替普瑞酮对大鼠慢性高眼压视网膜HSP70表达的影响

目的:研究慢性高眼压大鼠视网膜HSP70表达的变化及替普瑞酮的影响。方法:Wistar大鼠70只随机分为3组:空白对照组10只;慢性高眼压模型组30只;慢性高眼压模型+GGA组30只。采用烧灼巩膜浅层静脉的方法制备大鼠慢性高眼压模型。模型成功后给予替普瑞酮800mg/(kg.d)每日灌胃。应用免疫组织化学方法观察应用及未应用替普瑞酮的慢性高眼压大鼠视网膜不同时点的差异及HSP70表达的变化。结果:平均眼压高于正常眼压40%的手术眼为造模成功。与正常对照组相比,慢性高眼压大鼠应用与未应用替普瑞酮者,视网膜均随着高眼压时间的延长逐渐出现形态学变化,于高眼压的21d和28d视网膜变薄,节细胞数量减少;在此过程中,HSP70表达增多。慢性高眼压大鼠视网膜应用替普瑞酮者与未应用提普瑞酮者相比,其形态学变化较小,而HSP70表达则明显增多,两者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:替普瑞酮通过上调HSP70表达发挥对慢性高眼压视网膜的保护作用。     

替普瑞酮对大鼠慢性高眼压视网膜HSP70表达的影响

目的：研究慢性高眼压大鼠视网膜HSP70表达的变化及替普瑞酮的影响。方法：Wistar大鼠70只随机分为3组：空白对照组10只;慢性高眼压模型组30只;慢性高眼压模型＋GGA组30只。采用烧灼巩膜浅层静脉的方法制备大鼠慢性高眼压模型。模型成功后给予替普瑞酮800mg／（kg·d）每目灌胃。应用免疫组织化学方法观察应用及未应用替普瑞酮的慢性高眼压大鼠视网膜不同时点的差异及HSP70表达的变化。结果：平均眼压高于正常眼压40％的手术眼为造模成功。与正常对照组相比,慢性高眼压大鼠应用与未应用替普瑞酮者,视网膜均随着高眼压时间的延长逐渐出现形态学变化,于高眼压的21d和28d视网膜变薄,节细胞数量减少;在此过程中,HSP70表达增多。慢性高眼压大鼠视网膜应用替普瑞酮者与未应用提普瑞酮者相比,其形态学变化较小,而HSPT0表达则明显增多,两者差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：替普瑞酮通过上调HSP70表达发挥对慢性高眼压视网膜的保护作用。     

氨基胍对大鼠慢性高眼压视网膜PI-3K表达的影响

目的研究慢性高眼压过程中大鼠视网膜磷脂酰肌醇-3-激酶（PI-3K）表达的变化及应用氨基胍对其表达的影响，探讨氨基胍对慢性高眼压视网膜的保护作用。方法应用免疫组织化学、RT-PCR和Westernblot的方法，观察应用及未应用氨基胍的慢性高眼压大鼠视网膜在不同时点的差异及PI-3K表达的变化。结果与正常对照组相比，慢性高眼压大鼠应用与未应用氨基胍者，视网膜均随着高眼压时间的延长逐渐出现形态学变化，于高眼压的第21d视网膜变薄，节细胞数量减少；在此过程中，PI-3K表达增多。慢性高眼压大鼠的视网膜应用氨基胍者与未应用氨基胍者相比，其形态学变化较小，而PI-3K表达则明显增多，两者差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论PI-3K是慢性高眼压视网膜损伤过程中的保护性因素，氨基胍通过上调其表达发挥对视网膜的保护作用。     

晶状体囊膜HSP 70的表达与年龄相关性白内障

目的 探讨年龄相关性白内障的发生与晶状体前囊膜中热休克蛋白70（HSP70）表达之间的相关性。方法 选取年龄为43—51岁的成年尸眼透明晶状体6例，取前囊膜；选择年龄相关性白内障患者6例，年龄为40～50岁，白内障手术时撕取前囊膜；行SDS—PAGE、Western—blot法检测样品中HSP70蛋白，并进行分析比较。结果 白内障患者晶状体囊膜中HSP70含量较正常人明显减少。结论 HSP70表达量的下降与年龄相关性白内障的发生有关。     

AG对大鼠慢性高眼压视网膜Caspase-9表达的影响

目的:研究慢性高眼压过程中大鼠视网膜Caspase-9表达的变化及应用AG对其表达的影响,探讨AG可能存在的对慢性高眼压视网膜的保护作用。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western blot的方法观察应用AG及未应用AG的慢性高眼压大鼠视网膜在慢性高眼压后不同时间点的形态学变化及Caspase-9表达的变化。结果:与正常对照组相比,随着高眼压时间的延长视网膜逐渐出现可察觉的形态学变化,于高眼压的第21d视网膜变薄,节细胞数量减少;在此过程中,Caspase-9表达增多,与形态学变化相一致。而应用AG者其形态学变化和Caspase-9表达变化较小。结论:凋亡相关基因Caspase-9在慢性高眼压视网膜损伤过程中发挥了作用,AG通过下调其表达对视网膜起保护作用。     

Expression of caspase-9 affected by AG on retina of rats with chronic IOP elevation

AIM: To study caspase-9 expression on rat retina in the process of chronic elevation of IOP and the changes with the application of amino guanidine (AG), thus to investigate the potential protective function of AG to rat retina with chronic elevation of IOP. METHODS: Immunohistochemistry, RT-PCR and Western blot were used to observe retinal morphology and the expression of caspase-9 at different time points of rat with chronic IOP elevation, both affected and not affected by the application of AG. ·RESULTS: Compared with control group, as time passed retina of experimental group gradually had detectable morphological changes. On 21^st day of chronic IOP elevation, retinas became thinner and the quantity of retinal ganglion cells (RGCs) decreased; caspase-9 expression increased, consistent with the morphological changes. The group using AG presented relatively smaller morphology changes and less expression of caspase-9. CONCLUSION: Apoptosis-related gene caspase-9 plays a part in the process of chronic IOP elevation; AG protects retina by down-regulating expression of caspase-9.     

高眼压下大鼠视网膜HSP70表达与显微结构变化

目的 研究高眼压下大鼠视网膜热休克蛋白70(HSP70)的表达规律及其高眼压下视网膜电子显微镜下结构变化。方法 本实验分为2部分,第1部分将大鼠右眼制成高眼压模型,维持1h 110mmHg(1mmHg=0.133kPa)高眼压,按观察时间分为4组,每组6只大鼠,分别在4、18、24、48h后摘除眼球,同时每组均有4只大鼠作为对照只灌注,不加压,运用免疫组织化学方法,研究高眼压下大鼠视网膜HSP70的表达规律,第2部分分为免疫组和电镜组,其中免疫组中按高眼压维持时间不同,将动物分为3组,每组6只大鼠,高眼压维持时间分别为:0.5、1.5、2.5h,高眼压去除后,使其生存18h后,摘除眼球,每组也有4只大鼠只灌注不加压。电镜组中动物分组、高压眼作用时间、动物生存时间、对照组设计均与免疫组相一致,其中动物分组均随机分组。结果 高眼压后18h视网膜各层HSP70的表达有显著增高(P<0.01),到24h均有下降,但仍接近18h(细胞内层节段除外)。在本实验的高眼压范围内,电子显微结构变化提示;视网膜视细胞层对高眼压有较强的耐受性,HSP70在此范围高眼压下,视网膜各层内的表达随高眼压作用时间的延长无显著性差异(P>0.05)。结论 高眼压下大鼠视网膜各层HSP70的表达显著增高与视细胞的显微结构变化相一致。     

Expression of Nogo-A on the retina in rat model with chronic ocular hypertension

AIM: To study the expressive variation of Nogo-A on rat retina in the process of chronic ocular hypertension. METHODS: Thirty-six healthy adult male Wistars were randomly divided into control group (6 rats) and chronic hypertension group (30 rats). Chronic hypertension was created by cauterizing the superficial scleral veins. Immunohistochemistry technique was used to evaluate the expressive varieties of Nogo-A at different time points during the course of chronic ocular hypertension. RESULTS: The success of the model was indicated by over 40% of increase in the IOP as compared with normal rats. Compared with control group, as time passed chronic hypertension group gradually had detectable morphology changes in the retina. At the 21st day of chronic ocular hypertension, retinas became thinner and the quantity of retinal ganglion cells (RGC) decreased (P<0.05). Assoicated with the morphological changes, the expression of Nogo-A was strongly increased (P<0.05). CONCLUSION: Myelin associated protein Nogo-A plays a part in the process of chronic ocular hypertension.     

水通道蛋白4在慢性高眼压模型大鼠视网膜的表达

目的:研究慢性高眼压大鼠视网膜水通道蛋白4(AQP4)表达的变化与视网膜损伤的关系。方法:通过电凝巩膜表层静脉的方法制成慢性高眼压模型。用免疫组化和RT-PCR的方法观察AQP4在高眼压过程中不同时点的表达变化,同时观察在慢性高眼压过程中大鼠视网膜的形态学变化。结果:AQP4在正常和高眼压大鼠的视网膜皆有表达,表达的部位都位于节细胞层、内丛状层、内核层、外丛状层及外核层。在高眼压大鼠的视网膜上AQP4的表达随着高眼压时间的延长而增多。HE染色的组织切片上发现,与正常对照组相比高眼压大鼠视网膜的厚度有显著变化。结论:眼压升高后AQP4表达上调,与视网膜的厚度变化密切相关。     

大鼠慢性高眼压视网膜Nogo-A的表达

目的:研究慢性高眼压大鼠视网膜髓鞘相关抑制蛋白No-go-A表达的变化。方法:成年雄性Wistar大鼠36只随机分为正常对照组6只和慢性高眼压组30只,应用免疫组织化学方法观察慢性高眼压大鼠视网膜不同时点Nogo-A表达的变化。结果:与正常对照组相比,慢性高眼压21d大鼠视网膜变薄,节细胞数量减少(P<0.05);Nogo-A表达增多,与形态学变化相一致(P<0.05)。结论:髓鞘相关抑制蛋白Nogo-A在慢性高眼压大鼠视网膜损伤过程中发挥了重要作用。     

Quercetin对晶状体上皮细胞HSP70、HSP27表达的调节作用

目的研究大鼠眼钝挫伤后晶状体上皮细胞(LECs)热休克蛋白(HSP)70、HSP27的表达,并给予喂饲Quercetin(HSP阻滞剂),观察Quercetin对LECsHSP70及HSP27表达的调节。方法SD大鼠48只,随机分成拍打组和Quercetin组,每组各24只24眼,右眼为实验眼。拍打组:20g铁球20cm高度拍打眼球100次。Quercetin组:给大鼠喂饲Quercetin(100mg/kg),2-3h后再拍打眼球。RT-PCR检测LECsHSP70、HSP27基因表达。结果钝挫性眼外伤可造成LECsHSP70基因表达的增强,拍打眼球后1hHSP70表达开始升高,3h后达到高峰,24h后降至正常。Quercetin组HSP70基因表达随时间亦出现相应的提高,但与拍打组相比其峰值下降,差异有非常显著性意义。两组HSP27基因表达均无明显改变。结论钝挫性眼外伤中LECsHSP70表达的增强提示HSP70可能在钝挫性外伤性白内障形成过程中对晶状体变性蛋白起保护作用,预先喂饲Quercetin可抑制LECsHSP70基因的表达,其作用机制可能发生于HSP转录水平。     

热休克蛋白70在TTT小鼠视网膜中的表达

目的　研究热休克蛋白 70 (heatshockprotein 70 ,HSP 70 )在经瞳孔温热疗法(transpupillarythermotherapy ,TTT)小鼠视网膜中的表达。方法　首先对10只C57BL/ 6J小鼠进行TTT照射,激光功率5 0mW ,光斑直径1.2mm ,曝光4 0s,然后分别于激光后2h ,1d、3d ,1周、2周取材,采用免疫组化方法检测视网膜内核层HSP 70的表达情况,计算其阳性率及强阳性率。结果　HSP 70蛋白存在于正常C57BL/ 6J小鼠除视杆、锥细胞外节的视网膜各层细胞,TTT后小鼠视网膜内核层细胞HSP 70表达有一动态变化,2h时阳性表达细胞(阳性率和强阳性率分别为6 6 .85 %±4 .83% ,4 .91%±3.19% )即较正常视网膜明显增加,1d时达到高峰(78.12 %±8.0 9% ,8.15 %±3.4 5 % ) ,然后逐步下降,2周时(3.74 %±1.73% ,0 .5 5 %±0 .2 7% )已基本接近正常水平(2 .91%±0 73% ,0 )。结论　TTT引起的视网膜温度轻微升高可以诱导小鼠视网膜内核层细胞HSP 70的过度表达,从而提高其耐热能力,发挥内源性保护作用,减小TTT靶组织邻近部位的损伤     

HSP70在STZ-糖性白内障发病机制中的研究

目的:研究HSP70在链脲佐菌素—糖性白内障发生发展中的作用。方法:将66只SD大鼠随机分为2组,正常对照组与白内障组。用链脲佐菌素(STZ)诱发糖性白内障,每周观察晶状体的变化,在实验开始后2,4,8周末,分别摘取眼球,采用免疫组化技术检测热休克蛋白-70(HSP70)在晶状体上皮细胞(LECs)中的表达。结果:对照组晶状体一直保持透明,白内障组晶状体在2周末出现空泡,8周末全部混浊。HSP70在对照组中未见表达,在白内障组中表达明显,并随着白内障的发展而表达增加。结论:HSP70可能通过调节晶状体上皮细胞的生长在糖性白内障的发生、发展中起重要作用。     

手机微波辐射对体外培养大鼠晶状体HSP70表达的影响

目的:探讨手机辐射对体外培养的大鼠晶状体HSP70表达的影响。方法:采用ELISA和免疫组织化学法检测手机辐射后在MEM培养液里培养28d晶状体中HSP70的表达水平,裂隙灯下观察晶状体的混浊程度。结果:手机辐射组HSP70的表达量均显著高于对照组(P<0.05),并且HSP70的表达量随着手机辐射时间的增加而增加。结论:手机微波辐射可增加体外大鼠晶状体中HSP70的表达,可能导致白内障的发生。     

热休克蛋白70的主要功能及与白内障发病的相关研究

热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)在正常细胞中水平较低,而在应激后表达显著增高,是HSP中重要的成员。HSP的功能涉及细胞的结构维持、更新、修复、免疫等,但其基本功能为帮助蛋白质的正确折叠、移位、维持和降解。我们就热休克蛋白70的主要功能及其与白内障发病的相关研究进展作一简要概述。     

儿茶素对糖尿病性白内障大鼠晶状体热休克蛋白27表达的影响

目的　检测糖尿病性白内障大鼠晶状体中热休克蛋白（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ２７, ＨＳＰ２７）的表达,探讨儿茶素在糖尿病性白内障大鼠病程发生发展过程中的作用。方法　取６０只雄性ＳＤ大鼠,随机分为３组,每组２０只。正常组大鼠腹腔注射枸橼酸缓冲液;糖尿病对照组、儿茶素治疗组大鼠先行造模,大鼠腹腔注射链脲佐菌素溶液（６５ｍｇ·ｋｇ－１体质量）诱发糖尿病性白内障,造模成功后,治疗组大鼠给予儿茶素２００ｍｇ·ｋｇ－１（用蒸馏水配制）灌胃。正常组及对照组大鼠给予等量蒸馏水灌胃。于造模成功后２周、４周、８周３个时间点用免疫组织化学法检测ＨＳＰ２７表达,计算平均ＩＨＳ评分值。结果正常组晶状体中ＨＳＰ２７阳性上皮细胞及纤维细胞较少,染色较浅,在造模成功后２周、４周、８周无明显变化。对照组造模成功后２周时晶状体ＨＳＰ２７阳性细胞增多,染色加深,４周时表现最明显,８周时下降,但仍然高于正常组。治疗组在造模成功后２周、４周、８周ＨＳＰ２７阳性细胞较对照组明显增多、染色加深。正常组ＨＳＰ２７阳性上皮细胞ＩＨＳ评分值在实验各时间点无明显变化。对照组ＨＳＰ２７阳性上皮细胞ＩＨＳ评分值在造模成功后２周、４周及８周时均高于正常组,差异均有统计学意义（Ｆ２周＝９．２９４,Ｐ＜０．０５;Ｆ４周＝３８．４００及Ｆ８周＝１６．０００,均为Ｐ＜０．０１）。治疗组在相应时间点ＨＳＰ２７阳性上皮细胞ＩＨＳ评分值在相应时间点高于对照组,在２周及４周时差异均有统计学意义（Ｆ２周＝９．２９４,Ｐ＜０．０５,Ｆ４周＝３８．４００,Ｐ＜０．０１）。结论　大鼠糖尿病性白内障晶状体组织中ＨＳＰ２７的表达增强,全身应用儿茶素可提高晶状体组织中ＨＳＰ２７表达。     

热休克蛋白27和热休克蛋白70与视网膜视神经疾病关系的研究进展

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是细胞受到不同刺激时产生的一组高度表达的蛋白。这种蛋白在结构上高度保守,在功能上常被认为具有保护细胞的作用。近年来,有研究表明HSP27和HSP70具有保护视网膜视神经细胞的作用,而其相关抗体具有促进这些细胞凋亡的作用。在细胞培养和动物实验中,我们观察到阻断HSP27抗体和HSP70抗体的表达有利于保护视网膜视神经细胞。本文就HSP27和HSP70与视网膜视神经疾病的关系作一综述。     

成年及幼年Long-evans大鼠视皮层 HSP8 基因的表达差异

目的:观察热休克蛋白8(heat shock protein 8,HSP8)基因在幼年和成年Long-evans大鼠视皮层中的表达水平,探讨其在视觉可塑性关键期中的作用。方法:采用半定量RT-PCR方法,分析处于视觉可塑性关键期内的幼年Long-evans大鼠和处于视觉可塑性关键期后的成年Long-evans大鼠视皮层中HSP8基因的表达水平。结果:幼年大鼠和成年大鼠视皮层间HSP8mRNA表达量有显著性差异,成年大鼠视皮层中HSP8/G3PDH为0.68±0.03,幼年大鼠视皮层中HSP8/G3PDH为0.14±0.06,HSP8mRNA在成年大鼠视皮层中表达水平显著高于幼年大鼠(P<0.05)。结论:HSP8基因在视觉可塑性关键期后的成年大鼠视皮层中呈高水平表达,是视觉可塑性关键期终止相关的候选基因。     

Neu-P11对急性高眼压大鼠眼压及视网膜组织胶质原纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨Neu-P11对急性高眼压大鼠眼压及视网膜胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acid protein,GFAP)表达的影响.方法 24只雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、高眼压组、褪黑素治疗组和Neu-P11治疗组,每组6只,后3组采用Trendelenburg卧位法建立高眼压模型,各组通过眼角膜滴注方法给药.正常对照组和高眼压组滴注10 μL生理盐水,褪黑素治疗组和Neu-P11治疗组分别滴注10 μL 100 μmol·L-1褪黑素和NeuP11药物治疗,给药后休息2h,再次置于卧位45 min后每小时测1次眼压,共6次,观察1周,重复实验1次.实验末注射过量戊巴比妥钠处死大鼠,留取各组大鼠眼球常规组织学切片观察SD大鼠视网膜形态学变化;免疫组织化学染色观察视网膜GFAP的表达.结果 正常对照组眼压为(13.61±0.55) mmHg(1 kPa=7.5 mmHg),高眼压组眼压为(41.26±1.73)mmHg(P ＜0.01),即急性高眼压大鼠模型建立成功.与正常对照组相比,高眼压组大鼠视网膜水肿增厚,层次不清晰,GFAP表达呈强阳性.而褪黑素治疗组和Neu-P11治疗组大鼠眼压较高眼压组显著降低,GFAP蛋白阳性表达明显减弱.结论 Neu-P11能够降低急性高眼压大鼠眼压,抑制视网膜组织胶质细胞的激活,降低GFAP表达,保护视网膜.     

金丝桃素对兔慢性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响

目的研究蛋白激酶C（PKC）特异性抑制剂金丝桃素（hypericin）对兔慢性高眼压视网膜谷氨酸含量的影响。方法取29只成年家兔，后房内注射α-糜蛋白酶，建立兔慢性高眼压模型，以眼压≥30mmHg为造模成功。造模成功兔眼10d后玻璃体内分别注入0．1ml金丝桃素或生理盐水。另用3只正常兔作空白对照。用高效液相色谱法测定不同时间点的视网膜谷氨酸含量。结果正常免视网膜谷氨酸含量为（1．71×10^-5±0．23×10^-5）mmol／g，慢性高眼压免视网膜谷氨酸含量比正常免显著升高（P〈0．05）。慢性高眼压兔金丝桃素处理4d后视网膜谷氨酸含量为（8．53×10^-5±1．06×10^-5）mmol／g．同期生理盐水处理后为（11．31×10^-5±0．10×10^-5）mmol／g，二者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论慢性高眼压兔视网膜谷氨酸含量显著升高，可能与视网膜神经节细胞的损伤有关。金丝桃素玻璃体腔注射能显著降低免慢性高眼压模型视网膜谷氨酸含量。