Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的 探讨Th17细胞过继免疫治疗对荷弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)小鼠肿瘤生长的影响.方法 采用Mini MACS免疫磁珠分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4+ CD62L+初始T细胞,采用"转化生长因子(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ抗体(anti-IFN-γ)、白细胞介素4抗体(anti-IL-4)、白细胞介素23(IL-23)"因子组合体外诱导小鼠Th17细胞分化,采用ELISA法测定Th17细胞产生IL-17水平;采用DLBCL细胞株SUDHL-4接种SCID小鼠建立DLBCL荷瘤小鼠模型;选择0、8、18d(3组,5只小鼠/每组)对荷瘤小鼠进行Th17细胞过继免疫治疗,计算肿瘤体积,观察荷瘤小鼠生存期.结果 小鼠在接种SUDHL-4细胞8d左右均形成瘤结节,成瘤率为100％.与对照组小鼠相比,3个过继免疫治疗组小鼠肿瘤体积均明显缩小(P＜0.05),荷瘤小鼠生存期均显著延长(P＜0.05).结论 Th17细胞过继免疫治疗对DLBCL荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用.     

非小细胞肺癌患者外周血Th17细胞比例和血清IL-17水平的检测及其临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Th17细胞比例和自细胞介素-17(IL-17)水平的变化及其与患者临床病理的关系.方法 收集60例原发未治疗的NSCLC患者(NSCLC组)和20例健康志愿者(对照组),采用流式细胞术(FCM)检测Th17细胞比例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平.结果 NSCLC组Th17细胞占CD+3 T细胞比例高于对照组[(1.23±0.41)％比(1.05±0.28)％,t=1.679,P=0.097],鳞状细胞癌患者外周血Th17细胞比例明显高于腺癌患者[(1.31±0.39)％比(1.09±0.41)％,t=2.093,P=0.041].NSCLC组IL-17水平明显高于健康对照组[(21.11±7.87) pg/ml比(17.64±5.07)pg/ml,t=2.280,P=0.027],鳞状细胞癌患者血清IL-17表达水平明显高于腺癌患者[(23.11±8.73) pg/ml比(18.54±6.38)pg/ml,t=2.203,P=0.032].Th17细胞比例、IL-17的表达水平随临床分期的进展呈下降趋势[F=3.151,P=0.032;F=4.132,P=0.010].结论 NSCLC患者外周血中Th17细胞比例和IL-17的表达与肿瘤病理分型、TNM分期相关,可能在NSCLC的病程中发挥重要作用.     

IL-17调控DLBCL小鼠VEGF表达对肿瘤生长的作用

目的:建立弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）小鼠模型并接种体外培养的Th17细胞,对比接种组与对照组IL-17及VEGF表达水平的变化,分析IL-17水平与VEGF表达的相关性及其与肿瘤发生发展的关系。方法:Mini MACS免疫磁珠分离系统分离纯化BALB/c小鼠脾来源的CD4+CD62L+ nave T细胞,加入anti-CD3、anti-CD28、TGF-β、IL-6进行Th17细胞体外培养,SUDHL-4细胞进行传代培养后接种于SCID小鼠建立DLBCL小鼠模型,对荷瘤小鼠进行 Th17 细胞接种,ELISA法检测DLBCL小鼠肿瘤组织中IL-17及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果:接种Th17细胞后DLBCL小鼠IL-17表达水平较对照组升高,VEGF表达水平较对照组降低;随着肿瘤病程进展IL-17表达水平降低,VEGF表达水平升高。IL-17与VEGF之间存在显著负相关。结论:IL-17可下调VEGF的表达从而影响DLBCL的疾病进程,联合检测IL-17和VEGF表达水平对判断DLBCL疾病状态及进程更有参考价值。     

肺癌患者外周血白细胞介素-17+CD4+T细胞和白细胞介素-17+CD8+T细胞表达的意义

目的 检测白细胞介素(IL)-17+CD4+T(Th17)细胞和IL-17+CD8+ T(Tc17)细胞在肺癌患者外周血中的表达水平,探讨二者在肺癌免疫中的作用及临床意义.方法 采用流式细胞术(FCM)检测60例肺癌患者及40例健康对照者外周血中Th17和Tc17细胞占CD;T细胞的比例.结果 肺癌组外周血中Th17细胞[(1.795±0.623)％]和Tc17细胞[(0.865±0.357)％]比例分别高于对照组[(1.405±0.256)％、(0.640±0.204)％],(t=28.944,P＜ 0.001;t=14.051,P＜ 0.001).两组内Th17细胞与Tc17细胞的表达水平均呈正相关(肺癌组r=0.770,P＜0.05;对照组r=0.532,P＜0.05).Th7细胞和Tc17细胞表达均与临床分期有关(F值分别为4.882、3.633,均P＜0.05),但与病理类型无关(均P＞0.05).结论 肺癌患者体内Th17细胞和Tc17细胞表达升高,二者可能参与了肺癌的发生、发展;Th17与Tc17细胞的表达水平可作为评价肺癌患者免疫功能状态的新指标,能为病情监测提供参考.     

利妥昔单抗对弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子影响的体外实验

目的 探讨利妥昔单抗对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者Th17细胞及相关细胞因子体外的影响及其意义.方法 DLBCL初治患者(DLBCL组)20例和健康对照者(健康对照组)20名,每个对象分别采集4份外周血标本,分离外周血单个核细胞(PBMC),按照培养条件的不同分成4个亚组:空白组(A亚组)、加入利妥昔单抗组(B亚组)、加入利妥昔单抗和血清组(C亚组)和极化组(D亚组)[加白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子(TGF-β)].培养后分别采用流式细胞术检测各亚组外周血PBMC中Th17细胞比例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上述培养液中白细胞介素17(IL-17)的表达水平.结果 健康对照组中,D亚组的Th17细胞比例和IL-17水平分别为(17.12±4.90)％、(45.735±10.012)pg/ml,均高于A、B、C亚组(P＜0.05),A、B、C亚组之间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).DLBCL组A亚组的Th17细胞比例及IL-17水平为(0.69±0.24)％、(6.012±1.312)pg/ml,均低于健康对照组A亚组的(2.43±0.61)％、(8.217± 1.681)pg/ml(P＜ 0.05);在与利妥昔单抗一起体外培养后,DLBCL组中B、C和D亚组的Th17细胞比例分别为(2.34±0.48)％、(2.31±0.53)％和(16.92±4.81)％,IL-17水平分别为(7.944±1.538) pg/ml、(7.957±1.533) pg/ml和(44.417±9.881) pg/ml,均高于A亚组,且D亚组明显高于B、C亚组(P＜0.05).B、C亚组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 体外实验证实,DLBCL患者外周血PBMC中Th17细胞比例低于健康人,利妥昔单抗作用于DLBCL患者外周血PBMC后可升高Th17细胞比例.     

肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中IL-17的分布特征及临床意义

目的:探讨肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中IL-17的分布特征及其临床意义。方法:流式细胞术检测15例肺癌组织和15例配对远癌正常组织中浸润淋巴细胞的IL-17表达水平。结果:肺癌患者肿瘤组织浸润淋巴细胞中IL-17A显著高于远癌正常组织（P＜0.000 1）,肿瘤组织中浸润产生IL-17的CD3+CD4+T细胞（Th17）（P＜0.001）、CD3+CD8+T细胞（Tc17）（P＜0.001）、γδT细胞（γδT17）(P＜0.000 1)均高于远癌正常组织;肺癌患者肿瘤组织浸润Th17和Tc17水平无明显差异（P＞0.05）,而γδT17水平显著高于Th17（P＜0.001）和Tc17（P＜0.000 1）;肿瘤组织中浸润的γδT17表达水平和淋巴结转移相关（P＜0.05）。结论:IL-17和肺癌发生相关,其早期主要来源是肿瘤浸润的γδT细胞;γδT17数量与淋巴结转移有关,提示γδT17细胞可能参与肺癌病程的进展。     

人骨髓来源的间充质干细胞体外对外周血Th17细胞的调节作用

目的 探讨人骨髓来源的间充质干细胞(BMSC)在体外对外周血Th17细胞及IL-17的调节作用.方法 用淋巴细胞分离液以密度梯度离心法分离3例急性髓系白血病(AML)、3例急性淋巴细胞白血病(ALL)、1名健康人BMSC及健康人外周血单个核细胞(PBMC)并传代培养;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中的IL-17;流式细胞术检测共培养的健康人外周血中Th17细胞所占百分比.结果 AML患者BMSC与健康人PBMC共培养后,上清中IL-17表达水平为(292.32±37.25) pg/ml,与健康人BMSC与PBMC共培养上清中的IL-17水平[(169.64±17.47)pg/ml]相比,差异有统计学意义(P＜ 0.01);ALL患者的BMSC与PBMC共培养后,上清中的IL-17表达水平为(159.89±23.71)pg/ml,与健康人BMSC与PBMC共培养上清的差异无统计学意义(P＞0.05).健康人、ALL和AML患者BMSC与健康人PBMC共培养体系中Th17细胞的百分比分别为(10.13±2.19)％、(13.77±4.04)％、(21.53±5.05)％,AML患者与健康人间差异有统计学意义(P＜0.01),ALL患者与健康人间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 AML患者BMSC促进外周血CD4+T细胞分化产生Th17细胞,AML患者BMSC可能在免疫抑制调节中发挥作用.     

Th17细胞过继免疫对DLBCL小鼠CXCL6/CCL2表达的影响及其意义分析

目的 建立弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B lymphoma,DLBCL)小鼠模型,在肿瘤发生发展阶段中给予Th17细胞过继免疫治疗,检测肿瘤组织中趋化因子CXCL6/CCL2的表达,了解Th17细胞对DLBCL肿瘤微环境中CX-CL6/CCL2表达的影响,及其与DLBCL发生发展的相关性.方法 人生发中心B细胞(germinal center B cell,GCB)样DLBCL细胞株SUDHL-4进行传代培养后接种10只SCID小鼠建立DLBCL小鼠模型,观察小鼠肿瘤发生发展过程并得出DLBCL小鼠肿瘤中位发病时间T1及小鼠中位生存时间T2.体外培养Th17细胞,在接种肿瘤细胞株时予30只DLBCL小鼠注射Th17细胞行过继免疫,并分别于T0(接种Th17细胞后)、T1和T2这3个时间点处死小鼠,获得A0、A1和A2组,每组10只小鼠.实时定量PCR法检测DLBCL小鼠肿瘤组织CXCL6/CCL2表达,与同一时间点15只小鼠的生理盐水对照组(B0、B1和B2组,每组5只)进行对比,并对比T0、T1和T2这3个时间点各组CXCL6/CCL2的表达.结果 A0组、A1组和A2组CXCL6 mRNA表达量分别为0.115士0.021、0.657±0.142和0.935士0.322,差异有统计学意义,F=7.013,P=0.025.B0组、B1组和B2组CXCL6mRNA表达量分别为0.175±0.024、0.321±0.011和0.631±0.027,差异有统计学意义,F=6.007,P=0.008.A0组CXCL6mRNA表达量与B0组对比差异无统计学意义,t=2.03,P=1.25;A1组明显高于B1组,t=6.43,P＜0.01;而A2组也明显高于B2组,t=6.35,P＜0.01.A0组、A1组和A2组CCL2 mRNA表达量分别为0.133±0.015、0.654±0.534和0.928±0.322,差异有统计学意义,F=7.021,P=0.023.B0组、B1组和B2组CCL2 mRNA表达量分别为0.124±0.013、0.327±0.025和0.628±0.322,差异有统计学意义,F=6.005,P=0.007.A0组CCL2 mRNA表达量与B0组对比差异无统计学意义,t=1.98,P=1.75;A1组明显高于B1组,t=6.13,P＜0.01;A2组也明显高于B2组,t=7.59,P＜0.01.结论 随着DLBCL肿瘤进程,CXCL6和CCL2的表达上升,CXCL6和CCL2可能是影响DLBCL肿瘤发生发展的因子,而Th17过继免疫治疗可以上调DLBCL肿瘤组织CXCL6和CCL2的表达,可能会对DLBCL肿瘤的发生发展产生影响.     

肺癌脑转移患者Th17细胞和IL-17水平变化的研究

背景与目的 Th17细胞是一种重要的辅助性T细胞,其主要分泌IL-17等细胞因子,在感染免疫、自身免疫性疾病和肿瘤免疫中均有重要意义。本研究旨在探讨Th17细胞和IL-17在肺癌脑转移患者外周血中的表达及IL-17在肺癌脑转移患者脑脊液中的表达和意义。方法流式细胞术检测22例肺癌脑转移患者和20名正常对照外周血Th17(CD3+CD4+IL-23R+)细胞的百分率,ELISA方法检测22例肺癌脑转移患者和20名正常对照血浆IL-17水平,ELISA方法检测19例肺癌脑转移患者和16例无脑转移肺癌患者脑脊液IL-17水平。结果肺癌脑转移患者外周血Th17细胞百分率(4.65%±0.72%)明显高于正常对照(2.71%±0.54%,P=0.04);其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者和小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者没有差异。肺癌脑转移患者血浆IL-17水平明显高于正常对照(117.4±16.43 pg/mL和72.55±8.19 pg/mL,P=0.02);其中NSCLC患者和SCLC患者没有差异。肺癌脑转移患者脑脊液IL-17水平明显高于无脑转移的肺癌患者(73.21±7.52 pg/mL和50.25±8.04 pg/mL,P=0.04)。结论肺癌脑转移患者外周血Th17细胞数量增多,血浆IL-17和脑脊液IL-17水平升高,Th17细胞和IL-17可能参与了肺癌脑转移的发生和发展。     

肝细胞癌患者外周血Th17细胞水平的变化及其与肿瘤进展的关系

目的 研究Th17细胞在肝细胞癌(HCC)外周血中的表达,探讨Th17与HCC进展的关系.方法 采用流式细胞术检测61例HCC患者和38例正常对照者外周血中Th17细胞的水平,应用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR),从mRNA水平检测白细胞介素(IL-17)、IL-23p19和维甲酸相关孤儿受体(RORc)的表达情况,分析HCC患者外周血Th17水平变化与其各项临床指标间的关系.结果 61例HCC患者的Th17细胞水平为4.67%±0.79%,正常对照组为3.25%±0.68%,两组间差异有统计学意义(P＜0.0001).HCC患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17、IL-23p19和RORc的mRNA表达水平分别为正常对照组的23.9、8.5和23.2倍,差异有统计学意义(P＜0.05).HCC患者外周血中Th17水平增高与患者的性别、年龄、术前甲胎蛋白浓度等无关(P＞0.05),而与肿瘤大小、门脉癌栓、远处转移、TNM分期等有相关性(P＜0.05).Th17细胞水平随TNM分期的增加而升高,Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者外周血中Th17细胞水平分别为4.05%±0.82%、4.32%±0.67%、4.94%±0.70%和5.22%±0.87%,Ⅰ～Ⅱ期患者的Th17细胞水平明显低于Ⅲ～Ⅳ期(P=0.0008).结论 HCC患者外周血中Th17细胞水平升高,Th17细胞水平增高与肿瘤大小、门脉癌栓、远处转移、TNM分期有明显关系;PBMC中IL-17、IL-23p19和RORc的mRNA表达水平也明显升高.Th17细胞可能通过分泌效应细胞因子,直接或间接参与了HCC细胞的增殖、侵袭和远处转移.     

沙利度胺对弥漫大B细胞淋巴瘤疗效及Th17细胞和相关细胞因子表达的影响

目的 探讨沙利度胺对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血中Th17细胞、白细胞介素17(IL-17)、巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)表达及3年生存率的影响.方法 选择2009年1月至2013年1月河北工程大学附属医院60例DLBCL患者,采用信封法随机分为联合组(30例,采用沙利度胺联合CHOP方案)和化疗组(30例,单用CHOP方案),比较两组临床疗效、不良反应、治疗前后外周血中Th17细胞、IL-17、MIP3α表达量以及3年生存率.结果 联合组和化疗组总有效率分别为73.3％(22/30)、46.7％(14/30),3年生存率分别为87.4％、40.7％,差异均有统计学意义(均P<0.05).治疗前后联合组外周血Th17细胞百分率及IL-17表达水平分别为(0.52±0.14)％和(1.61±0.53)％、(5.61±0.75)pg/ml和(8.87±1.84)pg/ml,差异均有统计学意义(均P<0.05),而化疗组治疗前后Th17细胞及IL-17表达水平分别为(0.75±0.05)％和(0.74±0.07)％、(5.69±0.29)pg/ml和(5.26±0.24)pg/ml,差异均无统计学意义(均P>0.05).治疗前后联合组患者外周血清中IL-17、MIP3αmRNA表达水平分别为8.51±0.23和13.96±0.89、27.4±1.5和83.0±8.5,差异均有统计学意义(均P<0.05),而化疗组治疗前后分别为8.85±0.32和9.45±0.55、23.7±1.8和38.7±5.5,差异均无统计学意义(均P>0.05).联合组与化疗组患者不良反应差异无统计学意义(P>0.05).结论 沙利度胺可能通过干预Th17细胞及相关细胞因子治疗DLBCL,延长DLBCL患者生存期.     

急性白血病患者外周血Treg细胞与Th17细胞的相关性

目的:检测急性白血病患者外周血中Treg细胞与Th17细胞的比例以及相关细胞因子如IL-17、IL-6、TGF-β的变化,分析其相关性。方法:选取兰州大学第二医院血液科急性白血病初诊患者15例,另取15名健康志愿者为对照。流式细胞术检测外周血中CD3+CD4+TIL-17+辅助性T细胞(Th17细胞)、CD4+TCD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg细胞)占CD4+T细胞的比例,ELISA法检测血清中细胞因子IL-17、TGF-β、IL-6的水平。结果:急性白血病患者外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的(1.39±0.24)%,高于对照组的(0.26±0.11)%(P<0.05);急性白血病患者外周血Treg细胞占CD4+T细胞的(11.58±2.17)%,高于对照组的(2.47±0.72)%(P<0.05);且Treg细胞与Th17细胞呈正相关(γ=0.37)。急性白血病患者血清中TGF-β、IL-6、IL-17的水平分别为(26.06±2.43)、(14.66±2.47)、(18.63±2.38)pg/ml,高于对照组的(13.41±1.92)、(1.44±0.29)、(10.34±1.71)pg/ml(均P<0.05)。结论:急性白血病患者外周血中Treg、Th17细胞比例升高,且两者呈正相关;急性白血病患者血清中TGF-β、IL-6、IL-17水平升高,可能影响Treg与Th17细胞的平衡。     

吉西他滨对卵巢癌移植瘤小鼠的免疫调节作用

目的:观察吉西他滨(gemcitabine,GEM)对卵巢癌移植瘤小鼠肿瘤免疫微环境的调节作用.方法:C57BL/6小鼠皮下注射卵巢癌ID8细胞构建卵巢癌移植瘤模型,实验组腹腔注射GEM,对照组注射生理盐水,观察肿瘤生长情况.流式细胞术检测小鼠脾脏及肿瘤组织的调节性T细胞(regulatoryT cells,Treg)及髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC),实时定量PCR检测小鼠肿瘤组织arginase-1(Arg-D和Foxp3 mRNA的表达,流式细胞仪检测小鼠脾脏CD8+T细胞的比例,ELLSE法检测小鼠血清IFN-γ及IL-2的表达.结果:GEM处理后的移植瘤小鼠肿瘤生长明显受到抑制[(366.8±44.88) vs (499.3±24.14)mm3,P＜0.01].移植瘤小鼠肿瘤组织及脾脏Treg比率明显降低[(12.71±2.31)％ vs (20.36±2.65)％、(10.09±1.69)％ vs (13.79±1.31)％,均P＜0.01].实验组的相关基因mRNA表达较对照组显著降低[Foxp3:(4.30±0.46)vs (6.35±0.58);Arg-1:(16.32±0.38)vs(13.26±0.37);均P＜0.01].实验组血清中的IFN-γ和IL-2含量明显高于对照组[IFN-γ:(71.90±2.28)vs (53.91±3.91) pg/ml;IL-2:(51.46±1.69)vs (40.90±1.50) pg/ml,均P＜0.01].结论:GEM下调卵巢癌移植瘤小鼠免疫抑制活性,并可上调小鼠抗肿瘤免疫原性,该结果可为GEM作为卵巢癌免疫治疗干预措施提供实验依据.     

利妥昔单抗治疗前后弥漫大B细胞淋巴瘤患者Th17细胞及相关细胞因子的变化

 【摘要】　  目的　了解弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者接受利妥昔单抗治疗前后Th17细胞及相关细胞因子的变化及其意义。方法　初治患者31例,化疗后患者60例（RCHOP组29例、CHOP组31例）,以20名体检健康者为健康对照组。采用流式细胞术检测各组外周血中Th17细胞比例,酶联免疫吸附法检测外周血相关细胞因子白细胞介素17（IL-17）、IL-21、IL-23、转化生长因子β （TGF-β）的表达水平。结果　初治组和CHOP-完全缓解（CR）组Th17细胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分别为（0.67±0.21）%、（5.929±1.342）pg／ml、（130.632±17.945）pg／ml、（51.681±9.808）pg／ml和（1.07±0.37）%、（6.526±0.538）pg／ml、（132.119±7.700）pg／ml、（50.245±7.668）pg／ml,均低于对照组的（2.53±0.63）%、（8.435±2.031）pg／ml、（149.265±12.316）pg／ml、（55.303±7.778）pg／ml（P＜0.05）;初治组TGF-β水平为（370.615±98.444）pg／ml,显著高于对照组的（311.895±73.365）pg／ml（P＜0.05）。RCHOP-CR组Th17细胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分别为（2.38±0.59）%、（7.724±0.780）pg／ml、（148.412±7.355）pg／ml、（55.668±7.532）pg／ml,均高于初治组和CHOP-CR组（P＜0.05）;RCHOP-CR组TGF-β水平为（283.904±59.223）pg／ml,低于CHOP-CR组的（341.481±95.597）pg／ml（P＜0.05）。结论　Th17细胞可能与DLBCL的发生发展呈负相关,IL-23水平降低和TGF-β水平升高可能抑制Th17细胞的分化;利妥昔单抗可提高DLBCL患者Th17细胞比例,且与化疗效果有关。     

初诊DLBCL患者外周血Th17细胞表达与国际预后指标的关系

目的:探讨初诊的弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者外周血Th17细胞的表达与国际预后指标(IPI)之间的关系.方法:初诊DLBCL组(45例)按照国际预后指标(IPI)积分分为4组,采用ELISA和流式细胞术检测各个DLBCL组与正常对照组(43例)的外周血中IL-17的浓度以及Th17阳性细胞比例,比较各组数值间的差异,并分析IPI的5个指标与IL-17的浓度以及Th17阳性细胞比例的相关性.结果:高危组的IL-17的浓度以及Th17阳性细胞比例较正常对照组及其他IPI组降低,有显著性差异;DLBCL四组的IL-17的浓度以及Th17阳性细胞比例均低于正常对照组;且可见随着IPI分值的增高,IL-17的浓度以及Th17阳性细胞比例呈降低的趋势;IPI指标中年龄、临床分期、全身状态与Th17细胞的表达有相关性.结论:初诊DLBCL患者外周血Th17细胞的表达与国际预后指标有关系;随着IPI积分的增加,DLBCL患者Th17细胞表达下降;临床上对于年龄60岁以上、临床分期Ⅲ期以上、长期卧床及需别人照顾的患者更要注意监测其外周血Th17细胞的表达情况.     

Th17/Treg平衡失调与食管鳞状细胞癌浸润转移的相关性

目的:检测食管鳞状细胞癌患者外周血中辅助性T细胞17(T helper 17,Th17)和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的表达,探讨食管鳞状细胞癌中Th17/Treg比例的变化与食管鳞状细胞癌转移的关系。方法:收集山东大学齐鲁医院2009年9月至2010年5月食管鳞状细胞癌患者37例,其中男22例、女15例,平均年龄(61±7.85)岁;23例健康志愿者为对照。流式细胞术检测外周血Th17的表达情况,分析Th17占CD3+T细胞的比例,同样流式细胞术检测外周血Treg的表达及其占CD4+T细胞的比例。分析Th17/Treg比例变化与食管鳞状细胞癌病理特征的相关性。结果:食管鳞状细胞癌患者外周血中Th17占CD3+T细胞的比例显著升高[(2.11±0.66)%vs(0.84±0.19)%,P<0.01],Treg占CD4+T细胞的比例也显著升高[(6.21±1.48)%vs(4.43±0.78)%,P<0.01];食管鳞状细胞癌患者转移组与未转移组相比,Th17比例明显升高[(2.42±0.55)%vs(1.61±0.51)%,P<0.01],而Treg比例无明显差异。食管鳞状细胞癌患者外周血中Th17/Treg比例显著高于正常对照组[(0.35±0.13)%vs(0.19±0.04)%,P<0.01];食管鳞状细胞癌患者淋巴结转移组与未转移组相比,Th17/Treg比例显著升高[(0.39±0.13)%vs(0.29±0.10)%,P<0.05]。结论:食管鳞状细胞癌患者外周血中Th17/Treg比例显著升高,可能参与食管鳞状细胞癌的浸润和转移。     

Th17细胞与肿瘤免疫的研究进展

辅助性T细胞17(Helper T cells 17,Th17)是以高分泌白介素(interleukin,IL)17为特征的CD4+T细胞,可表达IL-17A、IL-17F、IL-6和TNF-α等炎性细胞因子,在抗胞外菌感染和介导慢性炎症、自身免疫病等过程中发挥重要作用[1]。本文拟就Th17细胞及其相关细胞因子与肿瘤免疫相关进展进行综述。     

人骨髓来源间充质干细胞在肿瘤微环境中上调IL-17A水平激活PI3K/Akt通路促进弥漫大B 细胞淋巴瘤生长和化疗耐药

[目的]探讨影响弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)生长和化疗耐药的机制,并分析其中的信号通路。[方法]分别采用CCK-8法检测DLBCL细胞株(SU-DHL-2和SU-DHL-4细胞)的增殖,用qRTPCR和ELISA法检测白细胞介素(IL)-17A的表达,用流式细胞术分析Th17和Treg细胞的表达,用PI/Annexin V法检测细胞凋亡,用基因芯片分析、生物信息分析和蛋白质印迹法验证IL-17A介导的DLBCL生长的信号通路。[结果 ]人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)联合外周血单个核细胞(PBMCs)在体外促进DLBCL细胞株的增殖。hBMSCs升高PBMCs中Th17和Treg细胞比例,上调IL-17A和TGF-β水平。hBMSCs显著上调PBMCs中RORγt、Foxp3、IL-17A和TGF-βmRNA的相对表达,增加共培养上清液中IL-17A和TGF-β蛋白的水平。IL-17A通过抑制自发或药物诱导的凋亡促进DLBCL细胞增殖和化疗耐药。外源性IL-17A促进了SU-DHL-4细胞的增殖,降低了自发或利妥昔单抗诱导的SU-DHL-4细胞凋亡,而aIL-17A则消除了这些作用。IL-17A上调细胞周期蛋白D2激活PI3K/Akt信号通路。[结论] hBMSCs在肿瘤微环境中上调IL-17A水平,激活PI3K/Akt通路,促进DLBCL生长和化疗耐药。     

艾迪注射液辅助化疗对中晚期非小细胞肺癌患者CD+4CDhi25CDlow127调节性T细胞表达的影响

目的 探讨艾迪注射液辅助化疗对中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD+4CDhi25CDlow127调节性T(Treg)细胞表达的影响.方法 60例NSCLC患者随机分为化疗加艾迪注射液组(观察组)和单纯化疗组(对照组),采用流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别于化疗前后检测外周血中CD+4CDhi25CDlow127Treg细胞和血清TGF-β 1、IL-10水平,同期选取20名健康体检者为健康对照组.结果 NSCLC患者外周血中CD+4CDhi25CDlow127Treg细胞占CD+4淋巴细胞的比例为(5.77±1.50)%,与健康对照组(3.84±0.96)%相比差异有统计学意义(P=0.000);血清中IL-10和TGF-β 1表达水平[(24.09±6.74)、(197.76±43.76)ng/ml]明显高于健康对照[(19.39±5.73)、(141.13±32.17)ng/ml](P=0.006,P=0.002).对照组化疗后CD+4CDhi25CDlow127Treg细胞水平显著降低(P=0.048),细胞因子IL-10、TGF-β1的表达水平[(22.25±6.79)、(184.85±49.11)ng/ml]与化疗前[(24.37±8.10)、(197.16±44.57)ng/ml]相比差异无统计学意义(P=0.276,P=0.314).观察组化疗后CD+4CDhi25CDlow127Treg细胞和细胞因子IL-10、TGF-β1表达水平[(4.36±1.19)%,(20.16±4.73)、(165.42±39.57)ng/ml]与化疗前[(5.78±1.50)ng/ml,(23.81±5.15)、(198.35±43.68)ng/ml]相比降低,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.006,P=0.003).结论 中晚期NSCLC患者外周血中Treg细胞表达水平增高,艾迪注射液配合化疗可以降低NSCLC患者的Treg细胞水平,改善机体免疫状态.     

食管鳞癌患者外周血中Th17细胞的检测及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中RORγt和IL-17的表达水平,探讨Th17、RORγt及IL-17在食管鳞癌中的临床意义。方法:收集山东大学齐鲁医院2009年8月至2010年6月40例食管鳞癌患者PBMC标本,其中男24例、女16例,年龄34～78(61±8.76)岁。采集40例健康志愿者PBMC为对照。流式细胞术检测Th17细胞在外周血淋巴细胞中的比例;PT-PCR检测PBMC中RORγt和IL-17mRNA的表达水平。结果:食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例较健康对照者明显升高[(2.40±0.55)%vs(0.84±0.41)%,P<0.01];PBMC中RORγt、IL-17mRNA表达水平均明显高于健康对照组[(0.669±0.184)vs(0.451±0.151),(0.625±0.179)vs(0.438±0.150),P<0.01],且两者呈明显正相关(r=0.551,P<0.01)。食管鳞癌患者转移组与未转移组相比,Th17细胞比例、RORγt和IL-17mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:食管鳞癌患者外周血Th17细胞占淋巴细胞的比例及PBMC中RORγt和IL-17mRNA表达水平明显升高,Th17细胞可能通过RORγt和IL-17参与食管癌的发生。