美洲大蠊提取物对3株人体呼吸系统肿瘤细胞的细胞毒性研究

目的通过2对美洲大蠊提取物的肿瘤细胞毒性测试,探讨美洲大蠊提取物的抗肿瘤作用。方法美洲大蠊醇提取物,通过聚酰胺柱层析分离划段得不同部位,采用MTT法对所得部位进行肿瘤细胞毒性测试。结果有多个部位样品的IC50值小于10μg/ml。结论通过样品与对照品细胞毒活性结果比较,表明美洲大蠊提取物中存在具有肿瘤细胞生长抑制作用的物质,值得对其进行进一步的研究。     

美洲大蠊提取物对3株消化系统肿瘤细胞的细胞毒性研究

目的探讨美洲大蠊提取物的抗肿瘤作用。方法通过聚酰胺柱层析分离划段得到美洲大蠊醇提物的不同部位,采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）对所得部位进行体外肿瘤细胞毒性测试。结果多个部位样品的半数抑制浓度（IC50）值小于10μg／mL。结论美洲大蠊提取物中确实存在具有肿瘤细胞生长抑制作用的物质,值得进一步研究。     

美洲大蠊提取物对两株人肺癌细胞的影响

目的:探讨美洲大蠊提取物(CⅡ-3)对两株人肺癌细胞(NCI-H446、NCI-H460)的细胞毒活性及细胞周期的影响。方法:采用改良MTT法检测了CⅡ-3对NCI-H446和NCI-H460人肺癌细胞的细胞毒活性,流式细胞术检测CⅡ-3对2株细胞凋亡、坏死率及细胞周期的的影响。结果:CⅡ-3对NCI-H446和NCI-H460细胞的IC50分别为(48.98±6.63)μg.mL-1、(33.00±10.57)μg.mL-1。对NCI-H446和NCI-H460细胞凋亡、坏死率的影响具有一定的剂量依赖性。对NCI-H446细胞,25,50μg.mL-1CⅡ-3诱导细胞的不同时期发生阻滞,75μg.mL-1CⅡ-3主要诱导细胞发生坏死;对NCI-H460细胞,20,80μg.mL-1CⅡ-3主要诱导细胞S期、G2/M期发生阻滞,40μg.mL-1CⅡ-3主要诱导细胞S期发生阻滞。结论:美洲大蠊提取物CⅡ-3对2株人肺癌细胞有一定的细胞毒活性,且对2株细胞的凋亡、坏死率和细胞周期分布有一定的影响。     

美洲大蠊提取物的质量标准研究

目的:建立美洲大蠊提取物的质量标准.方法:采用TLC法对美洲大蠊提取物进行薄层鉴别,用紫外可见分光光度法测定总氨基酸的含量,用水分测定法对提取物的水分进行测定.结果:在TLC色谱中均能显现出与对照药材相同的5个斑点;氨基酸含量测定方法的线性范围为0.008 ～ 0.022 mg· mL-1 (r2=0.9981),平均加样回收率为99.3％(RSD=2.46％).结论:所建立的方法可行,重复性好,可作为美洲大蠊提取物的质量控制标准.     

美洲大蠊提取物对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的疗效研究

目的探讨美洲大蠊抗肺纤维化活性提取物(ML-HB)对博来霉素诱导肺纤维化大鼠的保护作用。方法将SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组(地塞米松3 mg·kg^-1,qd)及ML-HB高、中、低剂量组(120,60,30 mg·kg^-1,qd),采用气管暴露式注入博来霉素(5 mg·kg^-1)制备大鼠肺纤维化模型,造模24 h后经腹腔给药干预。给药第30天处死大鼠,测定肺指数,ELISA法检测肺匀浆中肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)和转化生长因子-β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)的表达,紫外法检测羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)的表达,HE染色观察肺组织炎症病变,Masson染色判定肺纤维化程度,免疫组化法观察α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)与I型胶原蛋白(type I collagen,COL-I)的表达。结果与正常组比,模型组肺指数和TNF-α、TGF-β1、HYP表达均升高(P<0.05或P<0.01),肺组织炎症和肺纤维化程度较严重、α-SMA与COL-I的表达均升高。ML-HB中剂量组较模型组肺指数和TNF-α、TGF-β1、HYP表达均降低(P<0.05或P<0.01),肺组织炎症和肺纤维化程度减轻、α-SMA与COL-I的表达均降低。结论 ML-HB可降低TNF-α、TGF-β1、HYP、α-SMA和COL-I的表达,延缓肺组织病变、干预纤维化的进一步发展。     

美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402作用机制的研究

目的探讨美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402的作用机制。方法 MTT比色法观察美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染色法研究美洲大蠊提取物对人肝癌细胞Bel-7402凋亡的影响,流式细胞术检测线粒体膜电位,DNA Ladder实验检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达。结果美洲大蠊提取物可抑制人肝癌细胞Bel-7402增殖,IC50为28.2μg.mL 1,并可诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡,降低线粒体膜电位。DNA Ladder实验可见明显的梯形电泳图谱,蛋白印迹法显示Bax、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,Caspase-8蛋白表达无明显变化。结论美洲大蠊提取物可通过线粒体途径诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡。     

美洲大蠊提取物Ento-A对湿热型溃疡性结肠炎模型大鼠的改善作用研究

目的:研究美洲大蠊提取物Ento-A对湿热型溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠的改善作用。方法:将70只大鼠随机分为正常对照组(n=8)和造模组(n=62),造模组大鼠采用高糖高脂、辛辣饮食联合2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠法复制湿热型UC动物模型。将造模成功的48只大鼠随机分为模型对照组、美沙拉嗪组(300 mg/kg)、肠炎宁(300 mg/kg)和Ento-A低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg,以提取物计),每组8只。正常对照组和模型对照组大鼠灌胃生理盐水,其余各组大鼠灌胃相应药物,每天1次,连续给药14 d。末次给药后,对大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤指数(CMDI)及病理组织学(HS)进行评分,测定大鼠脾指数、肝指数和结肠指数,并采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中白细胞介素8(IL-8)、IL-17、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和结肠组织中IL-2、前列腺素E2(PGE2)、髓过氧化物酶(MPO)水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠DAI评分、CMDI评分、HS评分、结肠指数以及血清中IL-8、IL-17、MDA水平和结肠组织中MPO、PGE2水平显著升高(P<0.01),血清中SOD水平和结肠组织中IL-2水平显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,Ento-A高剂量组大鼠DAI评分、CMDI评分及血清中IL-17、MDA水平和结肠组织中PGE2水平显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中SOD水平和结肠组织中IL-2水平显著升高(P<0.01);Ento-A中剂量组大鼠CMDI评分、HS评分以及血清中IL-8、IL-17、MDA水平和结肠组织中PGE2、MPO水平显著降低(P<0.05或P<0.01),结肠组织中IL-2水平显著升高(P<0.01);Ento-A低剂量组大鼠HS评分以及血清中IL-17、MDA水平和结肠组织中MPO、PGE2水平显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中IL-2水平显著升高(P<0.01)。结论:美洲大蠊提取物Ento-A可能通过调节免疫系统平衡、减少炎症损伤,发挥其对湿热型UC模型大鼠的改善作用。     

IGF-1通路在美洲大蠊提取物诱导胃癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨美洲大蠊提取物(Periplaneta americana extract)诱导MGC-803胃癌细胞凋亡的作用和作用机制.方法 以胃癌MGC-803细胞为研究对象,MTT法测定细胞增殖抑制率;JC-1染色测定细胞线粒体膜电位情况;DAPI染色观察细胞核形态;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blo...     

美洲大蠊多肽提取物对SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：研究美洲大蠊多肽提取物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及其分子机制。方法：采用不同质量浓度的美洲大蠊多肽提取物作用于SMMC-7721,以Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测细胞抑制率;Hoechst33342/PI与Annexin V-FITC/PI双染法相结合检测SMMC-7721细胞的凋亡;蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2和Bax蛋白表达。结果：不同质量浓度的美洲大蠊多肽提取物可抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡,呈一定的量效关系;Western Blot法显示Bax表达增多,Bcl-2蛋白表达减少,Bcl-2/Bax比值降低。结论：美洲大蠊多肽提取物可明显诱导SMMC-7721细胞凋亡,抑制其增殖,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,降低Bcl-2/Bax比值有关。     

复方蜚蠊提取物对大鼠溃疡性结肠炎肠道菌群的影响

<正>溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)与人体肠道菌群的组成和改变密切相关~([1])。复方蜚蠊提取物PA、PB、PC[P4]中的君药蜚蠊学名美洲大蠊(Periplaneta americana L.),有促进组织修复、调节免疫的作用~([2-3])。本实验研究复方蜚蠊提取物对慢性UC大鼠肠道菌群的影响。1材料1. 1实验动物SPF级SD大鼠96只,♀♂各半,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,许可证号:SCXK(湘) 2016-0004,饲养于大理大学动物中心。     

Antiproliferative effects of extracts from Iranian Artemisia species on cancer cell lines

Objective: Different species of Artemisia (Asteraceae) have shown to exhibit antitumor activity. The aim of this study was to identify the antiproliferative effect of some Artemisia species from Iran on cultured human cancer cells.

Materials and methods: Methanol, ethyl acetate, dichloromethane and n-hexane extracts from aerial parts of seven species of Artemisia were prepared and their antiproliferative effects on four cancer (AGS, HeLa, HT-29 and MCF-7) and normal cell line (L929) were determined. Different concentrations of extracts were added to cultured cells and incubated for 72?h. 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay was employed to assess the cell viability.

Results: Different extracts exert various growth inhibitory effects. In case of AGS cells, dichloromethane and methanol extracts of A. ciniformis Krasch. & Popov ex Poljak. (IC₅₀ values: 35 and 60 µg/ml, respectively) showed the highest growth inhibitory effects. HeLa cells were more sensitive to both A. diffusa Krasch. ex Poljak. dichloromethane (IC₅₀ value: 71 µg/ml) and A. ciniformis ethylacetate (IC₅₀ value: 73 µg/ml) extracts. Dichloromethane extracts of A. diffusa, A. santolina Schrenk and A. ciniformis (IC₅₀ values: 42, 91 and 94 µg/ml, respectively) exhibited more inhibition on HT-29 cells in comparison to other extracts. MCF-7 cells were best inhibited by A. ciniformis dichloromethane (IC₅₀ value: 29 µg/ml) and A. vulgaris L. ethyl acetate (IC₅₀ value: 57 µg/ml) extracts.

Discussion and conclusion: This study shows the antiproliferative effects of Artemisia extracts on malignant cell lines. Artemisia could be also considered as a promising chemotherapeutic agent in cancer treatment.     

N-containing compounds from Periplaneta americana and their activities against wound healing

Three new compounds, periplanamides A (1) and B (2), periplanpyrazine A (3), a new naturally occurring compound salicyluric acid methyl ester (6), and seventeen known compounds were isolated from the medicinal insect Periplaneta americana. The structures of the new compounds were elucidated on the basis of spectroscopic methods. The absolute configurations of 2 were assigned by computational methods. Biological activities of these isolates except 1, 9, 11, and 13 toward nitric oxide (NO) production, cell proliferation in HDFs, cell migration and angiogenesis in HUVECs were evaluated.     

美洲大蠊多肽PAP-2对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

目的:探讨美洲大蠊多肽PAP-2对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法:通过小鼠腋窝皮下注射H22肝癌小鼠腹水构建荷瘤小鼠模型。将70只小鼠随机分为模型组(生理盐水)、5-氟尿嘧啶组(阳性药对照,20 mg/kg)以及美洲大蠊提取物的脱脂膏组(200 mg/kg,以提取物量计)、CⅡ-3组(从浸膏中提取的以多肽为主要活性成分的组分,200 mg/kg,以提取物量计)和多肽PAP-2高、中、低剂量组(从CⅡ-3中分离得到,200、100、50 mg/kg,以单体量计),每组10只。5-氟尿嘧啶组小鼠隔天腹腔注射给药1次,其余各组小鼠均每天灌胃给药1次,给药周期均为10 d。给药结束后,观察小鼠瘤块变化并测定其脏器(脾、胸腺、肝)指数,苏木精-伊红染色后观察其瘤组织病理变化,并采用酶联免疫吸附试验法测定其血清中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-4的含量。结果:脱脂膏、CⅡ-3和不同剂量的PAP-2均能不同程度地抑制荷瘤小鼠瘤块的生长并升高其脏器指数,且PAP-2的作用具有一定的量效关系。其中,PAP-2高剂量组的抑瘤率(38.95%)显著高于脱脂膏组和CⅡ-3组(P<0.05),并与5-氟尿嘧啶组(40.87%)接近(P>0.05);PAP-2高剂量组小鼠脾指数、胸腺指数、肝指数较模型组均显著升高(P<0.05),并显著高于CⅡ-3组(P<0.05),且其肝指数显著高于脱脂膏组(P<0.05)。此外,PAP-2还可降低荷瘤小鼠血清中VEGF和IL-4含量、升高其血清中IL-1β含量,其中PAP-2高剂量组与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05);并且PAP-2高剂量组小鼠血清中IL-1β含量显著高于脱脂膏组和CⅡ-3组(P<0.05),IL-4含量显著低于脱脂膏组和CⅡ-3组(P<0.05),但是其血清中VEGF含量显著低于脱脂膏组和CⅡ-3组(P<0.05)。结论:美洲大蠊多肽PAP-2对H22荷瘤小鼠具有一定的抑瘤作用,可升高其脏器指数,降低其血清中VEGF、IL-4含量并升高其血清中IL-1β含量。     

狼毒生品及炮制品的体外抗肿瘤活性研究

目的对从狼毒中分离得到的4种提取物进行体外抗肿瘤活性筛选。方法采用四甲基偶氮唑盐法研究狼毒提取物对SMMC-7721、HeLa、HepG2、H460 4种人癌细胞株增殖的影响。结果狼毒提取物可以不同程度地抑制4种人癌细胞株的增殖。其中炮制品石油醚部位抑制作用最强,对SMMC-7721、HepG2、H460细胞株增殖抑制率分别为81.08%,80.39%和89.81%;炮制品乙酸乙酯部位的抑制率分别为79.06%,78.36%和67.33%。结论狼毒炮制品石油醚部位和乙酸乙酯部位是狼毒抗肿瘤作用的主要活性部位,值得进一步深入探讨和研究。