病毒载体介导的帕金森病基因治疗研究进展

帕金森病 (PD)是一种常见的神经系统变性疾病 ,其病理改变主要为中脑黑质致密区多巴胺能神经元变性和消失 ,以及体内多巴胺水平的下降。 80年代末 ,随着基因治疗概念的不断深入 ,基因治疗技术日趋成熟 ,人们开始了对PD基因治疗的尝试。近年来PD动物模型基因治疗已经取得了不少进展。在基因治疗的体外及体内两种途径中 ,研究最多的是病毒载体相关的基因导入系统。目前研究较多病毒载体有 :腺病毒载体、腺相关病毒载体、单纯疱疹病毒载体、慢病毒载体、其他逆转录病毒载体。　　一、病毒载体的制备　　用于基因治疗的病毒载体应具备以下条…     

腺相关病毒为载体的基因治疗在肝病应用中的进展

基因治疗是目前医学研究的热点课题。将目的基因转入细胞的方法有很多，包括脂质体包裹转染、电打孔、微注射等，最近以重组病毒为载体的基因治疗因其独特的优势受到关注。比较常用的三大病毒载体是逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒（adeno—associated virus，AAV）。各种病毒载体都有各自的优点和不足，在细胞和动物实验研究中均有大量的应用。但是在临床应用中，逆转录病毒为载体的基因治疗由于在法国的临床试验出现2例白血病病历，     

嗜肝细胞腺相关病毒载体的构建

HBV具有天然嗜肝性,其中由HBVpreS1基因编码的前S1(PreS1)抗原位于病毒外壳表面,是HBV嗜肝性的主要分子机制[1].重组腺相关病毒(rAAV)是目前常用的基因治疗载体.我们以腺相关病毒载体系统为基础,用PreS1的编码基因HBVpreS1替代腺相关病毒载体系统的Cap基因,构建出以PreS1为衣壳的重组腺相关病毒载体(rA AVHBVpreS1),旨在探索构建肝病基因治疗特异性载体,为肝病靶向基因治疗提供实验研究基础.     

嗜肝细胞腺相关病毒载体的构建

HBV具有天然嗜肝性,其中由HBVpreS1基因编码的前S1(PreS1)抗原位于病毒外壳表面,是HBV嗜肝性的主要分子机制[1].重组腺相关病毒(rAAV)是目前常用的基因治疗载体.我们以腺相关病毒载体系统为基础,用PreS1的编码基因HBVpreS1替代腺相关病毒载体系统的Cap基因,构建出以PreS1为衣壳的重组腺相关病毒载体(rA AVHBVpreS1),旨在探索构建肝病基因治疗特异性载体,为肝病靶向基因治疗提供实验研究基础.     

痘苗病毒载体在肿瘤基因治疗中的应用

恶性肿瘤的基因治疗已成为目前研究的一个热点。基因转移是基因治疗的关键和基础，寻找高效安全的载体表达系统是基因治疗研究中的重点和难点。众所周知痘苗病毒（ｖａｃｃｉｎｉａｖｉｒｕｓ，ＶＶ）曾作为疫苗广泛应用于预防天花的全球性接种，控制了天花的流行。近年来，分子生物学理论与技术的迅猛发展，又使病毒学家、分子遗传学家及微生物学家对ＶＶ产生了浓厚的兴趣，ＶＶ再次成为生物学研究中一个中心课题。由于其特点，作为基因治疗的载体系统正越来越受到人们重视［１，２］。本文综述了该病毒的一般知识及在肿瘤基因治疗中应用的…     

重组痘苗病毒载体在消化道肿瘤基因治疗中的应用

痘苗病毒作为疫苗曾广泛应用于预防天花的全球性接种。近年来,该病毒又作为一种基因表达载体,在肿瘤基因治疗研究中起重要作用,且较其他病毒栽体系统具有多种优点。本文综述了痘苗病毒作为基因工程载体的构建及在消化道肿瘤基因治疗中应用的现状。     

重组腺相关病毒载体在脑缺血动物模型基因治疗中的应用

脑缺血的基因治疗是颇具前景的治疗手段,以病毒为载体的基因治疗的有效性和安全性关系到最终治疗的成败。重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体作为目前安全性最好的病毒载体系统,在动物中枢神经系统(centralnervous systerm,CNS)中已进行了有效转导。     

脑血管疾病的基因治疗

基因治疗脑血管疾病的主要目标是将cDNA引入一个血管或血管周围组织使之产生一种物质,这种物质自然调节着血管生长或改变其功能。目前能够把基因转递到血管的载体是病毒载体(腺病毒和反转录病毒retrovirus),带阳离子的DNA微脂粒复合体,病毒缀合物载体(含有病毒外衣的微脂粒)。基因治疗颅内外血管疾病主要是达到以下目的;(1)预防SAH后的血管痉挛;(2)刺激侧支血管的建立;(3)稳定动脉粥样硬化斑块;(4)抑制再狭窄。     

生物起搏中的病毒载体

随着分子生物学和基因工程学的进展,为了弥补电子起搏器的不足,生物起搏器应运而生。基因治疗作为构建生物起搏器的一个切实可行的方法,指通过载体将目的基因导入宿主并使其表达,以达到治疗的目的。而病毒载体是实现基因递送的前提条件,不同病毒载体在研究应用中均存在一定的优势和局限,现就生物起搏中常用的病毒载体(慢病毒、腺病毒和腺相关病毒)的结构特性以及在起搏中的应用选择做一综述。     

帕金森病的基因治疗研究进展

帕金森病是发生于中年以上的神经系统常见病，近年来基因治疗帕金森病显示了其良好的潜力和发展前途。基因治疗帕金森病采用两种策略：其一是将酶基因如TH、AADC、GTPCH基因直接或间接地导入脑内以增加DA的合成，其二为导入神经营养因子基因以保护DA能神经元。病毒载体或非病毒载体均被采用。本文对目前基因治疗帕金森病的具体方法作一综述。     

腺病毒载体在心血管基因转移体系中的应用

基因转移是实现基因治疗的关键所在,对心血管疾病进行基因治疗,需一高效的基因转移载体和实用的转移体系将目的基因导入心脏和血管,并安全忠实地表达。腺病毒是目前广泛应用于心血管基因转移的病毒载体,因它提供了一种简单、瞬间显改善可行的方法。     

抗肝癌单链双功能抗体基因逆转录病毒表达载体的构建及病毒包装细胞系的建立

人类基因治疗技术的迅速发展使越来越多针对先天性和获得性疾病的基因治疗方案进入临床试验,同时,逆转录病毒作为介导基因转染的载体也是目前基础和临床应用研究中最广泛使用的基因转移方法[1-3].迄今所掌握的研究资料表明,接受逆转录病毒介导基因治疗的患者中尚未发现因病毒感染导致的不良反应.因此,我们选择改造的缺陷型逆转录病毒载体pLXSN,将分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因(sFv-TNF-α)克隆至该载体,进行病毒包装并筛选具有高滴度感染性重组病毒产生细胞系的研究.     

肺癌基因治疗的动态

肿瘤是目前危及人类健康的最主要疾病之一,而肺癌的病死率又居恶性肿瘤的首位。尽管放射治疗(放疗)、化学治疗(化疗)及手术治疗等传统治疗癌症的方法已有不断改进和发展,肺癌患者的总体生存率并无明显改善,5年生存率不足15 % [1] 。近年来,肺癌的基因治疗取得了长足的进步,有的研究已进入临床实验阶段。现就其近年的一些进展情况及热点问题简单综述如下。一、基因转移载体成功地将目的基因转入靶器官并获得有效的表达是基因治疗的基础。目前用于基因转移的载体种类较多,用于肺癌基因治疗的主要载体可分为病毒载体和非病毒载体两类(表1) ,各…     

糖尿病的胰岛素基因治疗

糖尿病有着复杂的遗传背景,基因治疗可能成为其最终治疗手段。糖尿病基因治疗以胰岛素基因治疗为主,通过胰岛素基因导人,获得内源胰岛素替代。胰岛素基因可通过载体直接导入,也可通过体外构建的基因工程细胞输入体内;在胰岛素基因治疗中,病毒载体较为常用,但人工染色体等新型载体亦已出现;而寻找理想的胰岛素基因表达调控方案,是目前胰岛素基因治疗的主要研究方向。     

慢病毒载体在RNA干扰中的应用

慢病毒载体是以人类免疫缺陷1型病毒为基础发展起来的基因治疗载体.区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力.该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久件表达.在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的基因治疗效果.RNA干扰技术是近年来发展起来的新技术,通过产生针对特定基因的小分子干扰RNA,能高效特异地抑制特定基因的表达,在探查基因功能和治疗人类疾病方面有广阔的应用前景.     

心律失常基因治疗研究的进展

基因治疗通过病毒或非病毒载体将目的基因用直接注射法或导管技术等导入靶向区域,高选择性地发挥作用,从而减少全身用药的副作用,提高局部治疗的有效性。本文从机制背景、应用策略和临床前期研究成果方面就基因治疗在房颤、室速等心律失常中的应用进行综述。     

HSV-TK逆转录病毒包装细胞系建立及病毒滴度测定

目的 建立HSV-TK逆转录病毒包装细胞系并获得高产病毒的细胞株.方法 将TK基因与逆转录表达载体PLEGFP-N1连接后转染到包装细胞PA317中,经G418及荧光蛋白双重筛选得到高产病毒的细胞株.结果 经酶切鉴定成功构建PIEGFP-N1-TK重组载体,含HSV-TK基因重组逆转录病毒包装细胞PA317成功建立,经病毒滴度测定获得高产病毒的PA317/TK细胞株.结论 制备的重组病毒具有感染靶细胞的活性,为进一步应用HSV-TK基因进行肺癌的自杀基因治疗研究奠定基础.     

肝癌基因治疗的进展

肝癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,目前缺乏有效的治疗手段,寻找肝癌新的治疗策略显得尤为迫切.基因治疗途径(依赖遗传物质转染细胞如溶瘤病毒、抑癌基因、自杀基因、编码抗血管生成因子基因、小干扰RNA(siRNA)和免疫调节分子基因)为肝癌治疗提供了富有希望的治疗途径,并且已经在肝癌和转移性肝癌的动物模型中进行了大量的实验评估,治疗的载体和基因的多样性,单独或联合应用基因治疗的途径可能在控制肝癌生长方面产生有利的效果.     

消化疾病的基因治疗

基因治疗旨在从分子水平纠正疾病,将靶基因传递进宿主细胞以提供新的基因功能,或阻止有害基因表达的合成。靶基因可以是ＤＮＡ或ｍＲＮＡ水平。基因治疗可通过体外或体内途径达到。载体一、病毒载体１．逆转录病毒载体：逆转录病毒载体已被广泛运用,操作简便,病毒产量高,转染各型分裂相细胞的效率高。已成功地应用这一系统于体外,将ＩＬ－７和新霉素磷酸转移酶转移入大鼠肝细胞,以及在体内,将ＩＸ因子传递入血友病Ｂ犬模型的肝细胞。转基因的表达分别维持在期望水平２１天和５个月。除肝细胞外,肠道上皮细胞也是基因转移的可行目标…     

急性肺损伤基因疗法展望

肺是最适于基因治疗的器官.本文介绍了几种以病毒或微脂粒为载体的基因转染技术在活体肺的应用研究.结果表明,基因疗法对活体肺细胞是可行的,基因疗法的发展未来可应用于治疗急慢性肺疾病.