活血化瘀类方干预急性心肌缺血犬心肌组织病理改变及心肌细胞凋亡的实验研究

目的：观察活血化瘀类方对心肌细胞凋亡干预作用。方法：采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型，35条犬随机分成对照组、心肌缺血组、丹参饮组、血府逐瘀汤组、失笑散组、活络效灵丹组、桃红四物汤组，每组5条。采用HE染色及DNA末端标记法(TUNEL)分别观察心肌组织病理变化与心肌细胞凋亡的变化。结果：对照组无细胞变性与坏死。仅见极少量凋亡阳性细胞：心肌缺血组与失笑散组有明显心肌组织坏死，心肌细胞凋亡增多；丹参饮组、血府逐瘀汤组、活络效灵丹组、桃红四物汤组心肌细胞坏死及凋亡均显著减轻。结论：血府逐瘀汤、活络效灵丹、桃红四物汤、丹参饮可有效抑制心肌细胞坏死及凋亡．减轻心肌细胞损伤，对缺血心肌有保护作用，而失笑散对急性缺血心肌无明显保护作用。     

Staurosporine诱导乳鼠心肌细胞凋亡与Bcl-2/Bax的关系

目的 探讨staurosporine（STS）诱导心肌细胞凋亡过程中,凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的变化及意义。方法 以STS诱导原代培养的SD乳鼠心肌细胞,检测半胱天冬蛋白酶(caspase)-3的活性及用Hoechst-33258荧光染色观察细胞凋亡。用免疫印迹法（Western blot）检测Bcl-2和Bax表达的变化。用免疫荧光共聚焦显微镜和免疫印迹法观察Bax在细胞内的分布。结果 以4 μmol/L STS处理心肌细胞,随着处理时间的延长,细胞中caspase-3的活性逐渐增加,与对照组比较,8 h达到峰值（P<0.01）。Hoechst-33258荧光染色显示,多数细胞核呈现核分叶。STS诱导心肌细胞凋亡过程中,Bcl-2和Bax的水平与对照组比较无显著变化。正常细胞内的Bax均匀分布于细胞质中,在STS处理的细胞中,Bax明显聚集于线粒体上,呈现明显的线粒体的转位。STS诱导心肌细胞凋亡过程中,胞质片段Bax的水平明显下降,而线粒体片段Bax的水平明显升高,进一步证实STS诱导细胞凋亡过程中伴有明显的Bax线粒体转位。结论 STS诱导细胞凋亡中,伴有明显的Bax由胞质向线粒体的转位。     

运动预适应对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的探讨运动预适应(EP)对非动脉硬化大鼠及动脉硬化大鼠急性心肌缺血心肌细胞B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达及半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白的影响。方法选取7周龄SD大鼠90只,随机分为5组:对照组(A组)、急性心肌缺血组(B组)、动脉硬化+急性心肌缺血组(C组)、EP+急性心肌缺血组(D组)、动脉硬化+EP+急性心肌缺血组(E组),其中A组10只,其余各组20只。C、E组予维生素D3连续灌胃4 d,喂高脂饲料(猪油、胆固醇、胆酸、丙基硫氧嘧啶)6 w制备动脉硬化模型。B、C、D、E组腹腔注射3 mg/kg异丙肾上腺素(ISO),复制大鼠急性心肌缺血损伤模型。D、E组建立EP大鼠模型进行间歇性游泳运动,以尾部负重体重的3%重物。建模后24 h内采用脊髓脱臼法处死大鼠,取左心室心肌组织,采用免疫组化检测Bcl-2及Bax蛋白的表达,Western印迹检测Caspase-3蛋白。结果与A组比较,B、C、D、E组心肌细胞Bcl-2的表达均显著降低(P<0.05),而Bax表达均显著升高(P<0.05);B组与C组心肌细胞Bcl-2的表达差异无统计学意义(P>0.05),但C组Bax的表达显著升高(P<0.05);D组、E组心肌细胞Bcl-2的表达较B组、C组显著升高(P<0.05),而Bax的表达显著降低(P<0.05);与D组比较,E组Bcl-2的表达显著降低,而Bax的表达显著升高(P<0.05)。与A组相比,B、C、D、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与B组、C组相比,D组、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与D组比较,E组心脏Caspase-3蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);与A组比较,B、C、D、E组细胞凋亡指数(AI)显著增高(P<0.05),其中C组AI最高;与B组、C组比较,D组、E组AI显著降低(P<0.05),而D组比E组AI稍低(P<0.05)。结论EP可能改善急性心肌缺血或是在合并动脉硬化基础上急性心肌缺血大鼠的心肌细胞凋亡,可能基于凋亡相关基因Bcl-2表达升高、Bax表达降低调控及下调Caspase-3蛋白所致。     

CD151对小型猪急性心肌梗死心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的影响

目的:探讨腺相关病毒介导的CD151在小型猪急性心肌梗死(AMI)后对心肌细胞凋亡和Bax/Bcl-2蛋白的影响。方法:建立猪AMI模型,随机分为4组,分别给心肌内注入腺相关病毒介导的GFP基因(rAAV-GFP组)、腺相关病毒介导的CD151基因(rAAV-CD151组)、腺相关病毒介导的反义CD151基因(rAAV-an-tiCD151组)、假手术组(Control组)。AMI后2个月处死,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,WesternBlot法检测各组CD151、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:凋亡指数,rAAV-CD151组(3.3±0.4)小于rAAV-GFP组(9.2±1.3)及rAAV-antiCD151组(10.1±1.5)(P<0.05);rAAV-CD151组略多于Control组(2.4±0.8),2组差异无统计学意义,rAAV-CD151组CD151表达高于其他组,Bax/Bcl-2(1.13±0.11)较rAAV-GFP组(3.21±0.12)及rAAV-antiCD151组(3.53±0.09)明显降低(P<0.05),与Control组(0.93±0.04)比较差异无统计学意义...     

银杏叶提取物对大鼠急性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物(EGB)对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响.方法 采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)30 min,再灌注2 h复制大鼠心肌缺血再灌注模型,分别以缺口末端标记法(TUNEL)及免疫组织化学法检测心肌凋亡细胞、心肌细胞Bcl-2、Bax基因的蛋白表达的变化.结果 缺血再灌注(IR)组心肌细胞凋亡数量显著高于假手术组(P<0.01),EGB组心肌细胞凋亡明显受到抑制(P<0.01).IR组和EGB组Bax、Bcl-2、P53基因蛋白表达均明显增加(P<0.01);EGB明显促进Bcl-2基因表达,同时抑制Bax、P53基因表达(P<0.01),Bcl-2和Bax的比值也随之升高.结论 EGB可明显下调Bax和P53基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,从而显著抑制心肌缺血再灌注损伤(MIRI)后心肌细胞凋亡.     

芹菜素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2/Bax的影响

目的 探讨芹菜素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2/Bax表达的影响.方法 心肌缺血45 min,再灌注2 h制备缺血再灌注模型.随机分为正常组、假手术组、生理盐水缺血再灌注组、溶剂对照组、美托洛尔阳性对照组及芹菜素低、中、高剂量组,每组8只.除假手术组外,余各组在缺血前10 min分别股静脉给药.再灌注2 h后迅速取出心脏,用RT-PCR测Bcl-2及Bax基因的mRNA表达;实验时记录心率(HR)、平均动脉压(MAP)、心电图S-T段并计算心律失常Lambeth评分.结果 芹菜素组与生理盐水缺血再灌注组比较,Bcl-2 mRNA表达量增加,Bax mRNA表达量减少,均呈剂量依赖性(P＜0.05);心律失常Lambeth评分芹菜素组低于假手术组 (P<0.05);芹菜素能缩短再灌注心律失常持续时间(P<0.05).结论 芹菜素对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有良好的保护作用;芹菜素抗心肌凋亡作用的机制可能与其上调Bcl-2基因表达和下调Bax基因表达有关.     

实验性急性心肌梗死中Bax和Bcl-2基因对心肌细胞凋亡的调控

目的 探讨急性心肌梗死（AMI）中Bax和Bcl-2基因对心肌细胞凋亡的调控作用。方法 新西兰兔48只,随机分为不结扎冠状动脉的正常对照组及结扎冠脉后1h,2h,3h,4h,6h,8h,12h共7组。TUNEL法检测梗死区心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Bax和Bcl-2蛋白在心肌细胞中的表达水平。结果 急性心肌梗死心肌细胞凋亡数在冠脉结扎后1h开始增多,4h达高峰,以后逐渐下降,12h己降至正常。有Bax蛋白表达的阳性心肌细胞数与心肌细胞的凋亡数呈正相关,有Bcl-2蛋白表达的阳性心肌细胞数与心肌细胞的凋亡数呈负相关。结论 AMI免梗死区心肌细胞存在明显的凋亡现象,且受Bax蛋白上调、Bcl-2蛋白质下调,两作用相反,共同调节有着心肌细胞的凋亡。     

山茱萸总苷干预急性缺氧乳鼠心肌细胞凋亡的研究

目的探讨山茱萸总苷对急性缺氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响。方法原代培养乳鼠的心肌细胞,采用液状石蜡封闭法建立缺血缺氧模型,并将原代培养3d的心肌细胞分为对照组、缺氧组(1h、2h、3h、5h)及治疗组,药物浓度为生药10g/L,采用TUNEL法检测各组的凋亡率。结果与对照组相比,缺氧组各时间点凋亡率明显上升,差别有统计学意义(P<0.01);与缺氧组比较,治疗组各个时间点的凋亡率都有所下降(P<0.01)。结论缺氧可以引起心肌细胞凋亡,并且随着缺氧时间的延长凋亡率上升,山茱萸总苷可以抑制心肌细胞的凋亡。     

急性心肌梗死猝死者心肌细胞凋亡与Bcl-2和Bax基因蛋白表达的关系

目的　探讨Bcl 2和Bax基因蛋白在冠心病心脏性猝死 (SCD)者心肌细胞凋亡中的作用 ,为冠心病生物治疗提供理论依据。　方法　用凋亡原位末端标记检测 (TUNEL)法检测 16例SCD者和 10例心脏正常其它原因死亡者心肌细胞凋亡 ,用免疫组化法检测Bcl 2和Bax基因蛋白在心肌细胞中表达水平 ,并探讨其相互关系。　结果　SCD者梗死区心肌细胞凋亡数 (5 4 6 87± 132 10 )个 /10 0 0个 (2 18～ 794个 10 0 0个 ) ,明显高于正常对照组 (36 5 2± 2 1 86 )个 /10 0 0 (12～ 87个 10 0 0个 ) (P <0 0 5 ) ;SCD猝死者梗死区心肌细胞中Bax蛋白表达阳性细胞数为(4 2 3 6 3± 12 8 76 )个 10 0 0个 ,明显高于正常对照组 (16 2 0± 2 4 72 )个 10 0 0 (P <0 0 5 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数成明显的正相关性 (P <0 0 5 ) ;Bcl 2蛋白表达阳性细胞为 (35 35± 4 1 4 6 ) /10 0 0个 ,明显低于正常对照组 (10 1 10±72 2 4 )个 10 0 0个 (P<0 0 5 ) ,且与梗死区心肌细胞凋亡数呈明显负相关 (P <0 0 5 ) ;梗死区心肌细胞内Bax与Bcl 2蛋白表达数之间呈明显的负相关 (P <0 0 5 )。不同支数冠状动脉病变猝死者梗死区心肌细胞的凋亡数 1支者(4 13 38± 14 5 88)个 10 0 0个 ,2支者 (6 5 8 37± 95 15 )个 /10 0 0     

大鼠急性心肌梗死心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、FAS的表达

大鼠急性心肌梗死心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、FAS的表达     

缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及调控基因Bcl-2、Bax的影响

目的：观察缬沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及其调控基因Bcl-2、Bax的影响。方法：随机选择15只SD雄性大鼠,以高糖高脂饲料喂养6周后,腹腔注射STZ30mg／kg;2周后血糖升高≥16mmol／L者12只,随机又分为2型糖尿病组（n=6）和2型糖尿病缬沙坦治疗组（简称治疗组,n=6）,治疗8周,另选6只健康SD雄性大鼠为空白对照组,查内生肌酐清除率（Ccr）,24h尿白蛋白的排泄率（Uaer）。流式细胞术检测大鼠肾脏细胞凋亡率。免疫组化法检测Bcl-2、Bax的表达。结果：8周后,糖尿病组大鼠肾小球细胞外基质增生,部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞肿胀,胞浆内可见脂肪空泡变性,但治疗组较糖尿病组病变减轻。细胞凋亡率糖尿病组较治疗组高（26．54±2．67VS20．05±2．03,P〈0．05）;Ccr糖尿病组较治疗组低（O．021±0．001VS0．065±0．004ml／min,P〈0．05）,Uaer糖尿病组高于对照组和治疗组（O．150±0．004VS0．081±0．001,0．086±0．002mg,P〈0．05）。治疗组和糖尿病组肾小管均较对照组的Bcl-2和Bax阳性表达高（P-40．05）,治疗组肾小管Bcl-2较糖尿病组的阳性表达高,而Bax阳性表达低（P〈O．05）。结论：缬沙坦通过增加Bcl-2／Bax在肾小管的比例,使糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡率减低,保护肾功能。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织Bcl-2和Bax的表达及其意义

目的探讨凋亡调控蛋白Bel-2和Bax表达在大鼠非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用。方法将20只Wistar大鼠随机分为普通饲料喂养组（正常组）和高脂饲料喂养组（模型组）,连续喂养12周后,测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）,观察肝组织病理学变化和炎症活动度计分,采用westem blot法检测肝组织Bcl-2和Bax的表达。结果模型组大鼠肝小叶内肝细胞呈弥漫性脂肪变,伴大量炎性细胞浸润及散在性点状坏死;模型组动物肝组织Bax蛋白表达较正常组显著性升高（1．02±0．33对0．51±0．03,P〈0．01）,而Bel-2蛋白较正常组则明显下降（0．15±0．31对0．52±0．01,P〈0．01）,Bel-2／Bax比值降低（0．14±0．01对1．03±0．06,P〈0．01）。结论凋亡调控蛋白Bel-2和Bax的表达变化可能参与了NASH的发生和发展过程。     

红花注射液对肺缺血再灌注损伤时细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因的影响

目的探讨细胞凋亡与肺缺血再灌注损伤的关系以及红花注射液的干预及机制。方法健康日本大耳白兔84只,随机分为对照组、缺血再灌注1、3、5h组和红花干预1、3、5h组。复制在体肺缺血再灌注损伤模型。采用电镜和原位缺口末端标记法观测肺组织细胞凋亡情况,并计算凋亡指数;免疫组织化学和原位杂交技术检测各组肺组织Bcl-2和Bax基因表达的变化。结果缺血再灌注组肺组织细胞凋亡指数和Bcl-2、Bax蛋白及mRNA均显著高于对照组(P<0.01)。红花干预组肺组织凋亡指数、Bax蛋白及Bax mRNA低于缺血再灌注组,而Bcl-2蛋白、Bcl-2mRNA以及Bcl-2与Bax的比值较缺血再灌注组上调(P<0.01或P<0.05)。电镜观察发现,缺血再灌注组肺毛细血管内皮细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞超微结构损伤明显,红花干预组损伤明显减轻。肺组织凋亡指数与Bax蛋白、Bax mRNA呈显著正相关(r分别=0.926,0.913;均P<0.01),与Bcl-2/Bax蛋白、Bcl-2/Bax mRNA的比值呈负相关(r分别=-0.367,-0.375;均P<0.01)。结论肺组织细胞凋亡参与了肺缺血再灌注损伤的发生,红花注射液可能通过下调Bax基因的表达,提高Bcl-2/Bax的比值抑制肺组织细胞凋亡,从而减轻肺缺血再灌注损伤。     

Graves病患者甲状腺组织中凋亡蛋白Fas、FasL、Bcl-2和Bax的表达

目的　探讨凋亡调节蛋白Fas、FasL、Bcl 2和Bax与Graves病 (GD)发病机制的关系。方法采用免疫组织化学法检测 5 4例GD和 10例正常甲状腺组织Fas、FasL、Bcl 2、Bax表达 ,应用Mias 99图像分析系统对检测结果进行定量分析。结果　 (1)GD甲状腺细胞Fas、FasL、Bcl 2及Bax表达增高 ,其阳性颗粒面积、平均光密度及积分光密度均明显高于正常甲状腺 (均P <0 .0 1) ;(2 )GD组甲状腺组织Bcl 2阳性颗粒面积、平均光密度及积分光密度均高于Bax(P <0 .0 1) ,而正常甲状腺Bcl 2阳性颗粒面积及积分光密度与Bax比较差异无显著性 ;(3 )Bcl 2阳性颗粒面积及积分光密度与Bax的比值 ,GD组明显高于正常对照组 ;(4 )GD甲状腺浸润淋巴细胞亦表达一定水平的Fas、FasL、Bcl 2、Bax ,但明显低于同组甲状腺细胞(均P <0 .0 1)。结论　Fas、FasL、Bcl 2及Bax表达异常尤其是Bcl 2高表达导致的甲状腺细胞和浸润淋巴细胞凋亡减少可能与GD甲状腺体积增大、功能亢进有关。     

吡格列酮对成骨细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究吡格列酮对成骨细胞增殖及凋亡的影响,并进一步了解其凋亡发生机制.方法 以MC3T3-E1成骨细胞株为实验对象,分别用0、5、10、20、30、40 μmol/L吡格列酮干预,观察细胞活性、细胞周期及凋亡率的变化,同时检测细胞Bcl-2,Bax蛋白表达.结果 随着浓度增加,成骨细胞的活性逐渐降低;与对照组相比,G0/G1,G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少;凋亡率在5、10 μmol/L时低于对照组,30、40 μmol/L较对照组显著增高;Bax表达在10 μmol/L时明显减弱,20 μmol/L时回复到正常,30、40μmol/L较对照组显著增强;Bcl-2表达在浓度≤20 μmol/L时显著增强;对于Bax/Bcl-2相对表达强度与细胞凋亡率做相关性分析,两者呈显著性正相关(n=15,r=0.796,P＜0.01).结论 吡格列酮在低浓度抑制成骨细胞凋亡,对细胞起保护作用,较高浓度则促进细胞凋亡,Bax/Bcl-2参与其凋亡机制,并可能起关键调控作用.吡格列酮抑制成骨细胞DNA合成,抑制细胞增殖,导致细胞活性下降.

Abstract：

Objective To investigate the effects of pioglitazone on osteoblast proliferation and apoptosis.Methods MC3T3-E1 mouse osteoblastic cells were treated with 0, 5, 10, 20, 30, and 40 μmol/L pioglitazone for 24 h. Cell viability was measured by MTT, cell cycle and apoptosis were inspected with flow cytometry, the expressions of Bcl-2 and Bax proteins were examined via immuno-chemical staining. Results Survival of osteoblasts decreased in a dose-dependent manner. Compared with the control group, the cells in the G0/G1 and G2/M stages increased, while the cells in S stage decreased significantly. The percentage of apoptosis at 5 and 10 μmol/L were lower than that of the control group(P ＜ 0.05), While it was increased significantly at 30 and 40 μmol/L(P ＜0.01). Bax expression was attenuated at 10 μmol/L(P＜0. 01), returned to normal by 20 μmol/L, and was increased by 30 and 40 μmol/L(P ＜ 0. 01). Bcl-2 expression was enhanced at the dose ≤ 20 μmol/L(P ＜0.01). Positive correlation was found between the death rate and the expression intensity of Bax/Bcl-2(n = 15, r=0.796, P＜0.01). Conclusions Pioglitazone inhibits apoptosis of osteoblasts at low concentrations and protects the cells, but promotes their apoptosis at higher concentration, Bax/Bcl-2 may play an important role in mediating the piglitazone-induced apoptosis of osteoblasts. It inhibits DNA synthesis and cell proliferation.     

PCSK9-siRNA在抗ox-LDL诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡中对Bax、Bcl-2表达的影响

目的 研究PCSK9siRNA在抗ox-LDL诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡中对Bax、Bcl-2表达的影响.方法 用不同浓度ox-LDL处理THP-1源性巨噬细胞不同时间,免疫印迹法检测Bax、Bcl-2表达变化.应用Lipofectamine2000分别转染30、50 nmol/L和80 nmol/L PCSK9 siRNAs 进THP-1 源性巨噬细胞中,作用24 h后加入ox-LDL 处理48 h,免疫印迹法分析细胞Bax、Bcl-2表达,Hoechst33258染色观察形态评价细胞凋亡.结果 随着ox-LDL浓度的增加,Bax蛋白表达上调,而Bcl-2蛋白表达下调,呈浓度依赖性,80 μg/mL ox-LDL处理组作用最为明显;80 μg/mL ox-LDL处理THP-1源性巨噬细胞不同时间后,Bax蛋白表达上调,而Bcl-2蛋白表达下调,呈时间依赖性,48 h处理组作用最为明显;PCSK9 siRNA能明显下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,且均呈浓度依赖性;Hoechst33258染色显示,PCSK9 siRNA转染组细胞凋亡明显减少.结论 PCSK9 siRNA在抗ox-LDL诱导的THP-1 源性巨噬细胞凋亡中下调促凋亡蛋白Bax表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达.     

Bcl-2、Fas和Bax凋亡调控基因在限食和脑老化小鼠海马神经元中的表达

目的 通过细胞凋亡调控基因Bcl-2、Fas和Bax在限食及脑老化小鼠海马神经元中的表达,研究限食与脑老化的关系.方法 3月龄ICR雄性小鼠40只,随机分为4组:脑老化模型组、脑老化模型限食组、限食对照组、对照组,每组10只.10 w后进行为期7 d Morris水迷宫实验,实验完毕后进行Bcl-2、Fas和Bax免疫组织化学染色.结果 ①Fas、Bax阳性神经元数目脑老化模型组显著高于脑老化模型限食组、限食对照组显著低于对照组;与此相反,Bcl-2阳性神经元数目在脑老化模型限食组显著高于脑老化模型组,限食对照组显著高于对照组.②Morris水迷宫实验测试:脑老化模型组逃避潜伏期显著大于其他各组;撤台后小鼠的记忆性搜台游泳路程结果各组小鼠间均无显著差异.结论 限食可明显降低脑内凋亡相关基因Fas、Bax的表达,同时上调抗凋亡相关基因Bcl-2的表达,从而发挥抗脑细胞凋亡及防止脑老化性学习能力下降的作用.     

乙型肝炎患者肝组织中Bcl-2、Bax、Bak的表达及意义

目的研究Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｂａｋ蛋白在乙型肝炎（乙肝）肝细胞凋亡及坏死中的作用。方法用免疫组织化学法、原位未端标记技术（ＴＵＮＥＬ）检测８９例各型乙肝患者肝组织Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ、Ｂａｋ表达和肝细胞凋亡的情况。结果肝硬化组（１０例）、急性肝炎组（８例）、慢性肝炎组（５５例）和重型肝炎组（１６例）的ＴＵＮＥＬ实验中度以上阳性率分别为３０．０％,２５．０％,６１．８％和９３８％;Ｂｃｌ－２蛋白表达中度以上阳性率分别为３０．０％,２５．０％,３８．２％和１２．５％;Ｂａｘ表达中度以上阳性率分别为２０．０％,２５．０％,４７．３％和８７．５％;Ｂａｋ表达中度以上阳性率分别为１０．０％,１２．５％,２５．５％和７５．０％。ＴＵＮＥＬ反应及Ｂａｘ、ＢａＫ表达阳性程度在各型乙型肝炎中的分布差异均有显著性（Ｐ＜０．０５）,两蛋白的阳性程度随坏死程度的增加而增强。Ｂｃｌ－２在增生区的表达显著高于坏死区。结论Ｂａｘ、Ｂａｋ的加强表达有促进肝细胞死亡的作用,两者的表达水平可反映肝组织损伤和炎症活动程度。     

阿魏酸钠对局灶性脑缺血致多器官功能障碍综合征大鼠模型脑和肺及肾Bax和Bcl-2表达的影响

目的研究阿魏酸钠对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注后脑、肺和肾Bax、Bcl-2表达的影响，探讨阿魏酸钠对急性局灶性脑缺血致多器官功能障碍综合征（MODS）的治疗作用。方法参照Longa等的线栓法采用阻断大鼠大脑中动脉（MCAO）后再灌注法建立大鼠局灶性脑缺血致MODS模型，按随机原则将66只Wistar大鼠分为正常组（n=6）、假手术组（n=6）及手术组（缺血再灌注后2h、6h、12h、24h、48h、72h、5d，7个亚组），阿魏酸钠治疗组（n=6），0．9％氯化钠溶液组（n=6），应用免疫组织化学SP染色技术检测脑、肺、肾Bax、Bcl-2的蛋白表达并计数，计算出平均阳性率（LI）。结果（1）大鼠脑缺血后各时相点的脑、肺和肾组织均有不同程度的病理损害；（2）全身炎症反应综合征（SIRS）的发生率为100．0％，MODS的发生率为57、1％；（3）再灌注后72h 3组大鼠Bax、Bcl-2在脑、肺、肾的阳性细胞数间差异均有显著性意义（P〈0.05），且两两比较阿魏酸钠组与正常组、0．9％氯化钠溶液组间差异均有非常显著性意义（P〈0．01）。结论SIRS和Bax、Bcl-2表达失衡是脑缺血致MODS的可能机制，阿魏酸钠通过重建Bax、Bcl-2表达平衡起到治疗作用。     

大鼠急性心肌缺血再灌注损伤诱导细胞凋亡的实验研究

目的:观察心肌缺血再灌注(IR)损伤与心肌细胞凋亡关系及凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达情况。方法:选用健康雄性SD大鼠29只,随机分为:假手术组(n=8),缺血组(n=12),缺血再灌注组(n=9),分别取上述大鼠心肌组织。(1)观察心肌组织及线粒体的形态结构,并进行体视学分析。(2)采用缺口末端标记法(TUNEL)原位检测凋亡细胞。(3)用免疫组化SP法检测心肌细胞Bcl-2、Bax表达。结果:(1)假手术组心肌纤维排列整齐,细胞间质血管未见明显异常,细胞核膜完整,缺血组及缺血再灌注组可见心肌嗜酸性变、空泡变性、心肌纤维紊乱及收缩带形成,心肌纤维间出血及灶性心肌坏死。心肌细胞线粒体体视学分析,与假手术组比较,心肌缺血组形状因子显著降低(P<0.05),面密度显著增加(P<0.05),缺血再灌注组形状因子显著降低(P<0.01),面密度及周密度均显著增加(均P<0.05)。(2)与假手术组比较,缺血组细胞凋亡率明显升高(P<0.001),缺血再灌注组细胞凋亡率明显升高(P<0.001)。缺血再灌注组与缺血组比较细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。(3)与假手术组比较,缺血再灌注组凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达明显升高(P<0.01,P<0.001)。缺血再灌注组与缺血组比较凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达明显升高(均P<0.01)。结论:心肌缺血及再灌注在导致细胞形态、线粒体超微结构改变的同时,诱导心肌细胞的凋亡,Bcl-2、Bax蛋白表达在心肌细胞凋亡的发生中起重要作用,细胞凋亡加重了缺血再灌注损伤。