均匀设计法优选山茱萸九蒸九晒炮制工艺

目的:优选山茱萸最佳九蒸九晒的炮制工艺。方法:以水浸出物、多糖、莫诺苷、马钱苷、5-羟甲基糖醛(5-HMF)的含量为评价指标,采用均匀设计法考察黄酒用量、焖润时间、蒸制时间和蒸制次数对炮制工艺的影响,确定山茱萸最佳九蒸九晒炮制工艺。结果:山茱萸最佳九蒸九晒炮制工艺:黄酒用量为药材的15%、焖润时间为1.5 h、蒸制时间为1.5 h、蒸制次数为9次。结论:优选所得炮制工艺稳定可行,为规范九蒸九晒山茱萸炮制工艺和炮制品质量评价提供数据支撑,并为传统炮制技艺的传承开发提供科学基础。     

基于HPLC-MS及网络药理学探讨熟地黄炮制过程与美拉德反应的相关性

目的:基于HPLC-MS法探讨九蒸九晒熟地黄炮制过程中与美拉德反应相关化学成分的变化及炮制辅料黄酒对其的影响,同时借助网络药理学探讨熟地黄炮制过程中美拉德反应产物对血液流变及止血作用影响。方法:对清蒸-九蒸九晒熟地黄及酒蒸-九蒸九晒熟地黄样品进行HPLC-MS测定及主成分分析,通过多级质谱离子碎片对各化学成分进行鉴定;运用网络药理学构建"化合物-靶点-基因"网络,基于京都基因与基因组百科全书(KEGG)进行通路富集分析。结果:共鉴定出19种与美拉德反应相关的化学成分。随着蒸晒次数的增加,清蒸法和酒蒸法制熟地黄样品中部分成分的含量降低,蜜二糖及葡萄糖含量呈先增加后降低的趋势,5-HMF含量呈增加趋势。主成分分析结果显示,随着蒸晒次数的增加,清蒸法和酒蒸法制熟地黄样品均沿着PC1轴变化;酒蒸法制熟地黄样品在主成分分析得分图中的位置较离散。网络药理学研究结果表明,熟地黄发挥改变血液流变及止血功能的化合物多为美拉德反应产物。结论:熟地黄九蒸九晒的炮制过程中,以第5次蒸晒效果为最佳,而炮制辅料黄酒可能会加速美拉德反应的进程,美拉德反应产物是熟地黄发挥改变血液流变及止血的主要作用物质。     

何首乌“九蒸九晒”炮制工艺优选及对L02肝细胞生长的影响

目的探索何首乌"九蒸九晒"最佳炮制工艺及不同炮制品对正常人L02肝细胞生长的影响。方法选择蒸制时间、炮制次数、晒制时间3个因素,采用L9(34)正交试验,以二苯乙烯苷、游离蒽醌、结合蒽醌含量为考察指标,优选炮制工艺;以细胞抑制率为评价指标,考察何首乌不同炮制品对L02肝细胞生长的影响。结果优选的何首乌"九蒸九晒"最佳炮制工艺为:蒸制4 h,晒制4 h,蒸晒11次。优选炮制品的肝细胞抑制率为2.86%,药典法炮制品的肝细胞抑制率为23.67%。结论本研究优选的何首乌"九蒸九晒"炮制工艺结果可靠,评价指标可控,所得炮制品的肝细胞抑制率低于药典法炮制品。     

地黄不同工艺炮制过程中主要活性成分的变化规律研究

目的:研究地黄在常压一次蒸制工艺和"九蒸九晒"工艺炮制过程中主要成分的变化规律,并比较两者之间的差异。方法:采用高效液相色谱法测定地黄不同工艺炮制品中梓醇、毛蕊花糖苷、地黄苷A、5-羟甲基糠醛(5-HMF)和葡萄糖的含量。结果:在常压一次蒸制和"九蒸九晒"工艺过程中,随着炮制程度的加深,梓醇、地黄苷A和毛蕊花糖苷的含量下降幅度较大,5-HMF和葡萄糖的含量逐渐增加,且不同炮制工艺会使熟地黄中主要成分含量有着不同程度的改变。结论:常压一次蒸制16 h熟地黄与"九蒸九晒"熟地黄在主要成分含量上有很大差异,炮制过程中增量成分5-HMF可以作为评价地黄炮制质量的一个辅助指标。     

基于代谢组学分析不同蒸制次数熟地黄中糖类成分的变化规律

目的:基于代谢组学技术研究不同蒸制次数的熟地黄中糖类成分的变化规律。方法:收集采用传统方法加工的第1蒸至第9蒸熟地黄样品,分别对其水提液进行1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生及LC-MS测定。采用SIMCA-P 13.0软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),得到差异标记物,通过多级质谱离子碎片及对照品比较对差异标记物进行鉴定。结果:经OPLS-DA共鉴定了6种糖类化合物,分别为甘露三糖、蜜二糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;其中甘露三糖和蜜二糖逐渐降低,在第9蒸熟地黄中相对峰面积最低,分别为0.60和0.52;阿拉伯糖逐渐升高,在第9蒸熟地黄中相对峰面积达到4.74;甘露糖先升高后降低,其相对峰面积在第5蒸熟地黄中最高,达3.33;而葡萄糖和半乳糖基本上处于稳定状态。PCA结果显示第1蒸至第9蒸熟地黄沿着PC1轴逐渐改变,糖类代谢物发生着显著变化。结论:不同蒸制次数的熟地黄样品中糖类成分差异较大,可为九蒸九晒熟地黄的质量评价提供实验依据。     

UV结合MIR光谱探讨地黄炮制过程糖的动态变化规律

目的 探讨地黄九蒸九制过程中糖的动态变化规律，建立快速鉴别不同蒸制次数地黄的方法。方法 采用紫外分光光度计测定不同蒸制次数地黄多糖含量；采集不同蒸制次数地黄的红外光谱，运用聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析对红外光谱进行差异性分析。结果 随着蒸制次数的增加，地黄中多糖含量逐渐升高，在第五次蒸制时出现转折，而后急剧下降，六次蒸制后多糖含量变化波动范围很小，最后趋于动态平衡。建立的红外图谱共标定8个共有峰，聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析结果显示，生地、第五次蒸制的熟地黄各自聚为一类；第一、二、三、四次蒸制的熟地黄聚为一类；第六、七、八、九次蒸制的熟地黄聚为一类，正交偏最小二乘法-判别分析筛选出两个差异贡献波段3392cm^-1和1153cm^-1,其中1153cm^-1是糖苷的特征吸收峰波段。结论 不同蒸制次数地黄之间存在明显差异，红外光谱结合化学计量学可为快速鉴别地黄蒸制次数提供理论参考。     

熟地黄炮制(九蒸九晒)过程中药效化学成分量变化及炮制辅料对其影响研究

目的基于HPLC法探讨炮制辅料黄酒对九蒸九晒制备得到的熟地黄的化学成分动态变化的影响差异性。方法色谱柱为Hypersil GOLD a Q C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),体积流量为1 m L/min,柱温为25℃。梓醇定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(1∶99),检测波长为210 nm;地黄苷A定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(3∶97),检测波长为203 nm;地黄苷D和益母草苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(4∶96),检测波长为203 nm;毛蕊花糖苷定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(16∶84),检测波长为334 nm;5-羟甲基糠醛(5-HMF)定量测定:流动相为乙腈-0.1%磷酸水(11∶89),检测波长为284 nm。糖类成分的测定:色谱柱为Accurasil NH2柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(72∶28),体积流量为1 m L/min,柱温25℃,检测器为ELSD,Alltech2000ES,漂移管温度93℃,气体体积流量2.6 L/min。采用SPSS 20.0进行统计分析,将清蒸-九蒸九晒与酒蒸-九蒸九晒制得的不同蒸晒次数的熟地黄中12种化学成分定量测定数据进行配对样本t-检验。结果随蒸晒次数的增加,清蒸法与酒蒸法制得熟地黄中梓醇及益母草苷、毛蕊花糖苷、水苏糖、蔗糖、棉子糖均减少;地黄苷A及地黄苷D略为增加;5-HMF、果糖、葡萄糖、甘露三糖均增加。结论建立的方法符合方法学验证要求。在古法熟地黄九蒸九晒的炮制过程中,炮制辅料黄酒对炮制品的质量存在显著影响,且清蒸法与酒蒸法均以第3次、第4次及第6次蒸晒所得熟地黄的相关物质的量呈较大的波动性。     

基于多指标综合评价优选酒黄精传统蒸制工艺

目的：针对“九蒸九晒”中的“九”尚不明确的问题,本实验通过探究酒黄精1～9次蒸制过程中浸出物和多糖含量的变化规律,同时考察不同蒸制次数的酒黄精饮片对免疫抑制小鼠的免疫调节作用,从而优选出最佳的蒸制次数。方法：以外观性状、浸出物含量及多糖为评价指标,采用综合评分法优选出综合评分值前3位的酒黄精饮片;采用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,观察3批酒黄精分别给药后小鼠的体质量变化情况和免疫脏器指数,通过碳粒廓清实验分析吞噬细胞功能,从而优选出酒黄精最优的蒸制次数。结果：综合评分法结果显示四蒸四晒、五蒸五晒、六蒸六晒酒黄精的综合评分值最高,分别是0.72、0.66、0.75;与模型组比较,四蒸四晒、五蒸五晒、六蒸六晒组的体质量变化率显著升高(P<0.01,0.05),胸腺、脾脏指数显著升高(P<0.01),吞噬细胞功能有显著改善(P<0.01,0.05);3批酒黄精组比较,体质量变化率与胸腺指数差异无统计学意义,六蒸六晒组脾脏指数高于四蒸四晒组(P<0.05),六蒸六晒廓清校正指数显著升高(P<0.05)。结论：六蒸六晒酒黄精性状、浸出物、多糖综合评分值最高;酒黄精按...     

滇黄精炮制前后化学成分变化研究

目的 探究滇黄精Polygonatum kingianum传统炮制过程化学成分变化规律。方法 按照九蒸九晒法进行滇黄精炮制,应用分光光度法和HPLC测定炮制过程中总多糖、总皂苷、总多酚、总黄酮和游离氨基酸的含量。应用UPLC-MS/MS的广泛靶向代谢组学技术检测原料和炮制后的代谢产物。结果 随着炮制次数的增加,颜色逐渐加深,第3次蒸制后为深褐色,第4次至炮制结束缓慢转变为黑色。滇黄精原料具有麻味,第4蒸之后麻味消失,变为酸甜味。炮制过程中多糖和16种游离氨基酸含量降低,总皂苷、总黄酮和总多酚含量增加。广泛靶向代谢组学共检测到419个代谢物,氨基酸及其衍生物66个,脂质65个,酚酸类52个,黄酮类51个,有机酸42个,生物碱41个,核苷酸及其衍生物32个,甾体9个,木脂素和香豆素7个,异黄酮1个,萜类3个,其他类物质50个。结论 系统阐述了滇黄精九蒸九晒炮制过程中化学成分的变化,九蒸九晒对滇黄精中的化学成分影响较大,随着炮制时间的增加,氨基酸及其衍生物和生物碱类化合物的相对丰度降低,有机酸和酚酸类相对丰度增加等。该研究可为炮制滇黄精有效成分的筛选与质量评价提供参考,同时差异性成分的发现为研究滇黄精生熟饮片中差异性物质的分析提供新思路,对滇黄精的扩大开发利用有重要意义。     

黄精不同九制炮制的过程研究

目的对比清蒸、酒蒸黄精"九蒸九制"炮制过程中主要化学成分及性味的变化规律,探索黄酒在"九蒸九制"炮制过程中的作用。方法以黄精多糖、黄精皂苷、5-羟甲基糠醛、浸出物含量及性味为指标,比较不同辅料对黄精"九蒸九制"炮制过程的影响。结果 "九蒸九制"过程中,清蒸黄精与酒蒸黄精各成分指标变化规律一致,黄精蒸制后颜色逐步加深,黄精多糖含量下降明显,皂苷类含量显著上升,5-羟甲基糠醛含量随蒸制次数的增加而升高,浸出物含量随蒸制次数的增加而略有下降。相对而言清蒸黄精的多糖、皂苷及浸出物含量均略高于酒蒸黄精,其5-羟甲基糠醛含量略低于酒蒸黄精,酒蒸黄精较清蒸黄精更快达到性状终点。结论通过首次对比清蒸、酒蒸黄精"九蒸九制"炮制过程变化,发现黄酒可加快黄精九蒸九制的炮制过程。     

正交试验优选酒炙广地龙炮制工艺

目的：优选出酒炙广地龙最佳炮制工艺。方法：以次黄嘌呤的含量为评价指标,选择加酒量、闷润时间、烘干温度三个主要影响因素,用L9（3^4）正交设计表,采用方差分析法,对广地龙进行酒炙工艺的优选。结果：酒炙广地龙的最佳炮制工艺,每20g饮片,加10ml黄酒,闷润50min,40℃干燥。结论：本方法为规范酒炙广地龙的炮制工艺,提高酒炙广地龙的质量,提供了科学依据。     

不同方法炮制前后石斛中石斛碱及石斛多糖含量测定

目的:比较石斛干品与不同炮制品中石斛碱及多糖含量差异。方法:通过高效液相色谱法测量石斛碱含量,以苯酚-硫酸法检测多糖含量。结果:干品石斛碱含量0.182%、黄酒炙品0.218%、白酒炙品0.216%、黄酒润蒸制品0.225%、白酒润蒸制品0.283%、蒸制品0.229%;干品多糖含量5.48%、黄酒炙品5.80%、白酒炙品7.56%、黄酒润蒸制品8.31%、白酒润蒸制品12.5%、蒸制品8.72%。结论:石斛炮制过后石斛碱与多糖含量均有所增高,不同炮制品之间石斛碱和多糖含量也有一定差异。     

博落回药材采收及初加工工艺研究△

目的：确定博落回根、叶、果的最佳采收期及最佳产地初加工工艺。方法：采用RP．HPLC法同时测定各指标成分的含量。结果：实验数据表明博落回根、叶、果的最佳采收期分别为5月下旬、6月及8月下旬至9月上旬,从综合利用资源的角度出发,可在采集叶、果后再采收根。除博落回根外,不同干燥方式处理的博落回叶、果中各指标成分的含量无明显差异。结论：本研究表明博落回根、叶、果的最佳产地初加工工艺流程：最佳或适宜采收期采摘→净选→清洗或擦净→根、果荚45℃～65℃烘干、晒干,叶45℃烘干、阴干、晒干。     

天冬采收后待加工时间对天冬多糖含量的影响

目的：考察采收后待加工时间对天冬多糖含量的影响。方法：药材采收后,按照加工的日期不同,测定天冬中多糖的含量;采用紫外一可见分光光度法,多糖的显色使用硫酸一苯酚。结果：天冬中多糖的含量,放置1天的含量最大,其后下降,放置1、2天的样品之间有极显著性差异,放置3—7天的样品之间的含量无显著差异;结论：放置时间对天冬中多糖的含量有显著性的影响,根据实验结果分析,建议天冬采收后应及时加工处理。     

响应面法优化熟大黄炮制工艺

目的以多成分综合评分结合响应面法筛选熟大黄的最佳炮制工艺。方法以没食子酸、大黄酚-8-O-β-D葡萄糖苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚7种成分的综合评分为指标,采用3因素3水平的Box-Behnken响应面试验设计,考察加酒量、闷润时间、蒸制时间因素对熟大黄炮制工艺的影响,筛选最佳炮制工艺参数。结果采用Design Expert 8.05软件对数据进行分析,建立7种成分含量的综合评分与考察因素多元二次回归方程数学模型,预测熟大黄最佳炮制条件为每100 g药材加酒量36.6 mL,闷润时间2.16 h,蒸制时间10.96 h。结合生产实际,将工艺修正为每100 g药材加酒量35 mL,闷润时间2 h,蒸制时间11 h。结论优选的炮制工艺能合理控制熟大黄炮制质量,为制定其饮片的质量标准和临床应用提供了依据。     

正交法优选菟丝子黄酒炮制工艺

目的：筛选菟丝子黄酒炮制最佳工艺。方法：采用正交设计筛选最佳炮制工艺，测定不同工艺样品总黄酮含量作为工艺评价指标，并且另做了3个比较实验，考察本实验炮制所用各种辅料对炮制结果的影响。结果：最佳炮制工艺为A2B3C1D2。并且验证实验样品总黄酮含量测定结果高于比较实验各样品总黄酮含量测定结果。结论：就黄酒炮制菟丝子来说，本文最佳炮制工艺可行。     

肠胃清颗粒提取工艺研究

目的:研究肠胃清颗粒最佳水煎提取工艺。方法:选择L_9(3~4)进行正交试验,以黄芪甲苷含量、浸膏得率和多糖含量作为检测指标,考察浸泡时间、煎煮时间、用水量等因素对水提效果的影响,优选肠胃清颗粒的最佳提取工艺。结果:肠胃清颗粒最佳提取工艺为加水浸泡0.5h,水煎3次,每次煎煮1.5h,每次用水量为药材的10倍量。结论:该工艺对有效成分的提取率高,且稳定可行。     

黄芪中主要活性成分提取工艺的研究

目的：探讨从黄芪中同时获取黄芪甲苷和多糖的方法,为确立结肠靶向制剂的最佳提取工艺提供依据。方法：以黄芪甲苷为醇提部分含量测定指标,用超高效液相色谱-蒸发光散射检测器进行测定;以黄芪多糖为水提部分含量测定指标,经苯酚-硫酸法显色,用紫外可见分光光度法进行测定,通过综合评分优选最佳提取工艺。结果：黄芪以70%乙醇,8倍量,提取2次,每次1.5h,提取黄芪甲苷,药渣再用6倍水,提取3次,每次2h,提取黄芪多糖。结论：选出的提取工艺稳定、合理、可行。     

正交试验法优选酒蒸女贞子最佳炮制工艺

目的:优选酒蒸女贞子的最佳炮制工艺。方法:采用正交试验设计,以齐墩果酸、特女贞苷为含量指标综合评判,研究女贞子酒蒸工艺的三个关键因素即蒸前润制时间(A)、黄酒用量(B)和蒸制时间(C)对成品质量的影响,优选女贞子酒蒸工艺的技术参数。结果:蒸制时间(C)和黄酒用量(B)是女贞子炮制的关键因素,蒸前润制时间(A)对结果无显著影响,影响程度大小顺序为C>B>A。结论:女贞子蒸法炮制工艺为C3B2A1:取净女贞子加入其重量20%的黄酒拌匀,润制或不润,蒸或炖8h,取出,干燥。