丹参酮ⅡA对压力超负荷性心肌肥厚大鼠血液SOD、NO及Hyp含量的影响

目的：观察丹参酮ⅡA对压力超负荷性心肌肥厚大鼠血液超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、羟脯氨酸（Hyp）含量的影响。方法：健康成年SD雄性大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组（10mg·kg^-1）、丹参酮1组（5mg·kg^-1）、丹参酮2组（20mg·kg^-1）各8只,除假手术组外,其他组均采用胸主动脉部分缩窄术复制大鼠心肌肥厚模型。测量各组大鼠全心重量指数（HW／BW）、左心室重量指数（LVW／BW,即LVI）;检测血清SOD活力、NO及Hyp含量。结果：模型组大鼠的HW／BW、LVI、Hyp含量明显高于假手术组,而SOD活力、NO含量明显低于假手术组（均P〈0．05）。与模型组比较．丹参酮2组和缬沙坦组HW／BW、LVI及Hyp含量显著降低,SOD活力、NO含量显著升高;丹参酮1组与模型组各指标间差异无显著性意义。结论：丹参酮ⅡA对大鼠心肌肥厚有一定的保护作用,其机制可能与增加NO生成、抑制胶原合成、调节心脏局部氧自由基代谢等方面的作用有关,但〈5mg·kg^-1的丹参酮ⅡA对心肌作用不明显。     

丹参酮ⅡA对肥厚心肌信号转导系统蛋白激酶B通路的影响

目的：探讨丹参酮ⅡA对压力超负荷性心肌肥厚大鼠的细胞信号转导系统中蛋白激酶B（Akt）的影响。方法：健康雄性成年大鼠48只，采用胸主动脉部分缩窄术复制心肌肥厚模型大鼠40只，随机分为模型组（M组），缬沙坦组（X组）各8只，丹参酮组（D组）24只，另8只设为假手术组（S组）。术后2周，X组大鼠给予缬沙坦10mg／kg灌胃；D组大鼠按丹参酮5、10和20mg／kg剂量各8只腹腔注射；S及M组大鼠给予同等容量无菌注射用水腹腔注射。各组治疗均每日1次。8周后检测各组大鼠左室心肌质量指数（LVMI），左心室后壁（LVPw）及室间隔（IVS）厚度，比较心肌纤维横径（MFD），心肌组织中p—Akt，p-Gsk3β信号转导蛋白的量。结果：与S组比较，M组、X组和D组的大鼠左室心肌质量指数，左心室及室间隔厚度及心肌纤维横径均增加，p—Akt及PGsk3β升高（均P〈0．05），与M组比较，X组和D组各项检测指标均下降；X组与D组间比较差异无显著性意义；D组中各剂量丹参酮治疗的大鼠间比较差异无显著性意义。结论：丹参酮ⅡA可以通过作用于蛋白激酶B（Akt）信号通路，防止心肌肥厚。     

葛根素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌组织转化生长因子β1和血浆血管紧张素Ⅱ的影响

目的:研究葛根素对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和血浆血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)的影响.方法:采用ISO[5 mg/(kg·d)×14 d]皮下注射诱导大鼠心肌纤维化,给予葛根素100 mg/(kg· d)腹腔注射或卡托普利100 mg/(kg·d)灌胃,实验共8周.32只雄性SD大鼠随机分成4组:模型组8只;葛根素组8只;卡托普利组8只;葛根素+卡托普利组8只.实验末检测大鼠左室射血分数及缩短分数,计算左心室质量指数,取左室心肌组织进行VG染色,分别测算胶原容积积分,取左室游离壁心肌组织检测羟脯氨酸浓度,RT-PCR检测TGF-β1 mRNA水平和Western Blot测定TGF-β1蛋白,测定血浆Ang-Ⅱ浓度.结果:与模型组比较,葛根素和卡托普利均改善大鼠左室收缩功能(LVEF％,FS％,P＜ 0.01),减少左心室质量指数(P＜0.01)及羟脯氨酸浓度(P＜0.01),减少左室心肌组织TGF-β1(P＜ 0.05),降低血浆Ang-Ⅱ浓度(P＜0.01).以葛根素+卡托普利最显著(P＜0.01).结论:葛根素改善左心室收缩功能,抑制左室心肌组织中TGF-β1表达和降低血浆Ang-Ⅱ,葛根素与卡托普利合用作用更强.     

丹参酮ⅡA抑制心肌细胞的纤维化

背景：转化生长因子β-Smads信号通路是心肌纤维化的关键通路;丹参酮ⅡA具有抑制心肌纤维化作用.目的：验证丹参酮ⅡA对转化生长因子β1致心肌纤维化的作用并探讨其机制.方法：取出生24 h内的SD大鼠心脏,利用酶消化法结合差速贴壁体外培养心肌成纤维细胞.取上述第3代心肌成纤维细胞,用5μg/L转化生长因子β1培养15,30,60,120 min或6,12,24 h后收集细胞,用不同浓度（10-5 mol/L、10-4结果与结论：转化生长因子β1在一定范围内以时间依赖方式诱导结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原、磷酸化Smad3及Smad7的表达,刺激终末结缔组织生长因子、Ⅰ型胶原mRNA的表达量明显上升（均P 〈0.01）;磷酸化Smad3及Smad7蛋白表达量在刺激后1 h达到峰值,表达量显著增加（均P 〈0.01）.高浓度丹参酮ⅡA预处理可显著下调磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原表达（均P 〈0.01）.两种浓度的丹参酮ⅡA预处理均可上调Smad7蛋白表达（P 〈0.05,P 〈0.01）.提示丹参酮ⅡA对心肌纤维化有抑制作用,可能与其上调Smad7蛋白表达,抑制转化生长因子β1诱导的Smad3磷酸化,部分阻断转化生长因子β1-Smads信号通路有关. mol/L）丹参酮ⅡA预处理2 h后再加入5μg/L转化生长因子β1培养120 min或24 h后收集细胞,并设空白对照组.免疫细胞化学染色法进行细胞鉴定,反转录聚合酶链反应检测结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达,Western Blot检测Smad7及磷酸化Smad3蛋白表达.免疫组织化学染色及免疫荧光法检测磷酸化Smad3、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原蛋白表达.     

中药补肾复方对压力负荷增加大鼠左心室心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及转化生长因子β1表达的影响

目的：观察中药补肾复方对压力负荷增加致充血性心力衰竭大鼠左心室心肌Ⅰ，Ⅲ型胶原和转化生长因子β1表达的影响。 方法：实验于2005—03／10在解放军南京军区南京总医院动物实验中心完成。①选用成年SD大鼠64只。随机抽取12只大鼠作为假手术组：只分离腹主动脉，不用银夹缩窄，双蒸水灌胃，1．5g／kg，1次／d，连续4周，其余52只大鼠分离腹主动脉，用银夹缩窄，以左心室心肌质量指数≥0．3％，为造模成功，本组造模成功33只。将其按随机抽签法分为3组，每组11只：模型组（术后常规喂养4周，然后烈蒸水灌胃，15mL／kg，1次／d，连续4周），中药复方大、小剂量组[术后4周，分别用含生药24，12g／kg中药复方水煎浓缩液（中药复方由淫羊藿、熟地、川芎、丹参等中药组成，由解放军南京军区南京总医院制剂室提供，制成水煎液，浓缩至含生药1．6kg／L）15，7．5mL／kg,1次／d，连续灌胃4周1。术后至给药前均常规喂养。②用药4周后，称重左心室质量及体质量，计算左心室心肌质量指数[左心室质量（mg）／体质量（g）为左室质量指数]。采用免疫组织化学方法观察左室心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原及转化生长因子β1蛋白表达。③计量资料差异比较采用完全随机方差分析，组问两两比较用t检验。 结果：造模失败21只，假手术组大鼠12只及造模成功大鼠31只（假手术组12只，模型组10只，中药复方大剂量组11只．中药复方小剂量组10只）进入结果分析。①大鼠左室心肌Ⅰ，Ⅲ型胶原含量：给药4周后，模型组明显高于假手术组（P〈0．01）；中药复方大、小剂量组明显低于模型组（P〈0．01）。②大鼠左心室心肌质量指数和转化生长因子β1蛋白表达：给药4周后模型组明显高于假手术组（P〈0．01）：中药复方大、小剂量治疗组明显低于模型组（P〈0．01）。 结论：中药补肾复方能逆转压力负荷增加大鼠左心室心肌肥厚和心肌纤维化，其作用机制可能是通过抑制心肌转化生长因子β1蛋白过度表达，减少细胞外基质胶原合成。     

中药补肾复方对压力负荷增加大鼠左心室心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及转化生长因子β1表达的影响

目的:观察中药补肾复方对压力负荷增加致充血性心力衰竭大鼠左心室心肌Ι,Ⅲ型胶原和转化生长因子β1表达的影响。方法:实验于2005-03/10在解放军南京军区南京总医院动物实验中心完成。①选用成年SD大鼠64只。随机抽取12只大鼠作为假手术组:只分离腹主动脉,不用银夹缩窄,双蒸水灌胃,1.5g/kg,1次/d,连续4周。其余52只大鼠分离腹主动脉,用银夹缩窄,以左心室心肌质量指数≥0.3%,为造模成功,本组造模成功33只。将其按随机抽签法分为3组,每组11只:模型组(术后常规喂养4周,然后双蒸水灌胃,15mL/kg,1次/d,连续4周),中药复方大、小剂量组[术后4周,分别用含生药24,12g/kg中药复方水煎浓缩液(中药复方由淫羊藿、熟地、川芎、丹参等中药组成,由解放军南京军区南京总医院制剂室提供,制成水煎液,浓缩至含生药1.6kg/L)15,7.5mL/kg,1次/d,连续灌胃4周]。术后至给药前均常规喂养。②用药4周后,称重左心室质量及体质量,计算左心室心肌质量指数[左心室质量(mg)/体质量(g)为左室质量指数]。采用免疫组织化学方法观察左室心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原及转化生长因子β1蛋白表达。③计量资料差异比较采用完全随机方差分析,组间两两比较用t检验。结果:造模失败21只,假手术组大鼠12只及造模成功大鼠31只(假手术组12只,模型组10只,中药复方大剂量组11只,中药复方小剂量组10只)进入结果分析。①大鼠左室心肌Ⅰ,Ⅲ型胶原含量:给药4周后,模型组明显高于假手术组(P<0.01);中药复方大、小剂量组明显低于模型组(P<0.01)。②大鼠左心室心肌质量指数和转化生长因子β1蛋白表达:给药4周后模型组明显高于假手术组(P<0.01);中药复方大、小剂量治疗组明显低于模型组(P<0.01)。结论:中药补肾复方能逆转压力负荷增加大鼠左心室心肌肥厚和心肌纤维化,其作用机制可能是通过抑制心肌转化生长因子β1蛋白过度表达,减少细胞外基质胶原合成。     

丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄高血压大鼠JAK/STAT通路的影响

目的:观察丹参酮ⅡA对腹主动脉缩窄高血压大鼠心肌肥厚的作用,并研究其对左心室肌JAK/STAT通路的影响。方法:取32只9周龄SD大鼠,环扎其腹主动脉,制成高血压大鼠模型;术后4周将手术大鼠分为心肌肥厚组,丹参酮高、低剂量组和缬沙坦组。另取8只行假手术(假手术组)。测量大鼠的尾动脉收缩压(SBP)、室间隔厚度(IVS)及左室重量指数(LVMI),采用Western blot方法测定各组大鼠JAK1和STAT3的表达。结果:与假手术组相比,心肌肥厚组的SBP、IVS、LVMI以及JAK1、STAT3的表达均明显升高。丹参酮高、低剂量组上述指标(除SBP外)均较心肌肥厚组明显降低。结论:JAK、STAT的表达在心肌肥厚的信号通路中起着重要的作用。丹参酮ⅡA有可能是通过干预JAK/STAT通路而逆转左室肥厚。     

丹参酮ⅡA对心脏成纤维细胞转化生长因子β1/Smads信号通路的作用

背景:转化生长因子β1通过Smads信号通路刺激心脏成纤维细胞增殖与分化是心肌纤维化最重要的发生机制之一.前期研究证实丹参酮Ⅱ A能有效抑制心肌纤维化,但是否通过阻断转化生长因子β1/Smads信号通路起作用尚不清楚.目的:观察丹参酮ⅡA对大鼠心脏成纤维细胞内转化生长因子β1信号转导的影响.方法:采用胰酶消化法和差速贴壁法获取新生SD大鼠心脏成纤维细胞,应用5 μg/L转化生长因子β1刺激及不同浓度丹参酮ⅡA(10-6,10-5和10-4mol/L).用反转录聚合酶链反应法和免疫蛋白印迹法分别检测转化生长因子β1刺激后6,12和24 h纤维连接蛋白的表达,免疫蛋白印迹法检测转化生长因子β1刺激后15,30,60和120 min的Smads蛋白表达.结果与结论:纤维连接蛋白mRNA和蛋白表达量在转化生长因子β1刺激6 h后开始呈现上升趋势,至作用24 h时分别增加1.3倍和1.8倍(P<0.01);磷酸化Smad2/3蛋白表达量在转化生长因子β1刺激15 min后开始上升,1 h达到高峰,2 h后虽有所下降,但仍较刺激前增加3.9倍(P<0.01).丹参酮ⅡA(10-5和10-4mol/L)预处理可下调纤维连接蛋白和磷酸化Smad2/3表达(P<0.05或P<0.01),而且效应呈剂量依赖性.由此可知,转化生长因子β1在一定范围内以时间依赖方式诱导纤维连接蛋白及其mRNA和磷酸化Smad2/3表达.丹参酮ⅡA抗心肌纤维化作用可能与其抑制转化生长因子β1诱导的Smad2/3磷酸化,阻断心脏成纤维细胞内转化生长因子β1/Smads信号通路有关.     

丹参酮ⅡA对压力超负荷大鼠心肌肥厚的抑制作用及机制研究

目的 观察丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinone ⅡA sulfonate,TSN) 对腹主动脉缩窄高血压大鼠肥厚心肌的作用以及对细胞内游离钙离子浓度、Janus激酶及其信号转导子和激活子(JAK/STAT)的影响.方法 SD大鼠行腹主动脉缩窄术建立高血压左室心肌肥厚模型,随机分为心肌肥厚组(n=8)、丹参酮ⅡA组(n=8)和缬沙坦组(n=8);另取8只行假手术.用药8周后通过超声心动图测定左室后壁、室间隔的厚度;测量大鼠的尾动脉收缩压(SBP)和左室质量指数(LVMI);HE染色检测心肌细胞的直径(MDF);激光共聚焦显微镜测定心肌细胞内游离Ca2+浓度的变化;Western blot方法测定各组大鼠JAK1和STAT3的表达.结果 ①TSN对血压没有影响,显著高于假手术组和缬沙坦组(P<0.01).②TSN组和缬沙坦组的左室后壁、室间隔厚度、LVMI、MFD虽然高于假手术组(P<0.05),却显著低于手术组(P<0.01).③TSN与缬沙坦均可显著降低肥厚心肌的[Ca2+]i,丹参酮对[Ca2+]i 的影响显著超过缬沙坦(P<0.05).④与假手术组相比,肥厚心肌的JAK1和STAT3蛋白表达显著升高(P﹤0.05);丹参酮ⅡA、缬沙坦均可显著降低肥厚心肌JAK1和STAT3的蛋白水平.结论 JAK/STAT的表达在心肌肥厚的信号通路中起着重要的作用;丹参酮ⅡA可能是通过降低心肌细胞[Ca2+]i浓度、阻滞JAK/STAT信号通路的转导,起到抑制心肌肥厚的作用.     

百令对慢性肾衰竭大鼠模型肾纤维化治疗机制研究

目的观察百令对慢性肾衰竭大鼠模型24h尿蛋白定量、血肌酐、肾脏组织病理及细胞因子表达的影响,探讨其对肾纤维化的治疗作用。方法80只SD大鼠随机分为假手术组（20只）和手术组（60只）,手术组行5／6。肾切除术,模型制作成功后分为手术未治疗组15只、百令低剂量组（1．0g／（kg·d））15只、百令中剂量组（2．0g／（kg·d））15只和百令高剂量组（3．og／（kg·d））15只。假手术组随机分为假手术组未治疗组10只和假手术百令组（2．0g／（kg·d））10只。假手术百令组和百令低、中、高剂量组于手术4周后开始给药,每日灌胃,假手术组未治疗组、手术未治疗组每日生理盐水灌胃。治疗4周后检测24h尿蛋白定量、血肌酐,取残肾检测肾小球系膜基质面积／肾小球囊面积及肾小管-间质损伤指数,免疫组织化学法检测肾组织转化生长因子-β1表达。结果手术组24h尿蛋白定量、血肌酐、肾小球系膜基质面积／肾小球囊面积及肾小管-间质损伤指数、肾组织表达转化生长因子-β1较假手术组升高（P〈0．01）,百令各治疗组上述指标较手术未治疗组下降（P〈0．01）,百令高剂量组较中、低剂量组上述指标下降,两两比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论百令可保护残肾功能,通过下调转化生长因子-β1表达延缓肾纤维化进展。     

红景天苷通过抑制PI3K/AKT/GSK3β通路对AMI后心衰大鼠ColⅠ和Profilin-1蛋白表达的影响

目的探究红景天苷通过抑制PI3K/AKT/GSK3β通路对急性心肌梗死(AMI)后心衰大鼠胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、前纤维蛋白-1(Profilin-1)蛋白表达的影响。方法 45只SD大鼠随机分为3组(n=15),假手术组,模型组和红景天苷组。模型组和红景天苷组建立AMI后心力衰竭模型,红景天苷组大鼠使用红景天苷灌胃干预。通过心电图和血清B型脑钠肽(BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平评估心衰情况。HE染色和Masson染色检测心肌组织变化和纤维化情况。分别使用Western blot和qRT-PCR检测PI3K/AKT/GSK3β通路和ColⅠ、Profilin-1表达水平。结果模型组大鼠血清BNP、AngⅡ水平显著高于假手术组,并且BNP水平均高于100 pg/ml;红景天苷组的血清BNP、AngⅡ水平显著低于模型组。模型组心肌细胞形状发生改变,排列紊乱,细胞间系变小,出现炎性反应,并出现纤维化状态。红景天组细胞排列异常、炎性反应及纤维化情况均较轻。模型组出现大量的纤维化组织,红景天苷组的纤维化情况显著低于模型组。与假手术组比较,建模后大鼠心肌组织中Col I和Profilin-1的表达水平均显著升高,红景天苷组的Col I和Profilin-1蛋白和mRNA水平均显著低于模型组;建模后大鼠心肌组织中PI3K/AKT/GSK3β通路蛋白磷酸化水平显著升高,红景天组的大鼠心肌组织中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-GSK3β/GSK3β水平显著低于模型组。结论红景天苷通过抑制PI3K/AKT/GSK3β通路中蛋白的磷酸化,抑制AMI后心力衰竭大鼠心肌组织中ColⅠ、Profilin-1蛋白表达,减轻心肌纤维化水平,减轻心力衰竭。     

心肌间质转化生长因子β1在心肌梗死大鼠缬沙坦干预过程中的表达特点

目的:观察大鼠心肌梗死后心肌间质转化生长因子β1蛋白及mRNA的表达及缬沙坦对其的影响。方法:实验于2004-12/2005-06在华中科技大学协和医院心血管研究所实验室进行。①在110只SD雄性大鼠中随机取10只为假手术组(只行开胸手术不结扎冠状动脉),剩余100只结扎冠状动脉前降支复制急性心肌梗死模型,将造模成功的50只大鼠随机分成模型组和缬沙坦组,缬沙坦组灌胃给予缬沙坦40mg/(kg·d),模型组给予等量生理盐水。②模型组和缬沙坦组分别于给药后7,14,28d取8或9只,应用超声心动图评价大鼠心功能变化和心室重塑的过程,然后处死取心脏,用RT-PCR及免疫组化方法检测转化生长因子β1 mRNA和蛋白表达情况。假手术组于术后28d处死,检测项目同上。结果:58只大鼠进入结果分析。①转化生长因子β1 mRNA表达:模型组7,14,28d时高于假手术组(P<0.05);缬沙坦组7,14,28d时低于模型组(P<0.05)。②转化生长因子β1蛋白表达:模型组7,14,28d时高于假手术组(P<0.05);缬沙坦组7,14d时低于模型组(P<0.05)。③超声心动图显示模型组大鼠在术后7,14,28d时心功能明显低于假手术组(P<0.05),缬沙坦组14,28d时心功能指标均较模型组明显改善(P<0.05)。结论:心肌间质转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达在心肌梗死后均增高,缬沙坦抑制其增高,并改善心室重塑,提示缬沙坦影响转化生长因子β1的表达可能是改善心肌梗死后心室重塑的机制之一。     

辛伐他汀对大鼠心肌梗死后心肌转化生长因子-β1的影响

目的：观察辛伐他汀对大鼠心肌梗死后心肌转化生长因子-β1（TGF-β1）变化的影响。方法：50只大鼠随机分为3组,其中两组结扎大鼠左冠状动脉前降支制成急性心肌梗死模型,分别为辛伐他汀干预组（MI-S组,n=20）和心肌梗死对照组（MI-C组,n=20）,另一组不结扎左冠状动脉前降支为假手术组（Sham组,n=10）。4周后,RT-PCR法检测左心室梗死区及非梗死区心肌TGF-β1mRNA的表达,免疫组织化学染色测定心肌组织TGF-β1蛋白含量。结果：制模组大鼠心肌梗死4周后左心室心肌TGF-β1 mRNA及蛋白表达较Sham组明显升高（P〈0.05）,MI-S组上述指标较MI-C组显著降低（P〈0.05）,但仍高于Sham组（P〈0.05）,3组血脂差异无显著性。结论：辛伐他汀可减少大鼠心肌梗死4周后左心室心肌TGF-β1的表达,此改变与其调脂作用无关。     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左心室肥厚心肌细胞凋亡蛋白的作用

目的:观察丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚心肌凋亡蛋白的作用。方法:实验于2005-03/2005-07在华中科技大学同济医学院急诊科实验室完成。①选用8周龄自发性高血压大鼠18只。随机将大鼠分为3组:对照组、丹参酮组、高血压组,每组6只。②对照组:饲养至第8周处死;丹参酮组:从饲养至第8周开始,丹参酮ⅡA(中国药品生物制品检定所,批号S02001300,1kg/包)以1mL/(kg·d)剂量腹腔注射,持续用药10周,第18周处死;高血压组:以相同容量蒸馏水替代丹参酮ⅡA腹腔注射,余同丹参酮组。③用药结束后用MRS2Ⅲ型大鼠电脑血压心率测量仪测量大鼠清醒状态下尾动脉收缩压。④处死后,迅速取出心脏,称量左心室(包括室间隔)的湿重,计算左室质量指数犤左室质量(mg)/体质量(g)犦。⑤采用免疫印迹法检测心肌细胞Bcl-2,Bax及p53蛋白表达。⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果:自发性高血压大鼠18只均进入结果分析。①高血压组大鼠左心室心肌组织Bcl-2蛋白表达明显低于对照组(t=2.405,P<0.05),而p53和Bax蛋白表达明显高于对照组(t=14.51,10.26,P<0.01)。丹参酮组Bcl-2表达明显高于高血压组(t=2.359,P<0.05),而p53和Bax蛋白表达明显少于高血压组(t=11.74,7.13,P<0.01)。②高血压组大鼠的收缩压和左室质量指数明显高于对照组(t=6.68,3.84,P<0.01),左室质量指数明显高于丹参酮组(t=2.80,P<0.05)。结论:长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成,其机制可能与丹参酮ⅡA上调心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、下调Bax蛋白及抑制p53蛋白的表达有关。     

1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻模型大鼠E-钙黏素表达的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻大鼠E-钙黏素表达的影响。方法清洁级SD大鼠96只随机分为正常组、模型组、假手术组、干预组,各24只,模型组与干预组大鼠建立单侧输尿管梗阻模型,假手术组开腹后仅游离左输尿管。干预组于建模起给予1,25-二羟维生素D30.5μg/mL灌胃,1次/d,连用14d;余3组给予花生油1mL/d,1次/d,灌胃。4组分别于术后1,3,7,14d各处死6只大鼠,取左侧肾脏标本,观察肾脏病理改变及间质纤维化损害程度,免疫组织化学法检测4组大鼠E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达情况。结果与对照组比较,模型组E-钙黏素阳性表达量减少,转化生长因子-β1表达增多（P〈0.01）;干预组E-钙黏素表达量增多,TGF-β1表达减少（P〈0.05）。肾小管间质病理损伤程度与E-钙黏素呈负相关（r=-0.833,P〈0.01）,与转化生长因子-β1呈正相关（r=0.806,P〈0.01）;E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达间呈负相关（r=-0.871,P〈0.01）。结论 1,25-二羟维生素D3可能通过维持肾组织E-钙黏素的表达、抑制肾组织转化生长因子-β1的表达来减轻肾脏纤维化。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸抑制大鼠肾间质纤维化的研究

目的观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致大鼠肾间质纤维化的的改善作用并探讨其机制。方法将雄性Wistar大鼠36只随机分为假手术组,UUO组,处理组(AcSDKP+UUO),每组各12只。于造模第3、14d各处死大鼠6只,取其梗阻侧肾脏组织行HE染色,光镜下观察肾组织病理改变,计算肾间质纤维化指数。免疫组织化学方法检测其各组肾脏组织转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及a平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)表达,RT-PCR方法检测TGF-β1及a-SMA mRNA含量。结果与假手术组相比,各时间点UUO组大鼠肾脏病理损害进行性加重,AcSDKP处理后可明显减轻UUO组大鼠肾间质纤维化程度(P0.05);免疫组化染色及RT-PCR显示:TGF-β1、a-SMA的蛋白及mRNA表达UUO组和处理组明显多于假手术组,但处理组较UUO组明显减轻(P0.05)。结论 N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)可通过抑制TGF-β1及a-SMA表达,进而抑制大鼠肾间质纤维化,减缓肾纤维化的病程进展。     

1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻模型大鼠E-钙黏素表达的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3对单侧输尿管梗阻大鼠E-钙黏素表达的影响。方法清洁级SD大鼠96只随机分为正常组、模型组、假手术组、干预组,各24只,模型组与干预组大鼠建立单侧输尿管梗阻模型,假手术组开腹后仅游离左输尿管。干预组于建模起给予1,25-二羟维生素D30.5μg/mL灌胃,1次/d,连用14d;余3组给予花生油1mL/d,1次/d,灌胃。4组分别于术后1,3,7,14d各处死6只大鼠,取左侧肾脏标本,观察肾脏病理改变及间质纤维化损害程度,免疫组织化学法检测4组大鼠E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达情况。结果与对照组比较,模型组E-钙黏素阳性表达量减少,转化生长因子-β1表达增多(P<0.01);干预组E-钙黏素表达量增多,TGF-β1表达减少(P<0.05)。肾小管间质病理损伤程度与E-钙黏素呈负相关(r=-0.833,P<0.01),与转化生长因子-β1呈正相关(r=0.806,P<0.01);E-钙黏素和转化生长因子-β1的表达间呈负相关(r=-0.871,P<0.01)。结论 1,25-二羟维生素D3可能通过维持肾组织E-钙黏素的表达、抑制肾组织转化生长因子-β1的表达来减轻肾脏纤维化。     

压力超负荷早期大鼠心肌组织转化生长因子β1及c-myc和c-jun mRNA表达的差异

目的:观察转化生长因子β1,c-myc和c-jun癌基因mRNA在压力超负荷早期大鼠心肌中的表达。方法:实验于2004-11/2005-07在华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病科老年医学实验室完成。选择雄性Wistar大鼠50只,随机数字表法分为压力超负荷组和假手术组,每组25只。采用腹主动脉缩窄法建立左室压力超负荷模型,分子杂交系列观察心肌组织转化生长因子β1,c-myc和c-jun癌基因mRNA的变化,并用计算机图像分析技术定量分析,以假手术组作对照。结果:纳入动物50只,均进入结果分析。①压力超负荷组转化生长因子β1mRNA术后4h开始升高,8h达峰值,48h降至术前水平(分别为1.08±0.30,5.83±0.40,0.90±0.61,0.86±0.22);c-myc和c-jun癌基因mRNA均于术后8h开始升高,24h达峰值,48h降至术前水平(c-mycmRNA分别为4.25±0.97,5.94±1.42,0.80±0.43,0.68±0.11;c-junmRNA分别为4.36±0.55,5.91±1.66,0.93±0.35,0.79±0.12)。②假手术组各时间点转化生长因子β1,c-myc,c-jun癌基因mRNA斑点积分光度均无明显差别。结论:压力超负荷早期大鼠心肌组织中转化生长因子β1mRNA先于c-myc及c-junmRNA升高,提示转化生长因子β1可能是比c-myc及c-jun更早表达的信号因子。     

压力负荷增加大鼠模型左室心肌血管紧张素Ⅱ-1型受体mRNA及其受体蛋白的改变

目的:观察压力负荷增加大鼠左室心肌血管紧张素Ⅱ-1型(AT1)受体mRNA及其受体蛋白的表达,探讨压力负荷增加大鼠左室重构的机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组和模型组,利用腹主动脉缩窄法制备压力负荷增加大鼠模型,造模8周后观察左室重量指数、左室心肌细胞超微结构的改变;采用RT-PCR的方法检测心肌组织AT1 mRNA表达,采用免疫组织化学染色方法观察心肌组织AT1受体蛋白的改变.结果:与假手术组比较,模型组LVMI(‰)明显增加(P<0.01),左室心肌亚细胞发生改变,左室心肌组织AT1mRNA表达水平模型组较假手术组升高(P<0.01),左室心肌组织AT1受体蛋白较假手术组上升(P<0.1).结论:压力负荷增加大鼠在造模8周已形成左室肥厚的病理生理改变,这种左室肥厚的改变可能与左室心肌AT1基因转录与翻译水平均有关.     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左心室肥厚心肌细胞凋亡蛋白的作用

目的：观察丹参的脂溶性成分丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠左室肥厚心肌凋亡蛋白的作用。方法：实验于2005—03／2005—07在华中科技大学同济医学院急诊科实验室完成。①选用8周龄自发性高血压大鼠18只。随机将大鼠分为3组：对照组、丹参酮组、高血压组，每组6只。②对照组：饲养至第8周处死；丹参酮组：从饲养至第8周开始，丹参酮ⅡA（中国药品生物制品检定所，批号S02001300，1kg/包）以1mL／（kg&;#183;d）剂量腹腔注射，持续用药10周，第18周处死；高血压组：以相同容量蒸馏水替代丹参酮ⅡA腹腔注射，余同丹参酮组。③用药结束后用MRS2Ⅲ型大鼠电脑血压心率测量仪测量大鼠清醒状态下尾动脉收缩压。④处死后。迅速取出心脏，称量左心室（包括室间隔）的湿重，计算左室质量指数[左室质量（mg）／体质量（g）]。⑤采用免疫印迹法检测心肌细胞Bcl-2，Bax及p53蛋白表达。⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果：自发性高血压大鼠18只均进入结果分析。①高血压组大鼠左心室心肌组织Bel-2蛋白表达明显低于对照组（t=2．405，P〈0．05）。而p53和Bax蛋白表达明显高于对照组（t=14．51，10．26，P〈0．01）。丹参酮组Bcl-2表达明显高于高血压组（t=2．359，P〈0．05），而p53和Bax蛋白表达明显少于高血压组（t=11．74，7．13，P〈0．01）。②高血压组大鼠的收缩压和左室质量指数明显高于对照组（t=6．68，3．84,P〈0．01），左室质量指数明显高于丹参酮组（t=2．80，P〈0．05）。结论：长期应用丹参酮ⅡA治疗可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成，其机制可能与丹参酮ⅡA上调心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、下调Bax蛋白及抑制p53蛋白的表达有关。