去氢骆驼蓬碱衍生物DH-004大鼠在体肠吸收动力学研究

目的考察去氢骆驼蓬碱衍生物DH-004大鼠在体肠吸收动力学特征,探讨其可能的吸收机制。方法建立UPLC法测定灌流液中DH-004浓度,用大鼠在体单向肠灌流模型考察不同质量浓度的DH-004在不同肠段的吸收特征。结果 DH-004在全肠段均有吸收。20.0μg·mL^-1 DH-004在十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收速率常数(K_a)分别为(11.66±3.84)×10^-2,(10.85±2.65)×10^-2,(7.48±1.70)×10^-2和(4.75±1.14)×10^-2 min,药物表观渗透系数(P_app)分别为(1.47±0.33)×10^-2,(1.55±0.20)×10^-2,(1.25±0.10)×10^-2和(0.98±0.22)×10^-2 cm·min^-1。DH-004在十二指肠段与空肠段的K_a均明显大于其在回肠和结肠的K_a(均P<0.05)。结论 DH-004在大鼠小肠全段有不同程度地吸收,十二指肠和空肠可能为其主要吸收部位。     

复方丹参滴丸对阿司匹林大鼠在体肠吸收的影响研究

目的 建立阿司匹林的HPLC分析方法,研究复方丹参滴丸对阿司匹林大鼠肠吸收的影响。方法 采用大鼠在体肠单向灌流吸收实验模型,应用重量法校正灌流液体积,HPLC测定灌流液中阿司匹林浓度,计算阿司匹林肠吸收参数。结果 阿司匹林组、阿司匹林与复方丹参滴丸联合灌流组、复方丹参滴丸诱导组阿司匹林吸收速率常数(Ka)分别为1.05×10^-2,1.44×10^-2,2.29×10^-2 min^-1,吸收渗透系数(Papp)分别为0.219×10^-3,0.304×10^-3,0.504×10^-3 cm·min^-1。结论 复方丹参滴丸对阿司匹林大鼠肠吸收有明显影响,能促进阿司匹林的肠吸收。     

二阿魏酰基甲烷纳米乳的肠吸收和药代动力学研究

目的 考察二阿魏酰基甲烷(CM)水包油纳米乳(CCON)在大鼠的在体肠吸收特性和药代动力学特征。方法 建立单向肠灌流模型,各胃肠段灌入CM和CCON混悬液,计算吸收速率常数(K_a),研究其在大鼠胃肠道内的吸收特性。SD大鼠口服给药CM和CCON,于预先设定的时间点取血,测量血浆中CM的浓度,绘制浓度时间曲线,用DAS软件计算CCON的主要药代动力学参数。结果 CCON在大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠的K_a分别为(0.22±0.06)×10^-7,(30.60±0.36)×10^-7,(17.33±0.42)×10^-7,(28.45±0.35)×10^-7和(14.97±0.29)×10^-7·h^-1,游离CM在大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠和结肠的K_a分别为(0.05±0.03)×10^-7,(17.40±0.42)×10^-7,(12.97±0.23)×1...     

栀子环烯醚萜苷鼻腔给药的吸收特性

目的研究栀子环烯醚萜苷类成分鼻腔给药的吸收特性,为其鼻腔给药制剂设计提供依据。方法采用Franz扩散池,选用新鲜猪鼻黏膜为渗透屏障,以栀子苷为测定指标,HPLC测定含量,进行渗透试验;采用大鼠鼻腔循环灌流实验,以PBS溶液(pH7.4)作为鼻腔循环液,HPLC测定栀子苷,进行在体鼻黏膜吸收试验。结果栀子苷表观渗透系数Papp为(2.01±0.23)×10 5cm 2.s 1;药物稳态流量Jss为(1.61±0.18)×10 4μg.cm 2.s 1,透黏膜扩散属于以膜两侧浓度差为动力的被动扩散。栀子苷大鼠在体鼻黏膜吸收动力学方程lnC=1.165 7 0.001 6t,r=0.991 4,k=(1.6±0.021)×10 3min 1。结论栀子环烯醚萜苷可经鼻吸收,可制成经鼻给药的新制剂用于脑部疾病的防治。     

HPLC法同时测定感冒疏风片中5个成分的含量

目的 建立一种高效液相色谱法同时测定感冒疏风片中芍药苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸、甘草酸5个成分的含量。方法 采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C₁₈(150 mm×4.6 mm, 4μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长240 nm(0～14 min,检测芍药苷;25～30 min,检测5-O-甲基维斯阿米醇苷)、275 nm(14～25 min,检测甘草苷;30～40 min,检测肉桂酸)、250 nm(40～70 min,检测甘草酸);进样量10μL。结果 芍药苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、肉桂酸、甘草酸的线性范围分别为102.8～1 028μg·mL^-1(r=0.999 8)、16.91～169.1μg·mL^-1(r=0.999 9)、6.131～61.31μg·mL^-1(r=0.999 9)、1.927～19.27μg·mL^-1...     

L-5-甲基四氢叶酸钙在SD大鼠体内的药代动力学研究

目的建立测定SD大鼠血浆中L-5-甲基四氢叶酸钙(5-MTHF)浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS法),初步考察5-MTHF在SD大鼠体内的药代动力学(PK)参数。方法给予6只雄性SD大鼠口服1.5×10^-2mmol·L^-1·kg^-15-MTHF,采集血样用于HPLC-MS/MS分析。用蛋白沉淀法处理血浆样本,色谱柱:Grace Altima HP C₁₈,流动相A:甲醇-乙腈-异丙醇-乙醇-水-甲酸-二甲基亚砜(25∶25∶25∶25∶0.1∶1);流动相B:甲醇-水-甲酸(10∶90∶0.1);梯度洗脱:0.40 mL·min^-1。考察该方法的线性范围、准确度和精密度、回收率、基质效应及稳定性。用WinNonlin软件计算5-MTHF在SD大鼠体内的PK参数。结果 5-MTHF在10.00~1.00×10~4ng·mL^-1内线性关系良好,回归方程为y=1.01×10^-3x+1.82×10^-3(r=0.998 3),日内和日间的准确性和精密度、回收率、基质效应及稳定性符合要求。5-MTHF在SD大鼠体内的PK参数:不扣除本底5-MTHF浓度值的t_1/2为(15.23±5.76)h,AUC_0~t为(2788.52±348.86)ng·mL^-1·h,扣除本底5-MTHF浓度值的t_1/2为(1.57±0.34)h,AUC_0~t平均值为(971.80±237.58)ng·mL^-1·h。结论本研究建立了一种灵敏的、准确的用于SD大鼠血浆中5-MTHF浓度测定的HPLC-MS/MS法。     

诺氟沙星-磺丁基醚-β-环糊精包合物在大鼠体内的药动学研究

目的 研究诺氟沙星(NFX)-磺丁基醚-β-环糊精(SBE-β-CD)包合物在大鼠体内的药动学行为。方法 大鼠分别灌胃给予NFX及其SBE-β-CD包合物,采用HPLC测定给药后不同时间的血药浓度并计算有关药动学参数。结果 NFX及其SBE-β-CD包合物的Cmax分别为(3.57±2.46)μg·mL^-1和(6.92±4.03)μg·mL^-1;AUC0-∞分别为(9.94±5.72)μg·h·mL^-1和(14.63±5.39)μg·h·mL^-1,两组间差异有统计学意义(P<0.05);包合物相对于原药的生物利用度为147.2%。结论 NFX制成SBE-β-CD包合物后,其在大鼠体内的吸收速度有所加快,血药峰浓度以及生物利用度显著增加。     

UPLC测定消旋山莨菪碱片中的有关物质

目的 采用UPLC-PDA法测定消旋山莨菪碱片中的有关物质。方法 采用C₁₈柱,以0.01 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液(含0.15%三乙胺溶液,磷酸调pH6.5)-甲醇(70:30)为流动相,流速0.2 mL·min^-1,检测波长220 nm。结果 消旋山莨菪碱、托品酸、阿托酸6β-羟基-3α-托品酯(杂质Ⅰ)的线性回归方程分别为：Y_{消旋山莨菪碱}=2.1391×10⁴X+1.4348×10³、Y_托品酸=6.9081×10⁴X+5.2007×10⁴、Y_杂质Ⅰ=4.8162×10⁴X-6.6659×10⁴,5.304～106.080μg·mL^-1消旋山莨菪碱、5.215～52.150μg·mL^-1托品酸、5.300～53.000μg·mL^-1杂质Ⅰ与峰面积呈良好的...     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中他达拉非的浓度

目的 建立一种测定人血浆中他达拉非浓度的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)法。方法 用蛋白沉淀法对样品进行前处理。色谱柱：Waters ACQUITY UPLC^TM BEH C₁₈(2.1 mm×50.0 mm, 1.7μm),流动相：100%水含2 mmol·L^-1醋酸铵和0.1%甲酸-95%乙腈含2 mmol·L^-1醋酸铵和0.1%甲酸,流速：0.50 mL·min^-1,柱温：40℃,进样量：10μL。用电喷雾离子化源,正离子模式,多反应监测。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、稀释效应和稳定性。结果 他达拉非在0.80～500.00 ng·mL^-1内,线性关系良好,其标准曲线为y=1.91×10^-2x+1.17×10^-3(r=0.998 8),定量下限为0.80 ng·mL^-1<...     

UPLC-MS/MS法同时快速测定消渴丸中3种成分的含量

目的 建立一种UPLC-MS/MS法同时快速测定消渴丸中葛根素、格列本脲、五味子酯甲含量的方法。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH柱(C₁₈ 2.1×50 mm 1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(含10 mmol·L^-1乙酸铵)-乙腈为流动相梯度洗脱,流速：0.3 mL·min^-1,柱温30℃,进样量1μL。质谱采用ESI(电喷雾离子源),以正离子多反应监测模式定量分析。结果 葛根素、格列本脲、五味子酯甲的线性范围分别为0.2054～5.135μg·mL^-1、0.02156～0.5390μg·mL^-1、0.02066～0.5165μg·mL^-1(r²为0.99315～0.99920),平均加标回收率分别为98.5%、94.2%、93.3%,RSD为2.97%、2.04%、3.45%(n=6)。结论 该方法操作方便、快捷、灵敏度高、准确度好,可一次性实现多个不同成分的检测。     

黄连降脂合剂的质量标准研究

目的建立黄连降脂合剂的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对黄连降脂合剂中黄连、三七进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定黄连降脂合剂中葛根素。色谱条件:色谱柱为C₁₈分析柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(25:75),检测波长为250 nm,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30℃,进样量为10μL。结果在薄层色谱中能检出盐酸小檗碱和三七,葛根素在27.15～135.75μg·mL^-1范围内线性关系良好,加样回收率为97.00%(RSD为1.62%),3批次样品平均含量为7.01 mg·mL^-1。结论所建立的方法稳定可靠,可有效控制该合剂的质量。     

HPLC法检测依折麦布中的有关物质

目的:建立采用高效液相色谱法测定依折麦布有关物质。方法:采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5.0μm)色谱柱,以0.05 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-乙腈-四氢呋喃(60∶20∶20)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长232 nm,进样体积20μL。结果:依折麦布峰与各杂质峰分离良好;依折麦布峰与杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E与杂质F的线性范围分别为0.409～4.090μg·mL^-1(r=0.995 0)、0.402～4.020μg·mL^-1(r=0.998 1)、0.408～4.080μg·mL^-1(r=0.999 1)、0.411～4.110μg·mL^-1(r=0.999 3)、0.4050～4.050μg·mL^-1(r=0.998 1)、0.541～5.41μg·mL^-1(r=0.998 5)、0.657～6.57μg...     

培哚普利叔丁胺中差向异构体分离测定方法研究

目的:建立一种快速液相色谱方法分离培哚普利叔丁胺及(±)-1”-差向-培哚普利叔丁胺(差向异构体),并对该差向异构体进行测定。方法:采用Agilent Poroshell CS-C₁₈(100 mm×3.0 mm, 2.7μm)色谱柱,以0.15%庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节pH 2.0)-乙腈/戊醇(217∶3)(82∶18)为流动相,流速0.8 mL·min^-1,柱温50℃,进样量2μL,在215 nm波长处分离培哚普利及(±)-1”-差向-培哚普利。结果:培哚普利及(±)-1”-差向-培哚普利在25 min内依次出峰,峰谷比和分离度满足测定要求。培哚普利叔丁胺及其差向异构体均在2～2 000μg·mL^-1范围内线性关系良好(r>0.999),定量限(S/N约10)和检测限(S/N约3)均分别约为1.0μg·mL^-1和0.3μg·mL^-1。差向异构体低、中、高3个浓度的平均加样回收率为97.2%(RSD=1.8%,n=9)。10批样品中(±)-1”差向-培哚普利叔丁胺含量...     

木犀草素对大鼠肠系膜上动脉舒张作用的影响

目的 观察木犀草素对大鼠肠系膜上动脉的舒张作用并探讨其作用机制。方法 采用离体血管环实验方法，1×10^-6.1、1×10^-5.6、1×10^-5.1、1×10^-4.6、1×10^-4.1、1×10^-3.6、1×10^-3.1 mol·L^-1木犀草素加药组为实验组，同时设立等体积累加生理盐水组为对照组。使用Myograph动态描记系统分别记录高K⁺、苯肾上腺素(PE)对大鼠离体血管环的收缩作用；观察不同浓度木犀草素对高K⁺、PE预收缩血管环的舒张作用；同时采用多种工具药干预，探讨木犀草素舒张血管作用与内皮、钾通道及钙通道的相关性。结果 木犀草素对高K⁺和PE预收缩的内皮完整的微动脉血管最大舒张率分别为(42.75±3.13)%和(82.64±1.80)%;其对去内皮微动脉血管环的最大舒张率为(94.52±0.76)%;在灌注压力存在的条件下，其对高K     

miR-195-3p在同型半胱氨酸诱导的肝氧化应激损伤中的调控作用研究

目的 探讨miR-195-3p在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的肝氧化应激损伤中的作用。方法 小鼠分为CBS^+/+组、CBS^+/-组、Lv-miR-195-3p组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射病毒滴度为2×10⁷ TU·mL^-1的miR-195-3p重组慢病毒)、Lv-GFP组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射等体积病毒滴度为1×10⁸ TU·mL^-1的绿色荧光蛋白慢病毒)和PBS组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射等体积磷酸盐缓冲液),每组10只。体外培养人源肝细胞(HL-7702),分为对照组(0μmol·L^-1 Hcy)、Hcy组(100μmol·L^-1 Hcy)、mimic-NC组(转染模拟物对照组)、mimic-NC+Hcy组(转染模拟物对照组+100μmol·L^-1 Hcy)、miR-195-3p-mimic组(转染miR-1...     

双内标高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中美罗培南浓度

目的建立快速测定人血浆中美罗培南质量浓度的方法。方法以乙腈为沉淀剂,经蛋白沉淀法处理,进高效液相串联质谱系统(HPLC-MS/MS)分析,色谱柱:Waters XBrige C₁₈(2.1 mm×50 mm,3.5μm),流动相:乙腈(含0.1%甲酸)-水(含0.1%甲酸),流速:0.4 mL·min^-1,柱温:40℃,进样量:3μL,电喷雾电离,用多反应监测模式,定量分析离子对分别为m/z 384.3→140.6(美罗培南)、237.1→194.1(内标卡马西平),285.1→193.0(内标地西泮)。结果以卡马西平为内标标准曲线方程为y=2.95×10^-2x+1.46×10^-2(r=0.997 2),以地西泮为内标标准曲线方程为y=0.19x+5.21×10^-3(r=0.997 4)。线性范围为0.20～50.00μg·mL^-1。批间和批内精密度均在4.46%～9.52%,准确度均在94.12%～110.00%,平均提取回收率均在92.50%～104....     

虫草素及其代谢物3′-脱氧肌苷在大鼠体内的药动学

目的 建立血浆虫草素及代谢物3’-脱氧肌苷(3′-Deo)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定方法,研究其在大鼠体内的药动学。方法 以2-氯腺苷(2-Chl)为内标,甲醇沉淀蛋白,色谱柱为Kinetex C₁₈(3 mm×100 mm, 2.6μm),流动相为水(5 mmol·L^-1乙酸铵)-甲醇溶液,梯度洗脱。电喷雾离子源,正离子多反应监测。研究大鼠灌胃虫草素(10 mg·kg^-1)后血浆虫草素及3′-Deo药动学。结果 虫草素和3′-Deo分别在0.5～100和1～200 ng·mL^-1范围内线性关系良好,定量下限分别为0.5和1 ng·mL^-1。大鼠灌胃虫草素后,血浆虫草素浓度较低,主要转化为3′-Deo。虫草素和3′-Deo的峰浓度(C_max)分别为(5.4±3.4)和(142.0±50.0) ng·mL^-1,血药浓度-时间曲线下面积(AUC_{0-360 min})分别为(658.4±459.3)和(...     

HPLC法同时测定乙肝扶正胶囊中丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量

目的:建立同时测定乙肝扶正胶囊中丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A含量的高效液相色谱法。方法:采用Agilent ZORBAX-SB C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相，梯度洗脱，检测波长为270 nm。结果:丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮Ⅱ_A分别在7.82～313.01μg·mL^-1(r²=0.999 8)、0.087～17.324μg·mL^-1(r²=1.000 0)、0.067～13.468μg·mL^-1(r²=1.000 0)范围内线性关系良好，平均回收率分别为103.99%、97.76%、100.88%,RSD均≤1.00%。测定样品83批次，丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮IIA的含量分别为0.16～4.06、0.00～103.53、0.00～126.49μg·粒^-1。结论:本方法为提升乙肝扶正胶囊的质量控制手段提供了理论依...     

LC-MS/MS法同时测定小儿豉翘清热颗粒中13个成分的含量

目的:建立LC-MS/MS法同时测定小儿豉翘清热颗粒中栀子苷、芍药内酯苷、芍药苷、连翘酯苷A、甘草苷、黄芩苷、连翘苷、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、大黄酸、甘草酸共13个成分的含量。方法:采用Poroshell 120 SB-C₁₈色谱柱(100 mm×3.0 mm, 2.7μm),以0.1%甲酸水与甲醇-乙腈(1∶1)为流动相,梯度洗脱,流速0.45 mL·min^-1,柱温40℃;采用电喷雾(ESI)离子源,多反应监测模式(MRM)进行负离子扫描。结果:栀子苷质量浓度在9～900 ng·mL^-1,芍药内酯苷在1～100 ng·mL^-1,芍药苷在12～1 200 ng·mL^-1,连翘酯苷A在12～1 800 ng·mL^-1,甘草苷在1～100 ng·mL^-1,黄芩苷在8～800 ng·mL^-1,连翘苷在5～500 ng·mL^-1,千层纸素A-7-O-β...     

贝达喹啉治疗药物浓度监测方法的建立与应用

目的：建立贝达喹啉人体血药浓度的测定方法并应用。方法：血浆样本以舍曲林为内标经甲醇沉淀蛋白后,采用C₁₈色谱柱甲醇^-10 mmol·L^-1甲酸铵溶液梯度洗脱分离,电喷雾正离化,多反应监测模式(MRM)定量测定贝达喹啉和舍曲林的离子反应分别为m/z 555.2→229.0和m/z 306.2→159.0。结果：贝达喹啉检测质量浓度的线性范围为0.010～3.0μg·mL^-1(r=0.9995),定量下限为0.010μg·mL^-1;方法经验证符合生物样本分析要求。用于6例耐多药结核病(MDR-TB)患者贝达喹啉治疗血药浓度监测,患者在治疗第7天血浆中贝达喹啉血药峰浓度C_max为(3.48±0.70)μg·mL^-1,峰时间t_max为(5.33±1.03)h,半衰期t_1/2为(18.73±6.39)h;血药浓度曲线下面积AUC_last为(50.16±9.74)μg·h·mL