丹寿汤对抗磷脂抗体致妊娠丢失的作用机制

目的：探讨补肾活血方-丹寿汤对抗磷脂抗体致妊娠丢失的作用机制。方法：将100只10周受孕SD大鼠随机分为补肾活血组、补肾组、活血组、模型组和空白孕鼠组,自孕1天起,补肾活血组、补肾组、活血组分别予丹寿汤、补肾方、活血方灌胃,模型组和空白孕鼠组予生理盐水灌胃作对照,其间分别于孕8天、孕12天多部位皮下注射15mg/ml纯化后ACA蛋白液及LA蛋白液,直至孕第15天处死取材。结果：与模型组相比,补肾活血组能明显降低APA水平,降低胚胎吸收率,增加胚胎重量,有显著性差异（P〈0．05）,而补肾组、活血组无显著性差异（P〉0．05）;与空白孕鼠组相比,补肾活血组APA水平、胚胎吸收率及胚胎重量无显著性差异（P〉0．05）。结论：丹寿汤能明显降低APA水平,抵制胚胎吸收,增加胚胎重量,提高妊娠成功率。     

加味丹寿汤对双酚A染毒孕鼠之胎鼠致畸的防护作用

目的 探讨加味丹寿汤对双酚A染毒孕鼠之胎鼠致畸的防护作用。     

加味丹寿汤合地屈孕酮片治疗原因不明复发性流产50例

目的:观察加味丹寿汤合地屈孕酮片治疗原因不明复发性流产的临床疗效。方法:将150例患者随机分为对照组1、对照组2和治疗组,每组各50例。对照组1口服加味丹寿汤,对照组2口服地屈孕酮片,治疗组口服加味丹寿汤联合地屈孕酮片。比较各组临床疗效、治疗前后症状、体征的改善情况及胚胎存活率。结果:治疗后治疗组在临床疗效、中医证候积分、中医证候疗效及孕65 d与孕12周胚胎存活率方面均优于对照组1和对照组2,差异均有统计学意义(P0.05);对照组1与对照组2比较,差异亦具有统计学意义(P0.05)。结论:加味丹寿汤合地屈孕酮片能明显提高原因不明复发性流产患者的临床疗效,提高孕65 d及孕12周胎儿存活率。     

补肾活血方对复发性流产孕鼠Th17/Treg平衡及妊娠结局的影响

目的 观察补肾活血方对复发性流产(RSA)孕鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡及相关细胞因子水平和妊娠结局的影响。方法 将雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠按照2∶1比例交配建立RSA模型,成功后将RSA小鼠随机分为模型组、地屈孕酮组和补肾活血方低、中、高剂量组,每组10只;另将雌性CBA/J小鼠与雄性BALB/C小鼠按照2∶1交配,取正常妊娠的10只雌性小鼠作为正常妊娠组。妊娠第1天,正常妊娠组和模型组孕鼠给予生理盐水灌胃,地屈孕酮组孕鼠给予6.18 mg/kg地屈孕酮灌胃,补肾活血方低、中、高剂量组孕鼠分别给予7.83 g/kg、15.67 g/kg、31.34 g/kg补肾活血方灌胃,均每天1次,连续14 d。疗程结束,取各组孕鼠外周血,检测血清中白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,计算IL-17/TGF-β比值;处死孕鼠,计算胚胎吸收率;流式细胞术检测脾脏淋巴细胞中Th17细胞比例、Treg细胞比例,计算Th17/Treg比值。结果 与模型组比较,地屈孕酮组及补肾活血方各组孕鼠血清IL-17水平及IL-17/TGF-...     

补肾活血合主动免疫疗法对原因不明复发性流产患者的疗效研究

目的探讨补肾活血合主动免疫疗法对原因不明复发性流产(URSA)的临床疗效。方法将150例肾虚血瘀型原因不明复发性流产患者随机分为A、B、C三组,A组为治疗组采用加味丹寿汤合主动免疫治疗,B组、C组均为对照组分别采用加味丹寿汤、主动免疫疗法作对照。观察三组妊娠至65天及12周胎儿存活率、治疗后中医证候积分情况、疗后Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平、Th2型细胞因子IL-4、IL-6水平及Th1/Th2的水平。结果治疗后各组孕65天及孕12周胎儿存活率、临床有效率、IL-4、IL-6、IFN-γ、IL-2、中医证候积分及中医证候疗效比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论补肾活血合主动免疫疗法能降低Thl型细胞因子水平,提高Th2型细胞因子水平,使Th1/Th2平衡向Th2型免疫应答转换,改善URSA患者的免疫耐受功能,明显降低流产率,提高胎儿存活率。     

中药对中剂量电离辐射致胎盘氧化损伤的影响

目的观察补肾解毒方对核辐射孕鼠胎盘抗氧化能力的影响。方法将60只C57BL/6J孕鼠随机分为空白对照组、辐射模型组、补肾解毒方组,每组20只,补肾解毒方组给予补肾解毒方13.5 g/(kg·d)灌胃,其他两组给予0.2 mL生理盐水灌胃,各组均灌胃21 d。辐射模型组、补肾解毒方组两组小鼠于灌胃第11天接受一次性4Gy 60Coγ-射线的全身照射。于辐射后第1天、第10天各取10只小鼠剖腹取胎盘组织检测胎盘组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量。结果 MDA含量:辐射后第10天,辐射组与空白组比较,孕鼠胎盘MDA含量明显升高(P0.01),中药组与辐射组及辐射后1天比较孕鼠胎盘MDA含量下降有统计学意义(P0.01);SOD活性(U/L):辐射后第10天,辐射组、中药组与空白组比较,孕鼠胎盘SOD活性差异有统计学意义(P0.05),中药组与辐射组比较孕鼠胎盘SOD活性差异显著(P0.01);中药组辐射后10天较辐射后1天孕鼠胎盘SOD活性差异无统计学意义(P0.05);GSH-Px活性:辐射后第10天,辐射组、中药组与空白组比较,孕鼠胎盘GSH-Px活性差异有显著统计学意义(P0.01),中药组与辐射组比较孕鼠胎盘GSH-Px活性差异有统计学意义(P0.05);中药组辐射后10天较辐射后1天孕鼠胎盘GSH-Px活性升高有统计学意义(P0.05)。结论补肾解毒方能改善胎盘组织电离辐射所致氧化损伤。     

丹寿汤对抗磷脂抗体致妊娠丢失动物模型胎盘组织血小板活化因子受体、血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的探讨中医药对血管细胞因子的重要调节作用。方法选择ACA阳性的反复自然流产患者及系统性红斑狼疮(SLE)患者,对其以及健康人的血清进行提取,制备蛋白液。将10周龄SD孕鼠80只随机分为ACA阳性妊娠丢失动物模型组(40只),LA阳性妊娠丢失动物模型组(40只)。将两组孕鼠分别随机分为模型组、补肾活血组、西药组、空白孕鼠组,每组10只。自孕0天起,补肾活血组、西药组给予丹寿汤浓煎液、肠溶阿司匹林溶液灌胃,空白孕鼠组、模型组予生理盐水灌胃作对照。期间模型组、补肾活血组、西药组分别于孕8天、孕12天背部多部位皮下注射15mg·(ml·d)~(-1)ACA或LA蛋白液,空白孕鼠组予正常人血清蛋白液15mg·(ml·d)~(-1)多部位皮下注射作对照,至孕15日处死取材,采用RT-PCR技术检测PAF-R及VEGFmRNA。结果空白组PAF-RmRNA的PCR产物电泳条带显示几乎无基础水平的PAF-RmRNA表达,模型组电泳条带最亮,PAF-RmRNA表达积分光度明显增加,两组比较,差异无统计学意义(P0.05);西药组电泳条带亮度较模型组减弱,PAF-RmRNA表达积分光度明显减少,两组比较,差异有统计学意义(P0.05);补肾活血组与模型组比较,电泳条带减弱,PAF-RmRNA表达积分光度明显减少,差异有统计学意义(P0.05),补肾活血组与西药组比较,PAF-RmRNA表达积分光度减少,差异无统计学意义(P0.05)。空白组VEGFmRNA的PCR产物电泳条带较亮,有较多VEGFmRNA的表达,模型组电泳条带最亮,VEGFmRNA表达积分光度明显增加,两组比较,差异无统计学意义(P0.05),西药组与模型组比较,电泳条带亮度减弱,VEGFmRNA的表达积分光度减少,差异无统计学意义(P0.05),补肾活血组与模型组比较,电泳条带亮度更弱,VEGFmRNA表达积分光度明显减少,两组比较,差异有统计学意义(P0.05),补肾活血组与西药组比较,VEGFmRNA的表达积分光度减少,两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论丹寿汤通过降低PAF-RmRNA及VEGFmRNA的表达,发挥血管内皮保护作用,改善胎盘微循环,为应用于临床提供了可靠的实验基础及理论依据。     

补肾方剂对小鼠胎盘单胺氧化酶活性的影响

目的观察补肾方剂对胎儿宫内发育迟缓（IUGR）模型孕鼠胎盘单胺氧化酶（MAO）活性的影响,探讨其作用机理。方法孕鼠随机分为正常组、模型组、左归丸组、右归丸组、五子衍宗丸组、四君子汤组、四物汤组、八珍汤组、正常＋左归丸组,40%乙醇致胎儿IUGR模型,模型组和正常组予生理盐水灌胃,各治疗组分别在造模同时予相应方药水煎液灌胃,11 d后检测各组孕鼠胎盘组织MAO活性。结果 40%乙醇致IUGR的母体胎盘组织MAO活性明显降低（P〈0.01）,补肾阴方左归丸、平补肾方五子衍宗丸及气血双补方八珍汤对IUGR模型孕鼠胎盘组织MAO活性降低有明显回升作用（P〈0.05或P〈0.01）;补气方四君子汤、补血方四物汤、补肾阳方右归丸对IUGR模型孕鼠胎盘组织MAO活性降低无作用。结论平补肾方、补肾阴方和气血双补方可通过对抗酒精抑制的MAO活性,起到保护胎儿、保证胚胎正常发育的作用。     

基于雌激素受体途径探讨补肾活血汤干预免疫性卵巢早衰小鼠模型机制研究

目的:以透明带3多肽(pZP3)诱导的免疫性卵巢早衰(POF)小鼠为研究对象,观察其血清性激素水平及卵巢组织中雌激素受体(ER)表达情况,探讨免疫性卵巢早衰可能的发生机制及补肾活血汤的潜在治疗途径。方法:将40只雌性B6AF1小鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组及补肾活血汤组。除空白组外,各组小鼠第1天、第14天两次予pZP3联合弗氏佐剂皮下注射造模,空白组同期予0.9%氯化钠溶液皮下注射;建模成功后空白组、模型组、补佳乐组及补肾活血汤组分别予以等体积0.9%氯化钠溶液、戊酸雌二醇及补肾活血汤灌胃,每天2次。灌胃28 d后处死小鼠,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E₂)、抗缪勒氏管激素(AMH)水平;采用HE染色和免疫组化方法检测卵巢组织病理变化及雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)的表达情况。结果:(1)与空白组相比,模型组小鼠呈现出典型的低雌激素高促性腺激素表型(P<0.01);经补佳乐及补肾活血汤灌胃治疗后,小鼠血清E₂、AMH水平上升,FSH水平下降(P<0.05或P&l...     

补肾活血中药对子宫内膜异位症大鼠生殖功能干预研究

目的：探讨补肾活血中药对调节子宫内膜异位症（EMS）模型大鼠生殖功能的作用。方法：将EMS模型大鼠分为模型组和补肾活血汤高、中、低剂量组及阳性药组,另设假手术组,分别给药8周后观察在位内膜的PR表达和排卵数目,剩余各组大鼠分别与雄性大鼠按2：1比例合笼,观察＂孕鼠＂活胎数。结果：阳性药组和补肾活血汤中、高剂量组大鼠的在位内膜PR表达与模型组比较明显升高,阳性药组和补肾活血汤各剂量组的排卵数与模型组比较明显增多,补肾活血汤各剂量组的活胎数与假手术组相比差异无统计学意义。结论：补肾活血中药能有效调节EMS模型大鼠子宫内膜孕激素受体的表达,促进卵泡发育,提高妊娠率,达到有效调节生殖功能的目的。     

丹寿汤正交t值分析及其不同配伍对抗心磷脂抗体致复发性流产的影响

目的：研究丹寿汤及其不同配伍对抗心磷脂抗体阳性流产动物模型胚胎吸收率的影响,探讨丹寿汤的最佳组合对复发性流产的防治作用。方法：①将120只孕10周龄SD孕鼠随机分为12组,每组10只,模型制备按照本课题组的改良方法复制,药物按正交t值法[1]L12（26）的二水平正交表进行分组,自孕第1天起,灌胃15d,处死取材。②将80只孕鼠随机分为8组,每组10只,药物按正交t值法L8（2n）的二水平正交表进行分组,实验过程及疗效观察指标同上。结果：①菟丝子、续断、丹参明显降低模型鼠的胚胎吸收率（P〈0.05）为主药。②辅药桑寄生能明显降低模型鼠的胚胎吸收率（P〈0.05）。阿胶与桑寄生作用协同,降香与阿胶作用拮抗。结论：丹寿汤组合为菟丝子、续断、丹参、桑寄生、阿胶时,模型鼠的胚胎吸收率最低。     

丹芍汤对大鼠肾性贫血的治疗作用

目的：探讨丹芍汤对大鼠肾性贫血的治疗作用。方法：随机选取80只健康雄性SD大鼠,10只作正常对照,70只用含0.75%的腺嘌呤饲料喂养,制作肾性贫血模型。模型组随机分为丹芍汤治疗组和生理盐水治疗组。造模6周和丹芍汤治疗4周后,分别测定血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）和外周血血红蛋白（Hb）、红细胞（RBC）水平,显微镜下观察肾组织的形态学变化。结果①造模6周后,外周血Hb和RBC水平均显著低于正常对照组（95.1±8.5vs161.2±10.3;5.2±0.5vs7.8±0.4,P〈0.05）;丹芍汤治疗4周后,其水平均显著高于生理盐水治疗组（158.6±14.6vs101.3±8.6;7.9±0.4vs5.1±0.3,P〈0.05）。②造模6周后,血清BUN和Cr水平均显著高于正常对照组（240.5±10.2vs4.2±0.3;435.0±16.2vs56.1±6.8,P〈0.05）;丹芍汤治疗4周后,其水平均显著低于生理盐水治疗组（6.2±0.4vs232.1±12.6;68.8±6.2vs423.2±18.0,P〈0.05）。③丹芍汤治疗4周后,模型组大鼠肾组织形态结构恢复正常。结论：丹芍汤对大鼠肾性贫血有良好的治疗作用。     

滋肺阴合补肝肾法对阴虚阳亢型肾性高血压大鼠收缩压、内皮素-1及血管紧张素Ⅱ的影响

目的:探讨滋肺阴合补肝肾法对阴虚阳亢型肾性高血压大鼠(RHR)的降压机制。方法:筛选2月龄健康雄性SD大鼠78只,随机分为假手术组13只与手术组65只。手术组通过结扎左侧肾动脉的方法建立肾性高血压模型,以尾套法测血压筛选高血压大鼠,成功模型再给予附子汤4周,并每隔1天激惹大鼠使其打斗,制备阴虚阳亢证模型。筛选造模成功的阴虚阳亢证RHR,随机分为模型组、卡托普利组、滋肺阴组、补肝肾组、滋肺阴合补肝肾组(简称综合组)。假手术组与模型组给予等量生理盐水,用药组每日晨8时灌胃给药1次,连续4周。末次给药24 h后测血压,腹主动脉取血8 mL,制备血清和血浆。ELISA法测定血浆ET-1、ANGⅡ的浓度。结果:各治疗组阴虚阳亢型RHR血压的变化①基础血压:模型组、卡托普利组、滋肺阴组、补肝肾组、综合组血压与假手术组比较均无统计学意义(P0.05)。②手术后第2周末血压:与假手术组比较,模型组、卡托普利组、滋肺阴组、补肝肾组、综合组血压均明显增高(P0.05)。③治疗后各组血压的变化:治疗4周后,与模型组比较,卡托普利组、补肝肾组及综合组血压明显降低(P0.05),滋肺阴组有所降低但无统计学意义(P0.05);与滋肺阴组比较,卡托普利组、补肝肾组及综合组明显降低(P0.05);与卡托普利组比较,综合组明显降低(P0.05),补肝肾组无统计学意义(P0.05)。滋肺阴合补肝肾法对阴虚阳亢型RHR血浆ANGⅡ、ET-1及血清NO的影响①与假手术组比较,模型组血浆ANGⅡ、ET-1均明显升高(P0.05)。②与模型组比较,卡托普利组、补肝肾组及综合组血浆ANGⅡ、ET-1明显降低(P0.05);滋肺阴组血浆ANGⅡ、ET-1有降低,但无统计学意义(P0.05)。③与滋肺阴组比较,卡托普利组、补肝肾组及综合组有统计学意义(P0.05);④与卡托普利组比较,综合组血浆ANGⅡ、ET-1明显降低(P0.05),补肝肾组无统计学意义(P0.05)。结论:滋肺阴合补肝肾法对阴虚阳亢型RHR的降压机制在于:减少缩血管ET-1的形成,削弱ET所致心肌收缩力增强、心排量增大及血管壁增厚;减少ANGⅡ形成,对抗ANGⅡ所致血管收缩、血管壁增厚及顺应性降低。     

寿胎丸提取液透过妊娠大鼠胎盘屏障的药物成分研究

目的:对不同孕期妊娠大鼠给予寿胎丸提取液(STW),采用HPLC研究STW透过胎盘屏障的药物成分。方法:早、中、晚孕期Wistar大鼠灌胃STW,连续给药5天后,取母体血浆(母血)、脐静脉血及胚胎组织,用HPLC法检测其中所含药物成分。结果:在实验剂量下,各孕期1h母血中均检测到马钱子苷和槲皮苷,12h母血、脐静脉血及胚胎组织中均未检测到待测成分。结论:实验剂量下,STW的药物成分未透过胎盘屏障,提示妊娠期应用寿胎丸不会造成胎儿的宫内暴露。     

活血健脾补肾法对MSC移植在结肠炎大鼠肠道增殖分化的影响

目的：探讨中医活血健脾补肾法对骨髓间充质干细胞（MSC）移植在结肠炎大鼠肠道增殖分化的影响。方法：雌性SD大鼠以5%2、4、6,三硝基苯磺酸（TNBs）诱导形成结肠炎模型,造模后随机分为模型对照组、MSC移植组、活血组、健脾组、补肾组,第2天将体外分离培养的雄性SD大鼠MSC经尾静脉注射到各组雌性大鼠体内。疗程结束后,取大鼠结肠组织,免疫组化法检测其肠道干细胞标记物Musashi-1、端粒酶逆转录酶（TERT）的表达。结果：免疫组化检测到MSC移植组及中药治疗各组大鼠结肠黏膜组织Musashi-1及TERT均有阳性表达,其中活血组与MSC移植组比较差异有显著性意义。结论： 活血法代表方药桃红四物汤较明显促进MSC在结肠炎大鼠肠道增殖分化。     

补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠Th1/Th2细胞分泌细胞因子影响的实验研究

目的:探讨补肾益髓生血法对苯与环磷酰胺诱导AA大鼠血清细胞因子的作用。方法:清洁级SD大鼠85只,随机分为正常组10只,造模组75只,造模组皮下隔天注射苯(1 mL/kg)7周,取材前2周连续隔天腹腔注射CTX(25 mg/kg)3次,建立苯与环磷酰胺诱导AA大鼠模型。三周后灌胃前,按体质量随机分为模型组、康力龙组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组。第七周处死大鼠,股动脉取血,静置离心后,取上层血清,放免法检测血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10细胞因子的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IFN-γ明显升高(P0.05),IL-2显著升高(P0.01),TNF-α有升高趋势,经过治疗后,IFN-γ、IL-2、TNF-α均有降低趋势;与正常组比较,模型组IL-4、IL-5水平明显降低(P0.05),IL-10显著降低(P0.01),经过治疗后,IL-4、IL-5、IL-10均有升高趋势。结论:补肾益髓生血法可降低AA大鼠血清细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α负调控,增加细胞因子IL-4、IL-5、IL-10正调控,对AA大鼠免疫和造血系统有一定的调节作用,且滋肾生血方疗效优于益髓生血颗粒、温肾生血方。     

益肾通络方对大鼠的急性毒性研究

目的：观察益肾通络方对大鼠的急性毒理作用．方法：将40只sD大鼠随机分为受试组和对照组,每组20只,受试组大鼠以益肾通络方汤剂最大浓度灌胃给药,空白对照组灌服相同体积的蒸馏水,连续14d;观察大鼠死亡数及益肾通络方对大鼠的体质量和脏器的影响。结果：大鼠无死亡现象,益肾通络方对肝、脾、肾、胃、肠、心、肺等主要脏器无明显影响;未测出LD50;其最大给药量为150g／kg体质量,相当于临床剂量的64倍,未出现异常的毒性反应．,结论：益肾通络方具有较高的安全性．     

补肾益气活血方对胎儿生长受限孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响

目的观察补肾益气活血方对胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响,探讨该方治疗FGR的机制。方法采用被动吸烟法建立大鼠FGR模型,将32只孕鼠随机分为正常组、模型组、中药组(采用补肾益气活血方治疗)、西药组(采用精氨酸治疗)。运用HE染色观察各组胎盘的组织学变化,TUNNEL法检测胎盘滋养细胞的凋亡及RT-PCR、免疫组化检测胎盘滋养细胞Bcl-2、Bax的表达。结果模型组胎盘绒毛出现血液淤积及缺血,中药可明显改善FGR胎盘绒毛的微循环,而西药组则部分改善。正常组、模型组、中药组、西药组的绒毛两层合体细胞凋亡指数中位数依次为45%、75%、57%、70%,正常组和中药组的凋亡指数均低于模型组(P0.01),西药组与模型组比较差异无统计学意义。各组胎盘Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达比较,差异均无统计学意义。结论补肾益气活血方可改善FGR胎盘微循环,防止FGR胎盘滋养细胞的过度凋亡,但其并非通过经典的Bax/Bcl-2凋亡途径起作用,其作用途径仍待探讨。