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1.
目的:椎间盘退变是引起腰背痛的主要原因。将腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP1) 双基因体外联合转染兔椎间盘髓核细胞后,再移植于退变椎间盘内,观察椎间高度、II型胶原和蛋白多糖合成的变化,以探讨体外延缓或逆转椎间盘细胞退变的方法。方法 20只新西兰大白兔应用CT引导下的微创穿刺法建立兔椎间盘退变模型。以rAAV2-CTGF-IRES-TIMP1体外转染培养的兔髓核细胞,再将其显微注射于退变椎间盘内作为细胞移植组;退变椎间盘内注入磷酸盐缓冲液(PBS)作为退变对照组;正常椎间盘作为空白对照组。分别于6、10、14周行X线和MRI检查观察椎间高度的变化及椎间盘信号的改变,Western-blot鉴定细胞因子CTGF和TIMP1在椎间盘内的表达,35S整合法测定兔髓核组织蛋白多糖合成率,RT-PCR检测II型胶原及蛋白多糖mRNA的表达。结果 MRI证实CT引导下经皮微创穿刺2周后椎间盘开始退变。与退变对照组相比,MRI显示细胞移植组椎间盘退变明显减轻,转基因兔髓核细胞移植可减缓椎间高度(DHI)下降的发生率,转基因细胞移植组较退变对照组相比,Ⅱ型胶原含量和蛋白多糖的生物合成明显增加,差别有统计学意义(P﹤0.05)。结论 经皮CT 引导下穿刺可成功建立兔椎间盘退变模型。转双基因CTGF和TIMP1 髓核细胞移植可有助于椎间高度的维持,促进椎间盘内蛋白多糖和II型胶原的生物合成,明显延缓椎间盘退变。  相似文献   

2.
目的 探讨miR-29a在人椎间盘退变髓核(NP)细胞凋亡的调控作用.方法 体外培养椎间盘退变NP细胞,构建重组真核表达质粒cherry/miR-29a,脂质体Lipofectamine转染进入NP细胞,应用反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测NP细胞中miR-29a的表达变化,Western blot法检测凋亡相关蛋白Caspase-3前体的表达变化,流式细胞仪检测NP细胞凋亡水平变化.结果 NP细胞转染重组质粒cherry/miR-29a 48 h后,NP细胞中miR-29a的表达水平较NP细胞和转染空质粒的NP细胞中的miR-29a明显升高(P<0.05);凋亡相关蛋白Caspase 3前体的水平则明显下降(P<0.05);NP细胞凋亡水平明显升高(P<0.05).结论 在椎间盘NP细胞中过表达miR 29a能促进NP细胞凋亡,其机制可能是通过Caspase3途径起作用.  相似文献   

3.
目的:研究雌激素β受体(ERβ)在人椎间盘髓核细胞上的表达。方法:7例椎间盘突出症患者,手术切除之髓核组织经体外消化、细胞培养,提取总RNA,RT-PCR检测ERβ基因的表达;另外通过免疫组织化学方法检测ERβ在人椎间盘髓核细胞中的分布。结果:7例样本RT-PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,在323 bp处有单一高亮条带;免疫组织化学方法亦证实细胞质中有ERβ的分布。结论:人椎间盘髓核细胞中存在ERβ的表达。  相似文献   

4.
肌间隙入路腰椎间盘退变模型的构建   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨背最长肌与腹外斜肌间隙入路纤维环穿刺法构建兔腰椎间盘退变模型的可行性。方法新西兰大白兔6只,从兔子背最长肌与腹外斜肌间隙入路暴露椎体和椎间盘,L2/3为对照组,不暴露也不穿刺椎间盘;L3/4为假手术组,剪断L4右侧横突后暴露椎间盘,但不进行穿刺;L4/5、L5/6为穿刺组,剪断L5、L6右侧横突后暴露椎间盘并用18G针穿刺构建模型。分别在术前及术后4周对实验动物进行X线和磁共振(MRI)检查,4周后处死实验动物,取材后行组织学及免疫组织化学检查。结果术后4周,X线检查显示模型组L4/5、L5/6椎间盘高度明显降低、骨赘形成、终板硬化,MRI T2加权像亦见椎间盘高度下降,其椎间盘髓核信号明显减弱;大体观察见该组椎间盘髓核组织较少并组织松脆,呈淡黄色改变;组织学观察髓核脊索细胞数量减少,免疫组织化学观察到髓核Ⅱ型胶原表达比对照组和假手术组明显减少。结论本研究为椎间盘退变的研究提供了一种较为理想的、相对可靠的动物模型。  相似文献   

5.
目的观察不同退变程度颈椎病患者椎间盘髓核(nucleus pulposus,NP)的病理改变及磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38mitogen activated protein kinase,p-p38MAPK)的表达差异,探讨颈椎椎间盘退变可能的分子机制。方法收集2008年10月至2009年5月在我院行手术治疗的35例颈椎病患者的NP组织,获取术前相应颈椎MRI(T2像正中矢状位)资料。其中男性25例,女性10例,年龄27~82岁,5例来自单间隙,18例来自两间隙,12例来自三间隙;4例为C3/4、12例为C4/5、14例为C5/6、5例为C6/7。19例NP组织用于普通病理和免疫组织化学染色,16例用于蛋白质印迹分析。采用颈椎椎间盘MRI退变分级系统评定术前NP组织标本相应MRI退变程度。观察不同退变程度时NP组织的病理改变及p-p38MAPK在NP组织中的定位;分析退变椎间盘中p-p38MAPK含量与其MRI退变程度间的关系。结果随着颈椎椎间盘退变程度加重,NP内胶原纤维逐渐增多、增粗、变性,甚至聚合成团,NP逐渐纤维化;p-p38MAPK定位于NP细胞胞核;NP细胞p-p38...  相似文献   

6.
目的 探讨椎间孔镜下髓核摘除手术治疗腰椎间盘突出症的临床疗效.方法 经保守治疗无效的腰椎间盘突出症患者100例,行椎间孔镜下髓核摘除术.于术后各时点记录VAS评分及Oswestry功能障碍评分(ODI评分),于术后1年时行MacNab疗效评价.结果 术后各时点VAS评分和ODI指数均低于术前(P<0.05);术后1年时优效、良效、可效分别为66、28、6例,优良率为94.0%(94/100例).结论 椎间孔镜下髓核摘除手术治疗腰椎间盘突出症效果确切.  相似文献   

7.
椎间盘退行性变是临床的常见病,其病因尚不明确,可引起的一系列疾病如腰椎间盘突出症、颈椎病、椎间盘源性疼痛、椎管狭窄症以及脊柱节段不稳等,是导致腰腿痛和影响患者生活质量的常见原因之一。目前临床上的各种治疗办法或多或少存在着许多难以克服的问题,随着椎间盘髓核细胞组织工程学研究的不断深入,为椎间盘退行性变的治疗带来了新的希望,但其种子细胞的来源和鉴定等方面仍有许多问题亟待解决。  相似文献   

8.
最近,《关节炎和风湿病》(Anhrilis Rheum)杂志上刊载的1篇题为“人退变椎间盘髓核细胞中,整合素传导通路的变化”的研究文章引起了我们的关注。我们对该文进行仔细研读后,结合我们在人髓核细胞和椎间盘退变领域的研究,就人髓核细胞的培养,椎间盘退变的分级以及正常椎间盘的界定等方面提出了我们的见解,并就相关问题进行了对比和总结。我们撰写的Letter发表在《Anhrilis Rheum》杂志上。  相似文献   

9.
摘要:背景:椎间盘髓核的致炎特性是腰椎间盘突出症神经痛的重要机制,大鼠腰4、腰5半椎板切除术和并在左腰4、腰5神经根覆盖自体尾椎椎间盘髓核是研究非压迫性腰椎间盘髓核突出症常用的动物模型(简称传统模型)。但该模型尚存在创伤较大、成模率不高的不足。目的 :只暴露左L5 背根神经节(Dorsal root ganglion, DRG),行束膜切开后自体髓核移植制备非压迫性腰椎间盘髓核突出症改良模型,与传统模型比较其创伤度和成模率。方法 : 30只SD 雄性大鼠,随机分成三组,假手术组(6只),传统组(12只)、和改良组(12只)。统计每组的出血量和手术时间;测量术前1天和到术后大鼠的左后肢机械刺激缩爪阈值(paw withdrawal Threshold,PWT),和热刺激撤足潜伏期(paw withdrawal latency,PWAL)。结果:改良组手术时间和出血量少于传统模型组,改良组成模率91.7%高于传统组的58.3%,组间比较有统计学差异(p<0.05)。三组均未出现PWAL的减少。假手术组术后未出现PWT的降低。改良组和传统组术后出现明显的PWT降低(机械痛敏),改良组的机械痛敏比传统组更持久(28天VS 21天)。结论:对大鼠腰5背根神经节的束膜切开后再进行髓核移植可以制备损伤更小、疼痛行为学稳定的非压迫性腰椎间盘突出症的改良动物模型。  相似文献   

10.
Background  Nucleus pulposus of intervertebral discs has proinflammatory characteristics that play a key role in neuropathic pain in lumbar herniated intervertebral disc. One of the most commonly used animal models (the traditional model) of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc is created by L4–L5 hemilaminectomy and the application of autologous nucleus pulposus to cover the left L4 and L5 nerve roots in rats. However, such procedures have the disadvantages of excessive trauma and low success rate. We proposed a modified model of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc in which only the left L5 dorsal root ganglion is exposed and transplanted with autologous nucleus pulposus following incision of epineurium. We aimed to compare the modified model with the traditional one with regard to trauma and success rate.
Methods  Thirty Sprague-Dawley male rats were randomized into three groups: sham operation group (n=6), traditional group (n=12), and modified group (n=12). The amount of blood loss and operative time for each group were analyzed. The paw withdrawal threshold of the left hind limb to mechanical stimuli and paw withdrawal latency to heat stimuli were examined from the day before surgery to day 35 after surgery.
Results  Compared with the traditional group, the modified group had shorter operative time, smaller amount of blood loss, and higher success rate (91.7% versus 58.3%, P <0.05). There was no decrease in paw withdrawal latency in any group. The sham operation group had no decrease in postoperative paw withdrawal threshold, whereas the modified and traditional groups had significant reduction in paw withdrawal threshold after surgery (mechanical hyperalgesia).
Conclusions  Transplantation of nucleus pulposus onto the L5 dorsal root ganglion following incision of epineurium in rats established an improved animal model of non-compressive lumbar herniated intervertebral disc with less trauma and more stable pain ethology.
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11.
12.
目的:比较成人正常和突出椎间盘髓核细胞体外培养的形态及生长动力学差异.方法:从成人正常和突出髓核组织分离培养髓核细胞,分别取传1、3、5代细胞作为研究对象,光镜和电镜下观察细胞形态,并对细胞生长速率、MTT摄取、最大生长密度、分裂指数、克隆形成率等生长动力学指标进行比较研究.结果:体外培养的突出髓核细胞与正常髓核细胞相比,形态学上可见突出髓核细胞排列较紊乱,极性消失,胞质内粗面内质网轻度扩张.在接种相同的细胞密度和相同的培养条件下,成人正常和突出髓核细胞的生长速率差异在传1代时为T=52.5(P>0.05),传3、5代分别为T=72.0(P<0.01)、T=67.5(P<0.05);二者的最大生长密度、MTT摄取、分裂指数、克隆形成率在传1代时分别为7.28±0.23和7.41±0.17、0.186±0.015和0.173±0.008、(25.36±2.14)‰和(23.13±2.55)‰、(52.4±2.8)%和(47.7±2.6)%,差异均无显著性(P>0.05),传3代时分别为6.96±0.19和5.48±0.22、0.154±0.018和0.110±0.009、(22.52±2.16)‰和(16.68±2.35)‰、(48.7±3.3)%和(40.7±2.5)%,传5代时分别为2.42±0.13和0.98±0.14、0.085±0.006和0.050±0.007、(15.61±1.96)‰和(9.34±2.12)‰、(40.2±2.3)%和(28.34±2.9)%,传3、5代时差异均有统计学意义(P<0.05).结论:成人正常和突出椎间盘的髓核细胞在体外培养状态下,突出组细胞在细胞形态学上与正常对照组存在一定差异,在生长动力学方面,突出组细胞的持续增殖能力明显低于正常髓核细胞组,更容易出现老化现象.  相似文献   

13.
目的 检测椎间盘髓核细胞退变前后锌指蛋白A20及其相关炎症因子的表达变化.方法 获取我院骨科患者术中切除的椎间盘组织,分为正常组和退变组,采用阿辛蓝染色观察人椎间盘髓核细胞的退变情况,免疫组化观察人椎间盘髓核细胞A20、TNF-α、IL-1β及NF-κB p65蛋白的表达.体外培养胚胎小鼠髓核细胞,分为对照组(只加入等量的PBS)、内毒素(LPS)刺激组和NF-κB抑制组,分别以Real-time PCR检测LPS刺激细胞和加入NF-κB抑制剂后,A20、TNF-α、IL-1β、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMST-4)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMST-5)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达变化;Western blot检测A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、磷酸化p65(p-p65)的表达变化.结果 退变组髓核细胞数量显著少于正常组,并有明显的聚集现象;退变组髓核细胞中A20、TNF-α、IL-1β、p65蛋白表达明显高于正常组;LPS刺激胚胎小鼠髓核细胞后,LPS刺激组A20、TNF-α、IL-1β、ADAMST-4、ADAMST-5、MMP-13mRNA与蛋白的表达均高于NF-κB抑制组与对照组(P<0.05),A20、TNF-α、IL-1 β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、p-p65蛋白含量也较NF-κB抑制组与对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 髓核细胞炎症反应与椎间盘退变的发生、发展密切相关,A20可能通过NF-κB信号通路对抑制髓核细胞退变时炎症反应起到关键作用.  相似文献   

14.
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)及白细胞介素-23(IL-23)、IL-17A在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及其临床意义。方法 选取2019年2月—2022年2月青海大学附属医院收治的97例腰椎间盘突出症(LDH)患者作为研究组。另选取同期该院行前路减压内固定切除的脊柱骨折患者58例作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测两组腰椎间盘髓核组织TLR4、IL-23、IL-17A mRNA相对表达量。比较研究组不同腰椎间盘退变等级患者TLR4、IL-23、IL-17A mRNA相对表达量,分析研究组TLR4与IL-23、IL-17A mRNA相对表达量的相关性。结果 研究组TLR4、IL-23、IL-17A mRNA相对表达量高于对照组(P <0.05)。V级组TLR4、IL-23、IL-17A mRNA相对表达量高于Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组(P <0.05),Ⅳ级组高于Ⅱ级组、Ⅲ级组(P <0.05),Ⅲ级组高于Ⅱ级组(P <0.05)。重度腰痛组TLR4、IL-23、IL-17A mRNA相对表达量高于中度腰痛组(P <0.05)。重度腰椎功能丧失...  相似文献   

15.
目的观察单枚人工髓核PDN~SOLO型假体置换术治疗腰椎间盘突出症的效果。方法2003年3月至2005年6月,我院共施行单枚PDN~SOLO型假体置换术治疗腰椎间盘突出症30例,其中男17例,女13例,年龄25~61岁,平均43.1岁;第5腰椎~第1骶椎9例,第4~5腰椎17例,第3~4腰椎2例,第3~4腰椎并第4~5腰椎2例,术前均通过CT或MRI检查证实临床症状是由腰椎间盘突出症所致。均采用单枚PDN—SOLO置入,SOLO-525型3例,SOLO-725型24例,SOLO-925型3例。结果所有患者术后临床症状均消失,运动功能明显改善。25例获得随访,随访时间6~18个月,平均15.5个月。所有患者病变椎间隙的高度较术前均有增高(6~12mm)。术后早期并发症主要包括一过性腰部酸痛和低热,少见并发症包括假体移位脱出。结论人工髓核置换手术可以明显改善患者临床症状和功能,有效提高椎间盘高度,并发症轻微,可以接受,近期效果肯定,但长期效果尚待进一步随访。  相似文献   

16.
尚军 《中国现代医生》2013,(30):24-25,28
目的探讨小切口椎间盘开窗髓核切除术治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法将我科2009年9月~2012年9月期间应用小切口椎间盘开窗髓核切除术治疗的腰椎间盘突出症患者38例作为观察对象,观察术后患者的手术时间、切口长度、出血量、并发症以及患者术前术后JOA评分情况。结果全部病例的手术时间30~95min,最长1例手术时间长达95min。手术切口3-6cm,平均(4.3±0.1)cm,术中出血量达50~250mL,平均出血量达(92.4±3.1)mL。术中出现神经根损伤1例,未发生椎间隙感染、硬膜撕裂等并发症。术后当天开始腰腿痛完全消失,2例马尾综合征(急诊手术)分别在术后3d及5d内明显改善,肛周感觉恢复,括约肌不再松弛。1例术后症状加重,经脱水、激素治疗,1周后好转,半个月后症状完全消失。术后患者的JOA各项评分均较术前明显改善,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论小切口椎间盘开窗髓核切除术治疗腰椎间盘突出症具有手术创伤小,患者恢复快,保留了直视操作等优点,值得推广和应用。  相似文献   

17.
椎间盘退变是临床常见难题下腰痛的主要病因之一.而髓核细胞表型的改变、细胞生存时间的减少、代谢活动的降低和细胞外基质含量下降均被认为与椎间盘退变相关.椎间盘是身体内最大的无血管组织,在体内最显著的特点就是氧含量偏低.低氧诱导因子(H IF)是一种转录因子,细胞在低氧条件下诱导产生HIF从而引发一系列的细胞反应来适应低氧的外环境.HIF通过与低氧反应元件(HRE)结合以启动靶基因的转录表达.目前研究认为,HIF在椎间盘退变的病理进程中具有重要作用,可能是未来阻遏椎间盘退变进展甚至治愈这一临床难题的关键靶点.本文综述了HIF对于髓核细胞新陈代谢活动的调节作用,包括HIF在髓核细胞的表达以及HIF对于髓核细胞表型、生存、新陈代谢以及细胞外基质生成的调控.  相似文献   

18.
目的 在诱导椎间盘退变的早期移植同种异体兔髓核细胞( NPC),观察NPC对退变椎间盘的修复效果。方法 体外分离、培养NPC,并通过组织化学染色、免疫组织化学和免疫荧光染色对其进行鉴定。采用穿刺抽吸法建立兔椎间盘退行性变模型,造模同期进行细胞移植治疗。将27只5月龄日本大耳白兔随机分为3组:正常对照组(n=9)、NPC移植组(NPC组,n=9)及DMEM培养基组(DMEM组,n=9)。每只实验动物的L3-4、L4-5和L5-6作为实验干预椎间盘。术后4、8、12周分别利用标准化T2加权像信号强度(%ST2WI)、病理组织学、退变分数、免疫组化染色、免疫荧光染色以及二型胶原(Collagen Ⅱ)和蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达水平评价修复效果。结果 术后12周,DMEM组的%ST2WI值、CollagenⅡ和aggrecan 的mRNA表达量均明显低于其它两组(P<0.05),正常对照组和NPC组无明显差异(P>0.05);正常对照组和NPC组退变分数明显低于DMEM组(P<0.05),正常对照组和NPC组无明显差异(P>0.05);正常对照组、NPC组的Collagen Ⅱ免疫组化和aggrecan免疫荧光染色均显示强阳性,而DMEM组随着时间的推移阳性逐渐减弱。 结论 在退变早期移植同种异体的兔NPC能有效修复椎间盘组织的髓核退变。  相似文献   

19.
目的 探讨G蛋白偶联受体30(GPR30)通过Nrf2/ARE信号通路抑制白细胞介素1β(IL-1β)诱导的大鼠椎间盘髓核细胞的凋亡、炎症反应和氧化应激。方法 使用IL-1β处理大鼠椎间盘髓核细胞复制体外椎间盘退变模型,将椎间盘髓核细胞分为空白对照(Control)组、IL-1β组、IL-1β+过表达GPR30阴性对照质粒(oe-NC)组、IL-1β+过表达GPR30质粒(oe-GPR30)组、IL-1β + oe-GPR30+干扰Nrf2表达阴性对照质粒(si-NC)组、IL-1β + oe-GPR30+干扰Nrf2表达质粒(si-Nrf2)组,IL-1β的处理浓度为10 ng/mL。实时荧光定量聚合酶链反应检测GPR30 mRNA表达;Western boltting检测GPR30、抗重组与合成蛋白(Nrf2)和抗醌NADH脱氢酶(NQO1)和抗血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6水平;使用ELISA法检测活性氧(ROS)、分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,比色法检测丙二醛(MDA)水平。结果 IL-1β组髓核细胞GRP30 mRNA、蛋白相对表达量较Control组降低(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高(P <0.05)。IL-1β组髓核细胞核中Nrf2蛋白相对表达量较Control组升高(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高(P <0.05)。IL-1β组Nrf2、HO-1及NQO1蛋白相对表达量较Control组降低(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高(P <0.05)。IL-1β组髓核细胞Nrf2蛋白相对表达量较Control组降低(P <0.05),IL-1β+ oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组降低(P <0.05)。IL-1β组髓核细胞凋亡率较Control组升高(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组降低(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组较IL-1β + oe-GPR30+si-NC组升高(P <0.05)。IL-1β组TNF-α、IL-6水平较Control组升高(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组降低(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组升高(P <0.05)。IL-1β组ROS、MDA水平较Control组升高(P <0.05),SOD水平较Control组降低(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30组ROS、MDA水平较IL-1β + oe-NC组降低,SOD水平较IL-1β + oe-NC组升高(P <0.05),IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组ROS、MDA水平较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组升高,SOD水平较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组降低(P <0.05)。结论 上调GPR30表达激活Nrf2/ARE信号通路,能抑制IL-1β诱导的髓核细胞凋亡、炎症和氧化应激反应。  相似文献   

20.
目的评价经皮髓核切除术联合盘内胶原酶溶核治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法对45例腰椎间盘突出症病例行经皮髓核切除术联合盘内胶原酶溶核术。通过5~12个月的随访对其疗效进行分析。结果根据MacNab评价法,优30例,良12例,可2例,差1例。优良率93.3%,有效率97.8%。结论经皮髓核切除术联合盘内胶原酶溶核术胶原酶化学溶核术治疗腰椎间盘突出症具有见效快、疗效好,不良反应少的优点。  相似文献   

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