急性白血病多药耐药相关蛋白基因表达及临床意义

（１）目的 探讨急性白血病（ＡＬ）多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因的表达及临床意义。（２）方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法,对７７例ＡＬ病人及１０例健康人基因表达进行检测。（３）结果 ７７例ＡＬ病人ＭＲＰ平均表达水平与对照组比较差异无显著性,复发组ＭＲＰ平均表达水平与初治组比较差异有显著性（ｔ＝５．３２,Ｐ〈０．０１）。（４）结论 ＡＬ的复发与ＭＲＰ表达有关,ＭＲＰ基因的过度表     

急性白血病多药耐药相关蛋白基因的表达及其临床意义

多药耐药（multidrug resistance，MDR）是白血病化疗失败的主要原因之一，已成为白血病化疗及白血病患者长期无病生存的主要障碍。其机制复杂，涉及多方面因素。对多药耐药相关蛋白基因（multidrug resistance-associated proteingene，MRP）的研究已有较多的报道。MRP家族已被证实有7个成员MRPl～MRP7。     

急性白血病多药耐药相关蛋白的检测及临床意义

目的：探讨多药耐药相关蛋白（MRP）的表达与临床耐药的关系。方法：以免疫组化ABC法检测了53例急性白血病AL患者和15例对照组骨髓单个核细胞MRP的表达情况,并同时检测了P－170的表达。结果：（1）40例化疗后患者,MRP阳性表达23例,其中疗效差18例,疗效佳5例。MRP阴性表达17例,其中疗效差7例,疗效佳10例。MRP阳性组疗铲显著差于阴性组（P＜0．05）,（2）40例化疗后患者,P－170阳性组疗效显著差于阴性组（P＜0．01）,（3）化疗后患者MRP与P－170表达具有一定的一致性（Kappa系数－0．367,P＜0．01）,且两者与临床疗效有关。结论：MRP的过高表达是多药耐药（MDR（）产生机制中又一因素;（2）MRP与P－170表达有一定的一致性,且与临床疗效有一定关系;（3）MDR采用多项指标检测有助于AL疗效判断及预后预测。     

急性髓系白血病多药耐药细胞标记蛋白的探讨

目的 采用蛋白质组学技术筛查急性髓系白血病(AML)细胞多药耐药标记蛋白。方法 将16例AML患者根据化疗疗效的不同分为2组:多药耐药组(7例)和化疗敏感组(9例)。采用双向电泳和质谱分析检测2组之间差异表达的蛋白质。结果 双向电泳凝胶图像分析结果显示,2组之间差异显著的蛋白点共9个。与化疗敏感组比较,多药耐药组第41号蛋白点的蛋白表达水平明显升高(P<0.01),第7/8、25和36/37号蛋白点的蛋白表达水平均明显降低(均P<0.01)。2组之间鉴定的4个差异表达蛋白分别为:细丝蛋白A(filamin A,FLNa,第7/8号)、β-肌动蛋白(β-actin,第25号)、纤维蛋白原γ链(fibrinogen gamma chain,第36/37号)和热休克蛋白60(heat shock protein 60,第41号)。结论 多药耐药AML细胞中FLNa、β-actin、fibrinogen gamma chain和heat shock protein 60有可能成为预测AML患者耐药的标志物。     

急性白血病多药耐药相关蛋白及P糖蛋白表达与临床耐药的关系

OBJECTIVE: To investigate the relevance between the expression of P-170 and MRP and clinical drug resistance in acute leukemia. METHODS: The expression of P-170 and MRP in mononuclear cells of bone marrows was analyzed by the immunohistochemical technique in 72 acute leukemia patients. RESULTS: The expression of P-170 was positive in 46 and negative in 26 of the 72 post-chemotherapy acute leukemia patients. The therapeutic effect of the P-170 positive expression patients was significantly poorer than that of the negative expression patients (P < 0.01). The expression of MRP was positive in 39 and negative in 33 of the 72 post-chemotherapy acute leukemia patients. The therapeutic effect of the MRP positive expression patients was significantly poorer than that in the negative expression patients (P < 0.01). The expression of P-170 and MRP had a significant concordance (Kappa = 0.427, P < 0.01). The sensitivity of P-170 and MRP which were analyzed simultaneously was 97.5%, which was higher than that of P-170 (90%) or MRP (77.5%) analyzed respectively in drug resistance patients. CONCLUSION: The expression of P-170 and/or MRP was significantly related with drug resistance in clinical chemotherapy. The therapeutic effect was significantly poorer in P-170 and/or MRP positive expression patients than that in negative expression patients. These data suggest that P-170 and MRP analyzed simultaneously can improve the value of diagnosis and prognosis in patients with drug resistance leukemia.     

肺耐药相关蛋白与白血病细胞多药耐药研究进展

肺耐药相关蛋白（LRP）是人类的穹隆体主蛋白（MVP）,可在正常细胞和包括白血病细胞在内的多种肿瘤细胞中表达。LRP可通过阻止化疗药物进入胞棱以及胞吐机制将化疗药物排出胞外,降低核内和胞内药物浓度而诱导白血病细胞的多药耐药。检测白血病细胞LRP的表达情况,对预测临床疗效具有一定的参考价值。     

急性白血病多药耐药相关蛋白及P糖蛋白表达与临床耐药的关系

目的 :研究急性白血病患者多药耐药相关蛋白 (MRP)及P 糖蛋白 (P 170 )的表达与临床耐药的关系。方法 :采用免疫组织化学方法检测 72例急性白血病患者骨髓单个核细胞MRP和P 170的表达。结果 :72例化疗后急性白血病患者中 ,MRP阳性表达 39例 ,阴性表达 33例 ,MRP阳性表达者疗效显著差于阴性表达者 (P <0 .0 1) ;P 170阳性表达 4 6例 ,阴性表达 2 6例 ,P 170阳性表达者疗效显著差于阴性表达者 (P <0 .0 1) ;MRP与P 170表达有一定的一致性 (Kappa系数 =0 .4 2 7,P<0 .0 1) ,两者同时检测对耐药患者的灵敏度为 97 5 % ,高于P 170检测的灵敏度 (90 % )和MRP检测的灵敏度 (77 5 % )。结论 :P 170和MRP表达与临床化疗耐药密切相关 ,P 170和 或MRP阳性表达者临床疗效显著差于阴性表达者。MRP与P 170两者同时检测可提高对耐药白血病患者的判断及预后估计     

多药耐药相关蛋白在白血病耐药研究中的进展

多药耐药是白血病治疗中的一个难题,随着P- 糖蛋白(P—glycoprotein,P—gp)等肿瘤耐药蛋白的发现及相关调节剂在临床上的应用为复发及难治性白血病的治疗开辟了一个新的途径。本文就对白血     

MRP1和XIAP基因在急性髓系白血病及细胞株中的表达及临床意义

目的 本研究旨在探讨多药耐药相关蛋白1 (MRP1)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)基因在急性髓系白血病(AML)患者及K562、K562/ADM细胞株中的表达,探讨其在AML发生及多药耐药中的意义.方法 应用实时荧光定量PCR方法和蛋白免疫印迹法检测81例AML患者与20例正常人骨髓细胞(对照组),以及K562、K562/ADM细胞株中MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达.结果 K562/ADM细胞MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白水平明显高于K562细胞(P＜0.05).AML患者初治组和复发难治组MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达水平均高于对照组(P＜0.05),复发难治组MRP1、XIAP基因mRNA及蛋白表达水平明显高于初治组(P＜0.05).结论 MRP1、XIAP基因的异常表达与白血病发病及复发密切相关,可能通过诱导白血病细胞耐药及抑制细胞凋亡的途径发挥作用,其表达水平的高低对评估AML患者预后及治疗效果有重要意义.     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589抑制基底样乳腺癌生长和转移

目的：探究组蛋白去乙酰化酶抑制剂LBH589对基底样乳腺癌（BLBC）生长和转移的抑制作用。方法：通过MTT法和平板克隆实验检测LBH589对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231和小鼠乳腺癌细胞系4T1增殖能力的影响;Transwell实验检测LBH589对细胞迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR和免疫印迹实验检测LBH589对细胞上皮-间质转化的作用;构建4T1乳腺癌细胞Balb/c小鼠脂肪垫成瘤模型,腹腔注射LBH589,观察4T1细胞成瘤和转移能力。结果：体外实验结果显示,与对照组相比,LBH589显著抑制MDA-MB-231和4T1细胞的增殖能力（t=11.37,P<0.05;t=18.18,P<0.05）、克隆形成能力（t=7.76,P<0.05;t=15.22,P<0.05）、迁移（t=8.8,P<0.05;t=18.0,P<0.05）和侵袭能力（t=8.24,P<0.05;t=15.99,P<0.05）;与对照组相比,LBH589上调细胞的上皮标志物CDH1的mRNA(t=7.33,P<0.05)表达水平,抑制细胞的...     

RAD001对胃癌SGC7901细胞生长的抑制作用及分子机制

目的:研究mTOR特异性抑制剂RAD001对胃癌SGC7901细胞增殖的影响,并探讨survivin在其中的作用.方法:常规培养胃癌SGC7901细胞,RAD001单独或联合顺铂干预,MTT法测定RAD001对胃癌SGC7901细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率.免疫细胞化学和Western-blot检测药物作用...     

雷帕霉素、RAD001抑制胃癌细胞株MKN-28、MKN-45细胞生长的实验研究

目的探讨雷帕霉素（rapamycin）、RAD001（everolimus）对胃癌细胞株MKN-28、MKN-45细胞生长的影响,并对其机制进行初步探讨。方法体外培养人胃癌MKN-28、MKN-45细胞,给予雷帕霉素、RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布情况。结果雷帕霉素、RAD001均可抑制MKN-28、MKN-45细胞生长,抑制作用具有时间依赖性,雷帕霉素作用于MKN-28、MKN-45两种细胞株72 h抑制率分别为23.40%、36.26%;RAD001作用于MKN-28、MKN-45两种细胞株72 h抑制率分别为25.12%、40.11%。72 h时RAD001组与阴性对照组、DMSO对照组相比,MKN-28、MKN-45细胞计数差异有显著性（P〈0.05）。RAD001作用24 h后MKN-28、MKN-45细胞周期发生改变,停滞在G0-G1期细胞比例增加。RAD001组与阴性对照组、DMSO对照组相比,MKN-45细胞周期差异有显著性（P〈0.05）,MKN-28细胞周期差异无显著性（P〉0.05）。结论两种药物相比较,RAD001相对敏感;两株细胞相比较,MK...     

伊曲康唑联合多柔比星对急性髓系白血病细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究伊曲康唑(ITC)单药及联合化疗药多柔比星(ADM)对急性髓系白血病细胞增殖及凋亡的影响.方法 活细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度ITC、ADM单药及ITC(2、6、15 μmol/L)联合ADM(0.30、0.75 μmol/L)对人急性髓系白血病细胞株KG1α及急性髓系白血病原代细胞的增殖抑制作用;不同浓度ITC持续处理的KG1 α细胞,分别于7、14、21 d观察对集落克隆形成的影响;ADM 0.75 μmol/L、ITC 6 μmol/L及二者联合作用KG1α细胞48 h后,瑞氏染色法观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞周期阻滞情况,Western印迹检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路相关蛋白Shh和胶质瘤相关癌基因同系物1(Gli1)的表达水平.结果 ITC及ADM对KG1α细胞及急性髓系白血病原代细胞均具有增殖抑制作用,并且ITC可降低KG1α克隆形成能力,均呈剂量依赖.Weeb系数检验,ADM0.75 μmol/L与ITC 6 μmol/L两药联合时,细胞实际存活率≤70％细胞预估存活率,有协同效应;联合组与对照组和单药组相比,KG1 α细胞形态变化更为明显.ADM 0.75 μmol/L与ITC 6μmol/L联合诱导KG1α细胞48 h的凋亡率为31.72％±1.58％,均显著高于对照组、ITC单药组和ADM单药组(4.17％±0.74％、4.33％±1.12％、9.53％±1.15％,均P＜0.01).线粒体膜电位检测中,联合组的低红色荧光细胞(P3)比例明显高于对照组、ADM和ITC单药组(18.80％±0.96％比5.00％±0.38％、9.70％±0.43％、7.10％±0.77％,均P＜0.01).ADM 0.75 μmol/L与ITC 6 μmol/L联合组与对照组及单药组比明显阻滞细胞于G2期(P＜0.05).Western印迹结果显示Shh和Gli1的表达水平随着ITC浓度增大而下降.结论 ITC与ADM合用可明显抑制细胞的增殖,增加KG1 α细胞凋亡率、线粒体的损伤及细胞G2期的阻滞;ITC可以抑制Shh信号通路.     

ICG-001在肝癌中对凋亡抑制蛋白Survivin的影响

目的 探讨β-catenin抑制剂ICG-001对SD大鼠肝癌组织中凋亡抑制蛋白Survivin的影响.方法 予二乙基亚硝胺喂养SD大鼠,随后将已成瘤的大鼠分成对照组、DM-SO组和给药组.用ICG-001抑制β-catenin的表达,Western blot法检测ICG-001对大鼠肝癌组织中Survivin蛋白表达的影响;实时定量PCR法检测ICG-001对肝癌组织中Survivin mRNA的影响.结果 用ICG-001抑制β-catenin的表达后,Western blot结果显示,ICG-001给药后Survivin的蛋白表达量降低.实时定量PCR结果显示,ICG-001给药后Survivin mRNA表达量降低.结论 β-catenin抑制剂ICG-001明显抑制Survivin的蛋白表达及mRNA表达.     

急性白血病RAD50基因多态性研究

目的研究温州地区急性白血病与RAD50基因多态性的关系。方法选取2018年6月～2019年6月来我院血液科就诊治疗的温州地区急性白血病100例患者为研究对象,并将其纳入急性白血病组(n=100)。100名体检正常者为对照组。采用PCR技术确定两组RAD50第4号内含子(rs17166050)基因分型(GA型、GG型),比较健康对照组与急性白血病组基因型频率。结果健康对照组与急性白血病组的RAD50(rs17166050)基因型GA型和GG型出现的频率比较差异有统计学意义(P0.05)。结论温州地区急性白血病与RAD50第4号内含子(rs17166050)的G等位基因的易感性相关。     

维奈克拉联合地西他滨、阿柔比星对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察维奈克拉(venetoclax,ABT-199)联合地西他滨(decitabine,DAC)、阿柔比星(aclarubicin,ACM)对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞株HL60、KG-1细胞增殖和凋亡的影响。方法：CCK-8法检测不同浓度ABT-199、 DAC、ACM单药及ABT-199+DAC、ABT-199+ACM、ABT-199+ACM+DAC 3种药物联合方式对HL60、KG-1细胞增殖的影响,使用 Compusyn软件分析药物联合是否具有协同作用;流式细胞术检测上述单药及药物联合对HL60、KG-1细胞凋亡比例和细胞周期分布的影响。结果：ABT-199、DAC、ACM单药均抑制HL60、KG-1细胞增殖。相比单药ABT-199,3种药物联合方式均显著增强对HL60、KG-1细胞增殖的抑制作用,且均具有协同作用。ABT-199联合用药明显促进HL60、KG-1细胞凋亡。DAC、ABT- 199+DAC、ABT-199+ACM+DAC可促使HL60、KG-1细胞周期阻滞于G2/S期。结论：ABT-199联合DAC、ACM抑制AML细胞增殖且具有协同作用,可促进AML细胞凋亡和细胞周期阻滞。     

G-CSF和GM-CSF对髓系白血病细胞增殖的影响

目的 了解粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对髓系白血病细胞增殖的影响。方法 采用甲基纤维素半固体培养法培养白血病细胞集落（ＣＦＵ－Ｌ）,观察Ｇ－ＣＳＦ和ＧＭ－ＣＳＦ对１１例ＡＭＬ和ＣＭＬ患者外周血ＣＦＵ－Ｌ形成的影响。结果 ＣＭ－ＣＳＦ对ＣＦＵ－Ｌ的促进作用明显高于Ｇ－ＣＳＦ（Ｐ＝０．０１２）,而Ｇ－ＣＳＦ对ＣＦＵ－Ｌ形成影响与对照组没有显著性差别（Ｐ＝０．４９５）。结论 Ｇ－ＣＳＦ对髓系白血病细胞体外增殖无明显影响,作为髓系白血病大剂量化疗的支持治疗可能更为安全。