不同时机协同给药诱导裸鼠脑胶质瘤细胞凋亡的对照研究

目的对比观察不同时机给予持续低剂量抗肿瘤细胞增殖和抗血管增生药物协同治疗裸鼠U251MG脑胶质瘤抑制脑胶质瘤生长的情况。方法分为两实验组,Ⅰ组,将2.5μl细胞悬液接种至6周龄雄性裸鼠脑白质内,接种次日预防性给药,是口服吲哚美辛(4 mg/kg)和腹腔注射榄香烯(70 mg/kg)协同给药;Ⅱ组,将等量的细胞悬液接种至4周龄雄性裸鼠脑白质内,接种后第20天治疗性协同给药,每组2只裸鼠,共4只裸鼠。给药20 d和30 d时,断椎处死裸鼠,脑标本石蜡切片3μm厚,分别行HE、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、CD34、TUNEL和PDCD-5等染色。结果预防性给药20 d裸鼠脑内未见明显增殖瘤细胞,亦无大量凋亡的瘤细胞,30 d时大量瘤细胞发生凋亡,GFAP呈阴性表达;治疗性给药裸鼠脑内仍可见胶质瘤细胞,20 d部分细胞发生凋亡,30 d大量细胞发生凋亡。结论预防性持续低剂量抗肿瘤增殖和抗血管增生药物协同治疗裸鼠脑胶质瘤,可有效遏制肿瘤的生长;治疗性给药虽能起到遏制肿瘤生长的目的,但治疗效果欠佳。     

蛇毒解聚素在裸鼠胶质瘤间质化疗中的实验研究

目的:通过建立裸小鼠皮下人脑胶质瘤模型,研究蛇毒解聚素(contortrostatin)抑制U87胶质瘤裸鼠移植瘤生长的作用机制.方法:BALB/C裸鼠30只,接种U87胶质瘤细胞成功后随机分成两组,接种后肿瘤长至直径约1 cm大小时开始间质内注射给药.蛇毒解聚素按40μg/d给药,持续3周.观察两组肿瘤抑瘤率,用免疫组织化学检测移植瘤组织中的微血管计数(MVD),以及VEGF.结果:与溶媒对照组相比,蛇毒解聚素组均能抑制肿瘤生长(P＜0.01),其体积抑瘤率为50%;蛇毒解聚素能明显降低肿瘤MVD并下调移植瘤组织中VEGF的蛋白表达.结论:蛇毒解聚素通过抑制肿瘤血管形成抑制U87裸鼠移植瘤生长.     

survivin基因RNA干涉对宫颈癌裸鼠移植瘤生长及凋亡和顺铂化疗敏感性的影响

目的观察survivin基因RNAi对宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡和化疗敏感性的影响。方法随机选择雌性BALB/C-nu/nu裸小鼠24只,细胞接种法建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,每天观察裸鼠一般状况及肿瘤生长情况,通过绘制肿瘤生长曲线并计算肿瘤生长抑制率,观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响;通过免疫组化SP法检测各组移植瘤组织中survivin蛋白表达情况,TUNEL染色观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤凋亡的影响;当肿瘤体积达0.2cm3时给予顺铂化疗以观察survivin基因RNAi对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤化疗敏感性的影响。结果成功建立4组人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积在每个检测点均明显小于接种HeLa组;观察结束时,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.369±0.043）g和（1.150±0.136）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤生长抑制率为67.9%。免疫组化结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠survivin蛋白表达显著下降;TUNEL染色结果显示：接种HeLa-s2组裸鼠细胞凋亡明显增多,凋亡指数（AI）值达（22.73±1.37）%。顺铂化疗后不同检测点接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤体积明显小于接种HeLa组,肿瘤生长明显受抑;观察结束后,接种HeLa-s2组裸鼠瘤重明显小于接种HeLa组,分别为：（0.323±0.058）g和（1.347±0.173）g（P〈0.05）;接种HeLa-s2组裸鼠肿瘤细胞凋亡明显增多,与接种HeLa组AI比较,接种HeLa-S2组AI明显升高,分别为：（37.38±1.01）%和（5.19±0.61）%（P〈0.05）。结论 survivin基因RNAi可通过下调移植瘤组织survivin蛋白表达抑制移植瘤生长并促进其凋亡,并通过增加顺铂化疗诱导的细胞凋亡,增强顺铂化疗对移植瘤的生长抑制,进而提高移植瘤对顺铂化疗的敏感性。     

鼠胶质瘤模型在紫杉醇-聚乳酸纳米缓释纤维片抗胶质瘤中的应用

目的:紫杉醇由于水溶性低及全身毒性的问题而限制了其抗癌的临床应用,为克服这些缺陷,应用紫杉醇-聚乳酸纳米缓释膜片对鼠脑胶质瘤进行了局部缓释化疗,观察其对人脑胶质瘤细胞系C6抑瘤作用。方法:实验于2005-05/2006-03在中科院长春应用化学研究所高分子与物理国家重点实验室和吉林大学基础医学院实验室完成。Wistar雌性大鼠40只,在立体定向条件下选取大鼠脑右侧尾状核区为靶点,接种2×105个处于对数生长期的C6细胞,1周后经MRI检查后证实32只大鼠种植成功,将其随机分成2组各16只:①实验组:于接种C6脑胶质瘤细胞后第7天将紫杉醇-聚乳酸纳米缓释膜片(由中科院长春应用化学研究所徐秀玲博士惠赠)植入瘤细胞接种部位。②对照组:手术,但不植入膜片。观察两组一般情况及死亡时间;采用复查MRI检测及苏木精-伊红染色组织病理和免疫组织化学染色观察肿瘤生长情况。结果:①接种1周后MRI检查,脑内形成实体瘤,成瘤率为80%,无远隔转移;苏木精-伊红组织病理证实是胶质瘤,GFAP免疫组化染色阳性。②实验组平均生存期长于对照组[(56.5±18.7),(17.6±1.6)d,P<0.05];实验组肿瘤平均直径小于对照组(P<0.05)。结论:紫杉醇-聚乳酸纳米缓释膜片进行局部化疗可有效抑制脑胶质瘤细胞的生长。     

大鼠C6胶质瘤模型构建及生长特性的研究

目的 建立Wistar大鼠C6胶质瘤模型,研究C6脑胶质瘤的发生,发展过程,细胞侵袭情况,肿瘤细胞及血管特性,肿瘤自发消退现象,模型最佳应用时间段及应用范围.方法 Wistar大鼠各50只,其中9只用于对照.将C6胶质瘤细胞悬液和DMEM培养基立体定向接种于大鼠的右侧尾状核,分别于接种后3,7,14.21,28,35.50 d进行增强MRI扫描及病理切片HE染色,MMP-2,CD31免疫组化染色.同时观察荷瘤鼠的生物学行为.结果 肿瘤模型于接种后7 d可在MRI上见到肿瘤生长,病理切片可见肿瘤细胞沿神经纤维向周边侵袭,成出芽状生长,14～28 d为快速增长期,免疫组化染色显示基质金属蛋白酶MMP-2及新生血管CD31成强阳性表达,肿瘤细胞聚集,血脑屏障严重破坏,并可沿胼胝体向对侧生长.大部分荷瘤鼠死于30 d内,但有2只28d后出现肿瘤自发消退现象,病理切片可见大量炎细胞浸润,肿瘤内部出现软化灶.结论 大鼠C6胶质瘸模型的生长过程,病理性质与人脑间变,胶质母细胞瘤具有相似性,生长稳定.尽管部分荷瘤鼠出现肿瘤自发消退现象,但此模型仍适合大部分抗胶质瘤药物或基因治疗等的临床前期研究.试验研究最佳时间窗为14～28 d.     

人参皂甙Rh2对脑胶质细胞瘤侵袭性的影响

目的　探讨人参皂甙Rh2对C6胶质细胞瘤体内侵袭的影响。方法　将携带增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的pegfp N3质粒体外转染C6胶质瘤细胞 ,将C6阳性克隆以立体定向法植入SD大鼠脑实质内 ,建立大鼠胶质瘤移植模型。一周后经MRI检测接种成功的大鼠 ,随机分成两组 ,采用阴性对照及腹腔给药的方法 ,用病理检查、荧光显微镜及MRI观察Rh2对胶质瘤侵袭的影响。结果　稳定转染EGFP基因的C6瘤细胞于体内、外均可发出绿色荧光 ,在荧光显微镜下易于区分肿瘤与非肿瘤区。 16 μl/mlRh2可明显抑制肿瘤体内侵袭。 结论　Rh2降低了C6瘤细胞的体内侵袭性 ,抑制肿瘤生长。     

两种方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型的比较

目的采用两种不同方法建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法人胃癌细胞悬液直接注射法:将处于对数生长期的人胃癌细胞悬液接种于裸鼠皮下;胃癌裸鼠瘤转瘤法:将胃癌细胞悬液接种入裸鼠,待肿瘤生长直径在8 mm左右时,处死裸鼠并取其肿瘤组织边缘新鲜的组织,接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤。观察并比较两种方法所建立的模型肿瘤移植成功率及瘤体生长速度,实验结束后MSP法检测移植瘤组织中Reprimo基因的甲基化水平并采用免疫组织化学法检测移植瘤的Ki-67和CD31分子表达。结果细胞悬液直接注射组的瘤体成瘤速度较瘤转瘤组慢(P<0.05);瘤转瘤组的Reprimo基因甲基化水平及Ki-67和CD31的表达均高于细胞悬液直接注射组(P<0.05)。结论胃癌裸鼠皮下瘤转瘤法的瘤体生长状况优于胃癌细胞悬液直接注射法。     

胃肠道间质瘤细胞组织在不同周龄裸小鼠不同部位的成瘤情况

背景:建立合适的人胃肠道间质瘤裸鼠动物模型,可为以后在活体状态下研究胃肠道间质瘤细胞提供一个必不可少的工具。目的:观察胃肠道间质瘤细胞组织块接种于不同周龄裸小鼠腋下和臀部的成瘤情况。方法:将胃肠道间质瘤细胞组织块分别接种于4,8周龄BALB/c(nu/nu)裸鼠的腋下和臀部,观察在一定时间内,不同周龄裸鼠不同部位的瘤体成瘤率,生长速度,破溃率和转移率。结果与结论:4周龄裸鼠的成瘤率及生长速度明显高于8周龄裸鼠(P<0.05),且接种于腋下的成瘤率较臀部高;4周龄与8周龄裸鼠的肿瘤破溃率差异无显著性意义(P>0.05),但接种于臀部的肿瘤破溃率大于腋下(P<0.05);在肿瘤软化消失率方面,8周龄裸鼠明显高于4周龄裸鼠(P<0.05),同龄裸鼠中,臀部高于腋下。说明不论接种部位如何,周龄越小的裸鼠,移植瘤成瘤率越高、生长速度越快;但对于相同周龄的裸鼠,不论接种部位如何,肿瘤生长速度无明显差异。     

大鼠骨髓来源肝干细胞的成瘤性

背景:通过动员自身或移植外来的骨髓来源肝干细胞可促进肝再生,但是,在大规模临床应用前,其安全性需要进一步研究.目的:采用含体积分数5%淤胆血清的培养基诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝干细胞方向分化,将这些骨髓来源肝干细胞接种到裸鼠体内,观察其是否具有成瘤性.方法:用含体积分数5%淤胆血清的培养基培养大鼠骨髓间充质干细胞;以免疫荧光法检测白蛋白、甲胎蛋白及细胞角皮素18在诱导后细胞的表达;以糖原染色及尿素合成检测细胞功能. 将培养14 d的大鼠骨髓来源肝干细胞接种于裸鼠皮下,观察局部有无新生物形成.结果与结论:用含体积分数5%淤胆血清的培养基培养大鼠骨髓间充质干细胞,4 d后出现细胞集落,细胞为圆形;7 d后集落变大,其周围开始出现多角形细胞;培养14 d后可见细胞呈多角形和排列成铺路石样,免疫荧光染色发现这些细胞表达角皮素18、甲胎蛋白和白蛋白,糖原染色显示细胞内有糖原颗粒;培养第12～15天的培养液中尿素氮浓度逐渐升高.经诱导的大鼠骨髓来源的肝干细胞接种到裸鼠皮下,30 d后局部未见新生物形成,组织结构未见异常.结果提示用体积分数5%淤胆血清培养基诱导的大鼠骨髓源性肝干细胞可能无成瘤性.     

胃肠道间质瘤细胞组织在不同周龄裸小鼠不同部位的成瘤情况

背景：建立合适的人胃肠道间质瘤裸鼠动物模型,可为以后在活体状态下研究胃肠道间质瘤细胞提供一个必不可少的工具。目的：观察胃肠道间质瘤细胞组织块接种于不同周龄裸小鼠腋下和臀部的成瘤情况。方法：将胃肠道间质瘤细胞组织块分别接种于4,8周龄BALB/c（nu/nu）裸鼠的腋下和臀部,观察在一定时间内,不同周龄裸鼠不同部位的瘤体成瘤率,生长速度,破溃率和转移率。结果与结论：4周龄裸鼠的成瘤率及生长速度明显高于8周龄裸鼠（P〈0.05）,且接种于腋下的成瘤率较臀部高;4周龄与8周龄裸鼠的肿瘤破溃率差异无显著性意义（P〉0.05）,但接种于臀部的肿瘤破溃率大于腋下（P〈0.05）;在肿瘤软化消失率方面,8周龄裸鼠明显高于4周龄裸鼠（P〈0.05）,同龄裸鼠中,臀部高于腋下。说明不论接种部位如何,周龄越小的裸鼠,移植瘤成瘤率越高、生长速度越快;但对于相同周龄的裸鼠,不论接种部位如何,肿瘤生长速度无明显差异。     

Glioma

This chapter outlines the current clinical application of interferon for treatment of brain tumor, especially glioma. Since approved as a therapeutic drug for brain tumor originally produced in Japan, interferon-beta has been reported to be effective when it was used alone, in combination with chemo-radiotherapy (ACNU/MCNU as a nitrosourea derivative chemodrug, and radiation for 60 Gy totally). Recently, the regimen of combination with interferon-beta have been improved to obtain a higher efficacy rate. For example, as a fundamental study, temozolomide is an enthusiastic chemodrug to enhance the anti-tumor effect of interferon-beta when it is combined, pre-clinical and clinical trial will be scheduled. As for interferon-beta gene therapy by means of liposome as ad drug delivery system, already clinical trial has been performed and clinical safety and effectiveness have been proved, and it is expected that newly development in the field of gene therapy will be established and improvement of therapeutic results for malignant brain tumor will be achieved.     

神经胶质瘤的表观遗传学机制

神经胶质瘤是颅内最常见的一种恶性肿瘤,它的发生、发展与表观遗传修饰密切相关.本文着重介绍了近年来神经胶质瘤发生、发展过程中DNA甲基化异常、miRNA表达异常、组蛋白修饰异常三种主要的表观遗传修饰方式的研究进展.由于表观遗传修饰引起的改变可以通过药物逆转,本文进而探讨了基于表观遗传修饰机制的潜在药物治疗神经胶质瘤的前景...     

高级别胶质瘤放射及化学治疗后假性进展

目的 探讨高级别胶质瘤患者放射、化学治疗后假性进展的临床特点、诊断与处理.方法 分析2008年6月-2009年6月接受综合治疗的31例高级别胶质瘤患者临床资料,对假性进展的患者进行回顾分析,按照实体瘤疗效评判标准应用磁共振进行疗效评价.结果 31例术后病理诊断为高级别胶质瘤的患者,替莫唑胺(TMZ)同期放射、化学治疗后...     

脑胶质瘤术后化疗患者的护理

目的总结脑胶质瘤术后患者化疗的不良反应及护理对策。方法回顾性总结2007年4月至2008年12月应用替尼泊苷、司莫司汀和替莫唑胺等行化疗的30例脑胶质瘤术后患者的临床资料,分析化疗过程中的不良反应及护理措施。结果 30例患者原有的高颅压症状消失,癫症状得到控制,精神症状和意识障碍均好转,偏瘫和偏身感觉异常改善。不良反应发生情况:恶心22例,呕吐6例,白细胞下降8例,血小板减少4例,口腔溃疡12例。结论治疗前做好心理护理,治疗过程中密切观察病情、及时处理药物不良反应,治疗结束后做好健康教育,可提高患者的治疗依从性,提高治疗效果。     

fibulin-5基因在人脑胶质瘤中的表达

【目的】初步探讨fibulin-5基因在胶质瘤中的表达情况及其与胶质瘤发生、发展的关系。【方法】检测fibulin-5 mRNA在正常脑组织（7例）和低分级胶质瘤组（22例）和高分级胶质瘤组（15例）脑组织中的表达情况。【结果】fibulin-5 mRNA在对照组正常脑组织中,所有7例标本均检测到表达;在低分级胶质瘤组中,22例标本有14例检测到表达;在高分级组中,15例标本有3例检测到表达。正常脑组织标本的fibulin-5 mRNA表达阳性率以及平均IOD值和低分级组相比无统计学差异（P〉0．05）;高分级胶质瘤组的fibulin-5 mRNA表达阳性率以及平均IOD值均低于正常脑组织和低分级胶质瘤组的表达（P〈0．05）。【结论】fibulin-5在正常脑组织中表达。其在胶质瘤组织中表达的变化可能与胶质瘤的进展和血管生成存在联系。