芍药苷通过JAK2/STAT3信号通路抑制高糖诱导的RAW264.7巨噬细胞激活

目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)抑制高糖(high glucose,HG)诱导的RAW264.7巨噬细胞激活是否通过JAK2/STAT3信号通路。方法体外HG激活巨噬细胞RAW264.7, PF及JAK2/STAT3干扰RNA(siRNA)进行干预,分别检测巨噬细胞的增殖、趋化、炎症因子表达分泌、JAK2和STAT3蛋白表达及其磷酸化水平。结果在HG刺激下,巨噬细胞趋化功能增强,诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及单核细胞趋化因子1(MCP-1)的mRNA表达,以及细胞培养基中TNF-α、IL-1β、MCP-1分泌水平均增加(P<0.05,P<0.01),JAK2、STAT3蛋白磷酸化表达明显增加(P<0.05)。JAK2/STAT3基因沉默可抑制HG刺激下iNOS和炎症因子(TNF-α、IL-1β、MCP-1)mRNA水平和细胞培养液中炎症因子的分泌,抑制JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。PF能明显下调HG诱导的巨噬细胞趋化迁徙、炎症因子表达分泌及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论 HG可通过诱导JAK2/STAT3信号通路刺激巨噬细胞激活,PF抑制巨噬细胞激活的机制主要与抑制JAK2/STAT3信号通路相关。     

川芎嗪对脂多糖诱导内皮细胞花生四烯酸通路炎症反应的影响

目的研究川芎嗪对脂多糖(LPS)诱导内皮细胞花生四烯酸(AA)通路炎症反应的影响,为拓展川芎嗪临床适应症提供实验依据。方法在LPS(1 mg.L-1,2 h)诱导的原代培养人冠脉内皮细胞上,观察川芎嗪(1和10μmol.L-1,6 h)对COX-2、5-LOX和FLAP蛋白表达的影响;并观察加入LPS同时给予p-p38MAPK抑制剂SB203580(20μmol.L-1,6 h)或JAK2抑制剂AG490(20μmol.L-1,6 h)对上述蛋白表达及p-p38MAPK或p-STAT3蛋白表达的影响。结果川芎嗪可抑制COX-2、5-LOX和FLAP蛋白表达,抑制MAPK和STAT3通路磷酸化激活。结论川芎嗪靶向内皮细胞,抑制AA通路炎症反应,抑制MAPK和JAK2/STAT3通路激活。     

氧化苦参碱对脂多糖诱导的胰腺星状细胞NOD样受体蛋白3活化的影响

目的 研究氧化苦参碱（OM）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠胰腺星状细胞株（PSCs）NOD样受体蛋白3（NLRP3）活化的影响。方法 通过设置不同剂量（0、2.5、5、10、20、40 μg/mL）的LPS并设置相同剂量（10 μg/mL）的LPS刺激LTC14细胞不同时间（0、1、3、6、9、12 h）,利用Western blotting检测技术,考察LPS引起炎性小体活化的量效关系;使用OM、Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）抑制剂AG490干预LPS诱导的LTC14细胞株后,通过Westernblotting技术检测Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3（JAK2/STAT3）信号通路中相关分子以及NLRP3炎性小体相关蛋白表达的变化。结果 与对照组比较,LTC14细胞接受不同浓度的LPS刺激后JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1、白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白表达呈显著增高趋势;与对照组比较,LTC14细胞接受相同浓度LPS刺激不同时间后JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1、IL-1β蛋白表达呈显著增高趋势;与LPS组对比,OM和LPS共同处理组、AG490和LPS共同处理组JAK2、STAT3、NLRP3、caspase1及IL-1β的蛋白表达显著降低。结论 LPS呈一定的时间-剂量关系激活LTC14细胞JAK2/STAT3信号通路及NLRP3炎性小体;OM可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路起到抑制NLRP3炎性小体活化的作用。     

淡豆豉异黄酮对增殖血管平滑肌细胞JAK2/STAT3信号转导通路的影响

目的探讨淡豆豉异黄酮对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖及Janus激酶2-细胞信号转导及转录活化因子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响。方法建立AngⅡ诱导VSMC增殖模型,MTT法检测VSMC增殖活性;RT-PCR法检测AngⅡ1型受体(angiotensin Ⅱreceptor1,AT1R)mRNA表达;Westernblot法检测JAK2/STAT3信号通路蛋白JAK2,STAT3及其磷酸化表达水平。结果100、200μg·L-1淡豆豉异黄酮可明显抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,并明显下调AT1R mRNA表达水平;200μg·L-1淡豆豉异黄酮可明显下调磷酸化JAK2、磷酸化STAT3的表达。结论淡豆豉异黄酮可抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖,其机制可能与下调AT1R表达,阻断JAK2/STAT3信号通路的磷酸化有关。     

黄芩苷对脂多糖诱导的人牙周膜干细胞增殖、迁移作用及机制

目的 探究黄芩苷对脂多糖（LPS）诱导的人牙周膜干细胞（hPDLSCs）增殖、迁移及Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的调控作用。方法 将hPDLSCs分为对照组、LPS组、黄芩苷不同浓度（0.1、1、10 mg/L）组,采用ELISA法和CCK-8法测定细胞炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)]含量和细胞活力,以筛选最适黄芩苷浓度并进行后续通路验证实验。随后将细胞分为对照组、LPS组、最适黄芩苷浓度组、抑制剂组（10μg/mL LPS+1 mg/L黄芩苷+3μmol/L JAK2/STAT3通路抑制剂AG490）,干预24 h后检测hPDLSCs增殖率、凋亡率、迁移率、侵袭细胞数、细胞周期素D1(Cyclin D1)、胱天蛋白酶3(caspase-3)mRNA和蛋白表达及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果 根据细胞炎症因子含量和细胞活力结果选择1 mg/L为黄芩苷最适浓度。与对照组比较,LPS组细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数、Cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平显著降低,细胞...     

肝细胞生长因子对高糖刺激的系膜细胞GSK-3β和STAT3表达的影响

目的观察肝细胞生长因子(HGF)对高糖环境下系膜细胞糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和信号传导及活化转录因子3(STAT3)表达的影响。方法以大鼠系膜细胞为实验对象,给予HGF和高糖干预,实验中采用PI3K、p38MAPK、PKC、JAK2、ERK1/2抑制剂阻断其信号通路。系膜细胞转染野生型WT-GSK-3β,组成性激活型S9A-GSK-3β和显性负突变型KM-GSK-3β质粒,改变GSK-3β活性。Western印迹方法检测GSK-3β、pGSK-3β、STAT3、pSTAT3蛋白表达水平。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液中单核细胞趋化因子(MCP-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白含量。结果 HGF能明显改善高糖刺激引起的磷酸化GSK-3β(Ser9)蛋白降低及抑制p-STAT3蛋白表达。c-Met抑制剂能完全抑制HGF对磷酸化GSK-3β蛋白的调节作用,PI3K、PKC、JAK2抑制剂能部分抑制HGF对磷酸化GSK-3β蛋白的调节作用,而p38MAPK和ERK1/2抑制剂对HGF的作用无影响。高表达S9A-GSK-3β则剥夺了HGF对pSTAT3蛋白的抑制效应,及降低炎症因子MCP-1、ICAM-1的表达。结论 HGF可通过HGF受体及PI3K、PKC、JAK2信号通路介导高糖诱导系膜细胞GSK-3β和STAT3蛋白磷酸化,HGF拮抗高糖环境下炎症因子表达可能与GSK-3β蛋白失活有关。     

小檗碱通过JAK2/STAT3信号通路对食管癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

摘要：目的:研究小檗碱通过JAK激酶2/信号转导及转录激活蛋白3（JAK2/STAT3）信号通路对食管癌细胞的抑制作用。方法:选用50μmol·L-1和100μmol·L-1两个浓度小檗碱处理人食管癌细胞系KYSE170,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖能力,细胞迁移实验（Transwell）检测细胞迁移与侵袭能力,同时采用Western blot法检测JAK2/STAT3信号通路蛋白以及细胞周期和转移侵袭相关蛋白表达水平。结果:与对照组相比,不同剂量小檗碱处理组的KYSE170细胞的平均存活率、迁移细胞和侵袭细胞数目均显著降低（P＜0.05）;同时,小檗碱处理能显著抑制金属蛋白酶2（MMP-2）和9（MMP-9）、细胞周期蛋白D1（Cy-clinD1）蛋白表达（P＜0.05）,上调P21蛋白表达（P＜0.05）,同时下调JAK2和STAT3蛋白磷酸化水平（P＜0.05）。结论:小檗碱可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路激活,阻断食管癌细胞周期进程和促进凋亡,抑制食管癌细胞转移侵袭能力。     

JAK2/STAT3信号转导通路在子宫内膜异位症发病过程中的作用

目的 研究JAK2/STAT3信号转导通路在子宫内膜异位症 （EMS） 发展过程中的作用。方法 将60只大鼠随机分为假手术组、 模型组、 JAK2/STAT3通路抑制剂组 （AG组）, 每组20只。模型组、 AG组大鼠通过自身子宫内膜移植建立EMS模型。AG组造模前给予AG490 1 mg/kg, 手术后给予AG490 4 mg/kg, 每周2次, 连续4周; 模型组给予生理盐水。处理结束后记录各组大鼠异位内膜体积, 计算异位内膜生长抑制率, HE染色观察病理改变; 蛋白质印迹法 （Western blot） 检测内膜组织中p-JAK2、 JAK2、 p-STAT3、 STAT3蛋白表达水平。结果 治疗后AG组异位内膜组织生长发育不良, 异位内膜体积明显小于模型组, 异位内膜生长的抑制率为65.66%。Western blot结果显示, EMS模型大鼠异位内膜病灶中JAK2、 STAT3总蛋白及其磷酸化水平 （p-JAK2/JAK2、 p-STAT3/STAT3） 明显高于假手术组; 而 AG组大鼠异位内膜病灶中JAK2、 STAT3总蛋白及其磷酸化水平明显低于模型组。结论 JAK2/STAT3通路在EMS 发病过程中可能发挥了重要作用, 而抑制JAK2/STAT3信号通路则能够对EMS的治疗产生积极作用。     

JAK/STAT途径调节瘦素诱导的肝星状细胞Ⅰ型胶原基因的表达

目的研究瘦素对肝星状细胞(HSC)α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成的影响,探讨Janus激酶/信号传导及活化转录因子(JAK/STAT)信号传导通路在瘦素诱导的HSC胶原基因表达过程中的作用。方法采用RT-PCR法、ELISA法和Western blot法分别检测不同浓度的瘦素对人肝星状细胞株LX-2α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达、蛋白合成以及JAK1、STAT3磷酸化状态的影响;采用Western blot法和RT-PCR法分别观察JAK1抑制剂AG490对瘦素诱导的JAK1磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达的影响;采用Western blot法分别观察AG490、LX-2转染STAT3反义寡核苷酸(STAT3-ASON)对瘦素诱导的STAT3磷酸化状态的影响;应用RT-PCR法检测LX-2转染STAT3-ASON对瘦素诱导的α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达的影响。结果瘦素增加LX-2α1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成,呈剂量效应关系,当瘦素浓度为80μg·L-1时达到最大值;瘦素促进JAK1、STAT3磷酸化,呈时间效应关系;AG490完全阻断瘦素诱导的JAK1、STAT3磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA的表达;LX-2转染STAT3-ASON阻断瘦素诱导的STAT3磷酸化和α1(Ⅰ)型胶原mRNA的表达。结论瘦素通过增加HSCα1(Ⅰ)型胶原mRNA表达和蛋白合成而在肝纤维化发生发展过程中发挥重要的作用,JAK/STAT信号传导通路参与并调节该过程,AG490和LX-2转染STAT3-ASON可有效阻滞此传导途径。在人HSC中,活化的JAK1和STAT3信号可作为肝纤维化治疗新的分子靶点。     

灯盏花乙素对非小细胞肺癌细胞JAK/STAT信号通路的影响

目的 研究灯盏花乙素对非小细胞肺癌细胞JAK/STAT信号通路及其凋亡机制的影响。方法 培养非小细胞肺癌A549细胞,经不同浓度灯盏花乙素处理24 h后收集细胞。采用MTT法观察细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR法检测JAK2,STAT3,Pim1和Bcl-2的mRNA表达情况;Western blot检测JAK2和STAT3蛋白表达水平。结果 MTT法和流式细胞术结果显示,灯盏花乙素能降低A549细胞的存活率,促进其凋亡,并呈剂量依赖效应;RT-qPCR和Western blot结果显示,与对照组比较,灯盏花乙素各组JAK2,STAT3,Pim1和Bcl-2的mRNA表达降低,JAK2和STAT3蛋白水平下降,且与加入的灯盏花乙素浓度成反比。结论 灯盏花乙素可以促进非小细胞肺癌A549细胞凋亡,其机制可能是通过抑制JAK/STAT信号转导通路的激活,减少JAK2和STAT3蛋白的表达。     

3种活血化瘀中药复方含药血清对神经胶质瘤U251细胞JAK/STAT信号通路的影响

目的:评价3种活血化瘀中药复方含药血清对神经胶质瘤U251细胞侵袭行为及Janus激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(STAT)通路的影响。方法:将大鼠随机分为生理盐水组(5 m L/kg)、桃红四物汤组(5.7 g/kg)、血府逐瘀汤组(8.5 g/kg)和抵挡汤组(2.8 g/kg),以生药计,每天ig给药1次,连续10 d,末次给药2 h后制备10%含药血清培养液。以10%含药血清培养液干预U251细胞1周后,采用Transwell法检测细胞侵袭率,Western blot法检测细胞中金属基质蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测细胞中MMP-2、MMP-9 m RNA表达。结果:与空白血清比较,血府逐瘀汤含药血清能降低细胞侵袭率(P<0.05),下调细胞中MMP-2、MMP-9 m RNA及其蛋白表达以及细胞中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达(P<0.05或P<0.01);而桃红四物汤含药血清和抵挡汤含药血清作用后上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在3种活血化瘀中药复方中,血府逐瘀汤具有显著抑制U251细胞侵袭的能力;其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活,下调MMP-2、MMP-9基因及蛋白表达有关。     

山奈酚通过上调miR-340-5p减轻脊神经结扎大鼠的神经性疼痛

目的 探讨山奈酚(kaempferol, KAE)对脊神经结扎(spinal nerve ligation, SNL)大鼠神经性疼痛的作用机制。方法 采用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠星形胶质细胞建立炎症模型，用山奈酚单独或与miR-340-5p抑制剂共同处理细胞，RT-qPCR检测miR-340-5p表达，ELISA检测炎症因子白细胞介素(interleukin, IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平；荧光素酶报告基因实验验证AKT3与miR-340-5p的靶向关系；Western blotting检测自噬标志蛋白的表达。此外，建立SNL大鼠模型，山奈酚口服给药后，检测miR-340-5p表达，炎症因子以及自噬标志蛋白水平，并测定大鼠机械缩爪阈值和缩爪潜伏期。结果 在LPS诱导的星形胶质细胞中，山奈酚上调miR-340-5p表达，抑制IL-1β和TNF-α分泌，转染miR-340-5p抑制剂则逆转山奈酚对miR-340-5p表达的促进作用以及对炎症因子分泌的抑制作用。AKT3被确定是miR-...     

吴茱萸碱调控人结肠癌HCT-116细胞中JAK2/STAT3信号通路的机制研究

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人结肠癌HCT-116细胞中JAK2/STAT3信号通路的影响。方法EVO诱导人结肠癌HCT-116细胞2、4、6 h后,Hoechst法检测细胞核凋亡的形态学改变;6μmol·L-1的EVO作用于HCT-116细胞2、4和6 h,不同浓度的AG490作用于HCT-116细胞48 h,6μmol·L-1的EVO和50μmol·L-1的AG490分别诱导HCT-116细胞以及两药联合诱导HCT-116细胞6 h后,运用蛋白质印迹法检测各组细胞中JAK2、pJAK2、STAT3和p-STAT3的蛋白表达量。结果镜下观察EVO诱导后的细胞核浓缩聚集,染色质边缘化,并出现染色质碎裂成块,形成凋亡小体等形态学改变。Western blot结果显示:EVO可以明显下调HCT-116细胞内p-STAT3的表达;AG490可以抑制JAK2/STAT3信号通路的激活;EVO对JAK2/STAT3信号通路中p-STAT3蛋白的表达抑制效果较AG490更明显,且两药联合应用后抑制效果进一步增强。结论EVO对人结肠癌HCT-116细胞的抗肿瘤活性有可能是通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活来发挥的。     

钙激活的氯离子通道 A4通过抑制 JAK激酶 2/信号转导及转录激活蛋白 3信号通路对食管癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探讨钙激活的氯离子通道A4(CLCA4)对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭及JAK激酶2/信号转导及转录激活蛋白3(JAK2/STAT3)信号通路的影响.方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测正常人食管鳞状上皮细胞与人食管癌细胞中CLCA4的表达;将合成的CLCA4过表达载体及其对照分别转染至食管癌细胞Eca109,分别记作CLCA4过表达(pcDNA-CLCA4)组、CLCA4阴性对照(pcDNA-NC)组,并将未转染的细胞作为阴性对照(NC)组.四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖能力;细胞迁移实验(Transwell)检测细胞迁移及侵袭能力.JAK2/STAT3信号通路激活剂p-JAK2多肽对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.Western blotting检测细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)、依赖性激酶抑制因子(P21)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、JAK2、STAT3、磷酸化JAK激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(p-STAT3)的表达水平.结果 与Het-1A相比,人食管癌细胞KYSE170、Eca109、TE10中CLCA4 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与pcDNA-NC组比较,pcDNA-CLCA4组细胞存活率显著降低[(52.16±11.41)％比(99.57±13.49)％,P<0.05],迁移细胞数[(56.47±10.03)％比(112.49±13.52)％]与侵袭细胞数[(63.43±9.87)％比(123.47±16.58)％]减少(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9、p-JAK2、p-STAT3的表达水平降低(P<0.05),P21的表达水平升高(P<0.05);激活JAK2/STAT3信号通路可逆转CLCA4过表达对Eca109细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.结论 CL-CA4过表达可抑制食管癌细胞增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路活化有关.     

蛇床子素对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的探讨蛇床子素(Osthole,Ost)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤的作用及其机制。方法 45只雄性C57小鼠随机分为3组:正常对照组(对照组),LPS组,Ost+LPS组(Ost组),每组15只。各组小鼠于腹腔注射LPS或生理盐水(50 mg/kg)6 h后,测定PaO2、PaCO2、pH,IL-6、IL-1β、TNF-α表达,JAK2、STAT3、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量,观察肺组织病理变化和湿干比(W/D)。结果与LPS组比较,Ost组PaCO2、W/D,IL-6、IL-1β和TNF-α表达,p-JAK2和p-STAT3蛋白表达量和肺组织病理改变均明显降低,但PaO2和pH增高,而JAK2和STAT3表达无明显变化。结论 Ost预处理可通过抑制JAK2/STAT3信号通路激活而减轻LPS诱导的急性肺损伤。     

甲酰肽受体-2促进LPS诱导的BV-2细胞炎症反应

目的考察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活的BV-2细胞中甲酰肽受体-2(formyl peptide receptor-2,FPR2)的表达及其对细胞炎症反应的作用。方法 1 mg·L~(-1)的LPS刺激BV-2细胞12 h,建立体外小胶质细胞炎症模型。Western blot法检测FPR2的表达;分别用FPR2特异性激动剂MMK~(-1)和拮抗剂Boc-2孵育LPS-BV-2细胞后,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素1β(interleukin~(-1)β,IL~(-1)β)的分泌情况;Western blot法检测下游信号分子NF-κB的磷酸化;Transwell小室法考察LPS-BV-2细胞的迁移情况。结果 LPS可使BV-2细胞上的FPR2表达上调,并激活NF-κB。与LPS组比较,激动剂MMK~(-1)可促进LPS-BV-2细胞的TNF-α、IL~(-1)β的分泌和趋化,拮抗剂Boc-2可抑制这些反应。结论 LPS可诱导BV-2细胞膜表面FPR2表达上调,FPR2可使LPS诱发的炎症反应增强。     

褪黑素对PDGF诱导的肝星状细胞中JAK2/STAT3信号通路的影响

目的探讨褪黑素对血小板衍生生长因子(PDGF)诱导的肝星状细胞-T6(HSC-T6)JAK2/STAT3信号通路的影响。方法将HSC-T6细胞分为6组:对照组、模型组、实验组(褪黑素1 nmol·L^-1、1μmol·L^-1、0.1 mmol·L^-1)、抑制剂组(AG490为JAK2/STAT3通路的抑制剂),MTT实验检测褪黑素对PDGF激活的HSC-T6细胞增殖的影响;免疫组化和Western blot检测褪黑素HSC-T6细胞中p-JAK2、p-STAT3蛋白的表达。结果与对照组比较,PDGF能明显激活HSC-T6细胞增殖,明显上调HSC-T6细胞中p-JAK2、p-STAT3的表达;与模型组比较,褪黑素和抑制剂均可抑制PDGF激活的HSC-T6细胞增殖,显著下调p-JAK2、p-STAT3的表达。结论褪黑素可抑制PDGF诱导的HSC-T6的活化与增殖,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。     

基于miR-370-3p与JAK2/STAT3通路相关性探讨活血荣络方促缺血性脑卒中后血管新生的机制

目的基于miR-370-3p与JAK2/STAT3通路相关性探讨活血荣络方促缺血性脑卒中后血管新生的机制。方法将大鼠随机分为6组,MCAO/R法造模,灌胃给药7 d后免疫荧光染色观察脑组织CD31、vWF及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达;Western blot法检测脑组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白的表达;Real-time PCR(RT-PCR)法检测脑组织JAK2、STAT3 mRNA及miR-370-3p的表达;Pearson相关性分析脑组织miR-370-3p与JAK2/STAT3通路的相关性;培养大鼠脑血管平滑肌细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LncRNA-H19和miR-370-3p表达;荧光素酶报告实验检测LncRNA-H19和miR-370-3p的靶向关系。结果活血荣络方能增加缺血区微血管密度及VEGF平均荧光强度,上调JAK2、STAT3 mRNA,下调miR-370-3p表达,促进JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3表达,且miR-370-3p分别与JAK2、STAT3 mRNA呈高度负相关,此过程能被STAT3 SH2结构域抑制剂Stattic逆转。结论活血荣络方可能通过下调miR-370-3p的表达、激活JAK2/STAT3通路、促进下游VEGF的表达而刺激缺血性脑卒中后血管新生,从而改善神经功能缺损症状。     

JAK2/STAT3信号通路在人参皂苷Re预处理预防异丙肾上腺素致急性心肌缺血损伤中的作用

目的观察人参皂苷Re预处理对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心肌JAK2/STAT3通路的影响。方法应用异丙肾上腺素建立SD大鼠急性心肌缺血模型,将75只大鼠随机分为空白对照组(Control)、模型组(Model)、葛根素对照组(PUE)、Re高剂量组(Re-H,20 mg·kg^-1)、Re低剂量组(Re-L,10 mg·kg^-1)。Moor激光血流成像系统观测各组大鼠心脏表面血流值;ELISA法测定各组大鼠心肌中CK、LDH、SOD、MDA、GSH的含量;免疫组化法检测Bax、Bcl-2蛋白表达;Western blot方法检测各组大鼠心肌JAK、p-JAK、STAT3、p-STAT3蛋白的表达变化。结果与对照组比较,模型组大鼠心脏表面平均血流量明显下降,心肌CK、LDH、MDA含量升高,GSH、SOD含量下降,Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),JAK2/STAT3通路蛋白的表达有所增加;与模型组比较,Re-H组心肌表面平均血流有明显提升(P<0.05);CK、LDH、MDA含量降低,GSH-Px含量升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值上升(P<0.05),JAK2/STAT3通路蛋白的表达明显增强(P<0.05)。结论人参皂苷Re预处理对急性心肌缺血大鼠心肌有较好的保护作用,该作用可能与JAK2/STAT3通路的激活有关。