荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的 用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ－ＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎疾病（ＨＢＶ）的数量和免疫指标以指导临床,方法 设计合成了ＨＢＶＦＱ－ＰＣＲ诊断试剂盒,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合产生的实时检测定量ＰＣＲ方法,检测了５３２份临床血清标本,结果 经ＦＱ－ＰＣＲ检测,１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原,ｅ抗原,ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ,ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本,其血清标本ＨＢ     

荧光探针定量PCR检测HBV—DNA

本文采用荧光探针定量（ＦＱ－ＰＯＣＲ）法准确定量检测ＨＢＶ－Ｍ阳性标志中的ＨＢＶ－ＤＮＡ数量。结果显示：ＨＢｅＡｇ（＋组（３２份）的阳性率为１００％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数范围在１０＾５－１０＾９／ｍｌ之间。ＨＢｅＡｂ（＋）组（４７份）的阳性率为２３．４％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝范围在１０＾３－１０＾５．７／ｍｌ之间;ＨＢｓＡｂ（＋）组（３７份）的阳性率为２．７％,ＨＢＶ－ＤＮＡ拷贝数为１０＾５／ｍｌ。     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗体、E抗体及核心抗体阳性人群HBV-DNA临床意义

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染后 ,有复杂的乙型肝炎病毒标志 (ＨＢＶＭ)变化 ,其临床意义不同 ,我们用荧光定量聚合酶链反应 (ＦＱ ＰＣＲ) [1] 对普通人群中 12 8例乙型肝炎表面抗体(ＨＢｓＡｂ)、Ｅ抗体 (ＨＢｅＡｂ)、核心抗体 (ＨＢｃＡｂ)均阳性的血清 ,进行了乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸 (ＨＢＶ ＤＮＡ)定量检测 ,以进一步探讨其临床意义 ,现报告如下。1　资料与方法1.1　观察对象　观察组① 12 8例为 2 0 0 0年 12月至 2 0 0 1年7月 ,我院进行健康查体时发现ＨＢＶＭ呈ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ均阳性的普通人群 ,否认既往有…     

临床血清标本的HBV－DNAPCR检测指标与若干HBV免疫学指标关系

临床血清标本的ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检测指标与若干ＨＢＶ免疫学指标关系程宗浩上海青浦县卫校我们应用上海复华公司的ＰＣＲ检测试剂和上海科华公司ＥＬＩＳＡ检测试剂分别检测了３４７份血清标本的ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ指标。其中ＨＢｓＡｇ阴性３０...     

246份母—脐血配对HBV检测结果与分析

我们收集了 2 4 6份母 脐配对血进行ＨＢＶ血清标志物及ＤＮＡ定量检测 ,结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　 2 4 6份母 脐配对血均来自 1999年 11月至 2 0 0 0年 6月本院产科住院产妇静脉血及所产新生儿脐带血 ,分离血清置 - 2 0℃冰箱内保存。对ＨＢｓＡｇ阳性的母血 ,无论其对应脐血ＨＢＶ血清标志物结果怎样 ,均进一步用荧光定量ＰＣＲ(ＦＱ ＰＣＲ)检测ＨＢＶ ＤＮＡ。1 2　试剂与方法　ＨＢＶ Ｍ检测使用科华公司试剂盒按说明书操作。ＦＱ ＨＢＶＤＮＡ试剂购自复星公司。用ＰＥ5 70 0荧光定量扩增仪 ,结果自动测出。1 3　结…     

关于医学名词英文缩写的启事

ＡＣＴＨ促肾上腺皮质激素Ａ／Ｇ白蛋白／球蛋白比值ＡＬＴ丙氨酸转氨酶ＡＳＴ天冬氨酸转氨酶Ｃｃｒ肌酐清除率ＣＯＰＤ慢性阻塞性肺疾病ＣＴ计算机Ｘ线体层扫描ＤＩＣ弥散性血管内凝血ＤＮＡ脱氧核糖核酸ＨＢｃＡｂ乙型肝炎核心抗体ＨＢｅＡｂ乙型肝炎ｅ抗体ＨＢｅＡｇ乙型肝炎ｅ抗原ＨＢｓＡｂ乙型肝炎表面抗体ＨＢｓＡｇ乙型肝炎表面抗原ＨＤＬＣ高密度脂蛋白胆固醇Ｉｇ免疫球蛋白ＬＤＬＣ低密度脂蛋白胆固醇ＭｃＡｂ单克隆抗体ＯＴ旧结核菌素试验ＰＣＲ聚合酶链反应ＰＥＴ正电子发射断层扫描ＲＦ类风湿因子ＳＬＥ系统性红斑狼疮ＳＰ…     

聚合酶链反应凝胶呈像技术检测乙型肝炎病毒

目的 建立聚合酶链反应（ＰＣＲ）－凝胶呈像（ｇｅｌｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍＧＤＳ）技术,并应用于临床检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核酸ＤＮＡ。方法 用凝胶呈像技术对血清ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ扩增产物的电泳凝胶进行摄像,分析,并与紫外灯下的肉眼观察结果相比较,对肉眼未判断出阳性而凝胶呈像分析邮阳性的血清标本,用定量ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）方法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果 通过３８份血清标本的检测,发现     

乙型肝炎表面抗原阳性血清经不同方法消毒后用PCR法对HBV-DNA检测结果

经用ＰＣＲ法技术检测，以辐照度值＞１０５μＷ／ｃｍ２的紫外线对ＨＢｓＡｇ阳性血清照射８小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ有一定灭活作用。煮沸１０分钟，或者以７５％乙醇作用１小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ灭活能力较差。     

荧光信号引物PCR定量测定血清HCV—RNA的实验室评价

目的对Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ荧光标记ＨＣＶ定量ＰＣＲ方法进行实验室考核。方法２８例抗ＨＣＶ（＋）、定性ＰＣＲ（＋）的血清标本，用于重复性测定；２０例健康人血清用于正常值测定；５例定性ＰＣＲ（＋）和５例定性ＰＣＲ（－）标本用于Ａｍｐｌｉｓｅｍｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法的比较。结果孔间变异系数（ＣＶ）为 ２０．６％，操作者间ＣＶ为 ４３．８％，批内 ＣＶ为 ６１．９％，批间ＣＶ为８５．１％。２０例健康人血清测定值均小于最小检测浓度，即１０２拷贝／ｍｌ。用Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ两种方法对５ 例定性ＰＣＲ（－）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ和ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ均为阴性；对５ Ｎ定性ＰＣＲ（＋）标本测定，Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ均为阳性，ＨＣＶ－ＲＮＡ的浓度为 ２． ５ × １０５拷贝 ／ｍｌ～ １． ７ ×１０６拷贝 ／ｍｌ， ｂｒａｎｃｈ－ＤＮＡ方法有 ２例未能检出。结论 Ａｍｐｌｉｓｅｎｓｏｒ ＨＣＶ定量 ＰＣＲ方法特异性和灵敏度均好，可用于临床疾病的研究和抗病毒药物疗效的评估。由于批内、批间变异系数较大，试验与操作均应严格规范。     

乙型肝炎表面抗原阳性血清经不同方法消毒后用PCR法对HBV—DNA…

经用ＰＣＲ法技术检测，以辐照度值〉１０５μＷ／ｃｍ＾２的紫外线对ＨＢｓＡｇ阳性血清照射８小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ有一定灭活作用。煮沸１０分钟，或者以７５％乙醇作用１小时，对ＨＢＶ－ＤＮＡ灭活能力较差。     

HBV DNA定量与乙肝标志物检测结果对比分析

目的 探讨血清中HBV DNA定量与乙肝标志物（HBV-M）之间的关系及临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ-PCR）和ELISA法分别检测535例门诊病人的血清HBV DNA含量和HBV-M,并对结果进行对比分析.结果 HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为88.8%（207/233）,平均拷贝数为1.0＊10^8/ml;HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为31.6%（50/158）,平均拷贝数为6.2＊106/ml;HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为21.7%（15/69）,平均拷贝数为1.8＊106/ml;HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV DNA检出率为6.2%（1/16）,平均拷贝数3.2＊103/ml;全阴性组血清HBV DNA检出率为5.0%,平均拷贝数为2.0＊103/ml;其他组合,HBV DNA检出率为0.结论 对临床HBV感染、复制及传染性的判断,除乙肝标志物ELISA检测外,加做HBV DNA FQ-PCR检测具有重要意义.     

荧光定量PCR检测HBV DNA与血清HBV 标志物和preS1相互关系研究

目的探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志(HBVM)模式,preS1之间的相互关系及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测801例血清的HBVDNA,用ELISA方法对其免疫学标志,preS1同时进行检测。结果HBVDNA的总检出率为67·0%,preS1的总检出率为74·9%。其中,在模式HBsAg( ),HBeAg( ),HBcAb( )中血清HBVDNA含量明显高于HBsAg( ),HBeAb( ),HcAb( )及HBsAg( ),HBcAb( )组。在HBsAg(-)模式中HBVDNA亦有检出。在HBsAg( ),HBeAb( ),HcAb( )组,HBVDNA的检出率为55·8%,而preS1的检出率为69·8%,两者有显著差异(P<0·01),其余HBVM模式,无显著差异(P>0·05)。结论HBVM和preS1提供了HBV感染的间接证据,荧光定量PCR法检测HBVDNA准确灵敏,是HBV感染及复制的直接证据,HBVM,preS1和HBVDNA的检测各有其独特的临床检测意义,在乙型肝炎的诊断治疗中均具有重要的临床指导价值。     

乙型肝炎患者HBV DNA定量与血清标志物的关系分析

目的分析乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物与HBV DNA定量之间的关系。方法分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量PCR（FQ-PCR）对391例乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性血清进行检测,分析检出率及相关性。结果391例HBsAg阳性血清共检出7种模式,以HBV DNA含量大于5×10^2copy／mL为阳性。HBsAg阳性（＋）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）（＋）、乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）（＋）模式的阳性检出率较高,为96．9％,HBV DNA含量也较高,其中大于10^7copy／mL的血清为53．8％。HBsAg（＋）、抗-HBe（＋）、抗-HBc（＋）模式中阳性检出率为25．3％,171例（74．7％）HBV DNA含量小于5×10^2copy／mL。HBsAg（＋）、抗-HBc（＋）模式中阳性检出率为65．4％。结论HBsAg和HBV DNA联合检测,更能反映乙型肝炎患者HBV感染、传染性及体内复制情况。     

HBV—DNA检出情况与乙肝五项结果之间的相关性研究

[目的]探讨HBV—DNA的检测结果与乙肝两对半结果之间的相关性。[方法]运用荧光定量PCR法检测225例疑似乙肝患者血清中的HBV—DNA含量,同时采用ELISA法检测乙肝两对半标志物,并对结果进行相关性分析。[结果]HBsAg（＋）HBeAg（＋）HBcAb（＋）组（大三阳组）患者血清中HBVDNA的阳性率为85％（51／60）,平均拷贝数为2．24×10^7 copies／mt;HBsAg（＋）HBeAb（＋）HBcAb（＋）组（小三阳组）患者血清中HBVDNA的阳性率为31％（31／98）,平均拷贝数为3．86×10^5copies／ml;HBsAg（＋）HBcAb（＋）组患者血清中HBVDNA的阳性率为38％（5／13）,平均拷贝数为6．93×10^5copies／ml。[结论]大三阳组和小三阳组阳性率相比差异有统计学意义（x^2=42．458,P〈0．005）;大三阳组和HBsAg（＋）HBcAb（＋）组阳性率相比差异有统计学意义（x^2=12．954,P〈0．005）;HBVDNA病毒含量检测更能准确反映患者HBV感染情况,因此在检测中应该联合使用两种方法,提高检测的准确性,指导临床对患者的病情进行诊断、指导治疗和观察疗效。     

乙型肝炎病毒DNA含量与HBeAg、ALT相关分析及其临床意义

目的 探讨乙型肝炎病毒HBV-DNA含量与血清标记物HBeAg、谷丙转氨酶（ALT）的相关性及其对肝病患者诊断、预后的意义.方法 采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测523例乙肝患者血清学标记物（HBV-M）,其血清学模型包括以下四种组合,A组：HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）（大三阳）;B组：HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）（小三阳）;C组HBsAg（＋）、HBcAb（＋）;D组：HBsAb（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）;并选取65例HBsAg（-）、HBsAb（-）HBeAg（-）、HBeAb（-）、HBcAb（＋）正常人（E组）作为对照.实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测血清中HBV-DNA含量,同时采用酶法测定血清ALT水平.结果 A组HBV-DNA阳性率为92.55%,明显高于B组78.97%（x2=189.60,P〈0.001）和C组50.98%（x2=234.15,P〈0.001）,A、D、C三组ALT水平均高于对照组（P〈0.001,P〈0.001,P〈0.001）;Log HBV-DNA与HBeAg S/CO之间存在正相关性（r=0.418,P〈0.001）,而ALT与Log HBV-DNA及HBeAg S/CO之间均无相关性.结论 HBV-DNA含量与乙肝病毒e抗原具有显著相关性,HBV-M和HBV-DNA定量检测并联合ALT水平对于临床乙肝病毒感染、复制及临床治疗有重要意义.     

乙型肝炎表面抗原/抗体同时存在的血清学模式与病毒血症的关系

目的分析乙型肝炎病毒（HBV）感染者乙肝表面抗原（HBsAg）与乙肝表面抗体（HBsAb）同时阳性的模式,与HBV DNA的关系,以及其产生的原因及临床意义。方法采用化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）检测样本的HBV血清标志物,从中选出HBsAg和HBsAb同时阳性的样本,采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测其HBV DNA定量值。结果在选取的HBsAg和HBsAb同时阳性的37例样本中,出现3种HBV模式：（1）HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性,阳性率46%,HBV DNA阳性率22%;（2）HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性,阳性率30%,HBV DNA阳性率30%;（3）HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性,阳性率24%,HBV DNA阳性率5%。37例样本中,有21例血清HBV DNA检测阳性,阳性率为57%。结论 HBsAg和HBsAb同时阳性并不代表疾病真正好转,部分感染者仍存在病毒血症,应当引起重视。     

300例HBV前S1抗原与HBV标志物及HBV-DNA检测结果分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原与HBV标志物及HBV-DNA的关系。方法收集300例HBV感染者血清标本,根据HBV标志物不同表现模式进行分组。HBsAg、HBeAg和抗-HBc 3项阳性者92例为第1组;HBsAg、抗-HBe和抗-HBc 3项阳性者125例为第2组;HBsAg和HBeAg 2项阳性者16例为第3组;HBsAg和抗-HBe 2项阳性者30例为第4组;HBsAg和抗-HBc 2项阳性者37例为第5组。前S1抗原及HBV血清标志物检测采用酶联免疫吸附试验法,HBV-DNA检测采用荧光定量聚合酶链反应法。结果第1~5组的前S1抗原阳性率分别为81.5%、38.4%、37.5%、46.7%、54.1%;HBV-DNA阳性率分别为95.7%、36.0%、56.3%、40.0%、62.1%。前S1抗原与HBV-DNA检测结果比较,前S1抗原检测相对灵敏度为82.5%,特异性为86.2%,总符合率为84.0%,其敏感度不如HBV-DNA,差异有统计学意义(χ2=4.08,P<0.05)。结论前S1抗原与HBeAg及HBV-DNA具有高度相关性,可作为HBV存在、复制及其传染性的标志物,前S1抗原、HBV血清标志物及HBV-DNA联合检测,对提高HBV的检出率,防止误诊、漏诊以及指导治疗具有重要意义。     

乙型肝炎病毒标志物及其DNA相关性及联合检测临床价值

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）血清免疫标志物（HBV M）和HBV DNA含量的相关性及两种指标联合检测的临床应用。方法酶联免疫吸附试验检测HBV M;荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测HBV DNA含量。结果乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性的标本HBV DNA阳性率高,分别为：Ⅰ组[HBsAg、HBeAg和乙型肝炎核心抗体（抗-HBc）阳性],HBV DNA阳性率98.9%（181/183）;Ⅳ组（HBsAg和HBeAg阳性）,HBV DNA阳性率96.3%（26/27）;Ⅶ组[HBsAg、HBeAg、乙型肝炎e抗体（抗-HBe）和抗-HBc阳性],HBV DNA阳性率100.0%（2/2）;HBsAg阳性、HBeAg阴性,HBV DNA阳性率也较高,为Ⅱ组（HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性）60.4%（58/96）;Ⅲ组（HBsAg、抗-HBc阳性）50%（10/20）;HBeAg、HBsAg阴性有一定的HBVDNA阳性率,但阳性率低,分别为：Ⅴ组（抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性）13.3%（2/15）;Ⅵ组（抗-HBs、抗-HBc阳性）8.3%（1/12）;Ⅷ组（抗-HBs阳性）0（0/26）;Ⅸ组（HBV M全阴性）6.7%（1/15）。结论血清HBV DNA水平与HBV M表现模式有关,与HBsAg,HBeAg有良好的相关性,而HBV M阴性的患者也可能有HBV DNA阳性,因此HBV M和HBV DNA联合检测,可有效提高乙型肝炎的检出率,为临床提供HBV感染、复制及传染性判断以及指导治疗的实验室依据。     

乙型肝炎病毒 PreS1抗原及抗体检测应用价值分析

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）前S1（PreS1）抗原及抗体检测的临床应用价值。方法于2013年3～11月,随机选择具有不同乙型病毒性肝炎（简称乙肝）两对半检测结果的患者120例进行PreS1抗原及抗体检测,分析PreS1抗原及抗体检测结果与两对半检测结果的关系。结果大三阳及小三阳患者 PreS1抗原阳性检出率为89％和7％,乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝核心抗体（HBcAb）阳性患者阳性检出率为14％,单纯 HBsAg阳性患者阳性检出率为5％。PreS1抗原与 HBsAg、乙肝 e抗原和 HBcAb具有一定的相关性。结论两对半联合PreS1抗原、抗体检测能够更灵敏、准确地反映乙肝患者的病情和预后,在HBV感染早期诊断方面也具有一定的临床应用价值。     

不同方法检测乙肝表面抗原的结果分析

目的分析酶联免疫吸附法(ELISA)和电化学发光免疫法((ECLIA)检测乙肝表面抗原(HBsAg)的结果及临床应用价值。方法收集经ELISA法检测过的120份临床患者的血清,其中包括:30份HBsAg阳性;30份HBsAg阴性但乙肝e抗体(eAb)和乙肝核心抗体(cAb)阳性;30份HBsAg阴性但cAb阳性;30份乙肝5项均阴性。对上述血清采用ECLIA进行HBsAg检测,并对检测结果进行比较分析。结果 30份经ELISA检测HBsAg阳性者经ECLIA检测均为阳性,其灵敏度达100.0%;30份经ELISA检测HBsAg阴性而eAb、cAb阳性者中,有4份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达13.3%;30份经ELISA检测HBsAg阴性而cAb阳性者中,有2份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达6.7%;30份血清经ELISA检测乙肝5项均阴性者中,有2份血清经ECLIA检测HBsAg呈阳性,其阳性率达6.7%。结论 ECLIA法较ELISA法敏感性更高;对临床避免医院内有创检查、手术、输血等情况下的乙肝感染和传播等具有重要应用价值。