用呼吸道合胞病毒亚单位疫苗粘膜免疫接种小鼠

作者评价了用纯化的呼吸道合胞病毒（RSV）融合(F）蛋白和霍乱毒素（CT）佐剂疫苗粘膜免疫接种小鼠的保护效力。 取4周龄小鼠进行实验。用于鼻内接种的10μl疫苗中含CT2.5μg、F蛋白3μg;肌肉接种的0.1ml明矾疫苗中含F蛋白3μg,用PBS作安慰剂。活病毒疫苗为2.5μl中含2×10~6空斑形成单位（PFU）病毒。在0和4周各免疫1次,8周时用RSV Long株5×10~6PFU攻击。病毒攻击后4天杀死小鼠,取血清,用酶免疫试验测定抗F蛋白和CT的IgG抗体,并作微量中和试验。无菌取鼻洗液,一部分立刻用HEp-2细胞滴定病毒滴度,一部分测定IgA。 动物共分9组,每组6只。实验结果表明,鼻内接种活RSV组血清中有高滴度抗F特异IgG具有强的中和力,鼻洗液中有IgA,病毒攻击后,所有小鼠均未检出病毒。鼻内和肌肉同时接种PBS组,无抗体产生,不能阻止病毒复制,鼻内病毒滴度为log_210.1±0.2PFU。鼻内或肌肉接种F蛋白组,鼻洗液中均无IgA,不能阻止病毒复制,但后者有血清抗体。鼻内和肌肉同时接种F蛋白组亦有高滴度血清抗体但无鼻洗液IgA,病毒复制力比PBS组低。鼻内单独接种CT组,虽无抗F抗体,但能轻度抑制病毒复制,鼻洗液中病毒滴度为log_26.8±2.2 PFU,每只小鼠皆查到病毒说明与免疫接种无关。鼻内接种F+CT组,血清中有高滴度F和CT特异性IgG并     

Balb/c小鼠接种呼吸道合胞病毒融合蛋白后的肺免疫应答

为了确定局部浸润的肺单个核细胞（PMC）在清除下呼吸道病毒中的作用,作者研究了与氢氧化铝佐剂混合的纯化呼吸道合胞病毒（RSV）融合(F）蛋白（5μg）接种Balb/c小鼠的效果。 作者在0及3周对小鼠肌肉接种F蛋白以诱导保护性免疫力,同时与实验感染RSV（1～2×10~6 pfu）的小鼠进行比较,末次免疫或感染后3或4周用1×10~7pfu病毒作鼻内攻击,测定攻击后4和8天每克肺组织的病毒效价,并检测初次免疫后3和6周混合血清样本的中和抗体效价。 结果表明,F蛋白诱生的免疫应答与实验感染相似,能抑制攻击后4～8天的病毒复制,而未免疫对照小鼠在攻击后8天才有抑制作用。接种组和实验感染组于6周后查到抗RSV中和抗体。作者用~(51)Cr释放试验检测了初次接种后3周及RSV攻击后5和7天肺组织中浸润PMC的杀细胞作用,发现有抗原依     

联合接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位对流感病毒感染的防御作用

霍乱毒素B亚单位(CTB)是一种无毒性的霍乱毒素成分.CTB不仅是有效的肠道免疫原,也是一种肠粘膜佐剂.鼻内联合接种单剂流感病毒与CTB可诱导鼻分泌物中高水平IgA和血清中血凝抑制(HI)抗体.本文作者先给Balb/c小鼠鼻内联合接种甲型流感病毒HA疫苗和CTB,4周后再单独接种甲型流感病毒HA疫苗,观察接种后的免疫应答.小鼠接种两剂较高剂量(1.5μg)的A/PR/8/34(PR-8,H1N1)HA疫苗(第1剂与CTB联合接种)后,鼻洗液中的抗病毒IgA抗体和血清中的HI抗体应答都比第1次接种     

新型A族链球菌多表位M蛋白疫苗经注射和粘膜免疫小鼠后的免疫原性

A族链球菌 ( GAS) M蛋白是 GAS感染时的重要免疫原和毒力因子 ,是主要的 GAS候选疫苗。本文研究了 M蛋白多表位构建物——杂聚物鼻腔及口服免疫小鼠后诱导的特异性粘膜和全身抗体应答 ,并与注射接种作了比较。　　将 4～ 6周龄的 B1 0 .BR雌鼠分成 3组 ,第 1组 1 0只小鼠于第 1天鼻腔给予 2 0 μl含30μg杂聚物和 1 0μg霍乱毒素 B亚单位( CTB)的盐水 (每鼻孔 1 0 μl) ,第 7和 1 4天加强 2次 ,第 2 1天收集唾液和血液。第 2组 1 5只小鼠于第 0、7、2 8、4 2、56和 72天口服 1 0 0～ 2 0 0μl含 30μg杂聚物和 2～ 1 0μg CTB的碳…     

流感HA和霍乱毒素B亚单位联合疫苗经鼻内、口腔或非肠胃途径免疫的比较

本文用不同剂量流感病毒A/PR/8/34HA疫苗和霍乱毒素B亚单位(CTB)联合免疫小鼠,比较了鼻内、非肠胃、腹腔或皮下接种小鼠4周后的抗体应答和用A/PR/8/34小鼠适应株鼻腔攻击3天后的保护作用的观察。作者首先检测呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgA抗体,发现鼻内接种比其它途径产生较高水平的抗病毒IgA抗体。同时,分析呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgG抗体,发现当CTB的剂量为0.1μg时,鼻内与非肠胃接种产生的IgG抗体水平相似;当     

霍乱毒素B亚单位与流感疫苗鼻内合种可增强保护性抗体应答

最近,作者证明霍乱毒素B亚单位(CTB)用作流感病毒血凝素(HA)疫苗鼻内免疫的佐剂颇为理想.疫苗与CTB合用鼻内接种1次就可诱导抵御病毒攻击所需的高水平鼻内和血清抗病毒抗体.作者又探讨了流感病毒A/PR/8/34(PR-8)HA疫苗与CTB诱导保护性抗体水平所要的剂量、抗体应答持续时间、交叉保护性抗体程度以及CTB增加保护性抗体应答的机理.     

纯化的RSV融合糖蛋白(PFP)疫苗的安全性和免疫原性

本文报告了呼吸道合胞病毒(RSV)感染Vero细胞后经亲和层析提取的PFP-1疫苗在RSV血清阳性幼儿中的安全性和免疫原性。同时,作者认为蛋白印迹法(WB)对区别由PFP疫苗和RSV感染诱导的抗体滴度增高是一种有用的手段。 作者选择47名18～36月龄RSV血清阳性的健康幼儿,随机分为三组,比例为3:3:4,第1组接种含50μg蛋白的PFP-1疫苗,第2组接种含20μg蛋白的PFP-1疫苗,第3组接种三价流感病毒灭活(TIV)疫苗作为对照。分别于接种前、接种后4周及RSV流行季节末静脉采血,检测抗RSV抗体。根据注射部位     

用加入脂质体的病毒亚单位疫苗肺部免疫雌鼠后能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA应答

作者将流感病毒血凝素(HA)亚单位疫苗〔由甲型流感病毒NIB26(H3N2)制备〕与脂质体(蛋黄卵磷脂:胆固醇:三十二烷磷酸盐=4:5:1)混合,经下呼吸道免疫雌性小鼠,能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA抗体。 实验分4组进行。每组5只8～10周龄的雌性Balb/c小鼠。第1组于麻醉状态下鼻腔滴注50μl脂质体疫苗(全呼吸道免疫);第2组于未麻醉状态下鼻腔滴入20μl脂质体疫苗(上呼吸道免疫);第3组于麻醉状态下作气管切口,直接将50μl脂质体疫苗注入肺中;第4组肌肉注射或口服50μl疫苗作为对照组。肌肉或鼻腔接种的HA抗原均为5μg,脂质体剂量为1mg。免疫后4周,收集支气管洗液。连续三天以PBS冲洗阴道,收集洗液,合并每只小鼠的冲洗物。最后一次冲洗后,处死小鼠采血。用ELISA检测血清中抗HA特异性     

对RSV F蛋白亚单位疫苗(PFP-1)接种者的第二年监测:评价抗体持久性和可能的疾病加剧作用

作者选择26名18～36月龄感染过呼吸道合胞病毒(RSV)的健康儿童,用双盲法随机分为两组,疫苗组肌注0.5ml(50μg蛋白)疫苗,含90％～95％纯化的RSVF蛋白(PFP-1),对照组注射等量盐水,于接种后不同时间采血,用ELISA检测抗RSV糖蛋白F、Ga和Gb抗体,用空斑中和试验测定中和抗体,分析血清抗体应答与监测期间感染RSV的关系。     

鼠疫组分疫苗免疫后小鼠血清抗体滴度检测与豚鼠效力观察

目的 根据对小鼠血清抗体滴度检测和对豚鼠的保护力观察,评估鼠疫组分疫苗的免疫效果.方法 通过氢氧化铝佐剂吸附15μg F1、15μg rV、15μg F1+15μg rV抗原,分别制成鼠疫单组分疫苗和双组分疫苗.采用2剂(0、2周)皮下接种途径,分别免疫NIH小鼠和豚鼠.以皮上划痕人用鼠疫活疫苗1剂免疫作为对照.免疫6周后,采用间接ELISA法检测小鼠血清IgG滴度,采用t检验作组间比较.与此同时,使用强毒鼠疫杆菌141株对豚鼠进行皮下攻击,以观察疫苗效力.结果 小鼠血清抗体检测结果表明,鼠疫组分疫苗组血清F1抗体或/和rV抗体滴度均高于鼠疫活疫苗组,差异有统计学意义(t=3.041、3.472、15.958、16.264,P值均＜0.01).豚鼠攻击试验结果显示,F1+rV组的存活率可达到90%(9/10),而F1组和rV组分别为50%(5/10)和20%(2/10).结论 鼠疫F1+rV双组分疫苗是有效的抗鼠疫疫苗,而单组分F1或rV鼠疫疫苗不能有效防御鼠疫杆菌攻击.     

吸附于阳离子微粒的HIV-1 gag DNA粘膜免疫延长基因表达并增强局部和全身免疫

迫切需要开发一种安全有效而又廉价的抗人类免疫缺陷病毒 ( HIV)感染的疫苗 ,已经证实开发粘膜投递性疫苗是一良好的选择。作者探讨了用吸附于聚丙交酯 -乙交酯( PLG)微粒表面的 HIV- 1 gag DNA( PLG-DNA)疫苗鼻腔免疫小鼠后所诱导的局部与全身免疫应答的潜力。　　以 1 0 0 μg PL G- DNA或裸 DNA疫苗按2～ 3周间隔 4次鼻腔接种雌性 CB6 F1小鼠 ,于末次免疫后 1周处死小鼠。于处死前 1日采集小鼠血清并以 ELISA检测抗体水平 ;经鼻孔冲洗获得 30 0 μl鼻洗液 ;从每组 5只小鼠收集并混合颈淋巴结和脾脏 ,并将相应器官组织制备…     

药物赋形剂和吸收促进剂作为增强粘膜佐剂活性的免疫刺激物

霍乱毒素B亚单位(CTB)具有免疫佐剂作用,多种药物赋形剂和吸收促进剂[如牛磺胆酸(TC)、甘氨胆酸(GC)、双氢牛磺梭链孢酸(DHTF)、QuilA、甲基纤维素(MC)等]能进一步增强CTB的佐剂活性.将流感血凝素(HA)疫苗加CTB(0.2μg或2μg)、0.2μg CTB及赋形剂、2μg CTB及赋形剂或赋形剂悬于1.0μl的磷酸盐缓冲盐水中,分别接种于6周龄BALB/c雌性小鼠鼻腔内.免疫后4周,采集鼻腔洗液和血清,用ELISA测定抗HA和抗CTB抗体.     

接种编码乙型脑炎病毒E糖蛋白的质粒DNA可提供显著保护作用

作者构建了单独编码乙型脑炎病毒(JEV)包膜 (E)糖蛋白的 DNA质粒 p CMX-ENV,该质粒转染 Vero细胞后可在细胞内表达 E蛋白。作者就其在小鼠肌内 (im)和鼻内 (in)接种对脑内 (ic) JEV攻击的防御作用进行了研究。　　对 4～ 6周龄异系交配瑞士雄性小鼠间隔两周在四头肌 im接种 5 0 μg DNA质粒 ;或间隔 1周共五次 in接种 2 0 μg DNA质粒。末次接种后两周 ,用 JEV P2 0 788株作 ic攻击(1 0 0 pfu/鼠 ) ,每日观察至攻击后 1 5天。　　经 im免疫 p CMXENV的小鼠的存活率为 33%～ 70 % ,总体存活率为 5 1± 1 2 %。经 in免疫 p CMX…     

HIV-1 DNA-单磷酰脂质A佐剂疫苗鼻内与肌肉免疫的比较

最近作者对1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)DNA疫苗接种的研究证明,从细菌脂多糖取得的单磷酰脂质A(MPL)免疫佐剂可有效增强抗原特异性免疫力.免疫对象为BALB/c小鼠,DNA疫苗用pCMV160ⅢB和pCREV(ⅡB/REV)构建,使用稳定乳剂中的MPL(MPL-SE)作佐剂.肌肉免疫方法为:ⅢB/REV各2μg(总量4μg)溶于灭菌PBS,加(或不加)50μl MPL-SE,在小鼠股二头肌注射100μl疫苗.鼻内免疫的DNA剂量相同,仅MPL-SE改为5和20μl.用乙醚麻醉小鼠后,将30μl疫苗渐渐滴入小鼠鼻孔,让小鼠用自然方式吸入.肌肉和皮内途径均只接种1次.用ELISA检测血清IgG、IgG1和IgG2a及粪便中分泌性IgA(SIgA)滴度;用小鼠足垫试验评估迟发型超敏(DTH)反应;用标准~51Cr释放试验测定免     

CpG是呼吸道合胞病毒融合蛋白胃肠外接种的有效佐剂

福马林灭活的呼吸道合胞病毒 ( RSV)疫苗免疫婴儿在感染病毒后会出现病情加剧。目前的观点是 ,疫苗诱导的 Th2型应答是造成疾病恶化的原因。含有未甲基化 Cp G二核苷酸的合成寡脱氧核苷酸 ( Cp G ODN)作为亚单位疫苗抗原佐剂具有很好的前景 ,能诱导 Th1型免疫应答。据此 ,作者用吸附至氢氧化铝佐剂的天然 RSV F蛋白 ( F/Al OH)加Cp G ODN免疫小鼠 ,研究 Cp G ODN作为亚单位疫苗佐剂的效力。　　小鼠肌肉注射 F/Al OH(每剂含 0 .0 3或3.0 μg F蛋白 ,含 1 0 0 μg氢氧化铝佐剂 ) ,或F/Al OH加不同浓度的 Cp G( 0 .8～ 1 0 …     

呼吸道合胞病毒亚单位疫苗在18～36月龄血清阳性儿童中的免疫原性和安全性

作者用主要含呼吸道合胞病毒(RSV)F蛋白的亚单位疫苗或盐水安慰剂随机接种曾感染过RSV的18～36月龄健康儿童,以评价疫苗的免疫原性及安全性。采集接种前及接种后1和6个月的血清用ELISA检测抗RSV F、A亚型G糖蛋白(Ga和B亚型G糖蛋白(Gb)IgG抗体和中和抗体(nAb)。同时取鼻咽分泌物检测粘膜抗     

通过无针头粉末接种技术进行表皮免疫:流感疫苗的免疫原性和对小鼠的保护作用

本文介绍一种新的表皮免疫 ( EI)技术 ,即通过氦动力装置将粉末疫苗有效接种入有活力的表皮的无针头粉末接种技术。　　为了比较 EI与肌肉、皮下、腹腔等途径针头注射的效果 ,作者用福尔马林灭活的Aichi/6 8流感疫苗免疫 BAL B/c小鼠 (每组8只 )。 EI组接种的粉末疫苗是用疫苗和海藻糖制成的直径为 2 0～ 53μm的微粒粉末 ,经氦动力粉末注射装置将含 5μg疫苗 (全病毒蛋白 )的 1 mg粉末接种于小鼠刮毛后的腹部皮肤。ELISA测定表明 ,EI组的血清 Ig G抗体明显高于肌肉和皮下注射组。EI加强免疫使血清抗体滴度升高 1 2 0 0 0 %。对加…     

对杆状病毒表达的RSV融合蛋白190-289氨基酸片段的免疫应答[英]

呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(F)的190-289位氨基酸是主要抗原区,作者利用杆状病毒载体在昆虫细胞中表达了此蛋白片段(bF_(190-289)),并比较了bF1_(190-289)与杆状病毒载体表达的全长融合蛋白(bF)在小鼠中诱导的免疫应答.分别用bF_(190-289)和bF免疫小鼠3次,每次间隔2周.第1次免疫后38天采血,体外检测抗体的中和活性,结果bF_(190-289)和bF均可诱导中和抗体产生,且bF_(190-289)诱生中和抗体呈剂量依赖性.40μg bF_(190.289)和5μg bF诱导的中和抗体滴度分别为2.3和2.9log10.     

粘膜基因表达疫苗——新的呼吸道合胞病毒疫苗策略

科学家尝试用各种方法研制预防呼吸道合胞病毒(RSV)感染的安全有效的疫苗.本文介绍了一种有效的预防性鼻内基因转移策略,即采用含编码RSV抗原的质粒DNA的脱乙酰壳多糖DNA纳球[粘膜基因表达疫苗(MGXV)].在RSV感染小鼠模型中,给予单剂MGXV(25μg/只)能显著降低急性RSV感染后的病毒滴度及病毒抗原负荷.MGXV处理小鼠对乙酰甲基胆碱的呼吸道反应性无显著变化,肺部无明显炎症.这些结果证明MGXV能预防急性RSV感染.     

全面防御流感、单纯疱疹、呼吸道合胞病毒共同感染的联合疫苗

为确定由甲型流感病毒血凝素 ( INF-HA)和核蛋白 ( NP)、1型单纯疱疹病毒糖蛋白 D( HSV1 - g D)、呼吸道合胞病毒糖蛋白 F( RSV- F)基因构成的联合疫苗的保护效果作者将 6～ 8周龄雌性 Balb/c小鼠随机分入试验组和对照组 ,试验组于 0、3、6周接种联合基因疫苗 ,对照组按同样免疫程序接种无抗原质粒 ( p CMVi- tpa)、p CMVi- RSV- F或p CMVi- Flu。全程免疫后采血 ,用 ELISA法检测血清中特异性 Ig G抗体 ;免后 1 4～ 2 1天 ,各组用 Flu、HSV、RSV、肺炎支原体( MP)单独或联合攻击 ,观察小鼠的行为改变和死亡率 ;用免疫组…