铜山县周棚村人群隐孢子虫感染调查

230份农村儿童成人粪便，采用改良抗酸染色法进行粪便涂片染色，发现隐孢子虫卵囊阳性者12例，感染率为5．22％，其中11例为儿童，平均年龄19．6个月。最大者则3岁，成人1例为女性，其子及侄女均为感染隐孢子虫。     

数字图像处理技术对人源隐孢子虫卵囊形态学参数的测定

目的建立并分析人源隐孢子虫卵囊的形态学参数,明确其形态学变化特点。方法收集一名严重腹泻儿童的粪便,涂片经改良抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊。应用奥林巴斯(Olympus)BX50万能生物显微镜(日本)摄像系统采集1439个隐孢子虫卵囊的图像,利用计算机数字图像分析系统测定其长径(L)、短径(W)、周长、面积,用SPSS数据处理软件(12.0版本)分析,计算其卵形指数(L/W)等一系列形态学参数。结果计算机数字图像分析技术测定人源1439个隐孢子虫卵囊长径均值为4.78μm,95%可信区间为4.73～4.82;卵囊短径均值为4.35μm,95%可信区间为4.33～4.37;卵囊周长、面积和卵形指数均值分别为15.63μm、15.22μm2和1.10。计算机数字图像分析技术测定的人、狗和小鼠源隐孢子虫卵囊的形态学参数,经方差分析F值在10.7374～68.8776,P<0.01。结论利用计算机数字图像分析系统和SPSS数据处理软件,获得人源隐孢子虫卵囊长径、短径、周长、面积、卵形指数的累加和、均值、中值、最大值、最小值、标准差及95%可信区间等一系列形态学参数。获得的资料是精确的,为鉴别人源隐孢子虫提供了科学信息。     

人体隐孢子虫感染动物实验观察

用人体隐孢子虫卵囊人工感染几种动物,观察了其发病情况,排卵囊情况,并进行肠壁病理学观察。因排卵囊持续时间短,初步证明某些人体感染并不主要来源于这三种动物。该动物亦不适于做实验的动物模型。     

隐孢子虫感染动物排卵囊规律的研究

用牛粪中隐孢子虫卵囊感染小鼠和豚鼠，人粪中虫体卵囊感染犬，３种动物隐孢子虫感染模型均获成功。感染后７－１０ｄ粪便中卵囊增至一高峰值，此后数量逐渐减少；小鼠４周后、犬６周后，豚鼠７周粪便中卵囊全部转阴。临床病例采用检验粪便中卵囊转阴指标来评价某药物疗效，尚须进一步探讨。     

保存10余年的隐孢子虫卵囊粪渣涂片染色技术探讨

隐孢子虫是机会致病原虫也是一种重要的腹泻病原 ,近些年逐渐引起人门的注意。隐孢子虫病的诊断目前主要是从粪便中查到卵囊来确诊。理想的制片对学生认识及掌握隐孢子虫的形态有很大的帮助 ,为解决目前教学中标本来源的困难 ,作者对 10年前科研所保存下来的粪渣进行了涂片及染色的研究。1　材料与方法1.1　阳性粪便的来源　 1990年我室在山东邹县农村进行隐孢子虫感染调查时取得的阳性粪便 ,于室温下一直存放在青霉素小瓶内用10 %福尔马林固定。1.2　染色液的配制 (改良抗酸染色法 )第 1液　石炭酸复红染色液 :95 %酒精 2 0ｍｌ,石炭酸 8ｍ…     

安氏隐孢子虫卵囊分离纯化方法研究

目的 建立获取纯净的安氏隐孢子虫卵囊外培养模型。方法研究改进分离纯化安氏隐孢子虫卵囊的方法,采用蒸馏水稀释Sheather’s蔗糖溶液配制不同密度的蔗糖溶液,比较不同稀释比的Sheather’s蔗糖溶液漂浮卵囊的效果,并首次比较了蒸馏水和PBS稀释的Sheather’s蔗糖溶液分离纯化卵囊的活性,将两种方法分离纯化的卵囊37℃水浴1h进行脱囊率比较。结果2：1蔗糖溶液（2体积Sheather’s蔗糖溶液与1体积的蒸馏水）分离奶牛粪样中卵囊效果最好。漂浮三次即可获得大量卵囊,回收率为83．70％,三次漂浮的卵囊总数较Sheather’s蔗糖溶液高57．53％。蔗糖溶液多梯度密度纯化法纯化后的卵囊杂质较少,回收率为47．52％。蒸馏水稀释的蔗糖溶液分离纯化卵囊脱囊率为87．87％,PBS稀释的蔗糖溶液分离纯化卵囊的脱囊率为84．71％,差异无统计学意义P〉0.05）。结论2：1蔗糖溶液适用于分离安氏隐孢子虫卵囊,且用蒸馏水代替PBS稀释Sheather’s蔗糖溶分离纯化隐孢子虫卵囊其活性不受影响。可用于体外培养研究。     

广西南部某市周边农场奶牛隐孢子虫感染调查

目的调查广西南部某市奶牛隐孢子虫感染情况，为防治该病提供依据。方法粪样经水醚沉淀法和蔗糖离心浮聚法处理，涂片后用改良Ziehl—Neelsen抗酸染色法染色镜检，计算感染率和感染度。结果在7个奶牛场中检查了429头奶牛，隐孢子虫平均感染率为8．16％，14月龄犊牛和1岁龄以上奶牛感染率分别为7．69％（5／65）和8．24％（30／364）。结论广西奶牛隐孢子虫感染比较常见，居民可因摄入受病牛粪便污染的食品或水而受感染。控制该病的传染源和传播途径十分重要。     

隐孢子虫检测方法的改良及优化

人体隐孢子虫病是HIV患者的一种常见机会性感染疾病，与HIV患者死亡率密切相关。然而对于本病的检测却比较复杂，同时还存在着费时、检出率低等缺点。为了促进隐孢子虫检测技术的发展，本文对各种检测技术的改良方法作一综述。涉及面广，不仅包含了对经典方法的改良，如改良抗酸染色法，金胺-酚改良抗酸复染法等，还包括了对当前应用日趋广泛的PCR、ELISA等技术的改良，如Nested-PCR检测方法，非放射性标记探针检测法，双抗夹心-ELISA改良法，间接ELISA检测改良法等。但重点偏向于PCR和ELISA技术的改良及优化，因为这两种方法与其他方法相比较具有特异性强，灵敏度高，检出率高等优点，更重要的是它们具有向临床推广应用的巨大价值和内在潜力。     

隐孢子虫病的病原学诊断及病例对照研究

目的为了验证接触动物、营养不良与隐孢子虫病感染有显著的统计学联系,探讨隐孢子虫病的病原学诊断方法。方法根据随机化的原则,在湖南省湘南地区用改良抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊,以卵囊阳性为病例,卵囊阴性者为对照。将同一粪便标本一式二份,分别用碘染色法和改良抗酸染色法进行对比测试。结果接触动物者感染隐孢子虫的aoR=374,aOR=3.14。营养不良者感染隐孢子虫的aOR=4.66,aoR=4.35。碘染色法检出卵囊41例,阳性率1．9％,改良抗染色法检出卵囊41例,阳性率1.9％,符合率为100％。结论动物是人感染隐孢子虫的最重要传染源,接触动物是隐孢子虫感染的最重要的危险因素。营养不良所致的继发性细胞免疫功能缺陷及胃肠道形态学的功能变化,是造成易感染隐孢子虫病的危险因素。碘染色法简便,可靠,是检测粪便中CSO较理想的方法。     

水体中隐孢子虫卵囊的浓集和纯化

隐孢子虫为肠道寄生性原虫,可引起人兽共患病,隐孢子虫病暴发的主要途径是介水传播.水体中隐孢子虫的检测方法大致分为病原学检测、免疫学检测和分子生物学检测.由于水环境中隐孢子虫的含量相对较低,并且经处理后含量更低,同时为了排除环境水样中的干扰,因此在检测之前一般都需要把卵囊从浓集后的浓缩物中分离与纯化出来.浓集方法主要包括微滤膜及滤筒过滤法、超滤法、连续流式离心法、膜溶解法及絮凝沉淀法;分离纯化技术主要有浮聚法、密度梯度离心法及免疫磁珠分离法.本文即对水体中隐孢子虫卵囊的浓集以及分离纯化技术进行综述.     

改良痰结核分枝杆菌L型涂片检测方法的建立和应用

目的建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法。方法对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较。结果本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(χ2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P<0.0010);本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法。同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5minvs24h)。结论成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用。     

萋-尼抗酸染色冷染法与热染法结果比较分析

目的比较萋-尼抗酸染色(简称Z-N染色)冷染法与热染法查找抗酸杆菌的差异,探讨萋-尼抗酸染色冷染法的应用价值。方法选取2017年1～12月衢州市人民医院确诊为肺结核患者的痰标本355份,每份痰标本涂6张涂片。室温下干燥后于5 s内穿过酒精灯火焰上方4次固定。其中冷染法3张涂片滴加含有1%Triton X-100石碳酸复红染液,置室温5 min、15 min、30 min后分别用流水缓慢冲去染色液;再滴加5%盐酸酒精脱色1～3 min,用水缓慢冲洗;最后用碱性美兰复染1 min,用水缓慢冲洗;干燥后,用油镜观察。热染法3张涂片滴加不含1%Triton X-100石碳酸复红染液,然后加热到微微冒热气,分别放置5 min、15 min、30 min后用流水缓慢冲去染色液;其余步骤操作同冷染法。比较两种方法抗酸杆菌的阳性检出率、褪色速度等方面的差异。结果 355份痰标本冷染法5 min、15 min、30 min阳性率分别为29.57%、32.68%、32.68%,平均阳性率为31.64%;355份痰标本热染法5 min、15 min、30 min阳性率分别为32.96%、32.68%和32.96%,平均阳性率为32.87%;经统计,差异无统计学意义(P0.05)。两种方法的阳性片褪色速度结果比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论在萋-尼抗酸染色初染液石碳酸复红中加入表面活性剂Triton X-100,能改变分枝杆菌细胞壁的通透性,促进染料进入分枝杆菌的菌体。抗酸杆菌阳性检出率和阳性片的褪色速度与传统的热染法比较,差异均无统计学意义。与传统热染法比较,操作简单并避免了有害气体污染环境,是一种值得推广的方法。     

改进的抗酸染色技术在提高麻风杆菌检出率中的应用

目的将传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行改进,提高麻风杆菌的阳性检出率。方法对商洛疗养院68例麻风病人和121例疑似病例用传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法和改进的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法进行实验室检测,病理切片做进一步比较。结果改进的抗酸染色法麻风杆菌阳性检出率明显高于传统的萋-尼(Ziehl-Neelsen)染色法,前者阳性检出率为70.4%,后者为44.4%,差异有统计学意义(χ2=7.07,P0.05)。改进的抗酸染色法麻风杆菌切片着色率高、染色效果佳。结论改进的抗酸染色法优于传统的抗酸染色法,为麻风病的实验室诊断和筛查提供了靶方向。     

不同染色方法对精子形态学评估的影响

目的:探讨Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法对精子形态学评估的异同性及相关性。方法:对80例标本分别涂片两张,利用Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法分别进行染色,并记录同一标本不同染色方法其正常精子百分率、头部缺陷精子百分率、颈部和中段缺陷精子百分率、尾部缺陷精子百分率、畸形精子形态指数(TZI)、精子畸形指数(SDI)等。结果:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中,正常形态率、各种类型的缺陷率(头部、颈部与中段、尾部)、畸形精子指数、精子畸形指数等均无统计学意义(P>0.05)。结论:Diff-Quik染色法及改良巴氏染色法在精子形态评估中具有较为一致的结果;改良巴氏染色法虽经典,但过于繁琐;在病人多且急需出具精子形态学检验报告的情况下,可以考虑使用Diff-Quik染色法作为精子形态评估染色方法。     

痰标本抗酸杆菌涂片检查染色方法研究

目的对痰标本抗酸杆菌涂片检查染色方法进行研究,获得最佳染色方法并推广应用。方法对不同浓度孔雀绿复染液在不同时间内对痰涂片抗酸染色效果进行实验观察,并对冷染法和热染法的染色效果进行对比。结果热染法的检出率高于冷染法;孔雀绿复染法痰涂片背景对比明显,易于抗酸杆菌的识别,痰涂片易于保存。结论痰标本抗酸杆菌涂片检查染色采用加热的初染色、0.4%孔雀绿复染30 s是最佳方法。     

改良卡介苗痰涂片抗酸染色实验的教学应用研究

目的比较改良卡介苗（BCG）替代结核分枝杆菌（TB）痰涂片抗酸染色实验的教学应用价值。方法测定改良BCG痰涂片、BCG痰涂片和TB痰涂片的稳定性及染色镜检合格率。结果改良BCG痰涂片稳定性均高于BCG痰涂片和TB痰涂片（P < 0.05~P < 0.01）,且抽检合格率为100%,实验教学合格率>98.8%。结论改良BCG痰涂片教学简便可靠,同时易保存,可作为微生物实验教学替代实验的重要手段。     

应用改良的特殊染色方法观察缺血预适应对心肌再灌注早期病理改变的影响

目的 :应用两种改良的特殊染色法研究体外循环 (CPB)中心肌缺血再灌注早期病理形态特征的改变。方法 :建立猫CPB模型并随机分成 3组 :对照组 (n=5 )仅作单纯并行 CPB转流 ,不阻断升主动脉 (ACC) ;缺血再灌注组 (IR组 ,n=5 )于CPB开始 4 5 min后 ACC6 0 min,开放主动脉使心脏恢复再灌注 ;IPC组 (n=5 )于 ACC前进行 IPC(ACC5 min后开放 1 0min,并重复 3次 ) ,余同 IR组。分别应用改良的碱性复红 -苦味酸特殊染色法 (HBFP)和改良的 Gonori变色酸亮绿特殊染色法(GCA)观察各组再灌注早期心肌变性变化 ,并结合透射电镜直接观察各组再灌注早期心肌超微结构的损伤情况。 结果 :H- E染色难以识别 IR组和 IPC组之间损伤程度差异。再灌注早期 ,对照组 HBFP特殊染色及 GCA特殊染色均呈阴性着色 ,IR组呈弥漫性阳性着色 ,而 IPC组呈局灶性或小片状阳性着色 ,两组间差异显著 (P<0 .0 5 ) ;而且心肌组织染色深浅与心肌超微结构损伤的程度相一致。结论 :应用改良的 HBFP和 GCA特殊染色法均能显示心肌再灌注早期病理改变 ,敏感性较高 ,特异性较好 ;结果提示 IPC有助于心肌再灌注早期缺血、缺氧的改善 ,减少心肌变性     

甩片改良抗酸法与 FQ-PCR 技术在脑脊液抗酸菌检查中的应用分析

目的：评价脑脊液改良抗酸染色法与实时荧光定量聚合酶链反应（fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR）法诊断结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,TBM）的意义。方法 TBM 患者81例,采集脑脊液检测标本,分别采用离心甩片改良抗酸染色法、实时 FQ-PCR 法检测抗酸杆菌。结果81例改良抗酸染色法阳性率66．7％（54／81）高于 FQ-PCR 方法阳性率50．6％（41／81）,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论在诊断 TBM 方面,改良抗酸染色方法显著优于 FQ-PCR 方法。     

贲门肠上皮化生三种组织化学染色方法的比较研究

目的 :探讨爱显蓝 雪夫 (AB PAS) ,爱显蓝 [AB(pH 2 .5 ) ] ,高铁二胺 (HID)三种组织化学染色方法对贲门肠上皮化生组织化学染色的特点及存在的问题。方法 :分别用AB PAS ,AB(pH 2 .5 ) ,HID法对 2 5例病理诊断为肠化的贲门组织的 5 μm连续切片 3张进行染色。 结果 :染色结果比较 ,AB PAS法和MID法具有较高的一致性 ,明显优于AB(pH 2 .5 )法 (P <0 .0 5 ) ,且 3种染色法对同一病变的染色结果的组织学分型无显著性差异 (P >0 0 5 )。染色性质比较 ,AB PAS法对酸性和中性黏液着色 ,染色强度、对比度均最为理想。HID可区分硫酸化和羟基化酸性黏液 ,染色强度 ,对比度较好。AB(pH 2 .5 )法仅对酸性物质着色 ;染色强度和对比度明显不如前 2种方法。结论 :肠上皮化生组织化学染色首选AB PAS ,初步筛选时选用AB(pH 2 .5 )法 ,有区分黏液成分和指导IM组织化学分型要求时首选MID法