输注供者CD8+CD28-调节性T淋巴细胞抑制大鼠肝移植急性排斥反应的作用

目的 评价具有免疫抑制作用的CD8+CD28-调节性T淋巴细胞(Treg)体内输注在抑制大鼠肝移植急性排斥反应中的作用.方法 建立近交系大鼠肝移植自发耐受及急性排斥反应模型.从肝移植自发耐受模型受者脾脏中分离CD8+CD28-Treg,于急性排斥反应模型建立前1 d输注给受者,比较不同的输注组间受者的存活时间和移植肝病理学表现.结果 来自自发耐受模型(LEW大鼠为供者,DA大鼠为受者)的CD8+CD28-Treg输注可以延长急性排斥反应模型(LEW大鼠为供者,BN大鼠为受者)受者的存活时间,由(14.0±2.2)d延长至(24.0±3.0)d(P＜0.01),移植肝病理学显示排斥反应程度减轻.结论 大鼠肝移植自发耐受模型受者体内诱导的CD8+CD28-Treg具有抑制急性排斥反应的作用,该免疫抑制作用具有抗原特异性.     

全身照射预处理供体对异基因大鼠肝移植的作用及对受体内CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

目的 探讨全身照射(TBI)预处理诱导大鼠肝移植术后急性排斥反应的发生机制,及CD4~+ CD25~+调节性T细胞的变化在诱导免疫耐受中的作用.方法 以雄性Lewis、DA大鼠为供、受体,随机分为正常对照组、同种肝移植组、自发免疫耐受组、急性排斥反应组.观察各组受体的生存时间及生存率,检测受体术后外周血中ALT、TB含量、Foxp3~+ CD4~+ CD25~+ 调节性T细胞和T细胞亚群上GITR的表达,检测受体术后第14天移植肝的病理变化和受体脾脏CTL杀伤活性.结果 自发免疫耐受组,术后经历短暂排斥反应最终获得免疫耐受并长期存活.急性排斥反应组,在术后第17～21天死亡,与其他组相比,外周血血清中ALT、TB含量明显升高,而Foxp3~+ CD4~+ CD25~+调节性T细胞比例明显降低.TBI预处理大鼠供肝致受体外周血中CD3~+ CD4~+ T细胞上GITR表达降低,CD3~+CD8~+T细胞上GITR表达增加,提高CTL的杀伤活性.结论 通过TBI清除供体大鼠肝移植物中携带的旁路淋巴细胞,致受体外周血中Foxp3~+ CD4~+ CD25~+调节性T细胞表达降低,而使CD3~+ CD8~+T细胞上GITR表达增加,共同诱导大鼠肝移植术后急性排斥反应发生和耐受障碍.     

CD4+CD25+T细胞联合CD154单抗抑制大鼠肝移植急性排斥反应的研究

目的探讨CD4 CD25 T细胞联合应用CD154单抗在抑制大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法分离Lewis大鼠脾脏CD4 _CD25 T细胞后与DA大鼠脾细胞单向混合淋巴细胞反应行体外激活。用"二袖套法"行DA到Lewis的原位肝移植48例。A组为对照组;B、C组单独术前回输体外激活的CD4 CD25 T细胞或术后腹腔注射抗CD154单抗;D组联合应用CD4 CD25 T细胞和CD154单抗。每组大鼠12对。术后7 d各组处死6只受体,检测移植肝内T细胞亚群和细胞因子水平。余大鼠观察生存情况,死亡大鼠观察移植肝病理变化。结果D组受体生存期(52.00±10.64)d明显长于B、C组(P<0.01);移植肝内CD4 CD25 T细胞比例(16.43±4.28)%明显高于B、C组(P<0.05、P<0.01),而淋巴细胞浸润数量[(3.47±1.21)%×106]和(CD8 T细胞百分比(14.19±3.02)%明显低于B、C组(P<0.05、P<0.01);移植肝内白细胞介素- 2(IL-2)水平(6.44±1.83)ng/L低于B、C组(P<0.05),IL-10(43.72±7.55)ng/L和转化生长因子-β1(TGF-β1)(270.06±46.91)ng/L明显高于B、C组(P<0.05、P<0.01)。结论联合应用CD154单抗能明显增强CD4 CD25 调节性T细胞对大鼠肝移植急性排斥反应的抑制作用。     

近交系大鼠肝移植自发免疫耐受模型的建立及其CD8+CD28-T细胞的作用

目的建立近交系大鼠原位肝移植自发免疫耐受模型,并研究CD8+CD28- T细胞在自发免疫耐受形成中的作用.方法双袖套法建立原位肝移植模型;流式细胞技术检测CD8+CD28- T抑制细胞含量变化;利用补体细胞毒和免疫磁珠方法分离CD8+CD28- T细胞,通过体外混合淋巴细胞反应验证其抑制功能.结果我们成功建立了BN(供体)LEW(受体)原位肝移植自发免疫耐受模型,并发现自发免疫耐受模型大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞含量(23.7%±7.2%)显著高于正常大鼠(5.4%±1.5%)和急性排斥组大鼠(6.0%±1.3%),而且,分离纯化后的自发免疫耐受组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞可以抑制混合淋巴细胞反应的增殖,但急性排斥组大鼠脾脏CD8+CD28- T细胞无抑制功能.结论 BN(供体)LEW(受体)原位肝移植模型为自发免疫耐受;脾脏CD8+CD28- T细胞作为一种T抑制细胞,在自发免疫耐受的形成过程中具有重要作用.     

脓毒症大鼠调节性T细胞凋亡对效应T细胞增殖和分泌功能的影响及血必净注射液的干预作用

目的 探讨血必净注射液对脓毒症大鼠CD+4CD+25调节性T细胞(Treg)凋亡的影响及与效应T细胞(Teff)增殖及分泌功能的关系.方法 Wister大鼠随机分为对照组、假于术组、肓肠结扎穿孔(CLP)组和血必净治疗组,每组8只;于第3天采用免疫磁珠法分选大鼠脾脏CD+4CD25+Treg和CD+4CD25-T细胞.CD+4CD25+Treg培养12 h后检测凋亡率、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)表达及门细胞介素(IL)-10的分泌.将Treg与CD+4CD25-T细胞共培养,并以刀豆素A刺激后观察Treg对Teff增殖活性和细胞培养上清IL-2/可溶性IL-2受体α(slL-2Rα)含量的影响.结果 CLP组CD+4CD25+Treg细胞凋亡率<对照组和假于术组(P<0.01),而血必净治疗组明显>CLP组(P<0.01).与CLP组比较,血必净治疗组CD+4CD25+Treg细胞Foxp3、CTLA-4表达和IL-10分泌显著下降(P<0.01).同时,CLP组Teff增殖反应抑制率明显>对照组,而血必净组其抑制率CLP组,sll-2Rα低于CLP组(P<0.01).结论 脓毒症病理过程中CD+4CD25+Treg细胞对Teff抑制效应明显增强,而血必净注射液能诱导Treg细胞凋亡,减轻Treg对Teff的抑制作用.     

外周血T淋巴细胞亚群变化能预测肝移植急性排斥反应吗?

目的探讨同种异体原位肝移植术后T淋巴细胞亚群变化在急性排斥反应诊断中的价值。方法总结分析了我中心2005年9月至2007年9月的肝移植病例资料,常规于肝移植术前1天、移植术后第7天、第14天、第21天和第28天各采集静脉全血,分别测定CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞,并计算CD3+CD4+细胞与CD3+CD8+细胞的比值。在符合入选标准的74例肝移植病人中,术后一月内发生排斥反应8例(排斥组),一月内未发生排斥反应63例(对照组),对两组病人的外周血T淋巴细胞亚群变化进行统计学分析比较。结果排斥组和对照组术后第14天、第21天和第28天CD3+CD4+细胞和CD3+CD8+细胞的测定值缺乏组间统计学差异,但排斥组CD3+CD4+细胞/CD3+CD8+细胞比值明显高于对照组(P0.05)。结论监测外周血T淋巴细胞亚群的变化,用CD3+CD4+细胞/CD3+CD8+细胞比值评估机体免疫抑制的水平,可能是预测排斥反应更为敏感的指标,并且能为寻求理想的免疫抑制状态提供重要的参考依据。     

肝移植急性排斥反应者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞的变化

目的 探讨良性终末期肝病患者肝移植术后外周血CD4+CD25+叉状头螺旋转录因子(Foxp3)+调节性T淋巴细胞在急性排斥反应期的变化及意义.方法 2004年12月至2008年1月间,符合入选条件的良性终末期肝病患者共55例,按照术后是否发生急性排斥反应分为排斥组(14例)和无排斥组(41例).肝移植术前用流式细胞仪检测患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率(简称CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率),出院后1年内每隔3～6个月复查;发生急性排斥反应时,于治疗前和治疗缓解后(3～6个月)复查.比较两组患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率的变化,对排斥组发生急性排斥反应时外周血CD4+CD25+Foxr3+T细胞百分率与排斥反应活动指数(RAI的相关性进行统计学分析.结果 肝移植术前,排斥组与无排斥组外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率的差异无统计学意义(P＞0.05).排斥组患者发生急性排斥反应时外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率为(2.23±0.54)%,低于无排斥组的(2.99±0.86)%,差异有统计学意义(P＜0.01).排斥组中,患者发生急性排斥反应时外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率低于未发生急性排斥反应时的(3.67±0.70)%,差异有统计学意义(P＜0.01).排斥组患者发生急性排斥反应时外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率与RAI呈负相关(r=-0.80,P＜0.01).结论 监测肝移植受者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞的变化,可辅助诊断急性排斥反应及判断其严重程度.

Abstract：

Objective To investigate the expression of peripheral blood (PB) CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatory T cells (Tregs) in patients with benign end-stage liver disease after liver transplantation and the relationship between levels of PB Tregs and acute rejection. Methods A prospective analysis was performed on 55 consecutive patients who underwent liver transplantation.Fourteen out of 55 cases suffered from acute rejection after liver transplantation were defined as rejection group,while the rest patients were classified into no acute rejection group. PB was obtained from liver transplant patients at different time points longitudinally: pre-transplant, post-transplant within one year and acute rejection. The circulating CD4+ CD25+ Foxp3+ Tregs in PB were measured by flow cytometry. Blood samples were drawn during acute rejection, at the same time, liver biopsies were performed. The circulating CD4+ CD25+ Foxp3+ Tregs were compared between two groups.Results There was no difference between two groups in levels of circulating CD4+ CD25+ Foxp3 + Tregs cells pre-transplant. However, the levels of circulating CD4+ CD25+ Foxp3+ Tregs in rejection group were decreased significantly as compared with no-rejection group (2. 23 % ± 0. 54 % vs. 2. 99 % ±0. 86 %,P＜0.01). The frequency of CD4+ CD25+ Foxp3+ T cells was negatively correlated with rejection activity index (RAI) (r = - 0. 80, P＜0. 01 ). Conclusion Monitoring PB CD4+ CD25+ Foxp3+ Tregs levels may be helpful in evaluating the immune state and act as a more sensitive marker for acute rejection diagnosis in the patients following liver transplantation.     

不同免疫状态肝移植受者外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子的表达及意义

目的探讨不同免疫状态肝移植受者外周血T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)、共刺激分子(CD80、CD86)的表达,及其判断肝移植受者不同免疫状态的价值。方法 52例肝移植受者,分为免疫耐受组28例、急性排斥反应组(排斥组)13例、药物不良反应组(药物反应组)11例。采用流式细胞术测定三组患者外周血CD4+、CD8+及CD80、CD86的表达水平,并计算CD4+/CD8+。结果与免疫耐受组和药物反应组比较,排斥组患者外周血CD8+水平较低,而CD4+、CD4+/CD8+、CD80、CD86均较高(P0.05～0.01)。与免疫耐受组比较,药物反应组患者外周血CD8+、CD80、CD86水平明显升高(P0.05～0.01),而CD4+、CD4+/CD8+差异无统计学意义(均为P0.05)。结论免疫T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)、CD80、CD86可作为判断肝移植受者免疫状态的指标。     

T淋巴细胞亚群检测在肾移植排斥反应与巨细胞病毒感染鉴别诊断中的应用

目的:探讨外周血淋巴细胞亚群的检测在人类同种异体肾移植术后急性排斥反应与巨细胞病毒(CMV)感染的诊断与鉴别诊断中的价值。方法:采用三色流式细胞技术对47例肾移植术后肾功能正常、16例急性排斥反应、11例CMV感染三组患者外周血淋巴细胞中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞的百分比进行检测,并计算出CD3+CD4+细胞与CD3+CD8+的比值,分析不同T淋巴细胞亚群在三组患者中的差别,并行t检验。结果:肾功能正常组、急性排斥反应组与CMV感染组外周血淋巴细胞中CD3+细胞的百分比分别为(70.33±10.96)%、(74.46±8.78)%和(74.06±12.94)%,差异无统计学意义;CD3+CD4+细胞的百分比分别为(40.85±9.58)%、(50.85±8.43)%和(28.62±9.40)%,急性排斥反应组及CMV感染组与肾功能正常组相比,差异均有统计学意义(t=3.871;P<0.01。CD3+CD8+淋巴细胞的百分比分别为(27.08±9.40)%、(20.15±5.47)%和(46.32±15.51)%,急性排斥反应组及CMV感染组与肾功能正常组相比,差异均有统计学意义(t=2.787,P<0.01;t=5.346,P<0.01);CD3+CD4+/CD3+CD8+分别为1.78±0.98、2.88±0.76和0.69±0.31,急性排斥反应组及CMV感染组与肾功能正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论:检测外周血淋巴细胞亚群的变化,特别是CD3+CD4+/CD3+CD8+比值,对肾移植术后急性排斥反应及CMV感染具有鉴别诊断价值。     

大鼠肝移植物中T-bet+/GATA-3+和ROR-γt+/FOXP3+细胞随排斥程度的动态变化及意义

目的 检测Th1、Th2、Th17和iTreg CD4+T细胞亚系特征性表达的核转录因子以探究它们在大鼠肝移植急性排斥中的动态变化及意义.方法 Kamada"二袖套"法建立大鼠肝移植急性排斥模型,按Banff标准对排斥程度进行分级;免疫组织化学方法检测Th1、Th2、Th17和iTreg特征性表达的核转录因子,对阳性细胞计数.结果 与对照组比较,轻度排斥组、中度排斥组和重度排斥组中T-bet+(对照组:19.3±5.1;轻度排斥组:63.7±9.7;中度排斥组:40.9±13.6;重度排斥组:32.3±3.3)细胞数和RORγt+(对照组:6.5±1.4;轻度排斥组:8.3±2.3;中度排斥组:26.8±3.2;重度排斥组:39.2±12.8)细胞数显著升高(P<0.01);轻度排斥组中GATA-3+(对照组:7.1±1.3;轻度排斥组:6.4±3.1;中度排斥组:23.2±9.1;重度排斥组:42.6±14.1)细胞数无明显升高(P>0.05),中度排斥组中明显升高(P>0.05),重度排斥组显著升高(P<0.01);轻度排斥组FOXP3+(对照组:9.5±2.4;轻度排斥组:13.5±4.8;中度排斥组:24.5±4.9;重度排斥组:39.3±11.7)细胞数无明显升高(P>0.05),中度、重度排斥组显著升高(P<0.01).结论 大鼠肝移植术后急性排斥的发生与T-bet+、GATA-3+、RORγt+和FOXP3+细胞相关;在排斥早期,T-bet+/GATA-3+平衡与排斥的发生相关性比RORγt+/FOXP3+平衡更强.     

夫妻共同感染梅毒螺旋体临床表型及实验室指标差异

目的探讨夫妻共同感染梅毒螺旋体后临床表型及实验室指标差异。方法收集2015年3月至2021年7月于首都医科大学附属北京地坛医院首次诊治且人类免疫缺陷病毒(HIV)阴性的共同感染梅毒螺旋体夫妻32对。根据我国2020年梅毒和神经梅毒最新诊断标准分为症状神经梅毒(NS)-无症状NS夫妻组17对,NS-隐性梅毒夫妻组15对。分别比较两组患者夫妻间年龄、性别、外周血淋巴细胞计数和比值、梅毒血清学指标、脑脊液(CSF)白细胞(WBC)计数、蛋白(Pro)定量和葡萄糖(Glu)浓度、CSF梅毒相关指标等差异,通过条件Logistic回归分析影响夫妻间临床表型差异的因素。结果在症状NS-无症状NS夫妻组中,无症状NS患者T淋巴细胞计数较症状NS患者高(t=-2.184、P=0.047),无症状NS患者CD4^(+)T(t=-2.088、P=0.056)和CD8^(+)T(t=-2.112、P=0.053)淋巴细胞计数高于症状NS患者,但差异无统计学意义;症状NS患者CSF TRUST滴度(Z=-2.124、P=0.034)和CSF Pro定量(Z=-3.006、P=0.003)高于无症状NS患者;条件Logistic回归分析显示,男性患者更易表现为症状NS(OR=14.000、95%CI:1.841~106.465、P=0.011)。NS-隐性梅毒夫妻组中,NS患者淋巴细胞(t=2.322、P=0.040)、T淋巴细胞(t=2.385、P=0.036)和CD8^(+)T淋巴细胞计数(t=2.801、P=0.017),CSF Pro定量(Z=-2.062、P=0.039)及血清TRUST滴度(Z=-3.000、P=0.003)均显著高于隐性梅毒患者;条件Logistic回归分析显示CD8^(+)T淋巴细胞计数高的患者更易表现为NS,但差异无统计学意义(OR=1.008、95%CI:0.998~1.018、P=0.130)。结论当夫妻双方共患NS时,男性表现为症状NS的风险高于女性,夫妻间T淋巴细胞计数,血清和CSF TRUST滴度,CSF Pro等实验室指标差异可能与机体的免疫应答和炎症反应有关。     

大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的改变及临床意义

目的 了解大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的变化，探讨其与脓毒症的关系。方法 选择59例烧伤面积≥30％TBSA的患者，分为脓毒症组43例和非脓毒症组16例。采集两组患者伤后1、3、5、7、14、21、28d的外周静脉血，检测T淋巴细胞增殖能力和白细胞介素2（IL-2）的分泌水平，并行相关性分析；通过流式细胞仪检测CD3^＋／CD4^＋ T淋巴细胞的百分率及其凋亡率，并行相关性分析。结果 与非脓毒症组比较，脓毒症组患者伤后l、14、2l、28dT淋巴细胞增殖能力和IL-2的分泌水平均显著下降（P〈0．05或P〈0.01），两指标呈显著正相关（r=0．82，P〈0．01）。伤后1、5、14、21、28d，脓毒症组患者CD3^＋／CD4^＋T淋巴细胞百分率明显低于非脓毒症组，而其凋亡率呈相反趋势（P〈0.05或P〈0．01），两指标呈显著负相关（r=-0.66，P〈0．05）。结论 大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能持续处于抑制状态，T淋巴细胞凋亡参与了脓毒症细胞免疫紊乱的病理生理过程。     

手足口病患儿外周血CXC趋化因子配体10表达、T细胞及细胞因子与预后的相关性

目的检测手足口病（HFMD）患儿外周血中的CXC趋化因子配体10（CXCL-10）表达水平、T淋巴细胞亚群及相关细胞因子与HFMD患儿预后的相关性。 方法选取2016年4月至2017年5月徐州市儿童医院收治的HFMD患儿60例为研究对象,根据病情诊断标准分为重症组（10例）和轻症组（50例）;根据随访结果又分为预后良好组（58例）和预后不良组（2例）。选择同期体检正常婴幼儿52例为对照组。采用ELISA法检测两组研究对象外周血CXCL-10表达水平;采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群,采用ELISA法检测外周血中白细胞介素-17（IL-17）、IL-22、IL-23以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。 结果重症组患儿外周血CXCL10水平、IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平显著高于对照组和轻症组患儿（P均< 0.001）。轻症组患者细胞因子CXCL-10、IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平高于对照组（P均< 0.005）。重症组HFMD患儿外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T以及CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比例显著低于轻症组患儿和对照组（P均< 0.05）;轻症组患儿外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD4⁺/CD8⁺淋巴细胞比例与对照组差异有统计学意义（P均< 0.05）;经Pearson相关系数分析,HFMD患儿外周血CXCL-10表达水平与T淋巴细胞亚群CD3⁺T、CD4⁺ T、CD8⁺ T、CD4⁺/CD8⁺表达水平均负相关（r =－0.609、－0.714、－0.514、－0.524,P = 0.014、0.023、0.001、0.006）,HFMD患儿外周血中IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α水平与外周血CXCL-10水平正相关（r = 0.519、0.473、0.418、0.459,P = 0.002、0.006、0.009、0.007）;预后不良组患儿外周血CXCL-10表达水平显著高于预后良好组（t = 2.055、P = 0.044）,外周血CD3⁺ T、CD4⁺ T、CD8⁺ T淋巴细胞比例显著低于预后良好组,差异均有统计学意义（t = 2.508、P = 0.015,t = 3.830、P < 0.001,t = 2.222、P = 0.030）。 结论手足口病患者外周血CXCL-10、T淋巴细胞亚群检测对病情监测及判断预后有重要价值。     

卡泊芬净治疗肝移植术后真菌感染的临床观察

目的 探讨卡泊芬净治疗肝移植术后真菌感染的疗效.方法 回顾性分析重庆医科大学附属第一医院2003-2008年27例肝移植患者发生真菌感染的治疗情况,2005年以前的13例患者用两性霉素B或氟康唑治疗(对照组),2005年以后的14例患者用卡泊芬净治疗(观察组),治疗开始1周和2周后分别检测肝肾功能指标,肝功能(AST,ALT,TBIL),肾功能(BUN,Scr).疗程结束7～14 d后随访观察治疗效果和急性排斥反应的发生. 结果治疗1～2周观察组患者肝功能与对照组比较:1周后,AST(t=8.03,P<0.01)ALT(t=9.09,P<0.01)TBIL(t=6.01,P<0.01);2周后AST(t=5.59,P<0.01)ALT(t=6.60,P<0.01)TBIL(t=8.45,P<0.01).治疗1周和2周后观察组患者肾功能与对照组比较:1周后,BUN(t=6.51,P<0.01)Scr(t=5.66,P<0.01);2周后,BUN(t=7.61,P<0.01)Scr(t=6.91,P<0.01),差异均有统计学意义.疗程结束7～14 d后随访,对照组临床治愈率(7/13,53%),观察组的临床治愈率(12/14,86%),观察组2例,对照组1例出现了急性排斥反应,给予甲泼尼龙冲击疗法,很快治愈.结论 卡泊芬净是一种治疗肝移植术后真菌感染的理想药物.     

使用他克莫司的肝移植受者T淋巴细胞亚群及CD28家族共刺激分子的分析

目的 观察使用他克莫司(Tac)的肝移植受者外周血中T淋巴细胞亚群及CD28家族共刺激分子表达的变化及其意义.方法 以接受同种异体肝移植的受者20例为Tac组,术后采用Tac、霉酚酸酯(或硫唑嘌呤)和糖皮质激素预防排斥反应;以等待肝移植的终末期肝脏疾病患者20例为肝病对照组;以健康志愿者20名为正常对照组.测定正常对照组志愿者和肝病对照组患者的外周血中T淋巴细胞亚群及其CD28、可诱导共刺激分子(ICOS)、CD152和程序性死亡因子1(PD-1)的表达;分别测定Tac组使用Tac后2周、1个月、2个月和3个月时外周血中T淋巴细胞亚群及其CD28、ICOS、CD152和PD-1的表达.结果 肝病对照组、正常对照组和Tac组各时点间的CD3+ T淋巴细胞的差异无统计学意义(P>0.05).随着使用Tac时间的延长,Tac组CD4+ T淋巴细胞持续下降,至使用Tac 3个月时,明显低于正常对照组(P<0.05);CD8+ T淋巴细胞逐渐增加至正常水平.Tac组T淋巴细胞亚群表面ICOS分子表达持续低于正常对照组(P<0.05),CD4+ T淋巴细胞表面CD28分子表达恢复至正常水平(P>0.05),而CD8+ T淋巴细胞表面CD28分子持续低表达(P<0.05).同时,Tac组T淋巴细胞亚群表面CD152分子和PD-1分子的表达均持续高于正常对照组(P<0.05).结论 肝移植患者接受以Tac为主的免疫抑制治疗,其T淋巴细胞亚群平衡紊乱得到纠正,T淋巴细胞亚群表面CD28分子和ICOS分子的表达下调,CD152分子和PD-1分子的表达上调,通过共刺激信号的调节来达到抑制排斥反应的目的.     

Monoclonal analysis of fine-needle aspiration biopsy in kidney allografts

To evaluate changes in T-lymphocyte subsets and DR expression on tubular cells, 74 fine-needle allograft aspirates (FNAB) were evaluated in 31 patients with cadaver kidney transplants. Monoclonal antibodies against T helper CD4+, cytotoxic/suppressor CD8+, and HLA-DR were used with an indirect alkaline-phosphatase-staining technique. Cases with acute rejection (n = 11) showed a significant increase of CD8+: CD4+ ratio versus those with stable function (n = 21), acute tubular necrosis (n = 10) or CsA toxicity (n = 7) (ANOVA F = 10; P less than 0.01). Cases with chronic rejection or CMV infection showed no differences in the CD8+: CD4+ ratio with the other groups. DR expression on tubular cells was frequently found in cases of acute rejection, chronic rejection and CMV (73%, 66%, and 43% respectively), occasionally found in CsA toxicity (14%), but never seen in controls or ATN. Both tests, the CD8+: CD4+ ratio and the DR expression on tubular cells, had a high sensitivity and specificity in differentiating acute rejection versus controls, acute tubular necrosis, and CsA toxicity. When both tests are taken together no case without rejection showed a CD8+:CD4+ ratio greater than 1.6 and DR expression on tubular cells. Cases with acute rejection who lost the graft (n = 6) had a CD8+:CD4+ ratio significantly greater than those who responded to antirejection therapy (n = 5) (t = 2.9; P less than 0.05).     

槐耳清膏在小鼠心脏移植排斥反应中作用的初步探讨

目的 探讨槐耳清膏在小鼠心脏移植急性排斥反应中的作用.方法 实验分为3组:A组:同种异基因移植后槐耳清膏处理组(槐耳清膏组);B组:同种异基因移植财照组(移植排斥组)及C组:同系移植对照组(同系移植组).观察各组移植心脏的存活时间、术后第5天供心的组织病理改变.用免疫荧光检测移植心脏中CD8+T淋巴细胞的浸润和颗粒酶B的表达水平.结果 A组移植心脏的平均存活时间为(6.38±0.69)d,与B组(8.31±0.59)d相比明显缩短(P<0.01);心肌组织呈3级急性排斥反应病理改变,CD8+T淋巴细胞弥漫性浸润及颗粒酶B表达与两个对照组相比明显增强(P<0.05).结论 在术后早期单用槐耳清音会促进小鼠心脏移植物的急性排斥反应,可能机制足促进CD8+T淋巴细胞的组织浸润并增强颗粒酶B的表达.     

Tim-3在小鼠心脏移植受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化

目的 检测激活的T_H1类淋巴细胞标记分子"T淋巴细胞免疫球蛋白域及粘蛋白域蛋白-3(Tim-3)"在受者体内不同部位T淋巴细胞上表达的变化,探讨其与急性排斥反应的关系.方法 建立小鼠同基因和异基因心脏移植模型(简称:同基因组和异基因组);移植术后第3和第6天,分离和制备两组受者外周血、脾脏、引流淋巴结和移植心内淋巴细胞悬液,采用流式细胞仪检测Tim-3阳性细胞在CD4~+ 和CD8~+ T淋细胞中的比值.结果 两组受者术后外周血和脾脏内Tim-3~+/CD4~+以及Tim-3~+/CD8~+ 的比值比较,差异均无统计学意义(P>O.05).与同基因组比较,异基因组引流淋巴结内Tim-3~+/CD4~+ 比值轻度升高(P<0.05);但异基因组术后第6天与第3天比较,差异无统计学意义(P>0.05).与同基因组比较,移植心内Tim-3~+/CD4~+和TiM-3~+/CD8~+比值均显著升高(P<0.01);异基因组术后第6天与第3天比较.移植心TiM-3~+/CD4~+和Tim-3~+/CD8~+比值也显著升高(P<0.01).结论 小鼠异基因心脏移植受者引流淋巴结和移植心内T淋巴细胞上Tim-3的表达升高与急性排斥反应的进展动态相关.     

儿童肾病综合征T细胞亚群检测的临床意义

目的：探讨儿童原发性肾病综合征（NS）T细胞亚群检测的临床意义。方法：对25例NS活动期和缓解期患儿应用流式细胞仪检测T2细胞亚群的变化。结果：NS活动期组CD3^ ,CD4^ ,CD4^ /CD8^ 比值，NK[CD(16 56)]^ 细胞均明显低于缓解期组（P＜0．01）和对照组（P＜0．01）。结论：说明NS细胞免疫功能减低，T细胞亚群检测可作为肾病综合征活动指标之一。     

体外刺激肾移植受者外周血淋巴细胞进行免疫监测的临床研究

目的探讨应用体外刺激外周血淋巴细胞的方法进行免疫监测来预测肾移植术后急性排斥反应的价值。方法选取40例肾移植受者,将其分为急性排斥反应组(20例)和肾功能正常组(20例);选取10名健康供者作为正常对照组。抽取所有研究对象的外周静脉血,分离出外周血淋巴细胞,并经佛波酯(phorbol myfismte acetate,PMA)和离子霉素(ionomycin,Ion)体外刺激8h。应用流式细胞术检测细胞培养上清液白介素(IL)-2、IL-6的表达强度及CD3+CD69+、CD3+CD71+淋巴细胞比例;应用受试者工作特征(ROC)曲线评价IL-2联合IL-6、CD3+CD69+联合CD3+CD71+预测肾移植术后急性排斥反应的敏感度和特异度。结果急性排斥反应组的IL-2、IL-6的荧光强度和CD3+CD69+、CD3+CD71+淋巴细胞比例均显著高于肾功能正常组(P≤0.01);IL-2联合IL-6预测肾移植受者急性排斥反应的敏感度为0.90,特异度为0.95。CD3+CD69+联合CD3+CD71+预测急性排斥反应的敏感度为0.95,特异度为0.90。结论监测肾移植受者外周血淋巴细胞体外刺激上清液中的IL-2、IL-6及CD3+CD69+、CD3+CD71+的表达强度,可以预测急性排斥反应。此法简便,敏感度和特异度高。