氯唑沙宗杂质的遗传毒性研究

目的：本试验在体外条件下研究氯唑沙宗杂质是否具有遗传毒性,为临床用药安全提供依据。方法：采用Derek和Sarah方法,从定量构效关系（Q）SAR的角度对氯唑沙宗杂质进行分类和评价。对于软件预测结果为阳性的杂质,进一步采用细菌回复突变试验验证上述结果。结果：氯唑沙宗杂质6(CAS:889884-60-0)、杂质7(CAS:28443-50-7)的Derek和Sarah软件预测结果为阳性。细菌回复突变试验中,杂质6、杂质7在15～1250μg/皿剂量范围内,在代谢活化系统S9存在或不存在的情况下,五种菌株的回变菌落数均未超过自发回变菌落数2倍以上,试验结果为阴性。结论：氯唑沙宗杂质6、杂质7体外细菌回复突变试验结果均为阴性,可以按照非遗传毒性杂质进行控制。     

过热蒸汽灭菌松花粉的安全性毒理学评价研究

目的 对过热蒸汽灭菌松花粉进行安全性毒理学评价,为其食用安全性提供科学依据。方法 根据国家标准要求和相关规定,对其进行急性经口毒性试验、细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和28 d经口毒性试验等毒理学评价试验。结果 受试物最大给予量达10 g·(kg·BW)^-1时,对小鼠未见毒性作用;细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验结果均为阴性,未见该样品有致突变作用;28 d经口毒性试验各项指标均未见明显毒性反应。结论 过热蒸汽灭菌松花粉的急性毒性分级属于实际无毒级,无遗传毒性,在该试验研究剂量和条件下,未见明显毒性作用,具有较高的安全性。     

人参组培不定根遗传毒性及亚慢性毒性研究

目的探讨人参组培不定根的遗传毒性及对大鼠生长、生理生化的亚慢性毒性效应。方法采用急性经口毒性试验、细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和亚慢性毒性试验进行毒理学研究。结果人参组培不定根LD_(50)10 g/kg·bw;细菌回复突变、哺乳动物红细胞微核和精子畸形3项遗传毒性试验结果阴性,未观察到致突变性;亚慢性毒性试验结果表明,在人参组培不定根1.25、2.50和5.00 g/kg·bw剂量组中,个别剂量组大鼠的周进食量、血液生化、血常规指标与超纯水对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),其余各剂量组大鼠的体重、总进食量、总食物利用率、各脏器的生长发育及组织病理学等指标均未观察到有统计学意义的不良改变(P0.05)。结论经3项遗传毒性及对大鼠生长、生理生化的毒性效应研究,未观察到人参组培不定根有明显的毒性。     

世界新药之窗

诊断试剂和生物标记最新动态美国FDA批准检测葡萄球菌感染的试验美国Nanosphere公司的Verigene葡萄球菌血培养核酸试验(Staphylococcus Blood Culture Nucleic AcidTest,BC-S Test)获得美国FDA的510(k)许可证,用于检测引起血液感染的细菌     

药食同源物质蜂蜜急性毒性和致突变性研究

目的 通过体内、体外及模式生物等方法,初步研究蜂蜜的急性毒性和潜在的致突变性。方法 采用小鼠霍恩氏法、CCK-8(细胞计数试剂)法和秀丽隐杆线虫3种模式,对蜂蜜进行急性毒性研究。通过组合实验(哺乳动物红细胞微核试验、体外哺乳类细胞TK基因突变试验和细菌回复突变试验)研究蜂蜜的致突变性。结果 蜂蜜小鼠急性经口毒性半数致死剂量LD_(50)及95%可信区间为雌性小鼠LD_(50)92.6 g/kg·bw(63.6~135.0 g/kg·bw);雄性小鼠LD_(50)92.6 g/kg·bw(57.0~150.0 g/kg·bw);蜂蜜人肾上皮细胞系293(HEK293)细胞急性毒性半数致死浓度LC50为464.2 g/L;秀丽隐杆线虫急性半数致死浓度LC50为176.9 g/L。7.5、15.0和30.0 g/kg·bw蜂蜜剂量组的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组相比,差异均无统计学意义(χ^(2)=0.22,χ^(2)=0.00,χ^(2)=0.39,χ^(2)=0.18,χ^(2)=0.00,χ^(2)=0.00,P>0.05);1.25、2.50和5.00 mg/ml蜂蜜处理小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y)总突变频率(T-MF值)与阴性对照组相比未见明显增加,增加倍数均在1倍以内;在加与不加S9混合液的条件下,8、40、200、1 000和5 000μg/皿5个浓度组的5种菌株(TA97a、TA98、TA100、TA102和TA1535)的回复突变菌落数与自发回复突变菌落数相近,致变比(MR值)均小于2。结论 依据食品安全国家标准,蜂蜜急性毒性分级判定为实际无毒;哺乳动物红细胞微核试验、体外哺乳类细胞TK基因突变试验和细菌回复突变试验均为阴性;应用体外细胞及秀丽隐杆线虫,初步得到急性毒性参考值;在本实验条件下,药食同源物质蜂蜜未见明显的急性毒性及致突变性。     

苯酚类化合物基因突变风险评价研究

目的 使用毒性预测软件和细菌回复突变试验（Ames）评价苯酚类化合物的基因突变风险。方法 通过毒性预测软件对一系列苯酚类化合物进行致突变风险预测,在不同剂量、有或无S9代谢条件下进行六孔板Ames试验,判断该类化合物苯环上不同取代基对致突变性的影响。结果 软件基于羟基苯环的存在预测该类化合物均具有致突变风险。在非S9代谢活化下,对氯苯乙酰胺可导致TA98回复突变菌落数增加,对硝基氯苯则导致TA100和TA102回复突变菌落数增加。在S9代谢活化下,对硝基氯苯导致TA100和TA1535回复突变菌落数增加,增加倍数高于无代谢活化条件,且存在浓度效应相关性。结论 对氯苯乙酰胺和对硝基氯苯存在致细菌突变性,对硝基氯苯的致突变性在代谢活化后有所增加。开展相关研究评价其毒性风险对该类化合物合理监管具有重要价值。     

安神胶囊的遗传毒性研究

目的 研究安神胶囊是否具有遗传毒性.方法 采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames)的平板掺入法,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验的间隔24 h两次给药法,以及小鼠精子畸变试验,对安神胶囊的遗传毒性进行全面的研究.结果 Ames试验中,各剂量组(5.00、2.50、1.25、0.62 mg/皿)的回复突变菌落数,与溶剂对照...     

3D打印多孔钽浸提液体外细胞毒性和遗传毒性研究

目的 考察3D打印多孔钽浸提液的细胞毒性和遗传毒性.方法 参照GB/T 16886.12标准制备3D打印多孔钽浸提液,采用噻唑蓝(MTT)法检测样品浸提液的细胞毒性,分别采用体外哺乳动物细胞染色体畸变试验、细菌回复突变试验(Ames试验)、体内哺乳动物骨髓细胞微核试验检测样品浸提液的遗传毒性.结果 样品浸提液作用于小鼠...     

一种灵敏的细菌正向突变试验方法

目前已建立的遗传毒性检测技术有 2 0 0多种 ,其中 ,Ames试验最为常用。Ames试验 ,也就是鼠伤寒沙门菌组氨酸营养缺陷型的回复突变试验 ,是Ames等在70年代建立起来的。 1983年 ,Maron和Ames把该方法规范化 ,选用鼠伤寒沙门菌的 4种品系 (TA97,TA98,T10 0 ,TA10 2 )为标准菌株来检测外源化学物的致突变能力[1 ] 。这种方法被许多实验室采纳 ,广泛用于检测食品、化妆品、药品和饮用水等测试样中的致变物。但是 ,有 2个客观事实限制了它的应用 :(1)某些DNA分子诱变物不能使所用的细菌品系发生回变 ,因此 ,回复突变试验就不能用于这类物质…     

亚硝胺化合物致突变风险研究

目的 使用毒理预测软件和细菌回复突变试验评价17种亚硝胺化合物的致突变风险,探讨亚硝胺化合物取代基结构与其致突变性风险的关联。方法 使用Derek Nexus和Sarah Nexus对17种亚硝胺化合物的致突变风险进行预测,并使用鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535和TA1537分别在无和有大鼠S9代谢活化条件下开展基于6孔板的细菌回复突变（Ames）试验,评价其致突变性风险。结果 Derek Nexus基于亚硝基结构,预测16种亚硝胺化合物（不包括NDPh）均具有致突变风险。Sarah Nexus预测所有17种均有致突变性风险,但NMEA、NEIPA和NDIPA的致突变风险较低。非S9代谢活化条件下,除NMPEA外,其余所有亚硝胺化合物的细菌回复突变试验结果均为阴性。NMPEA仅能诱导TA1537菌株回复突变菌落数增加。经大鼠S9代谢活化后,NDEA、NMOR、NDPA、NPIP和NPYR在TA97、TA100和TA1535 3个菌株中均得到阳性结果,NDMA、NMEA、NEIPA、NDBA、NMPA、NNK、NDELA、NDPh和NMPEA则在TA...     

GLP认证现场检查常见问题简析

分析统计国家食品药品监督管理局药品认证管理中心近3年来组织的42次GLP认证的现场检查结果,列举了被检查实验室出现的共性问题和由此导致的缺陷结果。在对比较常见的10类缺陷项目,如组织机构和人员、实验过程、动物和实验设施、供试品和对照品、仪器设备、动物用品、标准操作规程（SOP）等方面问题进行具体分析的同时,提出整改措施和改进建议,以期帮助受检研究机构提升GLP管理水平,提高现场核查的通过率,为新药临床研究保驾护航。     

药物安全性评价GLP规范与SOP的关系及完善质量体系初探

在药物非临床安全性评价良好实验室规范（GLP）体系下依据规范产生的标准操作规程（SOP）,构成了GLP机构运行的基本体系架构,且在药物非临床安全性评价机构的持续性组织运行和试验实施过程中不断吸收获得的新经验、认知,并借鉴其他机构、行业、不同体系中的良好实践做法,融入到现有体系内,促进和引领质量管理体系持续改进,以满足日益严格的监管机构及委托方的合规性要求。依据国内外GLP相关的指导原则,分析GLP规范与SOP的关系,并提出完善SOP质量管理体系的途径,以期为药物非临床安全性机构优化、提升质量管理体系提供参考。     

猫眼草水煎液体外致突变性的研究

目的检验猫眼草水煎液的致突变性;改进经典的A-mes试验体系使之适应于中药体外致突变性检验。方法通过经典的Ames试验检测猫眼草的体外致突变性;通过哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验检测猫眼草的致畸作用;改进的Ames试验通过增设含补充组氨酸(含量对应于猫眼草水煎液中组氨酸浓度)的阴性对照,排除样品中组氨酸成分对试验结果的影响。结果猫眼草水煎液在经典的Ames试验中为强阳性;对哺乳动物骨髓细胞染色体致畸作用为阴性;在改进的Ames试验中猫眼草水煎液的致突变性为阴性。结论经典的Ames试验不适合猫眼草水煎液致突变性检测,改进后的Ames实验体系适合。猫眼草水煎液在体外和体内均没有致突变性。     

Toxicity of binary chemical munition destruction products: methylphosphonic acid, methylphosphinic acid, 2-diisopropylaminoethanol, DF neutralent, and QL neutralent

This paper reports the toxicity and environmental impact of neutralents produced from the hydrolysis of binary chemical agent precursor chemicals DF (methylphosphonic difluoride) and QL (2-[bis(1-methylethyl)amino]ethyl ethyl methylphosphonite). Following a literature review of the neutralent mixtures and constituents, basic toxicity tests were conducted to fill data gaps, including acute oral and dermal median lethal dose assays, the Ames mutagenicity test, and ecotoxicity tests. For methylphosphonic acid (MPA), a major constituent of DF neutralent, the acute oral LD(50) in the Sprague-Dawley rat was measured at 1888 mg/kg, and the Ames test using typical tester strains of Salmonella typhimurium and Escherichia coli was negative. The 48-h LC(50) values for pH-adjusted DF neutralent with Daphnia magna and Cyprinodon variegatus were > 2500 mg/L and 1593 mg/L, respectively. The acute oral LD(50) values in the rat for QL neutralent constituents methylphosphinic acid (MP) and 2-diisopropylaminoethanol (KB) were both determined to be 940 mg/kg, and the Ames test was negative for both. Good Laboratory Practice (GLP)-compliant ecotoxicity tests for MP and KB gave 48-h D. magna EC(50) values of 6.8 mg/L and 83 mg/L, respectively. GLP-compliant 96-h C. variegatus assays on MP and KB gave LC(50) values of 73 and 252 mg/L, respectively, and NOEC values of 22 and 108 mg/L. QL neutralent LD(50) values for acute oral and dermal toxicity tests were both > 5000 mg/kg, and the 48-h LD(50) values for D. magna and C. variegatus were 249 and 2500 mg/L, respectively. Using these data, the overall toxicity of the neutralents was assessed.     

GLP法规下医疗器械生物学试验的实施要点

目的论述GLP法规下医疗器械生物学试验的实施要点。为我国推行医疗器械GLP以及为从事医疗器械检测检验的实验人员提供参考。方法介绍医疗器械生物学试验的特点、生物学评价的原则及生物学试验的实施要点。结果与结论医疗器械生物学试验应根据其材料和用途等特征选择合适的试验方法,依据风险评价、风险-利益分析、GLP及重新评价等原则进行安全性评价。     

我国药物非临床研究质量管理规范（GLP）建设的现状、问题及思考

目的阐述我国药物非临床研究治疗管理规范（GLP）建设的现状、问题及思考,以供参考。方法通过对我国药物非临床研究质量管理规范的形成和现状的阐述,从人员、实验设施、标准操作规程、质量保证体系等方面分析了我国GLP建设中存在的实际问题,提出正确认识GLP的建设和实施、GLP管理方面的一些思考。结果与结论GLP是英文GoodLaboratoryPractice的缩写,中文直译为优良实验室规范。GLP是就实验室实验研究从计划、实验、监督、记录到实验报告等一系列管理而制定的法规性文件,涉及到实验室工作的所有方面。它主要是针对医药、农药、食品添加剂、化妆品、兽药等进行的安全性评价实验而制定的规范。制定GLP的主要目的是严格控制化学品安全性评价试验的各个环节,即严格控制可能影响实验结果准确性的各种主客观因素,降低试验误差,确保实验结果的真实性。本文所探讨的GLP概念是指狭义的GLP,是药物进行临床前安全评价试验的质量管理和保证体系。     

质量保证在长期毒性试验原始资料核查中的关注点

本文论述了质量保证(QA)在长期毒性试验原始资料核查过程中的关注点和主要问题,包括方案、报告和原始记录的一致性、原始资料记录的规范性和准确性、数据核查和资料保存等。分析问题产生的原因,主要归结于GLP意识不强、GLP依从性和SOP的执行力差。对减少问题发生提出了建议和措施,包括加强GLP培训、提高对GLP和SOP的依从性、计算机化仪器系统的运用和专家对GLP单位实施飞行检查等。     

美国、经合组织和中国GLP的特征分析与比较

通过对美国、国际经济合作与发展组织(OECD)和我国三方的GLP(原则),以及产生、发展和现状进行对照和研究,试图寻找各方GLP(原则)的共同点和差异,比较各方GLP(原则)的优势.结合我国GLP现状,提出发展和完善GLP的建议,即:实施GLP需要完善的法律和监管体系;应当充分发挥质量保证部门(QAU)的作用;并且构建实验数据的电子采集系统.GLP建设是一个动态的过程.     

新冠疫情对药物非临床研究试验机构的合规性影响及应对策略

目的：探讨如何提升GLP试验机构应对新冠疫情所带来挑战的管理能力。方法：梳理中国、美国、OECD、英国的GLP监管政策,结合本机构2022年上海疫情实际经历,归纳GLP试验机构降低GLP遵从性的风险管控方法。结果与结论：GLP试验机构应着重预案能力的建设（如业务可持续性计划、灾难恢复计划）,并从加强自身质量体系建设（如及时优化或新增标准操作规范）、强化技术人员培训等方面提升GLP试验机构管理水平,才能应对各类社会重大突发事件（如新冠疫情）和满足国内外监管机构的要求。     

Mini mutagenicity test: a miniaturized version of the Ames test used in a prescreening assay for point mutagenesis assessment.

The bacterial reverse mutagenicity test on Salmonella typhimurium, known as the Ames test, is widely used by regulatory agencies, academic institutions and chemical companies to assess the mutagenic potential of raw compounds. Several attempts have been made to miniaturise the Ames test in order to fit the industrial constraint of screening more products at the low quantities available. The major limitation of these miniaturised versions of the Ames test lies in the impossibility to work with all the six strains used in the regular Ames test, especially with those showing a low spontaneous revertant frequency. We describe here a mini version of the regulatory Ames test protocol that allows a significant reduction of the quantity of test substance needed (300 mg) but remains applicable to all Salmonella strains used in the regulatory protocol. In a preliminary study, 10 in-house chemical compounds have been evaluated in the Mini Mutagenicity Test (MMT) together with some positive control substances. A first set of historical data obtained in 1999 as well as the predictivity and the sensitivity of the MMT are presented and compared to those of the regular Ames test.