卵巢上皮性癌组织中磷酸化蛋白激酶B和PTEN蛋白的表达及其意义

目的探讨磷酸化蛋白激酶B（pAKT）和FYEN蛋白在卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中的表达及其相互关系,并分析两者与卵巢癌患者预后的关系。方法应用免疫组化法,检测12份正常卵巢、20份卵巢良性上皮性肿瘤、12份卵巢交界性上皮性肿瘤、80份卵巢癌组织中pAKT和PTEN蛋白的表达,并分析两者间的关系。采用单因素和多因素生存分析法分析pAKT和FYEN蛋白表达与卵巢癌患者预后的关系。结果pAKT蛋白在正常卵巢、卵巢良性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率分别为8％、10％。显著低于卵巢癌组织的55％（P〈0．01）;而FYEN蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率为45％,显著低于正常卵巢和良性上皮性肿瘤组织的100％、80％（P〈0．01）。pAKT和FYEN蛋白在交界性肿瘤组织中的阳性表达率分别为25％、67％,分别与卵巢癌组织比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。pAKT和FYEN蛋白表达与卵巢癌手术病理分期、病理分级、有无淋巴结转移和远处转移有关（P〈O．05）,而与年龄、病理类型、有无腹水无关（P〉0．05）。卵巢癌组织中pAKT和PTEN蛋白间的表达呈明显负相关关系（r=-0．444,P〈0．01）。单因素生存分析显示,手术病理分期、病理分级、有无淋巴结转移和远处转移、pAKT和FrEN蛋白阳性表达与患者预后有关（P〈0．05）。Cox回归多因素分析表明,FYEN蛋白阳性表达和手术病理分期是影响卵巢癌患者预后的独立危险因素（P〈0．05）。结论pAKT蛋白过度表达伴随PTEN蛋白表达缺失可能参与卵巢癌的发生、发展,PTEN蛋白表达缺失是卵巢癌患者预后不良的独立危险因素。     

Smac/DIABLO在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Smac/DIABLO在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化技术分别检测30例正常卵巢、30例良性上皮性卵巢肿瘤、30例交界性上皮性卵巢肿瘤及60例上皮性卵巢癌的组织中Smac/DIABLO蛋白的表达水平。结果：在上皮性卵巢癌中Smac/DIABLO阳性表达率为41.67%（25/60）,低于良性上皮性卵巢肿瘤（83.33%,25/30）和正常卵巢组织（90.00%,27/30）,差异有统计学意义（χ2=14.06,P〈0.0083;χ2=19.15,P〈0.0083）。且随组织学分级和临床分期增高,卵巢癌组织中Smac/DIABLO表达逐渐降低（F=7.23,P〈0.05;F=4.48,P〈0.05）。Smac/DIABLO阴性表达者生存期短于阳性表达者。结论：Smac/DIABLO在上皮性卵巢癌组织中阴性表达与上皮性卵巢癌不良预后相关。     

促凋亡蛋白PDCD5在卵巢上皮性癌中的表达及其与生存关系的研究

目的探讨促凋亡蛋白PDCD5（Programmed Cell Death 5）在卵巢上皮性癌组织中的表达及其与患者生存时间的关系。方法收集手术切除的卵巢癌组织107例,卵巢良性肿瘤组织16例和正常卵巢组织11例。采用免疫组织化学方法检测各组织内PDCD5蛋白的表达。利用图像分析系统和图像分析软件测定PDCD5蛋白在卵巢上皮性癌、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中表达的平均光密度值,并结合临床资料进行生存分析。结果①正常卵巢组织,卵巢良性肿瘤组织中PDCD5蛋白呈高表达;卵巢癌组织中PDCD5蛋白呈低表达;图像分析结果显示三组间差异有统计学意义（P〈0.05）;②PDCD5蛋白在不同FIGO分期和组织学分级的卵巢上皮性癌中表达有显著差异（P〈0.05）,并且随着FIGO分期和组织学分级的升高,PDCD5蛋白的表达下降;③PDCD5蛋白表达强弱与患者生存时间呈正相关（P〈0.05,R=0.731）。结论PDCD5蛋白与卵巢上皮性癌的发生、发展及临床预后有密切关系。     

Smac/DIABLO在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨Smac/DIABLO在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化技术分别检测30例正常卵巢、30例良性上皮性卵巢肿瘤、30例交界性上皮性卵巢肿瘤及60例上皮性卵巢癌的组织中Smac/DIABLO蛋白的表达水平。结果：在上皮性卵巢癌中Smac/DIABLO阳性表达率为41.67%（25/60）,低于良性上皮性卵巢肿瘤（83.33%,25/30）和正常卵巢组织（90.00%,27/30）,差异有统计学意义（χ²＝14.06,P ＜0.008 3;χ²＝19.15,P ＜0.008 3）。且随组织学分级和临床分期增高,卵巢癌组织中Smac/DIABLO表达逐渐降低（F＝7.23,P ＜0.05;F＝4.48,P ＜0.05）。Smac/DIABLO阴性表达者生存期短于阳性表达者。结论：Smac/DIABLO在上皮性卵巢癌组织中阴性表达与上皮性卵巢癌不良预后相关。     

Aurora B激酶在原发性上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的：检测AuroraB激酶在原发性上皮性卵巢癌组织中的表达情况,探讨其在卵巢癌发生发展中的意义。方法：用免疫组织化学PV二步法测定AuroraB蛋白在卵巢癌（n：61）、良性卵巢肿瘤（n=20）及正常卵巢（n=15）组织中的表达。并对所有卵巢癌患者进行随访,探讨AuroraB表达水平的临床意义。结果：原发性上皮性卵巢癌组织中Aurora-B蛋白阳性表达率（77.05％）显著高于良性卵巢肿瘤组织（25.00％）及正常卵巢组织（6.67％）（P=0.000）。Aurora-B蛋白表达水平与临床手术分期及病理分级有关（P=0.000,P=0.017）,而与组织类型及有无淋巴结转移无关（P=0.978,P=0.795）。单变量分析结果显示,Aurora.B与原发性上皮性卵巢癌复发有关。多变量分析结果显示,Aurora-B是影响患者复发的独立因素（P=0.000）。结论：Aurora-B蛋白的过度表达与上皮性卵巢癌的预后有关,有望成为观察患者预后的指标之一。     

MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:探究MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达水平及其与患者临床病理特征之间的关系。方法:免疫组化法检测46例上皮性卵巢癌、25例良性卵巢肿瘤及15例正常卵巢组织中MEX3A蛋白表达。结果:MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达明显高于良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织(P0.05),而良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织比较则无显著差异(P0.05)。MEX3A蛋白表达与上皮性卵巢癌的临床分期、淋巴结转移有关(P0.05),而与患者年龄、组织分级、组织类型及有无腹水无关(P0.05)。结论:MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中高表达,并与患者临床分期和淋巴结转移相关,在卵巢癌的发生发展中具有重要作用。     

PED/PEA-15及其磷酸化状态在卵巢上皮肿瘤中的表达及意义

目的:探讨PED/PEA-15(phosphoprotein enriched in diabetes/phosphoprotein enriched in astrocytes)蛋白及其磷酸化状态在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义。方法:免疫组化法检测40例卵巢上皮良性肿瘤(良性组)、40例卵巢交界性肿瘤(交界性组)、50例卵巢上皮癌(恶性组)中PED/PEA-15及其磷酸化状态的阳性表达水平。结果:PEA-15蛋白在良性组中表达高于交界性组及恶性组(P0.05),且在卵巢癌组中随着卵巢癌恶性程度的增高及临床分期的发展而降低(P0.05),但与患者年龄无明显相关性(P0.05)。卵巢癌中PEA-15磷酸化状态p PEA-15-Ser104蛋白表达高于交界性及良性上皮肿瘤(P0.05)。卵巢癌组织中p PEA-15-Ser104蛋白表达与组织学分级和临床分期有关(P0.05),但与有无淋巴结转移及年龄无明显相关性(P0.05);另一位点磷酸化状态p PEA-15-Ser116在不同性质卵巢组织、不同年龄、组织学分级、临床分期、淋巴结转移分组中表达无差异(P0.05)。结论:PEA-15及其磷酸化状态在卵巢癌的发生发展中发挥重要作用,可否通过调控PED/PEA-15的磷酸化状态从而使之成为卵巢癌治疗的重要靶点仍需进一步研究。     

Akt基因在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:检测Akt基因在正常卵巢组织、上皮性卵巢囊肿、交界性上皮性卵巢肿瘤和上皮性卵巢癌组织中的表达水平,探讨其在上皮性卵巢癌演变过程中的作用及临床意义。方法:收集正常卵巢组织10例、良性上皮性卵巢囊肿组织15例、交界性上皮性卵巢肿瘤组织15例和上皮性卵巢癌组织40例。RT-PCR和Western blot法分别检测Akt mRNA和蛋白的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。采用Akt激酶特异性抑制剂Triciribine分别作用于上皮性卵巢癌SKOV3、ES-2细胞,MTT法和FCM分别检测细胞增殖和凋亡,比较单独抑制剂Triciribine、单独顺铂及联合两种制剂的治疗方案对SKOV3、ES-2细胞的作用。结果:(1)Akt1、Akt2、Akt3 mRNA及p-Akt在正常卵巢组织、上皮性卵巢囊肿、交界性上皮性卵巢肿瘤和上皮性卵巢癌组织中均有表达,上皮性卵巢癌组织中的表达水平显著高于其余3组(P0.05);(2)p-Akt表达水平、总Akt mRNA水平与上皮性卵巢癌的临床分期和组织分级有关(P0.05),而与患者年龄和病理类型无关(P0.05);(3)Triciribine能有效抑制SKOV3、ES-2细胞中p-Akt水平,呈浓度依赖性抑制癌细胞生长率,联合顺铂处理可增加癌细胞的凋亡率。结论:Akt在上皮性卵巢癌组织过度激活,与临床分期和组织分级相关。Akt异常激活不仅是上游PI3K异常激活的后续效应,同时与Akt自身扩增密切相关。Triciribine阻断Akt的信号传导可增强顺铂化疗的疗效。     

卵巢上皮性肿瘤组织中KiSS-1、基质金属蛋白酶9和核因子κBp65蛋白的表达及其相关性

目的 探讨KiSS-1、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、核因子κB（NF-κB）p65蛋白3者在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其相关性。方法 采用免疫组化方法检测50份卵巢上皮性癌（卵巢癌）、20份卵巢交界性肿瘤、20份卵巢良性肿瘤和10份正常卵巢组织中KiSS-1、MMP-9、NF-κBp65蛋白的表达,并分析其临床意义及3者间的相关性。结果 KiSS-1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率（80％）明显高于良性肿瘤组织及正常卵巢组织（分别为35％、10％;P〈0．05）;在卵巢交界性肿瘤组织中阳性表达率（65％）明显高于正常卵巢组织（P〈0．05）。在卵巢癌组织中,KiSS-1蛋白阳性表达率与淋巴结转移有关（P〈0．05）,与手术病理分期、病理类型及病理分级均无关（P〉0．05）;MMP-9蛋白阳性表达率与手术病理分期及淋巴结转移有关（P〈0．05）,而与病理类型及病理分级均无关（P〉0．05）;NF-KBp65蛋白阳性表达率与手术病理分期、病理分级及淋巴结转移有关（P〈0．05）,而与病理类型无关（P〉0．05）。在卵巢癌组织中,KiSS-1与MMP-9、NF．KBp65蛋白表达呈显著负相关关系（rs=-0．547,P〈0．05;rs=-0．414,P〈0．05）;MMP-9与NF-κBp65蛋白表达呈显著正相关关系（rs=0．695,P〈0．05）。结论 KiSS-1基因可能对卵巢癌的转移起一定的抑制作用;KiSS-1基因可能通过抑制MMP-9、NF-κB基因,从而发挥抑制卵巢癌转移的作用。     

eIF4A在卵巢上皮性癌中表达及其与预后的关系

目的:检测真核细胞起始因子4A(e IF4A)在不同卵巢组织中的表达,探讨其临床意义及其与预后的关系。方法:利用荧光实时定量PCR及Western blot法检测42例卵巢上皮性癌(EOC)组织、15例卵巢交界性上皮性肿瘤组织、15例卵巢良性上皮性肿瘤组织和20例正常卵巢组织中e IF4A mRNA及蛋白的表达情况,同时采用免疫组化SP法检测123例EOC石蜡切片中e IF4A蛋白表达情况,并评估影响患者总生存率的高危因素。结果:EOC中e IF4AmRNA及蛋白表达显著高于交界性、良性及正常卵巢上皮组织(P0.05);交界性上皮肿瘤组织明显高于良性及正常卵巢上皮组织(均P0.05);卵巢良性上皮性组织略高于正常卵巢组织,但差异无统计学意义(P0.05)。EOC中e IF4A表达与FIGO手术病理分期、组织学分级、淋巴结转移及腹水情况有关(P均0.05),而与年龄及组织学类型无关(P0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,e IF4A蛋白高表达者的总生存率明显低于低表达者(Log-Rank检验,P0.05)。COX比例风险模型分析发现,临床病理分期、组织学分级及术后有无残余瘤灶是EOC患者的独立预后因素(P0.05)。结论:e IF4A在EOC的发生进展中可能起重要作用,有可能成为判断预后的指标之一。     

雌激素受体β与磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶1、2在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中雌激素受体β(ERβ)与磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶1、2(p-ERK1/2)的表达及其与临床病理参数的关系。方法:选取2010年10月至2011年12月青岛大学医学院附属医院经病理证实的上皮性卵巢癌组织标本70例,卵巢良性肿瘤24例,正常卵巢组织24例。采用RT-PCR和免疫组织化学SP法检测上述组织中ERβ和p-ERK1/2的表达。结果:(1)卵巢癌组织中ERβmRNA相对表达水平(0.3764±0.9826)显著低于卵巢良性肿瘤(0.4900±0.3742)及正常卵巢组织(0.4980±0.0434)(P<0.05)。卵巢癌组织中ERβ表达与组织学分型、细胞学分级及淋巴转移有关(P<0.05);ERβ蛋白阳性表达率及其与临床病理特征关系与ERβmRNA一致;(2)ERK1/2 mRNA相对表达水平(0.6007±0.1554、0.6951±1.3694)显著高于卵巢良性肿瘤(0.3575±0.0479、0.5125±0.0411)及正常卵巢组织(0.3027±0.1024、0.5431±0.0811)(P<0.05);ERK1/2表达与细胞学分级、临床分期及腹水有关(P<0.05);p-ERK1/2蛋白阳性表达率及其与临床病理特征与p-ERK1/2 mRNA一致。ERβ蛋白与p-ERK1/2蛋白表达呈负相关(r=-0.282,P<0.05)。结论:ERβ低表达和p-ERK1/2高表达于卵巢癌组织,可能在卵巢癌的发生、发展中有重要作用。     

卵巢上皮性癌组织中KiSS-1基因及其受体GPR54 mRNA的表达及其意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1及其受体GPR54mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR技术检测37例卵巢上皮性癌、15例卵巢交界性上皮性肿瘤、15例卵巢良性上皮性肿瘤及11例正常卵巢组织中KiSS-1基因及其受体GPR54mRNA的表达,并分析其与各临床病理指标的相关性。结果KiSS-1mRNA在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为68%、60%)及表达水平(分别为0·82±0·09、0·80±0·10)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为20%、18%和0·65±0·10、0·66±0·06;P均<0·05);且KiSS-1mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平均与手术病理分期和淋巴结转移有明显相关性(P<0·05)。GPR54mRNA在卵巢上皮性癌、卵巢交界性上皮性肿瘤、卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织中的阳性表达率(分别为70%、67%、60%和45%)及表达水平(分别为0·79±0·07、0·76±0·10、0·73±0·07和0·78±0·08)分别比较,差异均无统计学意义(P>0·05);GPR54mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平与手术病理分期、病理分级、病理类型、淋巴结转移及腹水生成均无相关性(P>0·05)。结论KiSS-1基因及其受体GPR54可能在抑制卵巢上皮性癌浸润和转移的过程中起重要作用。     

Absence of estrogen receptor-beta expression in metastatic ovarian cancer

OBJECTIVE: To evaluate the expression of estrogen receptor (ER)alpha and ERbeta mRNA and protein in normal ovarian tissue and primary and metastatic tumors. METHODS: Estrogen receptor alpha and ERbeta expression was studied in normal ovarian biopsies (n = 9) and primary (n = 8) and metastatic ovarian epithelial cancers (n = 8). Ovarian tissue was collected from surgical samples. Estrogen receptor alpha and ERbeta mRNA expression was compared by coamplification of the mRNA of the ERs. Expression was confirmed at the protein level by Western blot analysis using antibodies specific for each receptor. RESULTS: Among eight primary ovarian cancer samples, three had only ERalpha, two had only ERbeta, and three had both. All eight metastatic ovarian cancer tissues expressed only ERalpha mRNA and protein. Biopsies from normal ovaries had ERalpha and ERbeta mRNA and protein. Two of the ovarian epithelial cancer samples were paired and showed the same results. CONCLUSION: We found varying amounts of ERalpha and ERbeta in normal ovaries, lower levels of ERbeta expression in ovarian epithelial cancer primary tumors, and only ERalpha in metastatic tumors. Our findings indicate that a fundamental difference might exist between primary and metastatic cells, which could be caused by intrinsic or extrinsic factors that regulate ER gene expression.     

Prostate-derived Ets factor is overexpressed in serous epithelial ovarian tumors.

The frequent overexpression of prostate-derived Ets factor (PDEF) mRNA in ovarian cancer has been previously reported. The aim of this study was to evaluate PDEF protein expression in ovarian cancer and how this expression might vary at different stages of epithelial ovarian tumors in comparison to normal ovary. A new rabbit polyclonal antibody to PDEF was prepared, and immunohistochemistry was performed on tissue sections from 12 normal ovaries, 10 cases of benign serous cystadenoma, 17 cases of low malignant potential tumor, 19 cases of stage 1, and 15 cases of advanced stage primary epithelial (serous) ovarian carcinomas and their peritoneal metastases. Expression levels were assessed based on the percentage of positively staining cells and the intensity of staining. All 12 normal ovary and 10 benign serous cystadenoma cases were negative for PDEF expression. In contrast, 6 of 17 (35%) low malignant potential tumors, 5 of 19 (27%) stage 1, and 5 of 15 (33%) advanced stage ovarian tumors stained positive for PDEF expression. Together, these results show frequent overexpression of PDEF protein in epithelial ovarian tumors and its lack of expression in normal ovary and cystadenomas, and this supports a role for PDEF in ovarian tumorigenesis. Furthermore, these results suggest that PDEF is a potential marker and target in ovarian cancer.     

上皮性卵巢癌患者外周血中RRM2的表达及临床意义

目的:探讨核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达,初步探讨其作为肿瘤标记物在上皮性卵巢癌诊断中的意义。方法:应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测70例上皮性卵巢癌、16例低度潜能卵巢恶性肿瘤、15例卵巢良性肿瘤患者和15例健康外周血标本单个核细胞中的RRM2相对表达量。结果:(1)上皮性卵巢癌患者与低度潜能恶性肿瘤患者外周血中的RRM2 mRNA相对表达量显著高于良性卵巢肿瘤患者和正常对照组(P<0.05),后两组比较则无显著差异(P>0.05);(2)RRM2 mR-NA表达随临床分期的进展呈上升趋势(P<0.05),RRM2 mRNA表达量与FIGO分期、腹水、组织分化、淋巴转移及大网膜转移有关(P<0.05),与患者年龄、组织学分型无关(P>0.05);(3)上皮性卵巢癌患者外周血中RRM2 mRNA与血清中CA125、HE4的表达呈正相关(P<0.05);(4)ROC曲线分析显示,RRM2 mRNA临界值为1.759时诊断指数最大(敏感性94.3%,特异性76.6%),AUC=0.896(95%CI 0.819～0.948,P=0.000)。结论:RRM2 mRNA可能在上皮性卵巢癌的发生发展中发挥癌基因的作用,有望成为诊断上皮性卵巢癌的新指标。     

14-3-3γ在人卵巢上皮性癌中的表达检测

目的:检测14-3-3γ在卵巢上皮性癌组织的表达,探讨在卵巢上皮性癌发病机理中14-3-3γ蛋白家族的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR方法检测14-3-3γ在15例正常卵巢组织和52例卵巢上皮性癌组织中的表达差异,应用原位杂交方法检测14-3-3γ mRNA在正常卵巢组织和卵巢上皮性癌组织中的定位。结果:实时荧光定量PCR结果经过Mann-Whitney U检验,表明卵巢癌组的14-3-3γ mRNA水平显著高于正常卵巢组。14-3-3γ mRNA定位于卵巢癌细胞中,在正常卵巢组织中没有明显信号出现。结论:在人上皮性卵巢癌中,14-3-3γ转录上调,14-3-3γ mRNA定位于癌细胞。由此推测,14-3-3γ可能参与了人上皮性卵巢癌的发生。     

卵巢上皮癌IL-7mRNA表达的研究

目的 :研究卵巢上皮癌组织及细胞株中IL 7mRNA的表达 ,探讨IL 7是否参与了卵巢癌的局部免疫调节 ,为IL 7用于卵巢癌基因治疗提供实验基础。方法 :以 6例正常卵巢组织为对照 ,采用RT PCR方法测定 4 2例卵巢上皮癌组织及 2株卵巢癌细胞株SKOV3和 3AOIL 7mRNA的表达。结果 :6例正常卵巢组织未能检测到IL 7mRNA的表达 ,4 2例卵巢上皮癌组织只有 2例表达IL 7mRNA ,表达率为 4 .8% ,SKOV3和 3AO均不表达IL 7mRNA。结论 :卵巢上皮癌组织IL 7mRNA表达率低 ,推测IL 7未能在卵巢癌癌灶和腹腔局部发挥重要抗肿瘤作用。