中,内耳热休克蛋白70家族研究进展

本文从热休克蛋白７０家族（ＨＳＰ ７０ｆａｍｉｌｙ）在中,内耳的表达和分布,以及ＨＳＰ７０与自身免疫性内耳病发病的联系两个方面简要地综述了耳科领域内ＨＳＰ７０家族研究的进展情况。     

喉癌组织中热休克蛋白家族的表达及意义

目的：探讨热休克蛋白（heat shock proteins,Hsps)家族在喉癌组织 的表达及临床意义。方法：采用免疫组化ABC法检测HsP70,Hsp90,Hsp27蛋白及PCNA在喉癌组织中的表达情况。结果；分化差的喉癌组织中三种Hsps表达水平明显增高（P＜0．01），三种Hsps的表达与PCNAL．I．呈正相关（P＜0．01），提示Hsps的高表达可能是喉癌细胞高度增殖的结果；有淋巴结转移的喉癌组织中，Hsp70,Hsp27表达水平高于无淋巴结转移的癌组织（P＜0．05），结论：Hsps在喉癌的演变中可能具有重要作用，三种Hsps均可以作为诊断喉癌的参考指标，Hsp70,Hsp27可以作为判断喉癌预后的参考指标之一。     

喉癌组织中热休克蛋白家族的表达及意义

目的 :探讨热休克蛋白 (heatshock proteins,Hsps)家族在喉癌组织中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化 ABC法检测 Hsp70、Hsp90、Hsp2 7蛋白及 PCNA在喉癌组织中的表达情况。结果 :分化差的喉癌组织中三种 Hsps表达水平明显增高 (P <0 .0 1) ;三种 Hsps的表达与 PCNA L.I.呈正相关 (P <0 .0 1) ,提示 Hsps的高表达可能是喉癌细胞高度增殖的结果 ;有淋巴结转移的喉癌组织中 ,Hsp70、Hsp2 7表达水平高于无淋巴结转移的癌组织 (P <0 .0 5 )。结论 :Hsps在喉癌的演变中可能具有重要作用 ;三种 Hsps均可以作为诊断喉癌的参考指标 ;Hsp70、Hsp2 7可以作为判断喉癌预后的参考指标之一     

中耳胆脂瘤中热休克蛋白70和细胞周期素依赖蛋白p27的表达及病理意义

目的 探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)和细胞周期素依赖蛋白p~(27)在中耳胆脂瘤中的表达及病理意义。方法 应用免疫组织化学SP法和原位杂交技术,检测40例中耳胆脂瘤上皮中Hsp70、Hsp70mRNA和p~(27)的表达,选用20例正常外耳道皮肤作对照,应用全自动图像分析仪分析各张切片的平均吸光度值。结果Hsp70、Hsp70mRNA和p~(27)在中耳胆脂瘤上皮中表达均明显高于在正常外耳道皮肤中的表达(P<0.05)。而Hsp70和p~(27)二者间在中耳胆脂瘤上皮中表达无相关性(P>0.05)。结论 Hsp70和p~(27)二者可能独自参与了中耳胆脂瘤上皮的增殖、分化及胆脂瘤形成。     

热休克蛋白70在中耳胆脂瘤中的异常表达

目的研究热休克蛋白(HSP70)在中耳胆脂瘤组织中的异常表达,探讨HSP70与胆脂瘤的关系及其作用.方法采用免疫组化SABC染色法、计算机图像定量分析法,对25例中耳胆脂瘤和10例正常外耳道皮肤中HSP70的表达情况进行观察.结果在25例胆脂瘤上皮组织的全层及上皮下结缔组织中炎性细胞和成纤维细胞的胞浆中均有HSP70强表达,部分核中也有强表达.10例正常外耳道皮肤中HSP70为弱表达.计算机图象分析仪定量分析,结果显示胆脂瘤上皮中HSP70阳性细胞的平均光密度为0.3309±0.0070,正常外耳道上皮为0.1798±0.0020,胆脂瘤上皮中HSP70的含量显著高于外耳道皮肤(P＜0.001).结论HSP70可能参与了胆脂瘤的形成和发展.     

实验性自身免疫性内耳病耳蜗热休克蛋白70的表达

目的 探讨自身免疫性内耳病模型动物耳蜗热休克蛋白的表达。方法 利用同种异体内耳抗原免疫豚鼠,以建立自身免疫性内耳病（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｉｎｎｅｒ ｅａｒ ｄｉｓｅａｓｅ,ＡＩＥＤ）动物模型,并应用免疫组织化学及原位杂位技术,研究热休克蛋白（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｍｔｅｉｎ,ｈｓｐ）７０在正常对照组及ＡＩＥＤ模型动物实验组耳蜗中的表达情况。结果 对照组豚鼠螺旋神经节细胞中存在ｈｓｐ７０样蛋白基     

喉鳞状细胞癌转化生长因子β1与热休克蛋白70表达的相关性研究

目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）与热休克蛋白70（HSP70）在喉鳞状细胞癌的表达情况及意义。方法：采用免疫组织化学sP法结合计算机图像分析系统对53例喉鳞状细胞癌和48例癌旁组织中TGF-β1和HSP70的表达进行检测。结果：喉鳞状细胞癌组织中TGF-β1-和HSP70均有不同程度的表达;喉鳞状细胞癌TGF-β1的表达明显低于癌旁组织（P〈0．05）;与之相反,喉鳞状细胞癌HSP70的表达明显高于癌旁组织（P〈0．05）。喉鳞状细胞癌组织中TGF-β1和HSP70的表达均与肿瘤组织分化程度密切相关（P〈0．01或P〈0．01）,且两者的表达水平呈明显负相关（r=-0．87,P〈0．01）。结论：TGF-β1和HSP70的阳性表达与喉鳞状细胞癌组织学分级密切相关,它们共同参与了喉鳞状细胞癌的发生、发展及恶性进程。     

鼻咽癌HSP70和HSP90β的表达及临床意义

目的:探讨鼻咽癌组织中HSP70和HSP90β的表达及其与组织分级、预后之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测50例鼻咽癌组织中HSP70和HSP90β的表达情况,并分析二者表达与鼻咽癌临床与预后的关系。另取10例鼻咽部正常组织作为正常对照。结果:鼻咽癌中HSP70和HSP90β阳性率高于正常组织,而且鼻咽癌分化程度越低,HSP70和HSP90β的表达越强;HSP90β和HSP70阴性表达者5年生存率明显高于阳性者(P<0.05)。结论:HSP90β和HSP70的过度表达与鼻咽癌的发生、发展以及预后有关。     

实验性急性化脓性中耳炎中耳粘膜热休克蛋白的表达

目的 :探讨急性化脓性中耳炎时中耳粘膜发生的热休克反应。方法 :向豚鼠中耳注射肺炎克雷伯杆菌 ,制成中耳急性感染动物模型 ,分别于接种后第 1、3、5、7天处死动物取材。应用免疫转印技术动态分析中耳粘膜热休克蛋白 ( HSP)的表达。结果 :正常非应激状态下 ,豚鼠中耳粘膜仅有很弱的 HSP70的表达 ;中耳炎急性期 ,中耳粘膜 HSP70的表达明显升高 ,以第 3天为最强 ,第 3天开始表达 31k D分子 ,出现两条带 ;第 5天最强 ,至第 7天消失。 17k D处第 1～ 5天均有两条带 ,第 3天最高 ,第 7天减弱。结论 :观察发现 ,肺炎克雷伯杆菌感染豚鼠中耳后 ,中耳粘膜出现热休克反应 ,表达 HSP70及与之有相关表位的 HSP31k D和 HSP17k D分子     

热休克蛋白70及其抗体与实验性自身免疫性内耳病

目的 了解抗原免疫对热休克蛋白７０（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ,７０,ＨＳＰ７０）在豚鼠耳蜗中表达的影响。方法 以同种异体内耳组织为抗原免疫豚鼠,用免疫组织化学方法检测豚鼠耳蜗中ＨＳＰ７０的表达并进行计算机图像处理,对豚鼠膜迷路组织进行免疫转印分析以测定ＨＳＰ７１;以纯化的人类重组ＨＳＰ７１为抗原,用免疫转印技术（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）检测动物血浆中ＨＳＰ７１抗体。结果 ＨＳＰ７０在正常豚     

热休克蛋白70抗体检测在听神经病患者中的临床意义

目的 进行基于蛋白质表达水平的热休克蛋白70(heat shock protein,HSP70)抗体在临床诊断听神经病患者中的临床指导意义研究.探讨HSP70作为听神经病诊断的可靠应激标志物及判断预后前瞻性标记物的可行性分析.方法 对92例受试者的新鲜血清液进行了HSP70抗体检测.92例受试者为门诊就诊的患者和正常对照组.其中包括18例诊断为听神经病患者、23例听力正常的听神经病患者亲属、19例听力正常无血缘关系的正常对照、32例感音神经性耳聋患者.所有患者均进行纯音测听、听性脑干反映潜伏期、鼓室声导纳测试、耳声发射检查.部分患者接受了核磁共振及颞骨CT扫描检查.HSP70的表达研究应用的是免疫印迹法检测受试者血清HSP70抗体反应,采用美国IMMCO公司的Otoblot抗68 kDa(HSP70)免疫印迹诊断试剂盒进行检测,抗HSP70抗体阳性的反应在68 kDa处出现蓝紫色条带.结果 应用stata 7.0进行统计分析68 kDa蛋白阳性表达情况,显示在听神经病组和其家属组之间比较无差异(卡方检验P=0.43>0.05);听神经病组和感音神经性聋组间比较也无差异(卡方检验P=0.98>0.05).但是听神经病组和正常组比较,两组间有差异(Fisher,P=0.02<0.05);听神经病亲属组和正常组比较,两组间没有差异(卡方检验,P=0.11>0.05);感音神经性聋和正常组比较,两组间有差异(卡方检验,P=0.018<0.05).结论 综合以上结果,我们认为抗68 kDa抗体的免疫印迹检测对听神经病的诊断特异性和敏感性不理想,尚不能作为临床上的应激标记物和预后判断的指标.     

热休克蛋白70在顺铂所致豚鼠耳蜗损伤中的表达以及磷霉素钠的保护作用

目的 通过豚鼠在体实验观寨磷霉素钠对顺铂耳毒性的拮抗作用以及热休克蛋白70在耳蜗中的表达情况。方法豚鼠28只,随机分为4组:正常对照组6只;单独应用磷霉素钠组6只,磷霉素钠500mg/Kg,1日1次肌注;单独应用顺铂组8只,一次性给予顺铂15mg/Kg腹腔注射;磷霉素钠保护组8只,先肌肉注射磷霉素钠500mg/Kg,间隔30min后腹腔注射顺铂15mg/Kg。4天后处死所有动物。给药前和处死前各测听觉脑干诱发电位(ABR)1次。断头后取出听泡,固定、脱钙,常规石蜡包埋、切片。HSP70单克隆抗体免疫组化染色,光镜下观察阳性表达部位,图象处理分析系统测定灰度值。结果 单纯磷霉寨钠组ABR阈值无改变;顺铂组阈值明显升高,幅度达37.1±19.9 dBspl,P<0.001;磷霉素钠保护组阈值仅提高8.1±9.6 dBspl,同对照组相比P>0.05。HSP70表达分布在耳蜗中的Corti氏器、螺旋神经节、血管纹等处,顺铂损伤后Corti氏器和螺旋神经节细胞呈强阳性表达。从灰度值来看对照组、顺铂组与磷霉素钠保护组两两比较差异均有显著性,P<0.01或0.05。结论磷霉橐钠在一定程度上可以拮抗顺铂的耳毒性,减小ABR阈值的提高。顺铂损伤后耳蜗Corti氏器和螺旋神经节细胞HSP70呈强阳性表达,表达量与耳蜗的损伤程度一致。     

热休克蛋白在喉癌中的表达

目的 探讨热休克蛋白（ＨＳＰｓ）在喉癌组织及其正常喉粘膜中的表达。方法 采用狭缝杂交技术对２１例喉癌组织及其正常喉粘膜的ＨＳＰ９０、ＨＳＰ７０和ＨＳＰ２７ｍＲＮＡ表达水平进行检测。结果 ①ＨＳＰ９０α和ＨＳＰ７０在喉癌组织中呈过度表达，表达量是自身正常喉粘膜的５倍以上。②ＨＳＰ７０和ＨＳＰ９０β在喉癌组织及正常喉粘膜中呈低水平表达，其表达量在两种组织中差异无显著性。结论 ＨＳＰ７０和ＨＳＰ９０α在     

鼻咽癌高癌家系不同体质证型鼻咽癌患者鼻咽病灶组织蛋白双向凝胶电泳分析

目的 建立鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质证犁及湿热体质证型高分辨率双向凝胶电泳特征图谱,探讨其证本质相关性蛋白质组学特征.方法 设鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组、湿热体质组、其他体质证型组,散发性鼻咽癌患者组,鼻明癌高癌家系健康成员对照组,共计5组.分别获取鼻咽组织标本,提取总蛋白质,固相pH梯度双向凝胶电冰分离,经考马斯亮蓝显色后,Image Master 2D Elite4.01图像分析软件进行电泳结果分析.结果 各组标本均获得分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为860±20,854±25,842±30,867±20及857±15.比较分析,发现鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者气虚体质组与湿热体质组,差异蛋白质点10个.结论 鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者不同体质证型蛋白质谱发生了明显变化,提示同病异证存在不同的本质内涵,为进一步研究鼻咽癌高癌家系鼻咽癌患者中医体质证型的本质内涵提供了实验依据.     

放疗诱导鼻咽癌细胞株CNE1热休克蛋白高表达

目的鼻咽癌是一种以放射治疗为主的头颈肿瘤,但部分鼻咽癌对放疗耐受。为了解鼻咽癌放疗耐受机制,本实验拟初步探讨人高分化鼻咽癌细胞株CNE1放疗后的蛋白质改变。方法利用固相pH梯度二维凝胶电泳,建立CNE1放疗前后总蛋白质2DE图谱,利用MALDI TOF MS及数据库搜索初步分析和鉴定部分放疗前后差异蛋白质点。结果高分子量酸性蛋白质在CNE1放疗后20min高表达,其中大多为热休克蛋白质HSPs(heatshockproteins,HSPs)。结论放射能诱导CNE1的热休克蛋白高表达,它们可能与鼻咽癌放疗耐受有关。     

热休克蛋白70抗体检测对自身免疫性聋诊断的意义

目的 分析自身免疫性聋的听力学特点，探讨用免疫印迹法(Western blot)检测热休克蛋白70抗体在自身免疫性耳聋诊断中的意义。方法自身免疫性聋14例28耳，其它感音神经性聋8例16耳，正常对照6例12耳，采用免疫印迹法检测各组受试者血清中的热休克蛋白70抗体，并分别作临床听力学检查。结果自身免疫性耳聋者纯音听力图多数为平坦型，TEOAE和／或DPOAE未引出，听性脑干反应多数正常，轻、中度耳聋者可引出镫骨肌声发射，该组8例(57．1％)热休克蛋白70抗体阳性。其它感音神经性聋者纯音听力图多数为高频减退型和平坦型，TEOAE和DPOAE未引出，重度耳聋者ABR未引出，轻、中度耳聋者可引出镫骨肌声发射，1例(12．5%)热休克蛋白70抗体阳性。正常对照组1例(16．7％)热休克蛋白70抗体阳性。结论免疫印迹法检测热休克蛋白70抗体对自身免疫性耳聋诊断有参考价值，对该病的确诊还应结合临床听力学特点。     

HSP70、Ki-67、nm23-H1蛋白在鼻咽癌组织中表达

目的探讨鼻咽癌组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1蛋白表达的临床价值。方法采用免疫组织化学二步法，检测50例鼻咽癌患者鼻咽部或颈淋巴结组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1蛋白表达水平。结果50例鼻咽癌组织中HSP70、Ki-67和nm23-H1阳性表达率分别为36．0％（18／50）、98．0％（49／50）和50．0％（25／50）；HSP70和nm23-H1蛋自在Ⅱ—Ⅲ期和Ⅳa期中阳性表达率均有显著性差异（P=0．016，P=0．037）：Binarylogistic回归模型分析HSP70、nm23-H1表达是鼻咽癌局部复发或远处转移的相关因素（P=0．022，P=0．038）：Cox多因素回归模型分析HSP70表达是影响患者生存期的独立因素（P=-0．001）：nm23-H1与HSP70表达呈负相关（P=0．003）；Ki-67表达与鼻咽癌局部复发或远处转移及生存期均无相关性。结论检测鼻咽癌组织中HSP70和nm23-H1表达对指导治疗及评价预后有重要的临床意义。     

热休克蛋白—70免疫印迹测定在免疫相关与非相关性内耳疾病的诊断意义

为评价热休克蛋白 - 70的 Western免疫印迹测定在自身免疫性内耳疾病诊断中的意义 ,该作者应用Western免疫印迹法对 5 3例特发性渐进性感音性听力损失、突发性耳聋和梅尼埃病病人血液中的热休克蛋白 - 70进行了测定 ,其中特发性渐进性感音性听力损失2 4例 ,突发性耳聋 19例 ,梅尼埃病 10例 ,治疗前抽取血液标本并进行全身检查、纯音测听及 MRI检查 ,对应用皮质激素无禁忌的 4 7例给予甲基强地松龙治疗 ,用量 1mg/ kg/天 ,逐渐减量至 2 1天。检测结果显示 ,Western免疫印迹测定仅在 5例 (9.4 % )病人检测到热休克蛋白 - 70抗体 ,其阳性和…     

热休克蛋白70与自身免疫性内耳病

热休克蛋白是生物进化最保守的伴随细胞蛋白 ,具有多种生物活性功能 ,参与抗原提呈加工、协同免疫及自身免疫 ,已证实与许多自身免疫病的发病有关。本文就近几年来关于热休克蛋白 70 (热休克蛋白家族主要成员之一 )在内耳的表达以及热休克蛋白 70与自身免疫性内耳病之间关系的研究作一概述。热休克蛋白 (ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｓ ,ＨＳＰ) ,又称应激蛋白(ｓｔｒｅｓｓｐｒｏｔｅｉｎ ,ＳＰ) ,广泛存在于原核、真核细胞中 ,进化上高度保守 ,具有显著同源性 ,在细胞中发挥重要作用。当生物细胞受到各种理化因素 (如热、氧化剂、重…