组织固定对下游基因和蛋白分子检测的影响

甲醛固定石蜡包埋(formalin fixed and paraffin embedded, FFPE)组织是检测特异性生物标志物的主要标本来源之一。若未进行标准化的固定,用甲醛固定的组织作为下游检测的标本出现的问题较多,如会发生DNA碱基与附近组蛋白的交联、会引起组织中的DNA片段化等等。为全面了解FFPE标本对下游检测的影响,该文从其对蛋白质、DNA、RNA和miRNA等检测的影响作一综述,使病理工作者在今后的工作中,做好FFPE标本的固定处理,为下游的检测打好基础,让整个固定过程更加标准化,实现病理组织标本的精准固定。     

普通银染技术与微波银染技术的比较

1970年,Mayers首先用微波对组织标本照射进行固定.并获成功.由此创立了形态学的微波技术.微波是一种普遍存在的电磁波,其频率为300～300000MHz.由于它振荡频率非常高.可使微波照射下的物质内部的分子由无规则排列到有规则的排列,且随微波的振荡频中进行正负性交替变换达每秒钟上亿次的快速运动,物质在极短的时间内可产生热量.分子的热运动与相邻分子之间的摩擦加速了化学试剂村组织的浸透.从而达到了在短暂的时间内对组织标本进行固定的作用.近年来微波技术已从对组织标本进行固定的单方面.发展到形态学技术的各个方面.在染色方面其优点尤为突出,表现为:(1)产生很好的染色效果.(2)染色时间极大的缩短.(3)应用广泛,如HE染色、银染区应、组织化学染色以及免疫组化、免疫荧光染色等等.国内形态学微波技术的研究处于初步阶段.本实验就普通银染与微波银染在显示网状纤维、内分泌细胞及小肠嗜银细胞方面进行了一些模     

壳聚糖基聚电解质的生物医用前景

背景：利用壳聚糖阳离子聚合物特性,以不使用化学交联剂为前提在温和条件下制得的壳聚糖基聚电解质复合物,具有良好的生物相容性。 目的：综述近年来壳聚糖基聚电解质在药物载体、组织工程、伤口敷料、生物传感器、基因载体等方面的应用情况。 方法：由第一作者检索2004至2011年 ACS数据库和Elsevier Science电子期刊有关壳聚糖聚电解质在生物医用领域中的应用,尤其在药物载体、组织工程、伤口敷料、生物传感器及基因载体中的研究情况。 结果与结论：壳聚糖本身由于生物相容性好,可应用于生物体中作为良好的载体材料、支架材料、伤口敷料及生物传感器,经过与其他阴离子物质复合后可以保护壳聚糖本身良好性质,并且避免了使用化学交联剂所带来的生物毒性。壳聚糖的阳离子聚电解质本性使其能与黏液、阴离子表面和其他大分子如DNA产生强静电作用可有效应用于药物传送、基因治疗、固定生物酶等;壳聚糖聚电解质凝胶独特的性质如pH值、离子强度、电场敏感性,可使其通过对外界环境的改变作出不同响应,实现对生物组织的模拟、刺激响应药物控释,并且壳聚糖具备优异的抗菌性、止血性、亲水性和透气性,能够有效促进伤口愈合。     

FineFix固定液与福尔马林固定液对组织保存及固定的比较

随着石蜡切片、免疫组化、特殊染色以及分子遗传学分析在病理诊断上的普遍应用,对标本组织处理要求越来越严格.固定是标本处理过程中的重要环节,如果固定液选择不当、浓度不均、固定时间与温度不合适以及固定液过少等均会使组织固定不良而影响制片质量、免疫标记及分子生物学检测结果,从而影响病理诊断.福尔马林是一种有毒、致敏及致癌物,废液处理成本较高,经其固定的组织抗原蛋白的氨基与醛基交联形成羧甲基封闭抗原决定簇,使免疫组化着色效果减弱[1].本实验采用FineFix固定液(以下简称FF)与福尔马林液固定的组织进行对比,经FF固定的组织形态结构完整,尤其在提取DNA和RNA的质和量上具有明显的优越性[2].     

原位PCR技术及其应用

多聚酶链反应(PER)已广泛应用于扩增特定的DNA序列,从而能对许多疾病进行分子水平的分析。PCR虽然能扩增包括经福尔马林固定、石蜡包埋组织的各种标本的DNA,但扩增的DNA产物不能在组织细胞中定位,因而不能直接与特定的组织细胞特征相联系,这是该技术的一个局限性。原位杂交     

未脱钙骨酶组织化学研究新技术——低温塑料包埋切片技术

低温塑料包埋切片技术是一种能应用于未脱钙骨制备切片标本的技术。由于采用低温包埋,从而使组织中的酶获的良好而持久的保存。Westen已较为全面地研究了这一技术,为骨组织酶组织化学研究提供了较为理想的方法使多种酯酶及氧化酶能获得持久保存。然而,Westen的技术只能应用于小块骨组织和骨髓活检标本。我们在家兔桡骨骨折模型应用这一技术,现就初步体会报告如下。     

PDBu(phorbol-12,13-dibutyrate)作为促有丝分裂剂在低分裂指数的肿瘤细胞遗传分析中的应用

实体瘤,特别是大肠、乳腺和肺发生的肿瘤是人体最常见的肿瘤。然而,从这些肿瘤中获得可分析的染色体却存在着许多困难,其中一个问题就是不能刺激细胞分裂。应用促有丝分裂剂刺激细胞分裂是许多细胞遗传分析的一个必要步骤。不进行刺激时,分裂指数相当低,分析工作常常难以进行。许多实体瘤尚未建立应用促有丝分裂剂刺激增殖的技术。本文报道了可以普遍应用于许多类型肿瘤细胞,并且具有费用低、染色体质量高和易应用等特征的一种促有丝分裂剂-PDBu。大肠癌组织标本(0.5g)在术后4小时     

邮寄皮肤组织标本的免疫抗原修复

我院从 1993年 8月起至今采用自制的小组织标本固定邮寄盒接收外院肾穿、胃镜、皮肤等大量邮寄标本 ,其中皮肤标本 70余例 ,要求通过免疫组化检测系统性红斑狼疮带、疱疹样天疱疮等免疫复合沉积物 ,本试验旨在探讨远程皮肤病理免疫组化染色前处理的最佳方法。1　材料与方法1.1　标本来源　随机抽选 10个蜡块作试验。蜡块为不同季节、不同时期、不同地区 (江西、浙江、湖北、福建 4省 )邮寄的皮肤标本。1.2　小组织 (皮肤 )固定邮寄盒　 邮寄盒用一块设有凹陷的塑料薄板 (凹陷内装有特制的皮肤组织固定剂 ) ,表面用不干胶塑料薄膜粘贴封盖而…     

浅议中间剂的作用与选择——氯仿与二甲苯的比较

一、中间剂的作用制作组织蜡块包括固定、脱水、中间剂、浸蜡、包埋等环节。组织充分脱水后在浸蜡之前需要经过中间剂的处理,因为常规用的脱水剂——乙醇、甲醇等与石蜡不相溶,需用与两者相溶的中间剂起搭桥作用,因此,中间剂的应用是不可缺少的,同时应选择效果最佳的中间剂。二、中间剂的比较病理组织检查常规以二甲苯(Xylene)作为中间剂,现日本以氯仿(Chloroform     

防腐固定对血管径影响的实验观察

大体解剖文献记载血管形态的观测,大多是在已经固定的尸体标本进行。各种固定剂虽然防止了组织腐败,同时亦出现不同程度收缩。Bancroft、Kiernan、芮菊生、熊绪畲等在组织学技术中,都提到一些常用的固定剂对组织收缩的影响,但缺乏量的概念。而大体解剖常用的固定液对血管形态的影响,至今未见文献报道。近年来,巨微血管解剖学迅速发展,对血管径测量的报道多细达1毫米以下。在防腐固定后标本测得的血管径与其在生命状态下的差别,是解剖学和显微外科学迫切期望了解的。本文通过动物实验,比较了机体生前与死后固定对血管形态的影响变化,提供了由固定后标本测得的血管数据来推导活体管径大小的可能,使巨微血管解剖学的研究资料     

锁骨骨折三种内固定方法的生物力学性能比较

目的　探讨新研制的防滑锁骨钉在锁骨骨折内固定中的生物力学性能 ,并与传统的 4孔钢板和克氏针内固定方法进行比较 ,为临床应用提供科学依据。方法　采集 9具成人新鲜锁骨标本 ,行中外 1/ 3处锁骨骨折模型 ,分别采用防滑锁骨钉 (PSCN) ,4孔钢板 (4SP)和克氏针 (KP)三种内固定方法固定 ,运用实验应力分析手段测试各组试件的生物力学特性 ,并进行比较。另设正常锁骨标本组以作对照。结果　 (1)三点弯曲强度测量 ,4SP和PSCN组均接近正常标本 (P >0 0 5 ) ,而KP组与正常标本组相差显著 (P <0 0 5 ) ;弯曲刚度测量结果具有相似的规律性。(2 )扭转强度和刚度测量表明 ,4SP和PSCN与正常标本无显著性差异 ,而比KP固定来得优越 (P <0 0 5 )。 (3)拉伸试验表明 ,4SP和PSCN内固定抗拉强度和刚度优于KP内固定 (P <0 0 5 ) ;抗拔力PSCN明显优于KP内固定 (P <0 0 5 )。 (4 )PSCN内固定应力遮挡小 ,明显优于 4SP(P <0 0 5 )。结论　PSCN在强度和刚度上均明显优于KP内固定 ,与 4SP相接近 ,且应力遮挡小 ,是当前锁骨内固定的理想固定方法     

生物塑化标本组织切片的制作和染色方法

生物塑化技术是由德国解剖学家哈根斯教授于1978年发明的一种技术,主要用于生物类标本的塑化保存。目前．生物塑化技术已广泛应用于生物学和解剖学教学领域。尽管生物塑化技术对标本的保存效果得到广泛认可,但是对塑化标本保存效果的评价多见于标本的大体水平,而对塑化后标本的组织结构和细胞形态研究较少。因此,探究生物塑化技术对组织结构的影响具有一定的实际意义和科学价值。     

目前生物医用材料领域的研究动态

<正>1提高生物医用材料的组织相容性途径不外乎有两种,一是使用天然高分子材料,例如利用基因工程技术将产生蛛丝的基因导入酵母细菌并使其表达;二是在材料表面固定有生理功能的物质,如多肽、酶     

超薄切片技术的质量控制

超薄切片技术作为病理学诊断和组织学研究的一个重要技术 ,已广泛应用于临床病理诊断、教学和科研工作。一位出色的电镜技术工作者不仅要熟悉透射电镜样品制备的原理 ,还要熟练掌握该技术 ,能制备出一张优质的超薄切片 ,以便日常工作的顺利开展。近年来电镜用于活检和疑难病诊断也逐渐增加 ,由于电镜样品制备费用比较昂贵 ,因此有必要对超薄切片的质量进一步要求。1　标本的取材和固定如何获得 1张超微结构保存完整的超薄切片 ,固定是极为重要的过程。为了使离体组织如同活组织一样 ,这就要求生命的全过程 (包括酶促反应 )立刻停止 ,细胞及…     

生物传感器

生物传感器(biosensors)是生物化学和微电子学协同性的组合,它简化了微观和宏观的生化和化学分析。酶代谢、分子识别、全细胞代谢都能应用于生物传感器。在应用上生物传感器可分为四大类型:手握装置、实验室设备、流通式传感器(用于容积样品)和植入式传感器(用于全身监测)。生物传感器将广泛用于临床分析、卫生保健、兽医与农业、工业过程监测、环境和污染控制。原始的生物传感器是“生物催化膜电极(bioca-talytic membrane electrodes)”或“生物电化学传感器(bioelectrochemical sensor)”。在生物化学术语中这些技术是从固相酶与pH电极、安培计和氧     

微波固定较常规固定之优势与不足

从20个世纪70年代创立微波固定技术到今天,微波技术已渗透于形态学研究的各个方面并呈现出巨大的优势。本实验对标本的微波固定与常规固定效果的比较显示,前者的固定效果优于后者,不但固定时间大大缩短,而且节省了标本石蜡块制作的周期。比较结果提示微波固定标本的脱水应从低浓度脱水剂开始,可弥补脱水过程所产生的标本收缩之缺憾。1材料和方法1.1仪器选用家用型微波炉,频率2.45MHz,最大输出功率1200W(10个功率档),液晶数字显示控制面板。1.2材料取Wistar大鼠脑、心、肺、肝、肾、小肠等10种组织器官为实验材料,标本厚度3~5mm。固定剂选…     

口腔光动力疗法研究进展

光动力学疗法(PDT)是20世纪70年代末形成的治疗新技术,近年来已从实验研究进入到临床应用阶段,其机理是建立在某些特定类型的细胞或生物体能选择性吸收光敏型的药物,在接受特定波长光照射后产生光敏效应的一种治疗方法.目前主要应用于体表和空腔脏器表面的浅表肿瘤的非手术治疗,由于发现光敏剂对肿瘤以外的多种病变组织和病原微生物具有选择件聚集以及新型光敏剂的开发,使光动力疗法在现代临床中应用领域不断扩大.从光动力治疗的效应机制、光动力治疗的光源与光敏剂以及在口腔医学领域中对头颈部肿瘤、黏膜病、口腔致病微生物感染的治疗等方面的应用研究进展进行了综述.     

口腔光动力疗法研究进展

光动力学疗法(PDT)是20世纪70年代末形成的治疗新技术,近年来已从实验研究进入到临床应用阶段,其机理是建立在某些特定类型的细胞或生物体能选择性吸收光敏型的药物,在接受特定波长光照射后产生光敏效应的一种治疗方法.目前主要应用于体表和空腔脏器表面的浅表肿瘤的非手术治疗,由于发现光敏剂对肿瘤以外的多种病变组织和病原微生物具有选择件聚集以及新型光敏剂的开发,使光动力疗法在现代临床中应用领域不断扩大.从光动力治疗的效应机制、光动力治疗的光源与光敏剂以及在口腔医学领域中对头颈部肿瘤、黏膜病、口腔致病微生物感染的治疗等方面的应用研究进展进行了综述.     

组织芯片技术在检测正常组织和肿瘤组织抗原表达中的应用

组织芯片 (ｔｉｓｓｕｅｃｈｉｐ) [1] 技术具有高产出 (ｈｉｇｈ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ) ,实验误差小和省时、省力、节约经费的优点 ,并能应用于科研、教学、生物试剂测试、质量监控及标准化等领域[2 ,3 ] 。我们采用了组织芯片这项技术并选用了 5种常用抗体 (ＡＥ1/ 3、波形蛋白、ＣＤ45、结蛋白和Ｓ 10 0蛋白 )对 5 4例正常组织及 6 0例肿瘤标本进行了抗原表达的检测 ,以了解该技术在这方面的使用价值。一、材料和方法5 4例正常组织和 6 0例肿瘤标本选自内蒙古中蒙医院病理科和内蒙古乌兰察布盟医院病理科外检标本 (1988～ 2 0 0 0年 )。…     

口腔光动力疗法研究进展

光动力学疗法(PDT)是20世纪70年代末形成的治疗新技术,近年来已从实验研究进入到临床应用阶段,其机理是建立在某些特定类型的细胞或生物体能选择性吸收光敏型的药物,在接受特定波长光照射后产生光敏效应的一种治疗方法.目前主要应用于体表和空腔脏器表面的浅表肿瘤的非手术治疗,由于发现光敏剂对肿瘤以外的多种病变组织和病原微生物具有选择件聚集以及新型光敏剂的开发,使光动力疗法在现代临床中应用领域不断扩大.从光动力治疗的效应机制、光动力治疗的光源与光敏剂以及在口腔医学领域中对头颈部肿瘤、黏膜病、口腔致病微生物感染的治疗等方面的应用研究进展进行了综述.