bFGF和硫糖铝在持续恒压扩张术中局部联合应用对组织细胞增殖的影响

目的 研究bFGF和硫糖铝在扩张术中局部应用对细胞增殖的影响。方法 白色小猪9只，自身对照，分为实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组，对照组，扩张术中分别注入bFGF和硫糖铝、bFGF、硫糖铝、生理盐水。各动物于术后第1～14天取出扩张器后6周取材作免疫组织化学检查。结果 持续恒压扩张术同时加用bFGF和硫糖铝后，表皮层基底细胞增殖更早更明显，尤其以第3天最为显著，14d基底细胞增殖指数最低但也高于对照组（持续恒压扩张组）；真皮层成纤维细胞，毛细血管内皮细胞，毛囊上皮细胞，汗腺上皮细胞增殖更明显，早于对照组，7d达高峰，14d明显减少但仍高于对照组，6周基本恢复正常。实验Ⅱ、Ⅲ组与对照组差异无显著性意义。结论 bFGF和硫糖铝联合局部应用于扩张术，促细胞增殖作用强，从而在扩张早期有效地诱导皮肤细胞分裂增殖，促进皮肤软组织生物性生长。     

bFGF和硫糖铝加速组织扩张实验方法的建立

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和硫糖铝加速组织扩张的可行性和机理.方法用猪作为实验动物,制作持续恒压扩张模型,实验Ⅰ组在扩张器与组织之间注入bFGF和硫糖铝,实验Ⅱ组注入bFGF和生理盐水,对照组注入生理盐水,2次/日,持续用药7天;扩张完成后3天行组织学检查,皮肤即时回缩率的测量,制作皮瓣.结果实验Ⅰ组扩张器内注液量为(143±15.22)ml,实验Ⅱ组为(122±18.7)ml,对照组(121±20.09)ml,统计分析发现实验Ⅰ组与实验Ⅱ组、对照组间有显著差别(P＜0.05).实验Ⅰ组扩张器表面组织表皮层增厚,成纤维细胞和毛细血管密度显著增高,实验Ⅱ组、对照组变化较弱.扩张后皮肤组织即时回缩率实验Ⅰ组明显小于对照组(P＜0.05),实验Ⅱ组稍小于对照组,无统计学意义(P＞0.05).皮瓣形成术后4周实验Ⅰ组皮瓣伸展程度较对照组高,基本恢复正常(P＜0.05),8周实验Ⅰ组皮瓣有增宽趋势;实验Ⅱ组与对照组差别无统计学意义.结论 bFGF和硫糖铝局部应用与持续恒压扩张术结合可以促进扩张组织增生,加速扩张,该动物实验方法简单,效果可靠.     

bFGF和硫糖铝加速组织扩张实验方法的建立

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和硫糖铝加速组织扩张的可行性和机理。方法　用猪作为实验动物 ,制作持续恒压扩张模型 ,实验Ⅰ组在扩张器与组织之间注入bFGF和硫糖铝 ,实验Ⅱ组注入bFGF和生理盐水 ,对照组注入生理盐水 ,2次 /日 ,持续用药 7天 ;扩张完成后 3天行组织学检查 ,皮肤即时回缩率的测量 ,制作皮瓣。结果　实验Ⅰ组扩张器内注液量为 (1 4 3± 1 5 .2 2 )ml,实验Ⅱ组为 (1 2 2± 1 8.7)ml,对照组 (1 2 1± 2 0 .0 9)ml,统计分析发现实验Ⅰ组与实验Ⅱ组、对照组间有显著差别 (P <0 .0 5)。实验Ⅰ组扩张器表面组织表皮层增厚 ,成纤维细胞和毛细血管密度显著增高 ,实验Ⅱ组、对照组变化较弱。扩张后皮肤组织即时回缩率实验Ⅰ组明显小于对照组(P <0 .0 5) ,实验Ⅱ组稍小于对照组 ,无统计学意义 (P >0 .0 5)。皮瓣形成术后 4周实验Ⅰ组皮瓣伸展程度较对照组高 ,基本恢复正常 (P <0 .0 5) ,8周实验Ⅰ组皮瓣有增宽趋势 ;实验Ⅱ组与对照组差别无统计学意义。结论　bFGF和硫糖铝局部应用与持续恒压扩张术结合可以促进扩张组织增生 ,加速扩张 ,该动物实验方法简单 ,效果可靠     

bFGF和硫糖铝局部应用促组织扩张实验研究

目的：探讨bFGF和硫糖铝在持续恒压扩张术中局部应用的可行性。方法：以白色小家猪为实验动物,自身对照,分为3个实验和对照组,扩张同时分别注入bFGF加硫糖铝、bFGF、硫糖铝、生理盐水。扩张结束后第3天分别进行扩张器上总面积、皮肤净增面积、周围组织移行面积和皮肤即时回缩率的测量。结果：实验I组所获得的扩张皮肤面积、皮肤净增面积大于对照组（P＜0．05）;实验Ⅱ、Ⅲ组与对照组无统计学差别。结论：bFGF和硫糖铝用于持续恒压扩张术中,能有效地促进皮肤增殖扩展,扩张局部面积增加,皮肤即时回缩率降低,从而促进组织扩张。     

扩张皮肤中b-FGF和EGF的含量与扩张量的关系

目的　研究皮肤软组织扩张术中 ,扩张程度对皮肤中碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和表皮生长因子 (EGF)含量的影响。方法　以香猪为动物模型 ,实验分为 7组 :注水 1 2量组、注水 3 4量组、注水满量组、注水超量 5 0 %组、注水超量 10 0 %组、手术对照组、空白对照组。各实验组的注水时间均为 10周 ,测量各组皮肤中b FGF和EGF含量并进行统计学处理。结果　扩张皮肤中b FGF和EGF含量增加 ,与正常皮肤相比差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,超量扩张后其增加更加显著 ,与正常皮肤相比差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。结论　皮肤扩张可引起皮肤b FGF和EGF含量增加 ,其所导致的生物学效应 ,应可能与表皮细胞的增生和扩张皮瓣的血管化程度有关。     

DMSO促进皮肤快速扩张的实验研究

目的　为抑制组织扩张器周围纤维囊的形成，以实现皮肤快速扩张。方法　采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，背部埋置扩张器，实验分两组，用药组注入３０％ＤＭＳＯ，对照组注入生理盐水，常规等量扩张。扩张后切取囊壁，观察囊壁的厚度组织学及超微结构的变化。结果　用药组与对照组相比，其纤维囊厚度明显较薄，成纤维细胞功能低下。结论　ＤＭＳＯ可抑制成纤维细胞的增殖，从而抑制纤维囊的形成，由此实现皮肤快速扩张。     

皮管快速扩张的组织形态学和体视学研究

对皮管快速扩张后皮肤组织形态学和体视学进行研究。将１５只日本大耳兔分成三组：①快速扩张组，每日注水扩张一次，连续扩张７ｄ；②常规扩张组，隔３ｄ注水扩张一次，共注水扩张２１ｄ；③对照组，未置扩张器。结果表明，皮管快速扩张后皮肤表皮层增厚，细胞层次增加，真皮层增厚，胶原纤维呈疏松状态，有大量新生毛细血管和成纤维细胞，成纤维细胞增生活跃；常规扩张组有类似快速扩张组的改变；对照组则无上述变化。体视学观察显示，快速扩张皮管的血管密度和血管体积分数与对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。研究证明，皮管快速扩张是可行的。     

皮肤重叠扩张至极限后的组织学变化及其临床意义

目的:通过观察皮肤经重叠扩张至极限后的组织学变化。以探索进一步改良优化皮肤软组织扩张技术的有效途径。方法:以6只白色小家猪作为试验动物,制作重叠扩张术极限扩张(ETE)和常规扩张(RTE)动物模型,切取两种扩张方法扩张后的皮肤组织作测量及组织学观察。结果:极限扩张后皮肤真皮层明显变薄,表皮层厚度与RTE组相比无明显变化;真皮层胶原纤维排列稀疏、纤维束细小;弹力纤维广泛断裂;Ⅰ型胶原含量减低。结论:皮肤经持续重叠扩张后可达到极限;导致皮肤达到扩张极限的原因是机械力的持续过度牵拉和皮肤胶原纤维产生的相对不足。     

联合性快速皮肤软组织扩张法的研究

目的　观察联合性快速扩张法应用于皮肤软组织扩张术的效果 ,并探讨其机制。方法　在 8头小猪脊柱两侧设计 48块扩张区域 ,分为 :联合组 :耗时 1周。常规组 :耗时 3周。对照组分别测定扩张前囊内压 ;测量扩张毕皮肤表面积增加幅度、皮肤即时回缩率。结果　联合组扩张后皮肤即时回缩率 (3 6.2 3± 1.0 7) %与常规组 (3 5 .89± 0 .90 ) %比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;与对照组相比 ,联合组表皮层厚度显著增厚 (P <0 .0 1) ,真皮层显著变薄 (P <0 .0 1) ,真皮层内胶原纤维密度明显减低 (P <0 .0 1)。结论　联合性快速扩张法能获得额外皮肤组织 ,对皮肤超微结构无明显影响 ,具有扩张速度快 ,并发症少的优点。     

快速皮肤扩张的实验研究和临床应用

我们以狗为模型,利用常规和特殊染色技术,在光镜和电镜下对快速扩张后狗的皮肤进行观察,并作定量分析。结果发现扩张后的表皮层明显增厚,真皮层中的胶原纤维和弹性纤维含量均下降。电镜下可见表皮细胞间隙增宽,真皮中成纤维细胞增多,且功能活跃。同时,我们将快速皮肤扩张术应用于临床,取得了满意的效果。     

bFGF和硫糖铝在组织扩张术中的应用

目的：探索碱性居纤维细胞生长因子（bFGF）和硫糖铝在扩张术中的临床应用方法与效果。方法：皮肤瘢痕及鼻尖缺损患者共12例，经病变外边缘垂直切口埋置扩张器23个，持续恒免疫组化检测。结果：术后1－3d即可开始持续扩张，平均扩张时间为8．9d；第一、二期手术间隔平均13．5d，平均住院时间为28．4d。扩张后皮肤软组织即时回缩率平均25．7％，皮瓣全部皮活。组织学、PCNA检测显示表皮层明显增厚、细胞层数增加，胶原纤维排列较密，弹力纤维、成纤维细胞、毛细血管密度增高；增生期基底细胞增多，分布广泛。结论：采用此法扩张速度快，能明显缩知疗程，提高皮瓣质量，改善治疗效果。     

皮肤软组织重复扩张的微观研究

目的 探讨皮肤软组织重复扩张的微观变化，为临床应用提供理论依据。方法以6头小型猪为实验动物，并分为正常对照组、常规扩张组、重复扩张组，分别切取皮肤标本，进行光镜结构和超微结构的观察，以及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）含量的测定。结果重复扩张的皮肤软组织肉眼观察基本健康，其微观结构在常规扩张的基础上有进一步的变化。胶原纤维损伤明显，细胞损伤较轻并且进一步增殖和功能更加活跃。皮肤中bFGF含量进一步增高。结论重复扩张过程中，皮肤软组织虽然有进一步损伤，但通过进一步加强生长和修复功能，仍然能保持基本健康，因此，重复扩张安全可行。     

持续恒压扩张和常规间断扩张后皮肤超微结构的改变

目的：对比观察持续恒压扩张（CPTE）和常规间断扩张（CITE）后皮肤组织的超微结构改变。方法：用白色小家猪制作CPTE和CITE动物模型，切取组织样本做电镜观察。结果：CPTE组与正常皮肤和CITE组皮肤比较，皮肤基底细胞和棘细胞间距明显增大，细胞连接明显减少。两实验组扩张后的真皮中，胶原纤维结构基本正常，CPTE组成纤维细胞和血管内皮细胞的活化程度高于CITE组。两实验组中均可见到胶原溶解和成纤维细胞凋亡现象，CPTE组中表现明显。两种扩张方法均可引起毛细血管破裂出血。结论：扩张后皮肤中具有组织生长和退化的双重超微结构改变。     

应用双光子显微镜观察自体成纤维细胞填充效果

目的 通过双光子显微镜观察体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞皮内注射移植后的长期存活情况,了解胶原纤维等基质成分的变化.方法 将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)慢病毒液转染成功的成纤维细胞注射到小鼠皮内,分别于注射1、2个月后取材,行连续冰冻切片,双光子显微镜观察,对胶原的分布面积和真皮厚度做图像分析,并对所得数据进行统计学处理.结果 双光子显微镜对注射移植细胞及胶原清晰成像,注射1个月时,胶原分布面积及真皮厚度与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);2个月后胶原分布面积及真皮厚度与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 成纤维细胞注射移植到小鼠皮内可以长期存活,能够分泌胶原并增加真皮厚度,为临床上应用自体真皮成纤维细胞进行软组织填充注射治疗的可行性,提供了理论基础.     

二甲氨基乙醇和复方氨基酸溶液对衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响

目的依据中胚层疗法理念,观察真皮内注射二甲氨基乙醇（Dimethylaminoethano,DMAE）和复方氨基酸溶液（compound amino acid injection,AA）对D-半乳糖（D-galactose,D-gal）诱导的化学性衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法80只Wistar大鼠随机分为正常对照组、衰老对照组和衰老治疗组。衰老治疗组从注射D-gal后第18天开始,在大鼠两侧臀部皮肤分别皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE、0．1％DMAE、AA、生理盐水（NS）,1次／周,连续4周。观察各组皮肤组织学变化、真皮厚度、羟脯氨酸（Hydroxyproline,Hyp）、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA和成纤维细胞增殖细胞核抗体（proliferating cell nuclea antigen,PCNA）表达水平的变化。结果真皮内注射0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE＋AA可使衰老大鼠真皮厚度、Hyp、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）,而对PCNA表达无显著影响（P〉O．05）。结论真皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA可促进衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白合成,显著增加真皮厚度和胶原蛋白含量,具有一定延缓皮肤衰老的作用。     

不同波长紫外线照射对小鼠皮肤的损害

目的观察不同波长的紫外线照射对小鼠皮肤(胶原纤维和弹性纤维),对组织学及生物化学的影响,以探讨紫外线损伤皮肤的机制。方法用不同波长的紫外线照射小鼠皮肤12周后,测定各组小鼠皮肤丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。用V-G、Weigert染色方法分别显示胶原纤维和弹性纤维。用体视学测量和分析各组小鼠背部皮肤胶原纤维和弹性纤维的体密度、表面积密度和交点密度的变化。结果长波长紫外线(ultraviolet A,UVA)、中波长紫外线(ultrariolet B,UVB)照射组胶原纤维体密度、交点密度及表面积密度均低于对照组(P<0.01)。UVA照射组与UVB照射组胶原纤维变化差异无统计学意义(P>0.05)。UVA、UVB照射组弹性纤维体密度、交点密度及表面积密度、皮肤MDA含量均高于对照组(P<0.01)。结论UVA与UVB照射可使小鼠皮肤MDA、胶原纤维和弹性纤维发生改变,但两者短期内对小鼠皮肤MDA、胶原纤维损害的差异性不明显。