讨电针治疗AD的作用机制。方法:Wistar大鼠40只,随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组。以双侧海马注射微量Aβ25-35制备AD动物模型,电针组选取风府穴行电针治疗,以Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,免疫组化法观察海马区BDNF及其受体TrkB、GDNF及其受体GFR-α1的阳性细胞数量。结果:模型组BDNF及其受体TrkB、GDNF及其受体GFR-α1阳性细胞数较正常组明显减少(P0.05),电针组BDNF及其受体TrkB、GDNF及其受体GFR-α1阳性细胞数显著高于模型组(P0.01)。结论:提示电针风府穴能使AD模型大鼠海马区BDNF及其受体TrkB、GDNF及其受体GFR-α1表达水平增高,电针风府穴对胆碱能神经元具有保护作用。     

健脑通络汤对缺血大鼠脑组织神经营养因子含量影响的研究

目的 从神经营养因子环节探讨健脑通络汤(即补阳还五汤合六味地黄汤)抗脑缺血损伤的机制,并观察补阳还五汤与六味地黄汤是否有协同作用.方法 采用改良Haruo Nagasawa法复制老龄大鼠脑缺血模型,随机分为健脑通络汤组、六味地黄汤组、补阳还五汤组、模型组、假手术组,观察各组术后24h、72h、7d脑组织TGF-β1、GDNF的表达.结果 健脑通络汤能提高急性持续脑缺血大鼠的TGF-β1、GDNF阳性细胞总数,使其表达增强,其作用优于单用,其中单用补阳还五汤优于单用六味地黄汤.结论 通过诱导内源性神经营养因子的表达,可能是健脑通络汤脑保护的作用机制.     

加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区神经营养因子-3表达的影响

目的探讨加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区神经营养因子3(NT-3)表达的影响。方法腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,造模后以免疫组化法观察加味金匮肾气丸对大鼠脑海马CA1区NT-3表达的影响。结果加味金匮肾气丸治疗组比糖尿病组大鼠脑海马CA1区NT-3表达增加。结论加味金匮肾气丸可以有效防治糖尿病大鼠脑海马CA1区神经元退行性变化。     

葫芦巴对链佐霉素诱导糖尿病模型大鼠药理研究

目的：观察葫芦巴对链佐霉素（Streptozotocin．STZ）所致1型糖尿病（Insulin-dependent diabetes mellitus，IDDM）大鼠的药理作用。方法：一次性腹腔注射50mg／kgSTZ溶液，建立大鼠IDDM模型。分别灌胃给予葫芦巴煎液和格列齐特溶液作为治疗组和阳性对照组，连续给药20天；以大鼠血糖值、血脂、血清SOD和NO含量、肝组织GSH为观察指标。结果：葫芦巴明显降低IDDN大鼠血糖水平，水平明显降低TG、HDL—C、TC，血清明显升高SOD、NO水平。结论：葫芦巴给药对STZ所致大鼠IDDM有明显降低血糖作用，对STZ引起的1型糖尿病大鼠有明显的治疗作用．     

托玛琳对糖尿病周围神经病变的影响

目的 本研究旨在观察托玛琳对糖尿病周围神经病变的影响.方法 将托玛琳寝具用于糖尿病周围神经病变患者,通过使用前后自觉症状、神经功能的变化,比较、分析托玛琳对糖尿病周围神经病变的效果.结果 托玛琳寝具使用半年后,患者部分症状改善,1年后自发疼痛、肢体麻木、烧灼感改善虽明显.腱反射、震动觉、神经传导速度及自主神经检查等1年后有不同程度改善.疾病进程明显减慢.结论 托玛琳寝具可改善糖尿病周围神经病变的症状和体征,是简单易行、安全有效的保健方法之一.     

自发性2型糖尿病动物模型GK大鼠的发病特征研究

目的: 研究自发性2型糖尿病动物模型(GK)大鼠的发病特征。 方法: 以Wistar大鼠(n=12)为对照,从第13周龄起连续监测GK大鼠(n=61)的基础血糖值、体重、摄食量和饮水量。第32周龄时,开展糖耐量试验,进行大便常规和肝肾指数检查,检测血浆中血脂、肾功能和糖化血红蛋白(HbA1c)的水平,取胰腺和肾脏进行病理检查。 结果: GK大鼠在第24周龄时开始发病,血糖稳定地维持在11.0 mmol·L^-1以上的高血糖水平,HbA1c水平亦明显升高,至少可以维持到第32周龄;期间还出现类似于糖尿病病人"消瘦"、"多食"、"多饮"等临床症状;死亡率相对较低,仅为11.47%左右。GK大鼠对糖负荷的代谢能力降低,胰腺和肝脏组织病理改变明显加重。 结论: GK大鼠在第24～32周龄期间发病,具有明显的、稳定的糖尿病发病特征,且死亡率低,有利于开展糖尿病的发病机制和药物的有效性评价研究。     

白花丹参水提物对糖尿病大鼠胰腺的保护作用

目的：观察白花丹参水提物对实验性糖尿病大鼠胰腺功能的影响,明确其治疗作用。方法：以高糖高脂饮食喂养的90只雄性Wistar大鼠尾静脉注射链脲佐菌素（25 mg/kg）建立糖尿病（DM）模型,随机分为空白组、模型组、西药组、中药高,中,低剂量组,于给药第4周后测FPG、INSULIN、MDA、SOD等指标,进行统计分析。结果：与模型组相比,中药组、西药组对糖尿病模型大鼠血糖和胰腺均有显著的治疗作用,FPG、MDA明显降低,INSULIN、SOD明显升高,优于模型组（P〈0.01）;中药治疗组随剂量的增加,效果显著增加,而以中药大剂量组效果最好,明显优于其他各组（P〈0.01）。结论：白花丹参水提物对糖尿病大鼠胰腺功能有显著的保护作用。     

STZ建立2型糖尿病大鼠模型的剂量探讨

目的:探讨链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射建立2型糖尿病(T2DM)大鼠模型的最佳注射剂量。方法:4周龄SPF级雄性SD大鼠高糖高脂饲料喂养4周,分别按30mg/kg、40mg/kg、50mg/kg体重剂量腹腔注射STZ建立T2DM大鼠模型,观察成模大鼠各阶段体重、食量、饮水量、尿量变化;检测空腹血糖(FBG)、胰岛素(FINS)、血脂,比较各组大鼠模型稳定性。结果:40mg/kg剂量组大鼠的成模率最高(73.3%),成模大鼠具有胰岛素抵抗、高血糖、高胰岛素血症和血脂紊乱的T2DM临床特征,高血糖持续时间最长、最稳定(到实验结束模型稳定至少28d)。30mg/kg剂量组大鼠成模率只有40%,成模大鼠于实验结束血糖水平已基本恢复正常,50mg/kg剂量组成模大鼠倾向于1型糖尿病。结论:短期高糖高脂饮食联合STZ腹腔注射建立2型糖尿病SD大鼠模型的STZ最佳注射剂量为40mg/kg。     

实验性糖尿病大鼠动脉粥样硬化模型的建立

目的建立类似人类糖尿病并发动脉粥样硬化(AS)大鼠模型。方法选1月龄SD大鼠,先饲以高脂高糖饲料4周,促发胰岛素抵抗,继以小剂量STZ(30mg/kg·体重)腹腔注射,诱导建立糖尿病AS模型。结果注射STZ2周后大鼠血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白及HDL-L/总胆固醇均显著高于空白组;形态学观察发现,模型组动脉出现典型粥样硬化病变。结论本实验方法建立的糖尿病伴动脉粥样病变大鼠模型,与人类2型糖尿病代谢特征相似,是研究人类糖尿病大血管病变较理想的动物模型。     

维药孜亚比提片对2型糖尿病大鼠免疫功能的影响

目的:探讨维药孜亚比提片对2型糖尿病大鼠免疫功能的影响。方法:将SD大鼠75只随机分为正常组15只,造模组60只,将造模组大鼠采用高脂乳汁以灌胃的方式稳定饲养8周后隔3天腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(20 mg/kg)4次建立2型糖尿病模型,并随机分为模型组、维药孜亚比提片高、中、低剂量[6.0、3.0、1.5g/(kg·d)]组各15只,连续给药8周。采用酶联免疫吸附法(ELLSA)测定并大鼠血清白细胞介-2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果:1)与正常组比较,模型组大鼠血清IL-2含量降低、IL-6、TNF-α含量升高,差异有统计学意义(P0.01);孜亚比提片高、中剂量组IL-2含量降低,IL-6、TNF-α含量升高,差异有统计学意义(P0.05),孜亚比提片低剂量组IL-2含量明显降低,TNF-α含量升高,差异有统计学意义(P0.01),IL-6含量升高,但差异无统计学意义(P0.05)。2)与模型组比较,孜亚比提片高、中剂量组IL-2含量升高,IL-6、TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P0.05),孜亚比提片低剂量组IL-2含量升高,IL-6含量降低,差异有统计学意义(P0.05),TNF-α含量降低,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:维药孜亚比提片能改善2型糖尿病大鼠免疫功能。     

木丹颗粒对2型糖尿病患者颈动脉内膜中层厚度及血浆炎症因子水平的影响

目的观察木丹颗粒对2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内膜中层厚度及血浆炎症因子(C-RP)水平的影响。方法将符合2型糖尿病诊断标准的67例患者随机分为两组,两组控制血糖基础治疗相同,中药组配合中药木丹颗粒。结果①中药组治疗后FPG,2hPG,血脂TC、TG,LDL-C、BMI水平均下降,但没有统计学意义,而HDL-C则升高,亦没有统计学意义;②T2DM组的C-RP水平、IMT均高于中药组(P<0.05)。结论木丹颗粒通过减轻血管炎症反应,减缓动脉硬化的进程,从而可以延缓糖尿病大血管并发症发生及发展。     

针灸治疗糖尿病周围神经病变疗效观察

目的:观察针灸方法治疗糖尿病周围神经病变的临床疗效。方法:将65例患者随机分为治疗组32例和对照组33例,在糖尿病常规治疗基础上,治疗组配合针刺治疗,对照组口服肌醇,观察治疗期间两组症状的变化情况。结果:治疗3个月后治疗组显效16例,有效12例,无效4例,总有效率为87.5%;对照组中显效7例,有效14例,无效12例,总有效率为63.6%。两组总有效率比较有显著差异(P<0.05)。结论:配合针灸治疗糖尿病周围神经病变临床效果良好。