通心络和阿伐他汀对冠心病患者内皮功能的对比研究

目的探讨盅药通心络对冠心病患者血管内皮功能不全的改善作用.方法将60例经冠脉造影证实为冠心病的患者随机分为通心络及阿托伐他汀(商品名:立普妥)治疗组各30例,治疗3个月前后,分别利用高分辨率超声测定肱动脉血流介导的内皮依赖性舒张功能及血脂的变化.结果治疗前两组患者血脂水平、内皮依赖性舒张功能差异均无统计学意义.治疗3个月后,两组患者血流介导的内皮依赖性血管舒张功能均明显改善,通心络组由治疗前的(8.93±5.02)%升至(12.04±4.98)%(P<0.001),阿托伐他汀治疗组由治疗前的(8.65±8.63)%升至(11.75±8.87)%(P<0.001).血胆固醇(TC)通心络组由(4.68±1.03) mmol/L下降到(4.18±0.88) mmol/L,阿托伐他汀组由(5.01±0.84) mmol/L下降至(3.84±0.43) mmol/L、甘油三酯(TG)通心络组由(1.74±0.86) mmol/L下降至(1.37±0.49) mmol/L(P<0.05);阿托伐他汀组由(1.63±0.37) mmol/L下降至(1.07±0.37) mmol/L(P<0.01)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平通心络组由(2.88±0.86) mmol/L下降至(2.85±0.45) mmol/L(P<0.05),阿托伐他汀组由(3.03±0.65) mmol/L下降至(2.45±0.25) mmol/L(P<0.01),但阿托伐他汀治疗组,TG较通心络下降明显(P<0.01).结论通心络、阿托伐他汀均可改善肱动脉血流介导的内皮舒张功能,两组之间疗效无统计学意义;通心络及阿托伐他汀均可降低血清TC、TG、LDL-C水平.     

老年人胰岛素样生长因子-1、超氧化物歧化酶与骨质疏松的关系探讨

目的探讨老年人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、超氧化物歧化酶(SOD)与骨质疏松症(OP)之间的关系。方法测定150例老年OP患者(A组)和124例健康老年无OP者(B组)的IGF-1、SOD及骨密度(BMD)。结果A组患者和B组的IGF-1分别是(110.30±41.79)μg/L vs(186.13±68.13)μg/L;血清超氧化物歧化酶(T-SOD)分别是(89.57±18.67)kU/L vs(109.86±17.97)kU/L,差异有统计学意义(均P<0.01);各部位的BMD数值A组均小于B组(均P<0.01)。结论老年OP患者IGF-1、SOD明显低于无OP者,IGF-1、SOD与老年OP的发生、发展密切相关。     

1,25-二羟维生素D3对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:探讨1,25-二羟维生素D3对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响及其可能机制。方法:培养人肾小管上皮细胞并分为正常对照组(含5.5mmol/LD-葡萄糖)、高糖组(含25mmol/LD-葡萄糖)和高糖+1,25-二羟维生素D3组,细胞免疫组化方法测定各组HK-2细胞的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cad)的蛋白表达,RT-PCR半定量方法测定各组HK-2细胞的α-SMA和E-cad的mRNA表达。结果:与正常对照组相比,高糖组和高糖+1,25-二羟维生素D3组,α-SMA蛋白表达水平和mRNA表达水平明显升高(P<0.05),E-cad蛋白表达水平和mRNA表达水平明显下降(P<0.05);与高糖组相比,高糖+1,25-二羟维生素D3组α-SMA蛋白表达水平和mRNA表达水平明显下降(6.576±1.044vs.4.715±0.776;0.752±0.086vs.0.491±0.023,P<0.05),而E-cad蛋白表达水平和mRNA表达水平明显上升(2.085±0.553vs.4.970±0.845;0.163±0.036vs.0.478±0.062,P<0.05)。结论:1,25-二羟维生素D3可以抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化,其可能通过下调α-SMA的表达,上调E-cad的表达,从而抑制肾小管上皮细胞转分化,对糖尿病肾病有一定防治作用。     

活性氧介导高糖负荷致人系膜细胞癌胚纤维连接蛋白的表达

背景:研究发现,癌胚纤维连接蛋白系新合成细胞外基质的重要标志,而高糖环境氧化应激与癌胚纤维连接蛋白的关系尚未见报道。目的:观察高糖作用对人系膜细胞活性氧和癌胚纤维连接蛋白mRNA表达的影响。方法:将培养的系膜细胞分为以下各组:正常对照组(5mmol/LD-葡萄糖);渗透压对照组(5mmol/LD-葡萄糖+20mmol/LL-葡萄糖);高糖组(25mmol/LD-葡萄糖);α-硫辛酸干预组,分为高糖+LA50组(25mmol/LD-葡萄糖+50μmol/Lα-硫辛酸)、高糖+LA100组(25mmol/LD-葡萄糖+100μmol/Lα-硫辛酸)、高糖+LA200组(25mmol/LD-葡萄糖+200μmol/Lα-硫辛酸)。以RT-PCR法检测癌胚纤维连接蛋白mRNA表达水平,荧光显微镜和荧光酶标仪测定细胞内活性氧水平。结果与结论:高糖促进系膜细胞活性氧的产生,亦增加癌胚纤维连接蛋白mRNA的表达,α-硫辛酸可显著降低高糖负荷下细胞内活性氧水平,同时减少癌胚纤维连接蛋白mRNA的表达,且呈浓度依赖性,提示活性氧介导高糖负荷致人系膜细胞癌胚纤维连接蛋白的表达,α-硫辛酸可部分逆转这一效应。     

拮抗醛固酮受体对大鼠心肌细胞胰岛素敏感性的影响

目的 观察螺内酯对胰岛素诱导的心肌细胞3 H-D-葡萄糖掺入率以及脂联素、炎性因子表达的影响.方法 原代培养心肌细胞,分为对照组、胰岛素组、螺内酯10-7 mmol/L组,螺内酯10-6 mmol/L组,螺内酯10-5mmol/L组,干预24小时.检测3 H-D-葡萄糖掺入率以及心肌细胞脂联素、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)的表达变化.结果 螺内酯10-7 mmol/L、10-6 mmol/L、10-5mmol/L组心肌细胞与胰岛素组比较,其3 H-D-葡萄糖掺入率增加(12.35±1.12)nmol·mg-1·h-1、(13.07±0.62)nmol·mg-1·h-1、(13.87±0.13)nmol·mg-1·h-1 vs (10.61±1.14)nmol·mg-1·h-1,差异有统计学意义(P＜0.01);脂联素mRNA和蛋白表达量亦增加0.76±0.08、0.95±0.14、1.28±0.21 vs0.35±0.04,0.14±0.03、0.16±0.03、0.18±0.02 vs 0.22±0.08(P均＜0.01);TNFαmRNA表达量下降,0.29±0.03、0.28±0.01、0.18±0.03 vs0.33±0.05,差异有统计学意义(P＜0.01).螺内酯10-6、10-5组心肌细胞与胰岛素组比较,IL-6 mRNA表达量下降(0.24±0.02)、(0.20±0.04)vs (0.27±0.03),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 拮抗醛固酮受体可明显逆转胰岛素诱导的心肌细胞脂联素的表达下降,降低炎性因子水平,改善胰岛素敏感性.     

阿魏酸钠对L-精氨酸诱导的重症急性胰腺炎大鼠的作用

目的 研究阿魏酸钠(soaium ferulate,SF)对L-精氨酸诱导的大鼠重症急性胰腺炎(severeacute pancreatitis,SAP)的治疗作用及其机制.方法 将60只成年SD大鼠随机分为对照组、SAP组、SF组,每组20只.采用腹腔内分两次注射大剂量L-精氨酸(2.5g/kg×2,间隔1 h)的方法制备SAP大鼠模型,SAP组和SF组大鼠分2次间隔1 h腹腔内注射20%L-精氨酸溶液(2.5 g/kg×2);对照组同法予等量生理盐水.5 min后,SF组大鼠再尾静脉注射SF注射液100 mg/kg,q d×3 d,其余两组同法予等量生理盐水.72 h后比较三组大鼠腹水性状、胰腺组织病理变化和血清淀粉酶(AMY)、内皮素-1(ET-1),TNF-α,IL-6水平和胰腺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及预后.计量资料组间比较用单因素方差分析,计数资料用Fisher确切概率法检验,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 72 h后与对照组比较,SAP组出现典型的SAP病理形态改变,且大鼠血清AMY,ET-1,TNF-α,IL-6及胰腺组织NDA均显著升高[(9715.5±301.3)IU/L vs.(729.2±134.2)IU/L;(25.32±3.67)ng/L vs.(14.32±2.69)ng/L;(102.95±11.24)ng/L.vs.(38.62±3.87)ng/L;(538.63±9.53)ng/L vs.(186.35±1.19)ng/L;(34.8±3.9)mol/kg vs.(8.1±2.1)mol/kg,均P<0.01],胰腺组织抗氧化物质GSH,SOD明显降低[(7.1±0.6)mg/kg、vs.(16.9±1.9)mg/kg;(6423±1978)kU/kg vs.(29 905±z945)kU/kg,均P<0.01];与SAP组比较,SF组胰腺组织病理损害减轻且组织病理评分较低(P<0.05),血清AMY,ET-1,TNF-α,IL-6及胰腺组织NDA明显降低[(8104.6±149.9)IU/L vs.(9715.5±301.3)IU/L;(20.26±5.86)ng/L vs.(25.32±3.67)ng/L;(84.19±15.14)hg/L vs.(102.95±11.24)ng/L;(458±5.37)mol/kg vs.(538.63±9.53)ng/L;(28.3±2.5)mot/kg vs.(34.8±3.9)mol/kg,均P<0.05],胰腺组织GSH、SOD升高[(8.5±1.4)mg/kg vs.(7.1±0.6)mg/kg;(10316±2810)kU/kg、rs.(6423±1978)ldJ/kg,均P<0.05];SF组72 h死亡率低于SAP组,但差异无统计学意义(P=0.25).结论 SF能清除氧自由基、提高胰腺组织抗氧化物质SOD和GSH含量,降低血清促炎细胞因子及ET-1水平,减轻胰腺组织的病理损害,并且有可能降低死亡率,在SAP治疗中具有独特的优势.     

前列腺素E1联合α硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的疗效

目的:探讨前列腺素E1(PGE1)联合α硫辛酸治疗糖尿病合并的周围神经病变的临床效果。方法:40例糖尿病周围神经病变的患者随机分为两组,联合用药组给予PGE1和α硫辛酸,对照组单用PGE1,其他治疗方案相同,疗程均为2周。比较两组治疗前后症状、体征和神经传导速度。结果:两组治疗后症状、体征和神经传导速度均有明显改善(P<0.05);联合用药组改善幅度明显高于单药组[症状评分(2.7±0.2vs3.8±0.3,P<0.05);体征评分(4.3±0.4vs5.6±0.3,P<0.05);正中神经传导速度(45.7±4.8)m/svs(41.1±2.0)m/s,P<0.05]。结论:PGE1联合α硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变具有协同效应。     

通络方剂抗氧化作用及对大血管内皮细胞的保护

目的:观察通络方剂对1型糖尿病大鼠血清抗氧化指标和大血管内皮细胞损害的影响,并与抗氧化剂α-硫辛酸作用效果进行比较。方法:实验于2005-09/11在解放军第二军医大学动物实验中心及免疫研究所完成。①选用雄性SD大鼠23只,4～6周龄。随机抽取5只作为正常对照组大鼠(只注射等体积枸橼酸钠缓冲液),其余大鼠按60mg/kg剂量应用链脲佐菌素溶液,3d后,以空腹血糖持续≥16.7mmol/L,尿糖"者为造模成功,造模成功15只,将其按随机数字表法分为3组,每组5只:模型组,通络方剂组,α-硫辛酸组。通络方剂组:每天上午灌胃通络方剂水溶液1g/kg,通络方剂超微颗粒由人参、水蛭、全蝎、蜈蚣、土鳖虫、赤芍等药物组成,由以岭药业提供;α-硫辛酸组:每天上午灌胃α-硫辛酸(江苏常熟诚希化工有限公司)100mg/kg;其余2组均灌胃等体积的体积分数0.02的乙醇稀释液。②连续处理6周后,采用葡萄糖氧化酶法测血糖,采用可见光法检测过氧化氢酶活力,用TBA法测定丙二醛,用DTNB法定量测定谷胱甘肽过氧化物酶活力,比色法测超氧化物歧化酶活力与总抗氧化能力。透射电镜下观察胸主动脉内皮细胞的结构改变。结果:因造模失败脱失3只,其余均进入结果分析。①血清抗氧化指标:模型组血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活力和总抗氧化能力明显低于正常对照组[(0.883±0.243)mkat/L,(2.056±0.219)mkat/L,(223.21±28.84)μkat/L,(5.25±0.84)kU/L;(2.826±0.199)mkat/L,(4.890±0.358)mkat/L,(387.91±13.00)μkat/L,(9.81±1.28)kU/L,P<0.05],丙二醛水平明显高于正常对照组[(9.99±1.7),(2.42±0.89)μmol/L,P<0.05]。通络方剂组和α-硫辛酸组血清超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力明显高于模型组[通络方剂组:(1.665±0.140),(3.771±0.258)mkat/L;α-硫辛酸组:(1.851±0.132),(4.141±0.186)mkat/L,P<0.05],低于正常对照组(P<0.05)。②胸主动脉血管内皮结构透射电镜观察结果:模型组内皮细胞发生明显损害,通络方剂和α-硫辛酸组内皮细胞病变程度则明显改善。结论:通络方剂能提高糖尿病大鼠机体抗氧化能力,对糖尿病所致的大鼠血管内皮损害具有一定的保护作用。     

高血压患者胰岛素抵抗与内皮细胞功能障碍的关系

目的研究高血压患者胰岛素抵抗(IR)与内皮细胞功能的关系。方法72例原发性高血压(EH)患者分为胰岛素抵抗组(EH-IR)37例和非胰岛素抵抗组(EH非IR)35例,健康对照组25例。用化学法测定各组外周血的一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和结构型一氧化氮合酶(cNOS)水平。结果EH非IR组和EH-IR组NO水平分别为(64.79±41.96)μmol/L和(74.69±45.66)μmol/L,较健康对照组(110.21±55.79)μmol/L)降低,差异有统计学意义(均P<0.05);EH非IR组和EH-IR组NOS水平分别为(34.74±4.12)kU/L和(33.44±5.09)kU/L,较健康对照组(42.54±4.04)kU/L降低,差异有统计学意义(均P<0.01);iNOS水平分别为(13.86±3.60)kU/L和(13.67±3.95)kU/L,较健康对照组(17.02±2.78)kU/L降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。cNOS水平分别为(20.88±3.29)kU/L和(19.77±4.11)kU/L,较健康对照组(25.51±3.51)kU/L降低,差异有统计学意义(均P<0.01)。EH非IR组和EH-IR组NO、NOS、cNOS和iNOS含量的差异无统计学意义(P>0.05)。EH非IR组和EH-IR组的NO,NOS及其亚型水平与IR的相关性均无统计学意义(P>0.05)。结论高血压时内皮细胞释放NO能力的减弱与cNOS表达减弱和iNOS的表达缺陷均有关;高血压患者的IR与内皮系统损伤无明显关联。     

炎症性肠病病情活动监测指标的临床价值

目的探讨髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)作为炎症性肠病(IBD)病情活动临床监测指标的价值。方法分别观察了IBD活动组患者15例[其中活动期溃疡性结肠炎(UC)10例,活动期克罗恩病(CD)5例],IBD非活动组患者15例(其中缓解期UC10例,缓解期CD5例)和12例对照组患者的结肠黏膜病理变化,按Oshitani评分标准和d'Haens评分标准进行UC和CD组织学评分,测定结肠黏膜MPO和SOD活性。结果IBD活动组、IBD非活动组病理组织评分均比对照组高(8±5 vs 3±1)、(5±2 vs 3±1)(P<0.01),IBD活动组病理组织评分亦较IBD非活动组高(8±5 vs 5±2)(P<0.01);IBD活动组、IBD非活动组肠黏膜MPO活性均较对照组高[(3.55±0.38)U/g vs(1.52±0.24)U/g、(2.28±0.30)U/g vs(1.52±0.24)U/g](P<0.01),IBD活动组MPO活性较IBD非活动组高[(3.55±0.38)U/g vs(2.28±0.30)U/g](P<0.01);IBD活动组、IBD非活动组肠黏膜SOD活性均较对照组低[(104.58±18.91)U/mg vs(212.44±14.22)U/mg、(170.91±13.57)U/mg vs(212.44±14.22)U/mg](P<0.01),IBD活动组SOD活性较IBD非活动组低[(104.58±18.91)U/mg vs(170.91±13.57)U/mg](P<0.01)。结论MPO活性与IBD病情活动程度呈正相关,SOD活性与IBD病情活动程度呈负相关,两者可作为IBD病情活动的临床监测指标。     

解毒活血方含药血清对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞及细胞间黏附分子1的影响

目的通过观察解毒活血方含药血清(SPR)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤内皮细胞及细胞间黏附因子1(ICAM-1)的影响,探讨该方防治冠心病的作用机制。方法用10只Wistar大鼠,分成两组,每组5只,分别制备空白血清和解毒活血方含药血清,然后依据细胞培养条件对提取的血清进行分组。①空白对照组:20%空白血清+5%新生牛血清(FCS)培养液;②病理模型组:20%空白血清+100mg/L ox-LDL+5%FCS培养液;③SPR低剂量组:10%SPR+10%空白血清+100mg/L ox-LDL+5%FCS培养液;④SPR高剂量组:20%SPR+100mg/L ox-LDL+5%FCS培养液,每组各6个标本,共获得24个标本,分别检测各组超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、ICAM-1等指标的变化。结果病理模型组SOD比空白对照组明显降低,加入SPR后有明显提高,SPR高剂量组比SPR低剂量组提高更多(P<0.05或<0.01),分别为(58.26±1.34)kU/L vs(65.10±1.35)kU/L,(63.57±1.63)kU/L,(67.63±2.95)kU/L。病理模型组MDA水平和ICAM-1表达与空白对照组比较明显增加,加入SPR后有明显降低,SPR高剂量组比SPR低剂量组降低更多,分别为MDA(10.02±1.66)μmol/L vs(6.68±0.82)μmol/L,(6.87±1.26)mg/L,(6.83±0.46)mg/L;ICAM-1(0.51±0.06)mg/L vs(0.37±0.05)mg/L,(0.45±0.02)mg/L,(0.40±0.04)mg/L。结论 SPR防治冠心病的机制与抗脂质过氧化、抑制或减少炎症因子ICAM-1的释放有关。     

通心络胶囊对短暂性脑缺血发作患者血浆溶血磷脂酸含量变化的影响

目的探讨溶血磷脂酸(LPA)在短暂性脑缺血发作(TIA)发生过程中的作用以及通心络胶囊治疗对LPA含量、TIA发生的影响。方法选取经临床和CT或MRI确诊的TIA患者92例,随机分为通心络胶囊组、阿司匹林组、合用通心络胶囊及阿司匹林组(合用治疗组),选择同期健康体检者31例为健康对照组。通心络胶囊组服用通心络胶囊每天3次,每次4粒,连续服用30天。阿司匹林组服用阿司匹林片每天1次,每次100 mg,连续服用30天。合用治疗组服用通心络胶囊每天3次,每次4粒,阿司匹林片每天1次,每次100 mg,连续服用30天。全部患者于发病24小时内及治疗30天结束时测定血浆LPA含量,并与健康对照组比较。观察通心络胶囊对TIA患者血浆LPA含量变化的影响,并随访6个月内TIA发生率和出血性并发症的发生率。结果3组患者发病24小时内血浆LPA含量分别为通心络胶囊组(4.91±0.92)μmol/L,阿司匹林组(4.55±0.98)μmol/L,合用治疗组(4.67±0.94)μmol/L,显著高于对照组(1.64±1.02)μmol/L(均P<0.01);治疗后血浆LPA含量分别为通心络胶囊组(2.56±1.03)μmol/L,阿司匹林组(2.49±0.99)μmol/L,合用治疗组(1.52±0.85)μmol/L,与治疗前比较均明显降低(P<0.01),以合用治疗组下降最为显著。合用治疗组TIA发生率(23.3%)低于通心络胶囊组(41.9%)和阿司匹林组(54.8%)(均P<0.05);3组患者出血并发症发生率极低。结论TIA患者血浆LPA含量增高明显,通心络胶囊与阿司匹林均可显著降低血浆LPA含量并可减少TIA发生,二者合用效果更佳。     

通心络对2型糖尿病患者血管内皮功能和炎症反应的干预研究

目的研究通心络对2型糖尿病(T2DM)患者血管内皮功能和炎症反应的干预作用。方法选取2013年1月至2014年3月期间在绍兴文理学院附属医院和浙江大学医学院附属第一医院诊治的T2DM患者80例,分为通心络治疗组和对照组,各40例。于治疗前与治疗后8周分别测定两组患者的糖化血红蛋白(Hb A1C)、内皮素-1和超敏C反应蛋白(hs-CRP)。结果治疗后8周,对照组与通心络治疗组患者Hb A1C差异无统计学意义[(5.7±1.0)%vs.(5.9±1.0)%,t=0.639,P>0.05],通心络组患者内皮素-1和hs-CRP均明显低于对照组[(74±9)ng/L vs.(79±10)ng/L,(4.1±1.9)mg/L vs.(6.1±3.0)mg/L;t=2.743,3.709;P均<0.05]。通心络组患者的内皮素-1与hs-CRP较治疗前降低[(74±9)ng/L vs.(80±11)ng/L,(4.1±1.9)mg/L vs.(6.4±3.4)mg/L;t=2.875,3.704;P均<0.05],而对照组含量较治疗前均无明显变化[(79±10)ng/L vs.(80±10)ng/L,(6.1±3.0)mg/L vs.(6.1±3.1)mg/L;t=0.182,0.368;P均>0.05]。结论通心络可能有助于改善T2DM患者的血管内皮功能和炎症反应情况。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清抵抗素和肿瘤坏死因子水平与营养不良的关系

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者血清抵抗素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平及其与营养状况的关系.方法 采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测AECOPD患者40例和健康对照者30例血清抵抗素、TNF-α水平,分析相关因素.结果 AECOPD组患者血清抵抗素水平低于健康对照组,(3.2±1.9)μg/Lvs(4.2±2.4)μg/L,TNF-α水平高于对照组.(1 505±252)ng/L vs(397±66)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.01);AECOPD组营养不良患者抵抗素水平低于非营养不良患者,(2.6±1.8)μg/L vs(3.5±2.1)μg/L(P<0.01).AECOPD患者抵抗素水平与第1秒用力呼气客积(FEV1)及FEV1/用力肺活量(FVC)、体质量指数(BMT)及胸围、腹围呈显著正相关(r=0.356～0.493,均P<0.01),而TNF-α与FEV1、FEV1/FVC、BMI及胸围、腹围呈显著负相关(r=-0.521～-0.395,均P<0.01).结论 AECOPD患者血清抵抗素水平下降,合并营养不良时下降更加明显,而TNF-α水平则升高,合并营养不良时升高更加明显.     

阿托伐他汀抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞的氧化应激反应

目的探讨阿托伐他汀(Atv)对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响及保护作用、可能作用机制。方法 HUVECs低糖培养贴壁后分为对照A组;持续性高糖B0组、持续性高糖+不同浓度药物(0.1、1.0、10.0μmol/L Atv)B1~B3组;波动性高糖C组。高糖干预、药物培养24 h后检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)含量;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶NOX4和NOX2/gp91phox亚基的表达。所有计量数据采用均数±标准差(sx?)表示,SPSS 17.0软件处理分析。结果 (1)与对照组相比,高糖各组细胞增殖均降低(CCK-8 D450值:B0组0.74±0.085 vs.A组1.20±0.045,P<0.01;C组0.56±0.083 vs.A组1.20±0.045,P<0.01),阿托伐他汀可改善高糖对HUVECs增殖的抑制作用,呈浓度依赖性。(2)与对照组比较,高糖组NO含量及SOD活性明显降低、NOX4 m RNA及NOX2/gp91phox m RNA的表达升高,细胞凋亡率显著增高。波动性高糖组变化趋势更明显[早期凋亡率:B0组(23.48±0.73)%vs.C组(27.33±0.89)%,P<0.01]。(3)阿托伐他汀可明显升高持续性高糖诱导的SOD活性及NO的释放,减少细胞凋亡,抑制NOX4 m RNA及NOX2/gp91phox m RNA表达的增加幅度,具有明显的浓度依赖性。结论持续性高糖与波动性高糖对内皮细胞均有损伤作用,其损伤作用可能是通过氧化应激作用来实现的,波动性高糖较持续性高糖对内皮细胞的损伤作用更大。不同浓度的Atv对持续性高糖诱导的内皮细胞损伤有保护作用,呈浓度依赖性。     

缺氧诱导因子-1α对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其信号转导

目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(IRI)的保护作用及蛋白激酶C(PKC)信号转导作用.方法 采用结扎冠状动脉左前降支30 min、再灌注180 min的方法建立IRI动物模型.将32只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、IRI组、缺血预处理(IPC)组、IPC加PKC抑制剂组(IPC+Ⅰ组,IPC前静脉注射PKC抑制剂白屈菜季铵碱5 mg/kg),每组8只.再灌注180 min后取出心脏,测定HIF-1α、血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA和蛋白以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达;心内取血测定白细胞介素-8(IL-8)和髓过氧化物酶(MPO)水平.结果 与假手术组比较,IRI组心肌HIF-1α、HO-1的mRNA和蛋白及caspase-3蛋白表达均明显增多(HIF-1α mRNA:0.849±0.032比0.356±0.022,HIF-1α蛋白:0.762±0.042比0.324±0.016,HO-1 mRNA:0.862±0.045比0.332±0.012,HO-1蛋白:0.792±0.044比0.335±0.031,caspase-3蛋白:0.371±0.015比0.061±0.012,均P＜0.01),血IL-8、MPO显著升高[IL-8:(812±26)ng/L比(72±13)ng/L,MPO:(78.7±2.9)kU/L比(13.3±1.5)kU/L,均P＜0.01].与IRI组比较,IPC组HIF-1α、HO-1的mRNA和蛋白表达(HIF-1α mRNA,1.412±0.039,HIF-1α蛋白:1.362±0.045,HO-1 mRNA:1.523±0.038,HO-1蛋白:1.420±0.041)明显增多,caspase-3蛋白表达(0.129±0.019)明显降低(均P＜0.01),血IL-8[(432±59)ng/L]和MPO水平[(43.2±5.9)kU/L)明显降低(均P＜0.01).IPC+Ⅰ组各指标与IRI组无明显差异.结论 HIF-1α对心肌IRI具有重要保护作用,HIF-1α的表达是依赖PKC激活的,PKC是HIF-1α表达的重要信号转导通路.     

对氧磷酯酶-1基因多态性与2型糖尿病性肾病的关系研究

目的结合对氧磷酯酶-1(PON1)的活性,探讨其基因多态性与2型糖尿病并发肾病的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度(PCR-RFLP)分析探讨PON1基因A192B多态性在正常对照组、单纯2型糖尿病组和糖尿病肾病组分布情况;血清PON1活性以对氧磷为底物用光电比色法测定。结果①糖尿病肾病组BB基因型和B等位基因频率明显高于糖尿病组(χ2=7.839,P<0.05,χ2=53.22,P<0.01)和正常对照组(χ2=4.237,P<0.05,χ2=29.057,P<0.05)。②92例2型糖尿病患者的PON1活性比81例正常对照组显著降低[(150.9±49.7)kU/L与(226.6±64.9)kU/L,P<0.05],且2型糖尿病并发肾损害者活性下降更显著[(150.9±47.9)kU/L与(103.3±36.8)kU/L,P<0.01],回归分析表明BB基因型是糖尿病肾病的独立危险因素。结论PON1基因多态性与糖尿病性肾病有关。     

对氧磷脂酶家族与2型糖尿病及血管并发症关系的研究

目的研究对氧磷脂酶-1(PON1)活性与2型糖尿病大中血管及微血管病变的关系及丙二醛(MDA)水平的变化。方法用紫外分光光度法测定正常对照组(NC),2型糖尿病组(DM),2型糖尿病血管并发症组血清PON1活性及MDA水平。结果PON1活性在各组分别为:正常对照组(163.84±62.98)kU/L,2型糖尿病组(118.87±30.38)kU/L,并发冠心病组(DMCHD)(95.83±23.76)kU/L,并发脑梗死组(DMCI)(94.46±24.36)kU/L,并发肾病组(DN)(106.93±20.21)kU/L,并发肾病视网膜病变组(DNDR)(100.13±24.42)kU/L(P<0.01);MDA水平在各组分别为:NC组(3.48±0.50)μmol/L,DM组(4.02±0.75)μmol/L,DMCHD组(4.67±0.74)μmol/L,DMCI组(4.55±1.39)μmol/L,DN组(3.95±0.62)μmol/L,DNDR组(4.30±0.43)μmol/L(P<0.01)。结论与正常对照组相比,2型糖尿病组PON1活性降低,MDA水平升高;血管并发症组PON1活性更低而MDA水平进一步升高,说明2型糖尿病的脂质过氧化增加,血清PON1活性下降,并参与2型糖尿病及血管并发症的发生。     

通心络对糖尿病小鼠视网膜组织血管内皮生长因子及色素上皮衍生因子表达的影响

目的 观察通心络胶囊对自发糖尿病KK/Upj-Ay小鼠视网膜组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和色素上皮衍生因子(pigment epitheliumderived factor,PEDF)基因及蛋白表达的影响.方法 KK/UN-Ay小鼠40只随机分为模型组、通心络低(1 g/kg)、中(2 g/kg)、高(4 g/kg)剂量4组,通心络灌胃给药12周.以C57BL/6小鼠为对照组.应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测各组小鼠视网膜组织中VEGF和PEDF的基因表达;蛋白印迹(western blot)法检测视网膜组织中VEGF和PEDF蛋白的表达.结果 与对照组比较,模型组VEGF mRNA、蛋白表达明显增高(P＜0.01),PEDF mRNA、蛋白则明显下降(P＜0.01);通心络治疗12周后,与模型组比较,低、中、高剂量组VEGF mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P＜0.01),而PEDFmRNA和蛋白表达水平明显增高(P＜0.01).结论 通心络胶囊可通过抑制自发2型糖尿病小鼠视网膜组织VEGF的表达及提高PEDF的表达来改善视网膜病变.     

转基因小鼠胰岛β细胞株胰岛素样生长因子1受体和胰岛素受体表达与小檗碱的干预效应

目的:观察小檗碱对转基因小鼠胰岛β细胞株胰岛素受体和胰岛素样生长因子1受体mRNA表达的影响。方法:实验于2005-09/2006-10在华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所完成。①实验材料:培养NIT-1细胞,在低糖(5.5mmol/L)和高糖(11.1mmol/L)环境下,分别加入0,1,3,10,30μmol/L的小檗碱和1μmol/L的格列苯脲,0μmol/L小檗碱组为空白对照组。②实验评估:培养24h后,采用四甲基偶氮唑盐法检测小檗碱NIT-1细胞增殖抑制作用;逆转录-聚合酶链反应测定NIT-1细胞胰岛素受体和胰岛素样生长因子1受体mRNA表达。结果:①四甲基偶氮唑盐法检测发现,不同浓度小檗碱(1～30μmol/L)与NIT-1细胞作用24h后,小檗碱组吸光度值比空白对照组低,随着小檗碱浓度的增加,吸光度值逐渐从0.356±0.061降低至0.162±0.014,而且在各组之间有显著性差异。②在低糖及高糖环境下,与空白对照组相比,小檗碱能促进NIT-1细胞胰岛素受体mRNA的表达(低糖环境:0.27±0.04,0.49±0.02;高糖环境:0.22±0.04,0.42±0.03;P<0.01),但仍低于格列苯脲组(低糖环境:0.75±0.22;高糖环境:0.78±0.01;P<0.01);而且随着小檗碱浓度的升高,NIT-1细胞胰岛素受体mRNA表达的增加更为明显,分别从0.49±0.02增高至0.68±0.44及从0.42±0.03增高至0.71±0.01。与空白对照组相比,小檗碱组胰岛素样生长因子1受体mRNA的表达无明显改变。结论:小檗碱促进胰岛素分泌,其作用机制可能与促进胰岛β细胞胰岛素受体mRNA表达有关。