多重PCR-SSCP快速检测因子Ⅸ基因突变

遗传性因子Ⅸ (ＦⅨ )缺乏症 ,又称血友病Ｂ是一种Ｘ连锁的隐性遗传病 ,发病率为 1.0 / 10万～ 1.5 / 10万 ,大多数患者主要表现为出血倾向。其发病原因是因为ＦⅨ基因结构发生异常 ,从而导致ＦⅨ质或量发生改变。对血友病Ｂ进行基因诊断 ,不仅可以从分子水平上阐明其发病机制 ,而且有利于产前诊断 ,减少患儿的出血 ,提高人民的健康水平。ＦⅨ基因位于Ｘｑ 2 6 .3～ 2 7.1,全长 34ｋｂ ,由 8个外显子 ,7个内含子以及侧翼序列组成。除了ＰｏｌｙＡ以外 ,已知的基因部位内都能检测到突变 ,且其突变具有多态性[1] 。我们应用多重ＰＣＲ ＳＳＣ…     

肝脏疾病患者组织因子抑制物检测意义

目的检测肝脏疾病患者组织因子途径抑制物（TFPI）、凝血、抗凝指标，并探讨其临床意义。方法TFPI抗原（TFPI-Ag）采用双抗体夹心ELISA抗原测定法，凝血酶原时间（PT）采用凝固法，D-Z．聚体（D-D）采用免疫比浊法检测。结果肝脏疾病患者中TFPI、PT、D-D均高于健康对照组（P分别〈O．05、〈O、01、〈O．01），仅失代偿期肝硬化患者TFPI-Ag降低（P＜0．05）。结论肝脏疾病患者的TFPI、凝血、抗凝指标异常对评价肝脏损伤及判断预后具有重要的临床意义。     

重组因子Ⅸ的工业生产

由于重组DNA工业技术的进步,现在已能生产高纯活性重组因子Ⅸ(rFⅨ)产品。重组因子Ⅸ发展阶段:1、稳固插入因子Ⅸ基因和PACE—SOL(一种可溶性丝氨酸切酶,是从rFⅨ去除氨基末端前肽提高细胞量所必需)于中国仓鼠卵巢细胞; 2、选择能生长在含有规定完全培养基(不含血液或血浆制品)的生物反应器中的且能表达大量活性rFⅨ的细胞系;3、包含有4个独立层析步骤,均无需单克隆抗体。进而,对rFⅨ进     

重组因子Ⅸ病毒安全性

中国仓鼠卵巢(CHO)细胞—基本药物的病毒安全性已很好确证。已有1亿次以上输注CHO衍生的药物未证实病毒传染的单独病例。重组因子Ⅸ(rFⅨ)的生产建立在这样的安全记录之上,通过采用一种接近病毒安全性的多层次工艺状态。这些包括广泛测试用于生产rFⅨ的CHO细胞,细胞培养生产过程的常规病毒监控,工业生产和配方不采用血液或血浆制品以及验证纯化过程的病毒去除能力。rFⅨ的多方面病毒安全性计划     

地中海贫血患者组织因子和组织因子途径抑制物检测的临床意义

目的:观察地中海贫血(地中海贫血)患者脾切除术前及术后1年外周血中E-选择素、凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)、凝血酶原片段1+2(F1+2)、组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)含量的变化,探讨地中海贫血患者脾切除前后血凝状态的改变。方法:采用酶联免疫吸附法分别测定30例地中海贫血患者腹腔镜脾切除术前后血浆中E-选择素、TAT、F1+2、TF及TFPI的水平。选择30例健康体检者作为对照组。结果:地中海贫血患者脾切除术后1年患者血浆中E-选择素、TAT、 F1+2、TF、TFPI水平显著高于术前及对照组。地中海贫血患者脾切除术前血浆中E-选择素、TAT、 F1+2显著高于对照组。地中海贫血患者切脾前后血浆TF与TFPI水平均呈正相关(切脾前r=0.65,P 0.001;切脾后r=0.92,P 0.001);切脾后TF水平与TAT(r=0.75, P 0.001)及F1+2(r=0.78, P 0.001)呈正相关;切除脾后血浆TFPI水平与TAT(r=0.84, P 0.001)及F1+2(r=0.85, P 0.001)呈正相关。结论:地中海贫血患者脾切除后血小板增多、内皮细胞活化受损、促凝血因子增多,血液处于血栓前状态。TF/TFPI在地中海贫血脾切除患者血栓形成的病理过程中起重要作用,并可作为评价血液高凝状态变化的参考指标。     

未经热处理及经热处理因子Ⅸ复合物浓缩剂治疗有抑制物血友病患者的效果比较

为明确经热处理的因子Ⅸ复合物浓缩剂(其对于病毒传染的潜在危险比未经热处理的低)治疗有抗因子Ⅷ抗体血友病甲患者的效果与未经热处理的因子Ⅸ复合物浓缩剂是否一致,作者回顾性地分析了10例不加选择的有抑制物患者的家庭治疗记录。该10例来自2个血友病中心,例1-9为有抑制物的血友病甲,例10为获得性抗因子Ⅷ抗体伴严重出血倾向。分析内容为1983年1月1日-1985年7月31日的全部出血发作。所应用的制剂,未经热处理的为NHT-Konyne,经热处理的为Konyne-HT。应用目的均是为了处理关节出血。由于1984年后NHT-Konyne被淘汰,因此本文采用回顾性自身对比。所用剂量为     

组织因子途径抑制物研究进展

组织因子途径抑制物(TPI)以前称作抗转化素、脂蛋白相关凝血抑制剂(LACI)、外源性途径抑制剂(EPA)或组织因子抑制剂(TFI),为内源性血浆抗凝蛋白和目前惟一已知的组织因子(TF)依赖性凝血途径调节剂.人类TFPI有两种形式:TFPI-I和TFPI-2,通常说的TFPI是指TFPI-1.TFPI曾使用过多个不同的名字,直到1991年国际血栓止血协会科学和标准化委员会达成共识命名为TFPI.本文将从TFPI的结构、理化特性、抗凝作用等几个方面对TFPI进行综述.     

放射免疫分析法相关参数对甲状腺球蛋白检测结果的影响

目的评价放射免疫分析法曲线拟合方式一定时,不同试剂盒、结合率方式(B/T与B/B0)对甲状腺球蛋白(TG)检测结果的影响。方法选用国内具有代表性的3家放射免疫试剂盒(A、B、C组),分别对78例临床确诊的甲状腺疾病患者血清TG进行检测。曲线拟合方式一定前提下,分别用B/T与B/B0 2种结合率方式进行检测,分析3家放射免疫试剂盒的不同结合率方式对检查结果的影响。结果 A、B、C组试剂盒检测TG值差异有统计学意义(z=6.11,P0.05);A组与B组检测TG值差异无统计学意义(z=0.894,P0.05);A组与C组检测TG值差异有统计学意义(z=2.01,P0.05);B组和C组检测TG值差异也有统计学意义(z=1.963,P0.05)。在B/T与B/B0 2种结合率方式下,A组和B组检测TG值差异均无统计学意义(P0.05),C组检测TG值差异有统计学意义(z=-1.68,P0.05)。结论曲线拟合方式一定,选择不同的放射免疫试剂盒必须选择其试剂盒所对应的结合率方式,才能得出较准确的TG检测结果。     

因子Ⅷ抑制物及其临床意义

FⅧ抑制物是一种可以抑制或中和F血凝血活性的同种抗体或自身免疫抗体[1]。同种抗体见于部分先天性血友病甲患者；自身免疫抗体见于非血友病患者，由此引起的疾病亦称之为获得性血友病。FⅧ抑制物一旦形成，常规治疗方法时常不能有效地控制出血，成为临床棘手的问题。1FⅧ抑制物形成的相关因素FⅧ抑制物产生的病因较为复杂。同种抗体与以下因素有关：①血友病甲的严重程度。重型患者易形成FⅧ抑制物，而轻型患者较少见[2]。FⅧ基因严重的分子缺陷造成无FⅧ蛋白合成和分泌，替代疗法的FⅧ类似异体抗原，导致免疫反应，形成同种抗体，即F…     

重组因子Ⅸ的生物化学特性

天然人因子Ⅸ是一种55000—d糖蛋白,它具有—模域结构和许多翻译后修饰。重组型人因子Ⅸ(rFⅨ)是从中国仓鼠卵巢细胞系生产的,该工程细胞具有高水平蛋白加工和表达。为保证重组分子含有血浆衍生型因子Ⅸ的必需结构和功能状态,提出了rFⅨ详细的生物化学和生物物理特性。实验室研     

重组因子Ⅸ的临床评价

重组因子Ⅸ(rFⅨ)的药物动力学、安全性和有效性在以前治疗过的和未治疗过的乙型血友病人中已做出评价。在以前未治疗过的56例病人研究中,总计有1070次出血,需要输注rFⅨ1514次。1070次出血异外的80％经rFⅨ输注一次后得以止血。剩下的大部分需要1次以上输注者不是大出血就是复杂出血。1514次输注的87％经医师或病评价为反应极好或好。这     

因子Xa依赖的组织因子途径抑制物

组织因子途径抑制物（ＴＦＰＩ）是新近发现的一种生理性抗凝物质，存在于正常血浆中，对组织因子和因子Ⅶａ的复合物（ＴＦ／ＦＸａ）有强大的抑制作用，但其抑制机制需依赖因子Ｘａ（ＦＸａ）的存在。本文就该抑制物的体内产生、生化性质、基因结构、作用机制及其临床意义作一综述。     

胃癌患者血浆组织因子、组织因子途径抑制物的检测及其临床意义

近年来研究发现,组织因子（TF）和组织因子途径抑制物（TFPI）与恶性肿瘤的发生、发展有重要关系,TF在体内许多细胞均能表达,多种癌细胞亦能表达和分泌,与肿瘤的血管生长和转移有关。我们报道胃癌患者血浆中TF和TFPI的水平变化,并对其临床意义进行探讨：     

结核性胸腹水纤溶因子和组织因子及其抑制物检测的意义

结核性胸腹水凝血纤溶异常尚未引起人们重视,上个世纪80年代用纤维蛋白琼脂平板法检测结核性胸腹水总纤溶活力极度低下[1],检测纤维蛋白降解产物浓度中度升高[2],曾引起我们深思。近五年来随着新方法的应用,我们对结核性胸腹水的多项纤溶系因子以及组织因子(Tissue factor, TF)和组织因子途径抑制物(Tissue factor pathway inhibitor, TF-PI)作了进一步的检测,现将结果和意义作一报告。1材料与方法1·1检测对象结核性胸腹水42例,其中胸水33例、腹水9例,男19例、女23例,年龄15~76岁,平均48·8岁,均为本院住院病人,经结核菌素(PPD)试验、…     

因子Xa依赖的组织因子途径抑制物

组织因子途径抑制物(TFPI)是新近发现的一种生理性抗凝物质,存在于正常血浆中,对组织因子和因子Ⅶa的复合物(TF/FXa)有强大的抑制作用,但其抑制机制需依赖因子Xa(FXa)的存在。本文就该抑制物的体内产生、生化性质、基因结构、作用机制及其临床意义作一综述。     

组织因子途径抑制物的研究进展

组织因子途径抑制物的研究进展赵明综述包承鑫，王彭延审校组织因子途径抑制物（Ｔｉｓｓｕｅｆａｃｔｏｒｐａｔｈｗａｙｉｎ－ｈｉｂｉｔｏｒ，ＴＦＰＩ），又称外源凝血途径抑制物（ＥＰＩ）或与脂蛋白结合的凝血抑制物（ＬＡＣＩ），是正常生理条件下血液中存在的天然...     

086检测组织因子途径抑制物活性的简单底物呈色法

[英]／MauroB…／／AmJClinPathol.-1995,1039(4).-391～395组织因子途径抑制物(TFPI)是一种多功能蛋白酶抑制物，可直接结合并灭活X_a因子，并抑制组织因子──因子Ⅶ_a复合物。其结构和作用机理已阐明，但临床应用尚欠了解，原因是TFPI测定复杂，需应用多种纯化的凝血因子(Ⅶ,Ⅶ_a,X,X_a,X)。作者等设计一种测定血浆或血清TFPI的简单底物呈色法。具体步骤：于微孔板上每孔中加入200μl凝血活酶悬浮液(ortho公司)，4℃下孵育过夜，再加入200μl含2mmol／LCaC1_2及0.5％BSA的TBS，室温下孵育1小时，相继在孔中加入适量PCC(灭…     

重组因子Ⅸ的临床前研究

重组因子(rFⅨ)在临床前研究中已广泛评价。乙型血友病的狗模型研究指出,rFⅨ在使止血指标正常化方面和高纯血浆衍生替代因子一样有效。药物动力学研究指出了rFⅨ的剂量比例图。药物动力学/药效学分析表明,继rFⅨ注射后其血浆中浓度增加与血浆中测得的因子Ⅸ活性密切相关。已进行的体内外相应的毒理学研究支持临床应用rFⅨ治疗乙型血友